UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

Facultad de Ciencias de la Salud
Carrera de Laboratorio Clínico e Histopatológico

INFORME DE PRÁCTICA

* Tema:

TIPIFICACION

* Alumna

* Cátedra:
TERAPIA TRANSFUNCIONAL
Docente :
LIC: FERMNADO JARAMILLO

Periodo Académico
MARZO – AGOSTO 2018
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LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

INFOME DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

INSTITUCIÓN: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA: LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO
PERÍODO ACADÉMICO: MARZO – AGOSTO 2018
DOCENTE: Lic : FERNANDO JARAMILLO
ASIGNATURA: TERAPIA TRANSUNCIONAL
SEMESTRE: Quinto
FECHA DE LA PRÁCTICA: NÚMERO DE LA PRÁCTICA: 1
04 de mayo del 2018
HORA: 18:00 – 20:00 horas DURACIÓN: 2 HORAS
(120 MINUTOS)
NOMBRE DE LOS ALUMNOS  Alvarado Wendy
PARTICPANTES  Grefa Melisa
 Guilcapi Natasha
 Moina Evelyn
 Orozco Karla

TEMA DE LA PRÁCTICA: Especificidad de dos grupos sanguíneos diferentes

Reconocer el grupo sanguíneo de dos muestras de sangre

OBJETIVO GENERAL: diferentes mediante la observación de la hemaglutinación por
tipificación directa e inversa en tubo.

Preparar la suspensión de hematíes para facilitar la reacción

de hemaglutinación.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS: Observar y analizar las reacciones de hemaglutinación de la
tipificación directa e inversa en el tubo.
Identificar la avidez de las reacciones

Identificar el grupo sanguíneo al que pertenece cada una de

las muestras.
FUNDAMENTO TEÓRICO O CONTENIDO CIENTÍFICO:

La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO se efectúa enfrentando los glóbulos
rojos del paciente con anticuerpos monoclonales Anti-A, Anti-B o Anti-AB. La aglutinación o no
de los hematíes ensayados frente a cada uno de los reactivos indica la presencia o ausencia de los
correspondientes antígenos
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Hemaglutinación

Fenómeno en el que las células en suspensión en un líquido precipitan cuando se añaden

anticuerpos; éstos se unen a sus antígenos y originan complejos del tipo células-antígenos-
anticuerpos en forma de grumos visibles a simple vista.

Especificidad de la técnica de tipificación

La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO se efectúa enfrentando los hematíes
problema con reactivos de especificidad conocida anti A, anti B, anti A+B. La aglutinación o no
de los hematíes ensayados frente a cada uno de los reactivos es indicativa de la presencia o
ausencia de los correspondientes antígenos. Los reactivos del grupaje sanguíneo preparados con
anticuerpos monoclonales tienen la ventaja adicional de una identidad constante y una
reproducibilidad absoluta de su especificidad.
La especificidad de la técnica en tubo para la tipificación es del 98,6%.
Tipificación directa
Es una técnica que utiliza antisueros correspondientes para la determinación del sistema ABO.
Se trata de observar la hemoaglutinación cuando se produce alguna reacción en cualquier grupo;
en esta reacción los anticuerpos reaccionan a los antígenos de la membrana del glóbulo rojo que
representan los llamados grupos o factores sanguíneos. Así también se realizará para el Rh. (1)
Tipificación inversa

Es una técnica que utiliza reactivos conocidos como células de tipo A y B más el suero del
paciente que presenta anticuerpos que se desea conocer. Esta técnica se basa en la
hemoaglutinación el cual determinando la presencia de anticuerpos.
Forma de reporte

El resultado se reporta de acuerdo con la intensidad del grupo y al color del líquido sobre
nadante, de una o varias cruces, hasta cuatro. (2)

4+= Botón sólido de eritrocitos

3+= Grumos evidentes, pequeños y/o grandes, fondo claro.

2+= Algunos grumos medianos en el fondo

1+= Grupos pequeños fondo turbio

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MATERIALES, EQUIPOS Y MUESTRA:

REACTIVOS

MATERIALES.
BIOLOGICO DE VIDRIO, EQUIPOS Y REACTIVOS
OTROS

 Muestra de sangre  Tubos de ensayo  Solucion Salina al 0,9 % (

12x75 (30) 100 ml Solucion Liss
modificado 10 ml
 Pipetas de 1000ul,
 Set de Tipificación
500 ul, 100 ul (cinco Básico; Anti-A: Anti-B;
de cada uno) Anti-D

 Centrifuga
(Incubadora en seco
(uno); Lámpara de luz
blanca a
alutinasconadas)

PROCEDIMIENTO:

1.- Obtener una muestra de sangre en tubo de ensayo con EDTA (tapa lila).

2.- Centrifugar: por 5 minutos 3000 rmp.

3.- Colocar 100 ul de concentrado de hematíes en un tubo de vidrio limpio y rotulado

4.-Llenar con solución salina al 0,9 % tres cuartas partes, Nivelar el tubo con volumen similar y
centrifugar por 3 minutos a 3000 rpm.

5.- Decantar la solución salina sobrenadante y repetir los pasos 4 y 5 por dos ocasiones mas
total número de lavadas tres veces)

6.- Suspender hematíes: colocar 50 ul de hemataies lavados en un tubo limpio y rotulado ,

adicionar 1 ml de solucion salina ( suspencion al 5 % con volumen final de 1 ml). Verificar la
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coloracion que adquiere esta suspencion de hematies (color rojo fresa) la cual no debe estar muy
hemodiluida ni muy hemoconcentrada.

7- Rotular tres tubos con las letras A; B; D

Colocar en cada tubo 50 ul de la suspencion de hematies y adicionar a cada tubo el reactivo

correspondiente

o tubo A una gota de reactivo Anti-A;

o Tubo B una gota de reactico Anti-B;
o Tubo D una gota de reactivo Anti-D).

9- Centrifugar 2 minuto 3000 rpm ver resultados de hemaglutinacion con movimiento suaves
de los tubos para identificar el aglutinado y su avidez; volver a centrifugar los tres tubos 2
minutos a 3400 rpm y observar cambios de avidez en la reacción de hemoglutinacion.

10- Aplicando un medio de reacción que es la solución Liss modificada rotular un tubo de
vidrio y colocar 50 ul de concentrado globular y adicionar 1 ml de la solucion liss.

TIPIFICAICON INVERSA

o Colocar 100 ul 0 2 gotas de células reactivas según sea la marcación de cada tubo en el
que se esté trabajando
o Posteriormente colocar 100 ul l de plasma
o Centrifugar mediante 2 minutos a 3400 RPM
o Finalmente observar los resultados

GRÁFICOS Y RESULTADOS:

Imagen 1

Obteniendo la suspensión con reactivo de Liss

evitando realizar los 3 lavados de hematíes
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Imagen 2

Procedimiento para la realización de

Tipificación directa e inversa

Imagen 3

Tipificación directa

Identificacion: Grupo A Rh D POSITIVO

Imagen 3

Tipificación inversa

Identificacion: anticuerpos B en un grupo

sanguíneo A Rh D POSITIVO

REPORTE DE RESULTADOS
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No 1 No 2

Grupo : A (4+) Grupo : O

Factor : Rh D positvo (4+) Factor : Rh D positivo ( 4+)

Ac : Anti B (4+) Ac : Anti A ( 4+ )

Anti B ( 4+ )

CONCLUSIONES
1. La reaccion de hemoglutinacion se lo realizo con una muestra sanguinea con aplicación
de de una suspensión en solucion Liss compatible con los eritrocitos para finalmente el
antigeno de los eritrocitos sea detectado por los anticuerpos .
2. Al finalizar la práctica de tipificación sanguínea de dos diferentes muestras tanto por
método directo como inverso, pudimos reconocer el grupo sanguíneo al que pertenecían.
La identificación por el método directo e inverso, se la realizó tomando en cuenta que al
ser positivo estos presentarán un pequeño boton de sangre suspendida (hemaglutinación)
y al ser negativa esta tenderá a mezclarse, indicandonos así el grupo sanguineo al que
pertenecen. En este caso por método directo, al ser la muestra A RhD positivo pudimos
observar como la hemoglutinacion se hizo presente en el tubo que contenía anti A y anti
D , mientras que en la segunda muestra no existió una hemaglutinación en Anti A, Anti B
pero si en Anti D, siendo así que un grupo O RhD positivo. Por el contrario en el método
inverso al ser realizada con reactivos conocidos como células de tipo A y B más el plasma
del paciente se observará en la primera muestra una hemaglutinación en el tubo con células
B debido a que contiene anticuerpos siendo así A RhD positivo. En la segunda muestra se
observará como existe una hemaglutinación en A y B indicándonos al igual que en el
anterior, que este posee estos anticuerpos y por lo tanto será O RhD positivo.
3. En la reacion directa e inversa se identifico una avidez macrooscopica por su intencidad
de reaccion de del grupo ,fator y anticuerpo de con un resultado de 4 + gracias a la reacción
que existe de antígeno anticuerpo y viceversa en los dos casos.
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4. Finalmente se pudo concluir con la idenfificacion del grupo sanguineno al que pertenece
cada tubo , en el primer caso se identifico que su grupo sangineo es A RhD positivo y en
el segundo ejemplo el grupo sanguineo al que pertenece es O RhD positivos .

BIBLIOGRAFÍA:

1. Barrera E. Ebarreramota. [Online].; 2014 [cited 2018 Mayo 6. Available from:

http://ebarreramota.blogspot.com/2014/11/practicas-grupo-sanguineo-inverso-y.html.

2. Henrriquez JBHE. Manual de Prácticas de Inmunohematología. [Online].; 9 febrero, 2012

[cited 2018 mayo 05. Available from: https://www.uv.mx/personal/bescobar/experiencias-
educativas/manual-de-practicas-de-inmunohematologia/.

Mgs. XIMENA ROBALINO LIC : FERNADO RESPONSABLE DEL

DIRECTOR DE CARRERA JARAMILLO LABORATORIO
DOCENTE