Introducción
sangre se determinó 90 min. después de
Metodología
Animales
Se utilizaron 3 ratas Sprague-Dawley
hembras (A, B y C), que pesaban 200-
250 g. durante la experimentación. Las
ratas se alimentaron con una dieta
comercial estándar, ad libitum y tenían
acceso libre al agua.
Materiales y Reactivos
El disulfiram se recristalizó dos veces en
etanol al 99,5%. El disulfiram se preparó
como una suspensión en goma arábiga
(Acacia) al 5% (p / p).
Se preparó reactivo de tiosemicarbazida
(4 mmol / L) en tampón de fosfato sódico
pH = 6 (0,2 mol / L). El reactivo de
tiosemicarbazida se encontró estable
durante 30 días a +4ºC.
Se prepararon soluciones patrón de
acetaldehido (1 g / l) mediante
acetaldehido recién destilado y se
almacenaron a -23ºC. Poco antes de su
uso, estas solución se diluyo con agua
fría (10 ° C).
Las mediciones espectrofotométricas se
realizaron mediante el uso del
espectrofotómetro Beckman DU - 50
Administración de disulfiram y etanol
El etanol se administró
intraperitonealmente en forma de una
solución al 7,80% (p / v) en solución
salina a una dosis de 1,70 g / kg., a dos
ratas (B y C). El disulfiram se administró
por un tubo estomacal a una rata (C), 24
horas antes de la determinación de
acetaldehído, en dosis de300 mg / kg de
peso corporal 25-600 mg / kg. A la rata
control (A) se le dio agua.
Determinación de acetaldehído en la
sangre.
La concentración de acetaldehído en la
la administración de etanol (1,70 g / kg).
Las ratas (A, B y C) se anestesiaron con
30 mg de pentobarbital/ kg de peso
corporal, 20 min. antes del muestreo. Se
tomaron muestras de sangre de 0,50 ml
de una de las venas hepática, luego se
prepararon muestras de sangre
añadiendo 0.5 ml de sangre fresca a 0. 1
ml de solución que contenía ácido cítrico
(4,7 g / l), citrato de sodio (16 g / l),
glucosa (25 g / l) e hidrato de cloral (0,25
mol / L ).
Finalmente se determinó la
concentración de acetaldehído en sangre,
por destilación de acetaldehído a partir
de 0.6 ml de muestras de sangre (se
calentó a 45ºC a vacío), en 5 ml de
solución de tiosemicarbazida
tamponada. La destilación se realizó en
45 minutos y se diluyo a 10 ml con
tampón de fosfato sódico.
Determinación espectrofotométrica de
acetaldehído.
Para la calibración, se construyó un
gráfico, mezclando 0,5 ml de solución
acetaldehído (0,5-7,0 mg / L) y 3,0 ml de
reactivo tiosemicarbazida. Después de la
incubación durante 30 minutos a 25ºC se
midió la absorbancia a 260 nm frente a
un reactivo blanco.
Se determinó la concentración de la
tiosemicarbazona formada a 260 nm
contra el reactivo blanco (Burdridge,
Hine y Schichnk, 1950)
Resultados
En ratas pretratadas con disulfiram (300
mg / kg de peso corporal) durante 24 h,
el nivel de acetaldehído en la sangre
durante la oxidación del etanol fue 8-10
veces mayor (200-250 uM) que en las
ratas que recibieron sólo etanol (20-30
uM) (figura 3).
Figura. 3. Efectos de la cianamida, ACP
y disulfiram en el nivel de acetaldehído
y la tasa de eliminación de etanol in vivo. semicarbazona formada en sangre de la
A las ratas se les dio etanol (1,7 g /kg de rata A, B y C.
peso corporal) intrapentonealmente 1, 2
y 24 horas después de la administración T(min Etano Etanol+ Contro
de cianamida, ACP y disulfiram, ) l disulfira l
respectivamente. m
0 250 10 0
60 190 9 0
120 170 8 0
180 150 6 0
240 100 0 0
300 50 0 0

En la rata A podemos observar un

espectro de absorción
Discusion
Por destilación de la sangre AcH en
solución de tiosemicarbazida, se
Bibliografia
formaron tiosemicarbazonas de AcH,
que presentaban un máximo de T. N. Burbridge, C. H. Hine and A. F.
absorción a 260 nm (figura 1) Schichk. (1950). J. Lab. Clin. Med. (35):
983-987
En siguiente tabla se distingue la
absorbancia dada a 260 nm, de