Professional Documents
Culture Documents
Lima, Perú
27 de abril de 2018
1
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
ÍNDICE
1 RESUMEN ............................................................................................................ 3
2 INTRODUCCIÓN................................................................................................... 5
3 OBJETIVOS ........................................................................................................... 6
3.1 Objetivos generales .................................................................................... 6
3.2 Objetivos específicos .................................................................................. 6
4 MARCO TEÓRICO ................................................................................................ 6
4.1 MEDIOS DE CULTIVO ................................................................................... 6
4.2 CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO .................................................... 7
4.3 ASPECTOS PARA PREPARAR DE MEDIOS DE CULTIVO ................................ 9
4.4 ALMACENAMIENTO DE LOS MEDIOS DE CULTIVO ..................................... 9
5 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL..................................................................... 10
5.1 Materiales ................................................................................................. 10
5.2 Medios de cultivo...................................................................................... 10
5.3 Soluciones ................................................................................................. 11
5.4 Equipos...................................................................................................... 11
5.5 Metodología .............................................................................................. 11
6 RESULTADOS ..................................................................................................... 12
7 DISCUSIÓN DE RESULTADOS ............................................................................. 12
8 CONCLUSIONES ................................................................................................. 12
9 FUENTES DE INFORMACIÓN ............................................................................. 13
10 ANEXO ........................................................................................................... 14
11 APÉNDICE ...................................................................................................... 17
11.1 Diagrama de flujo ...................................................................................... 17
2
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
1 RESUMEN
Palabras claves: agar plate count, agua pectonada, caldo nutritivo, caldo BHI
3
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
ABSTRACT
The present practice was carried out in the microbiology laboratory of the
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA whose objective was to know how
to prepare dehydrated culture media such as plate count agar, pectonated water,
nutritious broth, BHI broth for the cultivation of microorganisms present in the
sample to study. For which analytical balance, test tubes (100ml and 500ml),
Erlenmeyer (250ml and 500ml), test tubes (16x150), spatulas, ph tapes, cotton,
70 ° alcohol, kraft paper, lighter, gloves asbestos, light bulbs, lighter, pipettes (1
ml and 10 ml), electric burner, asbestos grid, water picette, wick, scissors, tongs,
knife, racks, 0.1N NaOH and 0.1N HCl to adjust the pH, autoclave for sterilize,
and refrigerator to store the preparations. In an Erlenmeyer of 500, 6.75 gr of
APC (22.5 gr / L) was weighed and dissolved with distilled water, then the agar
was melted in an electric burner, then sterilized in the autoclave and then taken
to storage in the refrigerator. . For the peptone water (1 gr / L), in a 250 ml
Erlenmeyer, 0.15 g of peptone was weighed and dissolved with 150 ml of distilled
water and then distributed in test tubes with lids and lined with kraf paper. taken
to the autoclave and after the refrigerator. For the nutritious broth (8 gr / L), in a
250 ml Erlenmeyer, 1.04 g of the medium was weighed and dissolved with 130
ml of distilled water, then distributed in test tubes with lid and lined with kraf
paper, to be then taken to the autoclave and after the refrigerator. For the BHI
Broth (37 gr / L), 4.81 gr of BHI was weighed in an Erlenmeyer flask and
dissolved with 130 ml of distilled water, then distributed in test tubes with a lid
and lined with kraf paper, and then taken to the autoclave and after the
refrigerator.
Thanks to the fact that all the tools that are used in the microbiology laboratory
are optimal, it was possible to carry out the media successfully for its later use.
Key words: agar plate count, pectonada water, nutritious broth, broth BHI
4
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
2 INTRODUCCIÓN
5
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve
afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos,
son ajenos por completo al propio medio.
3 OBJETIVOS
4 MARCO TEÓRICO
6
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
factores de crecimiento necesarios y deben estar exentos de cualquier
microorganismo contaminante. Los medios de cultivo contienen como mínimo:
carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales inorgánicas. En muchos casos serán
necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento.
También se añaden colorantes que actúan como indicadores. El agar es el
principal agente solidificante utilizado en medios. Se disuelve completamente a
100°C y se solidifica al enfriarse a 40°C. (Clavell, 1992).
7
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Los medios de cultivo se pueden clasificar de acuerdo a la naturaleza de sus
constituyentes en:
• Medios definidos o sintéticos: son los medios que tienen una composición
química definida cualitativamente y cuantitativamente. Generalmente se
usan en trabajos de investigación.
8
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
4.3 ASPECTOS PARA PREPARAR DE MEDIOS DE CULTIVO
9
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
5 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
5.1 Materiales
10
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
5.3 Soluciones
• NaOH 0.1N
• HCl 0.1N
5.4 Equipos
• Hornilla eléctrica
• Balanza analítica
• Autoclave
• Refrigeradora
5.5 Metodología
11
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
6 RESULTADOS
7 DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Para este laboratorio el buen uso y el buen estado de los materiales, medios de
cultivo, soluciones y equipos se lograron tener las proporciones exactas de los
medios y solventes que en este caso es el agua destilada para la preparación de
los mismos.
8 CONCLUSIONES
Se logró preparar satisfactoriamente todos los medios
Se logró aprender a utilizar de forma correcta los instrumentos necesarios para
esta prueba como el buen manejo de la balanza, de las pipetas, etc.
Esta prueba pudimos realizarla en una mesa adecuadamente limpia para evitar
agentes contaminantes que perjudiquen nuestra práctica.
Se logró utilizar la máquina de la autoclave la cual permitió esterilizar nuestros
medios.
12
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
9 FUENTES DE INFORMACIÓN
https://es.scribd.com/doc/232146268/PREPARACION-DE-MEDIOS-DE-
CULTIVO-PARA-MICROBIOLOGIA
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/Pr
ograma_Microbiolog%C3%ADa_2008.pdf
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10
_Preparaci%C3%B3n_de_medios_de_cultivo.pdf
http://annymojica.blogspot.pe/2012/03/practica-no3-preparacion-de-medios-
para.html
https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8800
https://thunderbooks.files.wordpress.com/2009/05/introduction-to-
biotechnology-and-genetic-engineering-infinity-2008.pdf
http://www.mastgrp.com/IFUS/IFU342_SPA.pdf
http://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2844b49b1
c6.pdf
13
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
10 ANEXO
Tabla referencial del medio plate count
Concentración del medio
Triptona 5.0 gr/litro
Dextrosa 1.0 gr/litro
Extracto de levadura 2.5 gr/litro
Agar 12.0 gr/litro
pH final: 7.0 ± 0.2
14
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Imagen 1
15
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Imagen 3
16
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Imagen 5
11 APÉNDICE
Colocar el medio a
Repartir en tubos Enfriar y medir su la parrilla si es
de ensayo si es pH del medio necesario para su
necesario con tapa fundición
Introducir en el
Tapar, etiquetar, autoclave el Enfriar, y guardar
pegar con cinta material por 15 lb/ en la refrigeradora
testigo o papel kraf 15 min
17