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2. INTRODUCCIÓN
El P se clasifica como un nutriente primario, razón por la cual es comúnmente deficiente en
la producción agrícola y los cultivos lo requieren en cantidades relativamente grandes. El
fósforo (P) es un nutriente de baja solubilidad y movilidad en los suelos, que se encuentra
generalmente en situaciones de deficiencia para el crecimiento vegetal, y sólo puede ser
repuesto mediante la fertilización. La concentración total de P en los cultivos varía de 0.1 a
0.5 % (Munera, 2012)
El fósforo es constituyente del ATP (Adenosin Tri Fosfato), ácidos nucleicos, fosfolípidos y
ciertas enzimas, este elemento cumple una función importante en el sistema de transferencia
de energía dentro de la planta. Así mismo, es esencial para el crecimiento radical, en el
proceso de floración y en la formación de frutas y semillas. El fosforo es absorbido por la
planta principalmente como ion ortofosfato primario (H 2 PO 4 ) , pero también se absorbe
como ion fosfato secundario (HPO4 ) y no es reducido dentro de la planta, la absorción de
esta última forma se incrementa a medida que se sube el pH (Balta, 2015)
El P juega un papel vital virtualmente en todos los procesos que requieren transferencia de
energía en la planta. Los fosfatos de alta energía, que son parte de la estructura química de la
adenosina difosfato (ADF) y de la ATF, son la fuente de energía que empuja una multitud de
reacciones químicas dentro de la planta. La transferencia de los fosfatos de alta energía del
ADF y ATF a otras moléculas (proceso denominado fosforilación), desencadena una gran
cantidad de procesos esenciales para la planta (IPNI, 2017)
El análisis fitoquímico o análisis del tejido vegetal, se refiere habitualmente, al análisis
químico de hojas (foliar), pero es una analítica aplicable a cualquier tejido de la planta
(ramillas, flores, frutos, otros). En el caso de las hojas, esta técnica de diagnóstico es
ampliamente reconocida para determinar las concentraciones de nutrientes y con ello evaluar
el estado nutricional de la especie vegetal. (Bonomelli, 2017)
3. PRINCIPIO ANALÍTICO
3.1. Digestión húmeda de la muestra de tejido vegetal
La muestra de tejido seca y molida se trata con una mezcla de ácido nítrico (HNO3) y ácido
perclórico (HClO4) para destruir la materia orgánica liberando dióxido de carbono (CO2)
como gas y dejando en solución los minerales para que puedan cuantificarse.
3.2. Determinación de P en tejidos vegetales
El método para la determinación del contenido de P en los tejidos vegetales es colorimétrico.
La solución obtenida por la digestión de los tejidos se pone en contacto con una solución de
metavanadato de amonio (NH4VO3) y molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24. 4H2O]
conocida como solución de Barton’s. El P de la solución, en presencia del vanadio (V+5) y
el molibdeno (Mo+6), forma un complejo llamado fosfo-vanadomolibdato de color amarillo
que puede ser valorado colorimétricamente a una longitud de onda de 400 nm.
4. OBJETIVOS
4.1. OBJETIVO GENERAL
• Determinar el porcentaje de fósforo existente en las hojas de 4 distintos tejidos
vegetales a través del método colorímetro.
4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
• Ejecutar de manera adecuada los procedimientos para la determinación de Fósforo
(P) foliar
• Realizar una comparación del resultado de los 4 distintos tejidos vegetales obtenido
con la tabla de niveles críticos para la determinación de Fósforo foliar.
5. MATERIALES
5.1 . Digestión húmeda de la muestra de tejido vegetal
• Materiales
– Material vegetal seco, molido y tamizado
– Erlenmeyer de 125 ml y boca angosta
– Núcleos de ebullición
– Plancha de digestión
– Papel filtro Whatman cuantitativo No.1
– Espectrofotómetro UV-visible
– Piceta
– Pipetas de 5 y 25 ml
• Reactivos
– Ácido nítrico (HNO3)concentrado
– Ácido perclórico (HClO4) al 72%
– Solución de ácido nítrico 0.1 N
– Agua destilada
• Materiales
– Espectrofotómetro UV visible
– Pipetas
– Vasos de precipitación de 100 ml
• Reactivos
– Reactivo de Barton’s (metavanadato y molibdato)
– Solución estándar de P de 10 ppm
– Agua destilada
6. PROCEDIMIENTO
6.1 . Digestión húmeda de la muestra de tejido vegetal
– Pesar 0.125 gramos de material vegetal seco y molido, colocar en un Erlenmeyer de 50 ml
de capacidad.
– Agregar 2,5 ml de la mezcla de ácido nítrico-perclórico relación 5:1
– Adicionar 3 núcleos de ebullición para reducir la formación de espuma.
– Colocar los erlenmeyers en una plancha de digestión y someter a las muestras a las
siguientes temperaturas y tiempos:
Alrededor de los 100 °C se evaporan los humos pardos del ácido nítrico y alrededor de los
180 °C se observa la reacción del ácido perclórico, que se manifiesta por la presencia de
humos blancos y la reacción violenta del ácido.
La digestión está completa cuando no hay ningún tipo de humo y la solución se vuelve
transparente.
– Dejar enfriar y añadir 12,5 ml de agua destilada y agitar la solución para lavar los lados del
Erlenmeyer.
– Filtrar la solución utilizando papel filtro Whatman cuantitativo No.1. En este filtrado se
encuentran los minerales (P, K, Ca, Mg, Mn, Cu, Fe, Zn). Se toman alícuotas de esta solución
para el análisis químico correspondiente.
6.2 Determinación de P en tejidos vegetales
7. RESULTADOS
Concentraciones de Absorbancia
P (ppm)
0 0
1 0.0918
2 0.1844
3 0.2851
4 0.381
0.45
y = 0.0955x - 0.0026
0.4 R² = 0.9997
0.381
0.35
0.3
0.2851
Absorbancia
0.25
0.2
0.1844
0.15
0.1 0.0918
0.05
0 0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
Concentraciones de P (ppm)
8. CONCLUSIONES
9. CUESTIONARIO
Cabe destacar que el fósforo es un nutrimento móvil en la planta y en este sentido ubicación
de los síntomas de las carencias nutricionales en las plantas dependerá del grado y la
velocidad de traslado de los nutrimentos desde las hojas viejas hacia las partes nuevas. Los
nutrimentos difieren notablemente en cuanto a su movilidad dentro de la planta.
El fósforo se traslada rápidamente desde las hojas viejas a las partes nuevas. En consecuencia,
los síntomas de la carencia de estos elementos se producen inicialmente en las hojas más
viejas (CIMMYT, 2018).
10. BIBLIOGRAFÍA
IPNI. (2017). International Plant Nutrition Institute. Obtenido de Informaciones agrómicas del
Fósforo: http://www.ipni.net/publication/ia-
lahp.nsf/0/7600F971E3B3EF0085258013005D62E2/$FILE/Art%204.pdf
Munera, G. (2012). El fósforo elemental indispensable para la vida vegetal. Obtenido de
http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/handle/11059/5248/el%20fosforo%20ele
mento.pdf?sequence=1
Rahma, Z. (2010). El papel del fósforo en el desarrollo sostenible de la palma de aceite (Elaeis
Guineensis, Jacq.) .