Resumen

Introducción

Los nervios periféricos de vertebrados contienen típicamente miles de axones, pertenecientes a

neuronas motoras y sensoriales. Cada axón conduce potenciales de acción de una forma todo - o -
nada, de una manera autopropagada, sin embargo, la propiedad todo - o - nada desaparece en el
nervio periférico.

La membrana de la célula nerviosa en estado de reposo mantiene una diferencia de voltaje de

entre las caras interna y externa conocido como potencial de reposo, este se mantiene por un
mecanismo activo dependiente de energía que es la bomba Na-K, que introduce iones K+ en el
interior celular y extrae iones Na+ hacia el exterior. En esta situación los canales de sodio no
permiten el paso de este ion al interior. Al llegar un estímulo nervioso, se inicia la despolarización
de la membrana por lo que el campo eléctrico generado activa los canales de sodio,permitiendo el
paso de iones Na+, que masivamente pasa al medio intracelular. La negatividad del potencial
transmembrana se hace positiva. Cuando la membrana está despolarizada al máximo, disminuye
la permeabilidad del canal de sodio, cesando el paso estos iones (estado inactivo). Entonces, se
activan los canales de K+ aumentando su permeabilidad, permitiendo el paso de este ion por
gradiente de concentración, del interior al exterior. Posteriormente, se produce una restauración a
la fase inicial. Los iones son transportados mediante la bomba Na-K, el Na+ hacia el exterior y el K+
hacia el interior. En la repolarización de la membrana, los canal de sodio pasan de estado inactivo
a estado de reposo. Estos movimientos iónicos se traducen en cambios en el potencial eléctrico
transmembrana, dando lugar al llamado potencial de acción, que se propaga a lo largo de la fibra
nerviosa

Las fibras de diámetros diferentes que forman un nervio generan potenciales de acción
individuales que se suman para dar un potencial de acción compuesto que corresponde a la
amplitud de respuesta del total de fibras de un nervio con diferentes velocidades de conducción.
Con el osciloscopio de rayos catódicos se pueden registrar varios picos en el potencial de acción
registrado del nervio ciático de rana. La caracterización de las respuestas a la estimulación
nerviosa para un nervio aislado compuesto de una morfología neuronal heterogénea debe
entenderse ya no como subumbral, umbral y supraumbral para una sola neurona (siendo el
umbral nervioso la intensidad de estimulo necesario para provocar la activación de una neurona
expresada como potencial de acción), sino más bien como estimulo-respuesta submaxima,
máxima y supramaxima para un nervio compuesto por muchas neuronas. Se entiende que un
estimulo submaximo es subumbral para algunas fibras no activadas.

La practica tuvo como objetivo la utilización del osciloscopio para identifica el potencial de acción
del nervio ciático a través de diferentes intensidades de estimulación, y ademas dilucidar los
eventos que se relacionan con este, tales como: reobase, cronaxia, perido refractario absoluto y
relativo, la velocidad de coducccion y finalmente el efecto de los anestésicos locales a través de la
aplicación de etanol.

Metodología

Disección del nervio ciático.

Se descerebro y desmedulo al sapo, luego se le quito la piel de la mitad posterior
del cuerpo y se disecciono la parte inferior, se dejo al descubierto los nervios
ciáticos, los cuales se ven como dos cordones blancos a ambos lados del cuerpo y
se ataron con hilo para evitar la despolarización por contacto con metal o la
piel.Una vez disecado el nervio ciático, se coloco en la cámara Plexiglás y se le
conectaron los electrodos de estimulación y de registro a los terminales del
estimulador y del osciloscopio respectivamente. Se mantuvo el nervio siempre
húmedo, añadiéndole solución ringer anfibio

Curva de intensidad del estímulo vs. amplitud del potencial de

acción compuesto.
Se comenzo enviando pulsos simples al nervio, de intensidad
de 5 mV y de 3 ms de duracion, mediante el sistema osciloscopio,
estimulador y cámara plexiglas. Se observo en el osciloscopio
las señales que representan el estímulo enviado y la amplitud de las ondas que
representan la respuesta del nervio ante el estímulo. Se aumento el
Estímulo de gradualmente, hasta observarse la primera respuesta del nervio,
Ésta se señaló como el estímulo umbral, luego, se siguio
aumentando hasta que el nervio alcanzo el valor máximo de la respuesta
(respuesta máxima), la cual no aumentará a pesar de que se continúe
aumentando el estímulo (respuesta supramáxima)

2. Curva de duración vs. intensidad de estímulos

Se comenzó manteniendo las condiciones (intensidad supramáxima del estímulo
con un tiempo de duración de 3 mseg.), alcanzadas en la experiencia anterior. Se
disminuyo el tiempo del pulso 0,5 mseg., si ocurre una
disminución de la respuesta al enviar el estímulo, éste se
aumentaba en valor hasta que se logro alcanzar nuevamente la amplitud
de la respuesta inicial. Este procedimiento se repetirá hasta que el tiempo
de estimulación sea de 1,5 mseg.
Procesamiento de los datos
El estudiante deberá construir una tabla y graficar los resultados
(Intensidad del estímulo (mV) vs. amplitud de la respuesta (mV)),
señalando cada uno de los eventos que se puedan observar. En el
informe se deberán explicar los eventos ocurridos tomando en cuenta los
conceptos de Reobase y de Cronaxia en relación a la excitabilidad de las
fibras seleccionadas.

3. Determinación del período refractario.

Se observo la imagen del potencial de acción con el osciloscopio, posteriormente
se envio una serie de estímulos repetitivos con una frecuencia de 15 pulso/seg., y
luego, se enviaron dos series de estímulos repetitivos al nervio; para lo cual se
uso el botón TWIN del estimulador, observándose dos potenciales de acción con
la misma amplitud. Posteriormente se uso el botón DELAY (retardo), con la
finalidad de disminuir el periodo de tiempo entre las dos series de estímulos que
están actuando sobre el nervio, se disminuyo el valor del retardo hasta observar
que la amplitud del segundo potencial de acción comienzo a disminuir (período
refractario relativo); se continuará disminuyendo el valor del retardo hasta que
desaparecio el segundo potencial de acción (período refractario absoluto). Se
Tomo nota de los valores en DELAY, al comenzar a disminuir el segundo potencial
de acción y al desaparecer el mismo.

4. Velocidad de conducción.
Para determinar la velocidad de conducción del estímulo en el
nervio ciatico se midio con una regla la distancia el espacio entre el electrodo de
estimulación y el electrodo de registro que se encuentran en la cámara plexiglas.
Luego se enviaron pulsos de estimulación para ajustar la posición horizontal del
osciloscopio. De esta manera se pudo determinar el tiempo en que el nervio recibe
el estímulo y el tiempo que tarda en dar la respuesta (potencial de acción).

5. Efectos de anestésicos sobre el potencial de acción compuesto

del nervio ciático.
Manteniendo la imagen del potencial de acción en la pantalla del
osciloscopio, se colocaron gotas de etanol al 70% sobre el nervio ciático que se
encuentra entre los electrodos de estimulación y registro, con el fin de observar los
cambios que produce en la amplitud del potencial de acción.

Resultados

En la figura 1 se demostro que la amplitud de respuesta es directamente

proporcional a la intensidad del estímulo que se aplica. Se observó que la amplitud
de la respuesta se encuentra en un rango que va desde la primera respuesta
registrada del nervio (respuesta umbral) de 20 mV; el cual comprende el potencial
umbral (48 mV), hasta el punto en el que se obtiene un valor máximo de respuesta
de 70 mV utilizando 90mV de intensidad, luego de este punto a pesar de que se
continuo aumentando la intensidad del estímulo hasta valores de 112 mV éste se
mantuvo constante, resultando en respuestas supramaximas.

Figura 1. Curva de amplitud de respuesta registrada del nervio ciático de

Bufo marinus dependiendo de la intensidad del estimulo aplicado.
Figura 2. Curva de duración dependiente de la intensidad del estímulo del nervio ciático de Bufo
marinus

180
160
140
amplitud de la respuesta (mV)

120
100
80
60
40
20
0
1 2 3 4
Duracion (msg)

En la determinación de los periodos refractarios absoluto y relativo se obtuvo los rangos de

retardo (delay) entre un estímulo y el siguiente, en los que estos se alcanzan. Para el primero se
identificó el punto de 6,5 msg en el que comenzaba a disminuir la amplitud del segundo potencial
de acción en la pantalla del osciloscopio, hasta que este desaparecia completamente al llegar a los
3,1 msg de retardo alcanzando el periodo refractario absoluto.
Tabla 1. Intervalos de valores de frecuencia del estimulos en los que se encuentran el periodo
refractario relativo y absoluto

Frecuencia del estímulo (msg)

Periodo refractario relativo 3,1 – 6,5

Periodo refractario absoluto 0 – 3,1

El tiempo transcurrido entre el envio del estímulo y la generación de una respuesta

fue de 1,5 msg, al ser la distancia entre el electrodo de estímulo y el de respuesta
de 1 cm se obtiene la velocidad de 0,6 cm/msg la cual es traducida como la
velocidad de conducción del nervio ciático

Durante el estudio de la respuesta del nervio ciatico a la exposición con etanol al

70%, se observó la disminución del potencial de acción a medida que se iba
suministrando dicho anestésico

Discusion

El resultado obtenido en la figura 1 muestra la actividad eléctrica de un nervio compuesto

por centenares de axones de diámetros variables como es el nervio ciatico, por lo que las
respuestas nerviosas bajo los estímulos submaximos correspondieron a la fase de
reclutamiento de mayor cantidad de fibras nerviosa, cuando se observa la primera
respuesta del nervio ciático a 48mV se alcanza el potencial de acción de algunos de los
axones que componen este nervio, a medida que la intensidad del estimulo aumenta, el
numero de axones que alcanzan el potencial de acción aumenta, hasta llegar a un
estimulo máximo en el cual todos los axones que componen el nervio alcanzan su
potencial de acción. Este fenómeno se conoce como potencial de acción compuesto, el
cual no es “toto o nada” sino que es dependiente de la intensidad de la estimulación
(Neurociencia aplicada: sus fundamentos). Aunque experimentalmente se obtuvo una
respuesta umbral en el estimulo de 48mv y una máxima en el estímulo de 90mV en
condiciones naturales el estímulo necesario para alcanzar la respuesta umbral respuesta
se encontraría entre los valores 40 - 48 mV y para una respuesta maxima, entre 68 – 90
mV, para obtener datos más específicos en el futuro se recomienda realizar esta
experiencia con más valores de estímulo de manera que se obtenga el verdadero valor en
el cual se alcanza una respuesta umbral y máxima.

El proceso del potencial de acción comprende un ciclo de retroalimentación. Cuando el

potencial de reposo se hace más pequeño tendiendo hacia cero, se dice que la
membrana de los axones se despolariza, esto equivale a quitar cargas positivas del lado
externo. Una despolarización (como es la obtenida con el electrodo negativo del
estimulador) induce un aumento de la permeabilidad de la membrana al sodio (PNa), si
esta alcanza el nivel critico (potencial umbral) y si supera una velocidad minima se
desencadena un fenómeno acumulativo de retroalimentacion positiva llamado ciclo de
Hodgkin (figura 3 ) (Neurociencia aplicada: sus fundamentos). Al aumentar PNa, ingresa
más sodio al medio intracelular (por gradiente de concentración); lo que induce una
despolarización de la membrana por acumulación de cargas positivas lo cual aumenta a
su vez aumenta aún más la permeabilidad al sodio

Figura 3. Ciclo de activación de Hdgkin (realimentación positiva) y ciclo de inactividad

(repolarizacion o realimentación negativa).

Extraido de (Introducción a la bioingeniería)

Durante el potencial de acción se produce un perido refractario absoluto en el cual la

aplicación de un estímulo con intensidad máxima, no es capaz de desencadenar un
potencial de acción debido a que todos los canales para el Na+ se encuentran en estado
refractario. Además, existe un periodo refractario relativo en el que la llegada de un
estímulo supramaximo desencadenara un potencial de acción, este coincide con la fase
de aumento en la permeabilidad para el K y con la presencia de algunos canales de Na+a
aun inactivados. Neurociencia aplicada: sus fundamentos

La velocidad de conducción en los nervios depende de factores que afectan la conducción

electrotonica y el potencial de acción, entre los cuales se tienen: El diámetro del axón, ya
que entre mayor sea el diámetro mayor facilidad existirá para el paso de corriente debido
a la resistencia. Espesor de la vaina de mielina, donde a mayor espesor mayor es la
velocidad de conducción. La distancia intermodal se ha registrado como un factor que se
relaciona directamente en proporcion con la velocidad de conducción. Ademas, Se han
registrado incrementos del potencial de acción debido a disminución de la temperatura
(Fisiología humana y Fisiología dinámica)

Las observaciones realizadas durante la aplicación con etanol son el resultado de la

acción de los anestésicos locales, los cuales se han reportado que presentan una acción
específica, temporal y reversible, en los impulsos nerviosos de manera que inhiben de
forma transitoria la producción y conducción del estímulo nervioso en cualquier
membrana excitable. Estos impiden la propagación disminuyendo la permeabilidad del
sodio bloqueando la fase inicial del potencial de acción, esto lo hacen uniéndose a la
sub unidad alfa de los canales de sodio dependientes de voltaje lo que genera una
incapacidad de respuesta de estos a la llegada de un estímulo. (Farmacologia medica )

Bibliografia
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