INFORME DE LABORATORIO N° 1 DE QUÍMICA ANALÍTICA INSTRUMENTAL

“OPERACIÓN DEL ESPECTROFOTÓMETRO

UV/VIS ”

INTEGRANTES
Canchari Arroyo, Alex
Campien, Mayta Joana
Flores Castillo, Cristian

SECCIÓN: C1 - 2 - A

FECHA DE REALIZACIÓN: 16-MARZO

FECHA DE ENTRAGA: 13-MARZO

2018-1
I. OBJETIVOS

1.1. Objetivo general

● Reconocer las distintas partes del dispositivo espectrofotómetro UV/VIS y su
adecuada operación.
● Realizar mediciones con el fin de determinar la correcta calibración del
espectrofotómetro.
● Realizar mediciones o barridas espectrales de soluciones patrones y
soluciones de diferentes concentraciones de sulfato de cobre.

1.2. Objetivos específicos

● Preparar soluciones de cloruro de potasio y dicromato de potasio y hacer
mediciones para verificar calibración del dispositivo.
● Preparar soluciones de sulfato de cobre a concentraciones de 0.01M, 0.02M y
0.05M para realizar barridas espectrales.
 II. Características de espectrofotómetro usado
Figura 1
LAMBDA 25/35/45 UV/Vis Spectrophotometers

Fuente:www.perkinelmer.com,”keep your analysis flowing”

Especificaciones y descripción Lambda 25

Técnica
Rango de longitud de onda 190-1100 nm

Ancho de banda 1 nm fijo

220 nm (NaI) → < 0.01%T

340 nm (NaNO2) → < 0.01%T
Luz extraviada 370 nm (NaNO2) → < 0.01%T
200 nm (KCl) → < 1%T

Longitud de onda exacta En el pico D2 (656.1 nm) → ±0.1 nm

Reproducibilidad de longitud de onda 10 mediciones a 656.1 nm→ ±0.05 nm

A 1 A usando el filtro NIST 930D → ± 0.001 A

Precisión fotométrica En 2 A usando el filtro NIST 1930D → ± 0.005 A
Dicromato de potasio→ ± 0.010 A

Reproducibilidad fotométrica Desviación máxima de 10 mediciones a 1 A → < 0.001 A

Estabilidad fotométrica Estabilidad a 1 A, a 500nm con 2 segundos

tiempo de respuesta → < 0.00015A/hour

Planitud de línea base Hendidura 1 nm → ±0.001 A

Espejos con doble haz, sellados y recubiertos de cuarzo;

Óptica sistema sin lentes para reducir las aberraciones
cromáticas

Tamaño(W x D x H) 650 mm (25 in.) x 560 mm (22 in.) x 233 mm (9 in.)

Peso 26 g (57 lbs)

III. PARTE EXPERIMENTAL
3.1 VERIFICACIÓN DEL INSTRUMENTO

3.1.1 Preparar una solución de KCl al 1.2% m/v.

0.6 g de KCl

. Pesar y transferirlo en un matraz

Erlenmeyer de 50 ml.
1. Disolución
 Agua destilada a temperatura ambiente,
previamente hervida.
Enrasar.
2. Agitación
Tapar y agitar vigorosamente.

KCl 1.2%

3.1.2 Preparar una solución de 60.06 mg de K2Cr2O7/L de solución.

0.006 g de K2Cr2O7

. Pesar y transferirlo en un matraz

Erlenmeyer de 100 ml.
1. Disolución
 Agua destilada a temperatura ambiente.
Enrasar.
2. Agitación
Tapar y agitar vigorosamente.

60.06 mg de K2Cr2O7/L
3.2 PREPARACIÓN DE MUESTRA

3.2.1 Preparar una solución de CuSO4 0.010M.

0.12484 g de CuSO4

. Pesar y transferirlo en un matraz

Erlenmeyer de 50 ml.
1. Disolución
 Agua destilada a temperatura ambiente.
Enrasar.
2. Agitación
Tapar y agitar vigorosamente.

CuSO4 0.010M

3.2.2 Preparar una solución de CuSO4 0.020M.

0.24969 g de CuSO4

. Pesar y transferirlo en un matraz

Erlenmeyer de 50 ml.
1. Disolución
 Agua destilada a temperatura ambiente.
Enrasar.
2. Agitación
Tapar y agitar vigorosamente.

CuSO4 0.020M
3.2.3 Preparar una solución de CuSO4 0.050M.

0.6242 g de CuSO4

. Pesar y transferirlo en un matraz

Erlenmeyer de 50 ml.
1. Disolución
 Agua destilada a temperatura ambiente.
Enrasar.
2. Agitación
Tapar y agitar vigorosamente.

CuSO4 0.050M
IV. Resultados
Espectros de calibración del espectrofotómetro con dicromato de potasio y cloruro de
potasio.

4.1 Verificación del instrumento

4.1.1. Preparar 50 mL de KCl 1.2 % m/v

Gráfica 1

Absorbancia vs longitud de onda para la calibración con KCl

Fuente: creación propia a partir de los datos arrojados por el espectrofotómetro.

4.1.2. Preparar 50 mL de K2Cr2O7 60.06 mg/L

Gráfica 2

Absorbancia vs longitud de onda para la calibración con K 2Cr2O7

Fuente: creación propia a partir de los datos arrojados por el espectrofotómetro.

Como la masa es muy pequeña para ser pesada es necesario partir de una
concentración mayor, en este caso usaremos una concentración 10 veces mayor, por
ende pesaremos 0.03003 g K2Cr2O7 , de dicha solución sacaremos una alícuota de 5
mL esta alícuota la usaremos para sacar la concentración deseada de K 2Cr2O7.

Luego esta alícuota será puesta en un matraz aforado, luego se enrasa esta alícuota
hasta llegar al volumen deseado (50 mL).

Por el equilibrio formado con el dicromato - cromato, es necesario diluir nuestra

muestra de dicromato de potasio en un medio ácido; por eso usaremos como solvente
un solución de ácido sulfúrico diluido (0.01 N).
 Figura 2

Diagrama de pourbaix del cromo

Fuente: handbook James G- speinght

Gráfica 3

Espectros de todos los barridos realizados con KCl

Fuente: creación propia a partir de los datos arrojados por el espectrofotómetro.

4.2. Preparación de muestras de CuSO4, se prepara a partir del sulfato de cobre
pentahidratado (CuSO4*5H2O)

50 mL para cada solución a preparar.

4.2.1. Disolución A: 0.010 M CuSO4

4.2.2. Disolución A: 0.020 M CuSO4

4.2.3. Disolución A: 0.050 M CuSO4

4.3. Espectros de soluciones de sulfato de cobre 0.01M, 0,02M Y 0,05M
Gráfica 4

Espectro para sulfato de cobre 0.01M

Fuente: creación propia a partir de los datos arrojados por el espectrofotómetro.

Gráfica 5

Espectro para sulfato de cobre 0.02M

Fuente: creación propia a partir de los datos arrojados por el espectrofotómetro.

 Espectro para sulfato de cobre 0.05M

(Data no registrada)

Gráfica 6

Comparación de Espectros de sulfato de cobre en

Concentraciones 0,01M y 0,05M

Fuente: creación propia a partir de los datos arrojados por el espectrofotómetro.

V. DISCUSIONES
- Verificación del espectrofotómetro con KCl 1.2%. Se trabajó con una celda de
cuarzo ya que se encuentra en la región Ultra Violeta por lo tanto la lámpara
que se uso fue de Tungteno que es útil en un rango de trabajo de 325 o 350
nm a 3𝜇𝑚. Como el medio fue agua se realizó un Auto-cero esto nos dice que
va ver 100% Transmitancia o 0 Absorbancia entre el rango de (198-210) nm,
antes de colocar la muestra a analizar (KCl). De acuerdo a la ley de Lamber-
Beer que viene a ser absorbancia es igual a la absortividad molar por el largo
de la celda y por la concentración de la muestra (A=e x b x c), en la gráfica 1,
que es el resultado del espectro del KCl para la verificación del equipo, la
absorbancia del espectro salió mayor a 2, lo que indica que está bien calibrada.
[1][2]

- Haciendo una comparación de los espectros que se obtuvieron en la medición

de las soluciones de KCl la mayoria de ellas estan muy cerca al valor de 200
nm; 2 A. Lo que quiere decir que el espectrofotómetro se encuentra
correctamente operable.
-
 Gráfica 7

Espectro Ideal para el KCl 1,2% m/v

Nota:Los sistemas LAMBDA superan la especificación de la prueba de luz difusa de la farmacopea de

una absorbancia de > 2,0 Absorbancia a 200 nm usando cloruro de potasio al 1,2% p / v solución. El
pre-monocromador adicional en el LAMBDA 45 más reduce la luz difusa en comparación con el
LAMBDA 25 y 35.fuente: fuente:www.perkinelmer.com,”KEEP YOUR ANALYSIS FLOWING”

- Verificación del espectrofotómetro con K2Cr2O7. Se trabajó en la región Visible

por lo tanto se utilizó una celda de vidrio también pudo ser de plástico, por lo
tanto, la lámpara que se uso fue la de deuterio que es útil en un rango de
trabajo de 175 a 375 o 400 nm. Como el medio fue acido se realizó otro Auto-
cero lo cual nos indicará que habrá 100% Transmitancia o 0 Absorbancia entre
el rango de (220-430) nm, antes de colocar la muestra a analizar (K2Cr2O7). En
la gráfica 2 el espectro del K2Cr2O7, los picos (crestas) y valles difieren mucho
del ideal, por lo tanto, se pesó piensa que hubo una contaminación de los
reactivos, ya que estos estaban colocados juntos en una misma desecadora
(dicromato de potasio, cloruro de potasio y sulfato de cobre pentahidratado).
[3]

- Para los espectros del dicromato de potasio, estos difieren regularmente a

partir de los 300 nm hacia abajo lo que nos indica que probablemente hubo un
problema de la interacción del haz de luz con el envase que se usó para
depositar la muestra.
 Gráfica 8

Espectro ideal para K2Cr2O7 60,06 mg/L

Nota: Los sistemas LAMBDA pasan fácilmente la precisión de absorbancia de la farmacopea prueba a
235 nm, 257 nm, 313 nm y 350 nm usando 60,06 mg / L solución de dicromato de potasio.

 Muestras de CuSO4 a concentraciones 0.010M, 0.020 y 0.050M. Para

cada dilución se realizó su propio barrido espectral, para las 3 muestras
se trabajó entre un rango de 600 a 1000 nm, para ello se usó una celda
de muestra de vidrio ya que se trabajó con una lámpara de tungsteno.
Un barrido espectral se obtiene trabajando con una misma solución, pero
a diferentes concentraciones y midiendo los valores de absorbancias
correspondientes a distintas longitudes de onda seleccionadas dentro de
un determinado rango de trabajo.
La grafica 6 muestra las 2 graficas superpuestas en una sola, donde se
observa que a diferentes concentraciones la absorbancia es distinta, esto
cumple con la Ley de Lambert Beer, debido a que hay una relación directa
entre la absorbancia y la concentración, se observa conforme la
concentración es mayor la absorbancia va aumentando. [4]

 Para todos los casos vistos cuando una molécula absorbe un fotón, la
energía de la molécula se incrementa. Se dice que la molécula pasa a un
estado excitado. Si una molécula emite un fotón, su energía disminuye.
Por lo tanto, cuando una muestra absorbe luz (luz monocromática) a un
cierto rango de trabajo, la potencia radiante de haz de luz disminuye, esta
señal pasa a un detector donde luego es amplificada para dar una lectura
que viene a ser la concentración obtenida de la muestra. [4] y [3]

VI. CONCLUSIONES
VII. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
[1]. Harris D. (1992) Análisis químico cuantitativo. (3ra ed.) México. Iberoamericana
S.A Pág. (495-510).

[2]. Rubinson (2001) Análisis instrumental. (1ra ed.) Madrid. Pearsoneducation S.A

Pág. (282-294)

[3]. Skoog. D. (2007) Principios de análisis instrumental. (6ta ed.) México.

CengageLearning. Pág. (132-150).

[4]. R.A.Day (1989) Química analítica cuantitativa. (5ta ed.) México. Prentice Hall

Hispnoamericana S.A Pág. (495-502).