Abstracto

Antecedentes: La tuberculosis (TB) es una causa importante de morbilidad y mortalidad en todo el

mundo. Toll-like-receptores (TLR) son importantes para el reconocimiento del agente causal
Mycobacterium tuberculosis. regulación negativa de los TLR es necesario controlar el daño inflamatorio
perjudicial, pero podría proporcionar un medio de evasión inmune por M. tuberculosis también.
Métodos: Para obtener una visión en la extensión de la expresión de reguladores de inhibidores de la
inmunidad en pacientes con TB activa, los mononucleares-células de sangre periférica (CMSP) y el
plasma se obtuvieron de 54 pacientes de TB y 29 donantes de sangre sanos de Chittagong, Bangladesh.
los macrófagos alveolares bilaterales se obtuvieron de un infectado frente a un segmento pulmonar
normal contralateral de 9 pacientes. Los análisis estadísticos se realizaron utilizando Mann-Whitney
y la prueba de Wilcoxon pares. Las correlaciones se calcularon mediante la prueba de Spearman Rho.
Resultados: las PBMC recogidas de pacientes con TB demostraron un aumento de la expresión de
ARNm de IL-1 receptor-associatedkinase-M, supresor de citocinas de señalización Toll-3 y que
interactúa con la proteína. La citometría de flujo reveló mejorada expresión de IL-1-receptor-like-1
(ST2) en los linfocitos. Plasma ST2 soluble fue elevado en los pacientes con TB y correlacionado con
biomarcadores TB establecidos, más fuertemente con solubles interleucina-2 subunidades del receptor
α y interleucina-8. la expresión del ARNm de los macrófagos alveolares de los reguladores negativos de
TLR no difirió entre los infectados y el lado de pulmón contralateral.
Conclusión: Estos resultados muestran una mayor expresión de distintos reguladores negativos de la
inmunidad innata en PBMCs de pacientes con TB y se identifican ST2 soluble en el plasma como un
nuevo biomarcador potencial para la actividad de la enfermedad de TB.
Palabras clave: la inmunidad innata, receptores Toll-like, reguladores negativos de la señalización de
TLR, Mycobacterium tuberculosis, pulmón la inflamación, la broncoscopia Fondo Mycobacterium
tuberculosis (Mtb) sigue siendo el líder agente bacteriano que causa la muerte en los seres humanos en
el mundo hoy [1,2]. Las estimaciones sugieren que esta barra de ácido-alcohol resistentes
bacilo de forma ha infectado a aproximadamente un tercio de la población mundial. En 2012 se
convirtió en la infección la tuberculosis (TB) activa en 8,6 millones de casos, lo que resulta en
1,3 millones de muertes en todo el mundo [1,2]. Bangladesh es uno de los países más afectados con
225 casos nuevos por 100.000 habitantes en el año 2012 y una tasa de mortalidad global
de 45 por cada 100.000 habitantes [1].
Los receptores tipo Toll (TLRs) comprenden una familia de patrón receptores de reconocimiento
diseñados específicamente para reconocer ampliamente conservadas patógeno asociado a patrones
moleculares expresado por microorganismos [3]. Mientras que la especialmente gruesa pared celular
de Mtb protege en cierta medida, contra sede de detección inmunológico, sino que también alberga
antígenos específicos capaz de inducir una respuesta TLR [4,5]. células micobacterianas glicolípidos
pared como 19kD lipoproteína, fosfatidilinositol manósido y lipoarabinomannan han demostrado
activar la señalización de TLR2 (cuando heterodimerized con cualquiera TLR1 o TLR6). Además, es capaz
de TLR4 reconociendo el calor secretada proteína de choque Mtb 60/65, mientras que TLR9 reconoce
motivos CpG no metilados en DNA micobacteriano. Los estudios con alterado genéticamente
ratones mostraron un aumento de la susceptibilidad a la infección por Mtb en la ausencia de TLR2,
TLR9 y TLR4 posiblemente [4,5]. De conformidad, MyD88, una molécula adaptadora utilizada
por la mayoría / receptor de interleucina-1 dominio Toll (TIR) que contiene los receptores, resultó de
particular importancia para la defensa del huésped contra Mtb, aunque esto parece principalmente en
relación con su papel en la interleucina (IL) -1 señalización [5,6]. el compromiso de micobacterias de
TLRs fagocitos y la posterior contratación de MyD88 finalmente culmina en la translocación de NF-kB y
una robusta proinflamatorias respuesta. Aberrante de señalización TLR puede causar daños en los
tejidos colaterales y amortiguación del inflamatoria la respuesta puede ayudar a limitar
inmunopatológicas perjudicial cambios. Varios reguladores negativos de la inmunidad innata y la
señalización de TLR han sido identificados, incluyendo receptores de superficie celular, tales como IL-1
receptor de tipo 1 (ST2) y la única inmunoglobulina IL molécula relacionada-1R (SIGIRR, TIR8), e
intracelular inhibidores, tales como Toll-que interactúan las proteínas (TOLLIP), señalización supresor
de citocinas (SOCS) y del receptor IL-1 quinasa asociada (IRAK) -M [7].
Varios estudios anteriores informaron sobre la expresión de TLRs por leucocitos de la sangre en
pacientes con tuberculosis [8-11]. Nosotros aquí tratamos de determinar la expresión del inhibidor
reguladores de la inmunidad innata en la circulación y en el sitio primario de infección en pacientes con
TB pulmonar. EnAdemás, se evaluó el valor de soluble (s) S T2, un secretada proteína producida por el
gen ST2 [12], como un potencial biomarcador en la tuberculosis.
métodos
Diseño del estudio y población Los pacientes y donantes de sangre sanos fueron reclutados
prospectivamente en la Clínica de Tuberculosis de Chittagong El Hospital General y el Colegio Médico
de Chittagong Y el Hospital, Chittagong, Bangladesh. sospecha de TB fue basado en las directrices
nacionales basadas en la OMS para Bangladesh [13]. Se estudiaron dos grupos de pacientes. Por el
primer grupo, de la que se extrajo sangre solamente, la inclusión criterios fueron: (a) 18-80 años de
edad; (B) confirmó Tuberculosis pulmonar; (C) la capacidad de dar su consentimiento informado por
escrito antes del estudio específicos procedimientos. Los criterios de exclusión fueron:
(A) una enfermedad concomitante o una condición clínica conocida que podría interferir en la
realización del estudio; o (b) una falta de voluntad o incapacidad para cumplir con el estudio
protocolo por cualquier otra razón. En las instalaciones de confirmación TB fue definida por un mínimo
de dos de cada tres positivos De Ziehl-Neelsen (ZN) teñidas muestras de esputo recogidas en
dos días consecutivos. la confirmación ulterior de Mtb la infección se obtuvo por PCR (GeneXpert,
Cepheid, Solna, Suecia) en el Laboratorio de Microbiología Médica en el Centro Médico Académico
(Amsterdam, Países Bajos) para todos excepto dos pacientes en los que ITP no pudo realizarse debido
a dificultades técnicas. donantes de sangre sanos sirvieron como controles. Para el segundo grupo de
pacientes, en el que de diagnóstico Se realizaron broncoscopias, criterios de inclusión comprendían:
(A) 18-65 años de edad; (B) la sospecha clínica de Tuberculosis pulmonar, de acuerdo con el Nacional
con sede en la OMS Directrices para Bangladesh [13], (c) tres ZN consecutiva muestras de esputo
teñidas negativas para Mtb; (D) unilateral Las anomalías en el pecho sospechoso de rayos X para la
tuberculosis; (E) sin TB tratamiento; (F) la capacidad de dar su consentimiento informado por escrito
antes de cualquier procedimiento específico del estudio. Muestras de sangre fueron tomadas
directamente en la presentación seguida de un acuerdo bilateral lavado broncoalveolar para obtener
BAL fluido y BAL Células. Mtb infección fue confirmada en el sitio por un ZNpositive
mancha BAL o en Amsterdam por PCR. Antes de broncoscopia la ubicación exacta del pulmón enfermo
subsegmento se identificó mediante radiografía de tórax. LBA bilaterales fueron realizadas por
neumólogos calificados en una normalizado la moda de acuerdo con las directrices de la Sociedad
Torácica Americana, con un broncoscopio flexible, directa (Olympus tipo C30C, P20D y P40, Shinjuku,
Tokio, Japón). Ocho sucesivas alícuotas de 20 ml de estéril salina al 0,9% se inculca tanto en el lado no
infectada en un subsegmento del lóbulo medio o língula y aspirado inmediatamente con baja succión.
Esto fue seguido por la instilación y la aspiración de la misma cantidad de alícuotas en la, subsegmento
pulmón enfermo contralateral. Broncoscopias No se llevaron a cabo en pacientes con esputo ZN-
positivo, ya que estos no contribuiría al diagnóstico y el manejo del paciente.
Todos los pacientes se ensayaron para determinar la inmunodeficiencia humana
virus (VIH) por una prueba de Determine® VIH 1/2 (Alere,
Tilburg, Países Bajos). El estudio fue aprobado por el
Comité Nacional de Ética en Investigación (NREC), Bangladesh
Consejo de Investigación Médica, Bangladesh y el Oxford
Comité de Ética de Investigación Tropical de la Universidad de
Oxford, Oxford, Reino Unido (OXTREC 35-09). informado por escrito
el consentimiento se obtuvo de todos los sujetos de estudio o
al lado de los familiares por un hablante nativo bengalí.
manipulación de muestras
Las muestras de sangre para la recogida de plasma (EDTA y heparina
sangre) y células mononucleares de sangre periférica
(CMSP) cosecha (Preparación de células Tubos (CPT),
Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ) se tomaron directamente
en la presentación. PBMCs se aislaron de acuerdo con
las instrucciones del fabricante y se conserva en RA1
tampón de lisis para más tarde la extracción de RNA (RNA Nucleospin kit, Macherey-Nagel, Düren,
Alemania) o de forma viable congelados
(Ver citometría de flujo) en espera de un análisis adicional.
Los macrófagos alveolares (AMS) se aislaron de BAL
fluidos utilizando perlas CD71 MACS (Miltenyi Biotec, Bergisch
Gladbach, Alemania) como se describe [14]. En resumen, el LBA
se centrifugó y las células se resuspendieron en helado
clasificación magnética automatizado estéril celular y separación
(AutoMACS) tampón (PBS, 0,5% de albúmina de suero bovino,
EDTA 2 mM; pH = 7,4). Posteriormente, las células se incubaron
durante 15 minutos con microperlas CD71 a 4 ° C. Las células se
se lavaron de nuevo en tampón autoMACS y se purificó por autoMACS
(Multenyi Biotec). El promedio AM pureza era
96% según se determine en cytospins. Los AM se conserva en
tampón de lisis RA1 para el análisis de RNA (RNA kit Nucleospin,
Macherey-Nagel, Düren, Alemania).
ensayos
Los niveles de las siguientes citocinas, quimiocinas y otros
marcadores inflamatorios se midieron en EDTA-plasma
por ensayo multiplex (Luminex, Austin, TX) utilizando reactivos
de Bio-Rad (Veenendaal, Holanda): interleucina
(IL) -6, quimioquinas (C-X-C con motivos) ligando (CXCL) 8 (IL
8), soluble IL-2 receptor subunidad-α (sIL-2Ra), soluble
molécula de adhesión intercelular 1 (sICAM-1), soluble
TNF receptor-1 y -2 (sTNFR-1, sTNFR-2). IL-33 y
sST2 se midieron por inmunoabsorción ligado a enzimas específicas
Ensayos (R & D Systems, Abingdon, Reino Unido). C-reactiva
proteína (CRP) se midió en muestras de plasma heparinizado
con el kit de prueba Gen.3 la proteína C reactiva (Roche
Diagnostics, Mannheim, Alemania), una immunoturbidimetric
método, en el módulo de Hitachi Modular P-800
(Hitachi, Hitachinaka, Japón).
Citometría de flujo
Recién PBMCs obtenidas se congelaron en medio RPMI
con 20% de FCS y 20% de DMSO con la ayuda de un "mr.
Frosty 'contenedor de congelación (Thermo Scientific, Waltham,
EE.UU.) se coloca en primer lugar la noche en un congelador -20 ° y posteriormente
almacenado en la fase de gas de un recipiente de nitrógeno líquido.
Antes de células almacenadas análisis fueron cuidadosamente
descongelado, se lava y se tiñeron con los anticuerpos siguientes:
CD14-APC-Cy7, CD3-Alexa Fluor 700, CD4-PERCPCy5.5
o CD4-PE (todo el BD Biosciences), CD8-PE-Cy7
(EBioscience), ST2-FITC (Acris, Herford, Alemania) y
SIGIRR-APC (R & D Systems) durante 30 minutos a 4 ° C. A
mancha para las células se permeabilizaron con TOLLIP perm I
tampón (BD Biosciences) durante 20 minutos a 4 ° C. permeabilizadas
las células se tiñeron intracelularmente con anticuerpos
contra TOLLIP (SouthernBiotech, Birmingham, AL)
durante 30 minutos a 4 ° C seguido de tinción con una
secundario anti-ratón-Alexa Fluor 610-R-ficoeritrina
(Life Technologies, Carlsbad, CA) de anticuerpos de 30 -
minutos a 4 ° C. La adquisición de datos se realizó utilizando una
FACS Canto II (BD Biosciences) citómetro de flujo. Mesurado
Se corrigieron las intensidades de fluorescencia media geométrica (IMF)
con la ayuda del accesorio de fluorescencia menos uno (FMO)
mediciones. Para el análisis de citometría de 17 (donante sano)
frente a 19 (paciente con TB) se compararon.
Evaluación de los niveles de ARNm por RT-PCR cuantitativa
El ARN total obtenido a partir de PBMCs y AM era inversa
transcrito usando oligo (dT) primer y murina de Moloney
virus de la leucemia de la transcriptasa inversa (Promega, Madison,
WI, EE.UU.) según las recomendaciones de los proveedores.
RT-PCR se realizaron utilizando ADN Comienzo Acelerado
Maestro SYBR Green I en un aparato Light Cycler
(Roche Applied Science, Penzberg, Alemania). cebadores
de utilizarse se indican en la Tabla 1. PCR cuantitativa de datos
se analizaron con el programa LinRegPCR [15,16].
Todas las muestras se normalizaron al gen de mantenimiento de la casa
β2-microglobulina [17,18].
análisis estadístico
Los datos se expresan como gráficos de puntos con medianas (figuras)
o medianas con rangos intercuartiles (tablas). Las comparaciones
entre los grupos se realizaron mediante la U de Mann-
Whitney U test. Las comparaciones entre muestras pareadas
se realizó con un ensayo de Wilcoxon acompañado pares.
Los análisis se realizaron utilizando GraphPad Prism versión 5.01
(San Diego, CA). Las correlaciones se calcularon utilizando el
Traductor

TB pulmonar. Además, los niveles de ARNm de ST2 no diferían en

AMs desde el lado infectado y el pulmón contralateral
(Figura 1E).
los niveles de mRNA SIGIRR no difirieron en PBMCs de
los pacientes y los controles (Figura 2A). Además, la citometría de flujo
mostraron niveles similares de expresión en las células CD4 positivas
y los linfocitos CD8 positivos, y el CD14 positivo
monocitos (Figura 2B, C). los niveles de mRNA SIGIRR no lo hicieron
diferir en los AM desde el lado infectado y el contralateral
pulmón (Figura 2D). En general estos datos indican que
SIGIRR expresión no se altera durante la TB.
La expresión de los reguladores negativos intracelulares de innata
inmunidad en pacientes con tuberculosis activa
A continuación trató de determinar la expresión de intracelular
reguladores negativos de la inmunidad innata en la sangre
compartimento de pacientes con tuberculosis (Figura 3). los pacientes con tuberculosis
mostraron mayores niveles de ARNm que codifican IRAK-M
(P <0,01 frente a los controles), TOLLIP (P <0,05) y SOCS-
3 (P <0,01), mientras que los niveles de ARNm que codifica A20
y la fosfatasa de la proteína quinasa activada por mitógeno
(MKP) -1) no difirió entre los grupos. mRNA SOCS-1
no pudo ser detectado en PBMC de los pacientes con tuberculosis o cualquiera
controles. El grado de IRAK-M, TOLLIP o SOCS-3
la expresión de ARNm no se correlacionó con el plasma
Las concentraciones de PCR, IL-6, IL-8, IP-10, sIL-2Ra,
sICAM-1, sTNFR1 o sTNFR2 (datos no mostrados). Fluir
citometría de no mostró ninguna diferencia en la expresión TOLLIP
entre PBMCs de pacientes con tuberculosis y controles sanos.
los niveles de mRNA IRAK-M, MKP-1, A20 o TOLLIP hicieron
no difieren en el AMS del sitio infectado y la
pulmón contralateral (Figura 3). SOCS-1 y -3 mRNAs
no pudo ser detectado en los AM.
Discusión
TLR son jugadores importantes en el reconocimiento de micobacterias
patógenos y la facilitación de la antimicrobiano
respuesta inmune [4,5]. reguladores negativos de TLR
señalización inducida por TLR amortiguar la inflamación [7], el cual
por un lado puede prevenir patológica perjudicial
cambios, pero por otro lado puede proporcionar una vía
para Mtb evasión inmune. Aquí hemos tratado de obtener
Insight en la expresión de la inmunidad innata negativo
y reguladores de TLR en el compartimento de la sangre y en
el sitio de la infección en pacientes con TB de una endémica
región en Bangladesh. Hemos demostrado la expresión diferencial
de varios reguladores de inhibición de la inmunidad innata en cualquiera
nivel de ARNm o proteína entre los pacientes con activa
La tuberculosis y controles sanos y sST2 plasma identificado como una
potencial nuevo biomarcador para la tuberculosis, en correlación con lo establecido
biomarcadores de la actividad de la enfermedad de TB.
Muchos estudios anteriores examinaron el papel de TLRs en
TUBERCULOSIS. Entre la familia TLR, TLR2, TLR4 y TLR9 tienen
ha implicado en la defensa del huésped contra Mtb, aunque
el impacto de la deficiencia de cualquiera de estos receptores
fue modesto o variable en modelos de ratón de tuberculosis [5,6].
Ciertos polimorfismos de genes en los TLR y los genes relacionados
(Es decir, TLR1 [22], TLR2 [23-25], y MyD88-adaptador-como
(MAL) [25,26]) se han asociado con la susceptibilidad
a la tuberculosis en los seres humanos, lo que sugiere que la señalización de TLR influencias
el desarrollo de la tuberculosis en el huésped humano. Los pacientes con
La tuberculosis pulmonar activa mostraron aumento de TLR1, 2, 4 y 6
los niveles de mRNA en los leucocitos de sangre total en comparación
con los controles sanos, mientras que la expresión de TLR 7 y 9 mRNA
no fue modificado [9].
ST2 inhibe la señalización dependiente de MyD88 [19], y, junto
con proteína accesoria IL-1R, funciones como la IL-
33 receptor [27]. Además, existe una variante que sST2
puede actuar como un receptor señuelo para IL-33 [12]. Nosotros aquí detectamos
niveles elevados de sST2 en el plasma de los pacientes con tuberculosis.
los niveles circulantes elevados sST2 se han reportado en
diferentes contextos de enfermedades humanas, incluyendo auto-inmune
enfermedades como el lupus eritematoso sistémico y artritis reumatoide
la artritis [28], las exacerbaciones de asma [29] y cardiovasculares
enfermedad [30]. Nuestro laboratorio se informó anteriormente
niveles elevados sST2 en la sepsis [31] y la leptospirosis [32].
Por lo tanto, los niveles plasmáticos elevados sST2 de ninguna manera son
específico para la tuberculosis. Por el contrario, los niveles circulantes de sST2 podría ser una
marcador de la actividad de la enfermedad en los pacientes con tuberculosis, también teniendo en
cuenta
las correlaciones estadísticamente significativas entre sST2
y los biomarcadores de tuberculosis conocidos [21]. Claramente, el potencial
valor de sST2 como un biomarcador de la tuberculosis y su respuesta a la tuberculosis
el tratamiento que examinar más en cohortes independientes.
Sólo se detectan cantidades muy bajas de ST2
mRNA en PBMCs de pacientes con TB. De acuerdo,
nuestro laboratorio se informó anteriormente un marcado aumento de
Las concentraciones en plasma después de la administración intravenosa sST2
de LPS a los seres humanos sanos en la ausencia de una
aumento de los niveles de ARNm de ST2 en los leucocitos de sangre [17].
También hemos encontrado niveles igualmente bajos de ARNm de ST2 en el AMS
de los pulmones de los pacientes con tuberculosis. De acuerdo, Oshikawa et al.
probados diferentes macrófagos pulmonares para la expresión ST2
(Humano murino y humano líneas celulares y primaria
AMS) y se han encontrado niveles bajos o indetectables de mRNA a menos
células habían sido expuestos a LPS, IL-1β, TNF-α o IL-6
[29]. Es importante destacar que nuestro grupo previamente documentado que
estimulación de sangre entera con LPS o Leptospira viable
no da lugar a liberación sST2 [32]. En conjunto, estos resultados
indican que sST2 plasma se origina a partir de células no
presentes en la sangre. Curiosamente, se halló una mayor ST2
expresión en la superficie de los linfocitos de la sangre de los pacientes con tuberculosis,
aunque la expresión ST2 fue bajo en relación a la de
monocitos. Es de destacar que la deficiencia de ST2 no influyó
cargas de micobacterias o resultado de la enfermedad durante murino
infección Mtb [33]. Plasma IL-33 no fue elevado en los pacientes
con TB. De acuerdo, los niños con TB mostraron
inalterados circulantes de IL-33 niveles [34].
SOCSs son una familia de proteínas intracelulares que funcione
como inhibidores de retroalimentación de los receptores de citoquinas. Ellos
son inducidos por la activación de TLR y, o bien directamente
(SOCS-1) o indirectamente (SOCS-3) interferir con la señalización de TLR
[35]. Si bien no hemos podido detectar SOCS-1 mRNA
en PBMCs, lo que confirma un informe anterior de nuestro grupo
[17], nos informan de un aumento de la expresión del ARNm de SOCS-3
en PBMCs de pacientes con tuberculosis pulmonar en comparación
a PBMCs de controles sanos. Por el contrario, Masood
et al. reportaron un aumento en SOCS-1 mRNA expresión en
PBMCs de pacientes con tuberculosis pulmonar avanzada en ausencia
de los cambios en SOCS-3 la expresión de ARNm [36,37].
De acuerdo con nuestros datos actuales, SOCS-3 ARNm
Se informó de expresión incrementado en los leucocitos de sangre entera
[38]. Otra investigación demostró una mayor
los niveles de mRNA SOCS-1 y SOCS-3 mRNA en Inducida
esputo de los pacientes con tuberculosis [8]. No fuimos capaces de detectar
ya sea SOCS-1 o -3 mRNA en los AM de pacientes con tuberculosis
lo que sugiere que SOCS-1 y -3 expresión en Inducida
esputo podría proceder de un tipo de célula diferente. Un reciente
estudio ha establecido el papel funcional importante
para SOCS-3 de expresión en cualquiera linfoide o células mieloides
para la resistencia contra Mtb en ratones [39].
A lo mejor de nuestro conocimiento nuestro estudio es el primero
informe aumentó la expresión de mRNA IRAK-M en PBMCs
de los pacientes con tuberculosis. Se ha sugerido que Mtb
lipoarabinomannan puede inducir IRAK-M en los macrófagos,
atenuando de esta manera las señales pro-inflamatorias
[40]. De hecho, la expresión de mRNA IRAK-M se upregulated
en el esputo inducido de los pacientes con tuberculosis [8]. Lo hicimos
no encontraron mayores niveles de mRNA IRAK-M en el AMS de
los pacientes con tuberculosis. Es de destacar, sin embargo, se obtuvieron los AM de control
desde el pulmón contralateral del mismo paciente.
Aunque los pacientes fueron seleccionados para una radiográfica caras
anormalidades y aunque el contralateral
BAL fluidos a prueba de PCR negativo para Mtb, no se puede
descartar un efecto indirecto de la afectada a la
pulmón contralateral. Por otra parte, las consideraciones éticas
nos impidió el reclutamiento de pacientes positivos de frotis de esputo
para el procedimiento de BAL, lo que significa que la carga bacteriana
en estos pacientes eran lo suficientemente bajo como para escapar repetitivo
las pruebas de esputo (en contraste con la tuberculosis pulmonar
pacientes reclutados para el análisis PBMC). Por tanto, es
posible que en los pacientes con más extensa pulmonar
La tuberculosis, la expresión de genes se altera en los AM cosechado
desde el sitio de infección.
Además de SOCS-3 elevadas y IRAK M-mRNA
niveles se observó ligeramente mayor expresión de
ARNm que codifica TOLLIP en PBMCs de pacientes con tuberculosis,
que, sin embargo, no fue acompañada de una mayor
expresión de la proteína. En las células en reposo TOLLIP forma una
complejo, ya sea con IRAK-1 o -2 evitando de ese modo
IRAK (auto) fosforilación y la inhibición de IL-1R, TLR2
y TLR4 vías de señalización [41,42]. De conformidad, humana
monocitos de sangre periférica en la que TOLLIP era
Silenciado parcialmente producido más TNFa e IL-6 en
estimulación con Mtb lisados de células enteras [43]. Aunque esto
podría sugerir que TOLLIP puede obstaculizar la antimycobacterial
respuesta inmune, SNPs en el gen humano TOLLIP
resultante en la deficiencia se asocia con un mayor
susceptibilidad a la tuberculosis [43]. Como tal, el papel funcional de
TOLLIP en la tuberculosis aún no se ha determinado. Cabe destacar que, en la medida
de TOLLIP (y IRAK-M) en la expresión del ARNm
PBMCs no se correlacionó con los niveles circulantes de proinflamatorias
citoquinas. Esto no contradice la suposición
que la mayor expresión de innata negativo
reguladores de inmunidad sirve para inhibir la inflamación aberrante
causado por la activación de receptores inmunes mejorar
tales como TLRs. Más bien, es el equilibrio entre pro- y
reguladores anti-inflamatorias que determina el efecto neto
en la liberación de citoquinas proinflamatorias.
MKP-1 inactiva las MAPK (en particular, p38 y JNK)
que son aguas abajo de las vías de transducción de señales TLR
[44]. El silenciamiento de MKP-1 en monocitos de sangre humana
disminución de la expresión de fosfo-MAPK y TNF-α
producción en respuesta a BCG, sugerente para una posible
papel perjudicial de MKP-1 en la defensa del huésped contra Mtb
[45]. Nosotros aquí no encontramos un efecto de TB activa en
MKP-1 mRNA expresión en cualquiera de las PBMC o los AM.
Del mismo modo, la tuberculosis no influyó en los niveles de mRNA de la A20 o
SIGIRR en PBMCs o los AM. Un posible papel de la A20 en
patogénesis TB no se ha investigado hasta el momento,
Aunque su papel central como un inhibidor de NF-inducible
activación kappa B sugiere A20 puede ser importante [46]. Consistente
con el papel de la inhibición de TLR SIGIRR, SIGIRR
ratones deficientes mostraron inflamación exagerada y aumentaron
letalidad después de la infección con Mtb a pesar de una eficiente
el control de crecimiento de micobacterias [47].
conclusiones
La inmunidad innata necesita ser controlado cuidadosamente en
Para evitar daños a las células y tejidos debido a aberrante
inflamación. El sistema inmune alberga un gran
variedad de reguladores negativos que sobre la interacción entre
células inmunes y patógenos se activan en
en paralelo con potenciadores inmunes. Mientras que los estudios anteriores
examinó la expresión de potenciadores inmunológicos, y, en
en particular los TLR, durante la tuberculosis [8-11], que aquí informe sobre una
expresión de un grupo de reguladores inhibitorios de innata
la inmunidad, la expresión diferencial de estos controladores "inmunes"
en PBMCs de pacientes con tuberculosis activa en relación con
donantes de sangre sanos. Por lo tanto, nuestro estudio proporciona evidencia
que en pacientes con TB activación de la inmunidad innata
se mantiene bajo control por varios reguladores negativos.
Además, en los pacientes niveles elevados en plasma sST2
correlacionado con varios biomarcadores de TB establecidos, lo que sugiere
sST2 que podría ser un marcador útil para la enfermedad de la tuberculosis
actividad y la respuesta al tratamiento.