INTRODUCCIÓN

Primero se observó una vesícula pequeña en reticulocitos de oveja en 1983 [ 1 ]. Más

tarde Rose M. Johnstone lo definió como exosomas [ 2 ]. Los exosomas son vesículas
de 30-100 nm, que son secretadas por casi todos los tipos de células, incluidas las
células tumorales [ 3 , 4 ]. Están compuestos de proteínas y ácidos nucleicos que están
asociados con las células del donante [ 5 ]. Los exosomas también tienen marcadores de
membrana específicos tales como tetraspaninas (p. Ej., CD9, CD63, CD81), proteína de
choque térmico (Hsp70), moléculas complejas de complejo de histocompatibilidad
(MHC I y II) y moléculas coestimuladoras [ 6 ]. En 1996, Raposo et al. en primer lugar,
informaron que los exosomas derivados de células B inducían respuestas de células T
restringidas al MHC clase II específica del antígeno [ 7].], y luego Zitvogel et
al. demostraron que las células dendríticas (CD) pulsadas con péptidos derivados de
tumores provocaron una potente respuesta de células T antitumorales en ratones
portadores de tumores en 1998 [ 8 ]. Estos resultados han indicado que los exosomas
tienen capacidades potenciales para la inmunoterapia del cáncer. En 2001, Wolfers et
al. encontraron que los exosomas derivados de tumores podrían usarse como una fuente
de antígenos de rechazo de tumores compartidos para el cebado cruzado de CTL
[ 8 ]. Con base en los hallazgos, las investigaciones de inmunoterapias tumorales se
llevaron a cabo en diversas enfermedades malignas, como el melanoma, el glioma, el
carcinoma hepatocelular y el carcinoma de células renales [ 9 - 14] En esta revisión,
resumiremos la función y los valores de aplicación de las DC cargadas con exosomas
derivados de tumores en la inmunoterapia del cáncer, así como los mecanismos
relacionados.

Exosomas en cánceres
Los exosomas se forman a través de la endocitosis en la membrana celular, y luego
resulta en la formación de cuerpos multivesiculares (MVBs) que pueden fusionarse con
la membrana plasmática y ser liberados al espacio o fluidos corporales extracelulares a
través de la exocitosis (Figura (Figura 1).1 ). Los exosomas pueden transportar el
contenido de sus células hospedadoras, incluidos miRNAs, proteínas, lípidos e incluso
DNA. Por lo tanto, los exosomas mantienen la función de parte de sus células
anfitrionas. Liberado de células malignas, los exosomas derivados de tumores (TEX)
pueden promover el crecimiento tumoral mediante la inhibición de la diferenciación de
las células de la médula ósea [ 15 - 17 ], cambiando la fisiología de los macrófagos
[ 11 , 18 , 19 ], reduciendo la citotoxicidad de las células NK [20 - 22 ], y la regulación
del papel de las células T [ 23 - 29 ]. Texs también juega un papel importante en la
metástasis del tumor a través de transporte de su contenido a las células receptoras que
afectan de este modo la vía de señalización intracelular [ 30 - 35 ] (Figura (Figura
2).2 ). En comparación con exosomas liberados de las células normales, la cantidad de
Texs es significativamente más porque las células malignas secretan aproximadamente
10 veces más exosomas que las células normales (Tabla (Tabla 1).1) La abundancia de
TEX en el microambiente tumoral puede mejorar la invasión inmune del tumor
mediante la inhibición de la función de las células T efectoras y las células NK. Los
TEX también pueden desempeñar funciones inhibitorias en la diferenciación de los
países en desarrollo. Los TEX pueden ayudar a las células tumorales a escapar de la
inmunosupervisión del huésped, lo que facilita el crecimiento tumoral y la metástasis
[ 17 , 20 - 22 ].
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Figura 1
La ruta biosintética de los exosomas
Los exosomas se formaron con proteínas, proteínas citosólicas y ácido necélico. La formación
de exosomas se produjo en la membrana a través de la enodocitosis, y se relacionó con el
entorno celular a través de la exocitosis (figura de Munson et al. [ 73 ]).
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Figura 2
La función biológica de los TEX en la tumorogénesis
Liberado por las células tumorales, los TEX desempeñaron papeles promotores importantes en
la progresión maligna de los tumores mejorando el entorno del tumor, apoyando la metástasis,
inmunosupresores, etc. La figura era de Munson et al. [ 73 ].

tabla 1
La comparación entre TEX y exosomas derivados de células normales
 TEXs Exosomas derivados de células normales

Origen Células tumorales Células normales

Componentes mRNAs, miRNAs, lnRNAs, mRNAs, miRNAs, lnRNAs, proteínas,

biológicos proteínas, antígenos, DNA, etc. antígenos, DNA, etc.

Aproximadamente 10 veces más que

Cantidad los exosomas derivados de células menos que los números de los TEX
normales

las proteínas o la familia de proteínas que

Proteína representan su origen endosomal: por
Antígeno específico del cáncer
característica ejemplo, los exosomas de las CD contienen
abundantes MHC clase II y CD86

inhibición inmune; promover la

angiogénesis, el crecimiento, la comunicación intercelular; acción
Función
invasión, la metástasis; resistencia a antitumoral; efectos inmunoestimulantes;
las drogas

biomarcadores tumorales y terapia

Solicitud entrega dirigida; tratamiento para el cáncer
dirigida

En los primeros tiempos, los investigadores se centraron en su potencial como

marcadores de diagnóstico porque los TEX podían reflejar los genotipos y fenotipos de
sus células progenitoras. Los siguientes estudios confirmaron que los exosomas podrían
secretarse al suero, la orina y el líquido cefalorraquídeo, y todos indicaron que podría
ser un nuevo generador de diagnóstico para el cáncer [ 35 - 39 ]. Se ha confirmado que
el nivel de miARN en TEX en el fluido corporal mostró una fuerte correlación con la
progresión tumoral en comparación con los niveles de fluidos corporales. Las
investigaciones relacionadas se han reportado en glioma, cáncer de ovario, cáncer de
pulmón, carcinoma hepatocelular, cáncer gástrico, etc. [ 40 - 44] Los ARN largos no
codificantes (ARNlnc) también tienen papeles potenciales para actuar como nuevos
biomarcadores de diagnóstico y pronóstico. Recientemente, los investigadores han
encontrado que la expresión de lncRNAs, que es baja en células, aumenta en exosomas
derivados de glioblastoma, cáncer de vejiga, carcinoma de células escamosas laríngeas,
cáncer colorrectal, cáncer gástrico, cáncer de hígado, etc. [ 38 , 45 - 49 ]. En una
palabra, la detección de la información genética en los exosomas puede ser una forma
prometedora para el diagnóstico temprano y la vigilancia de tumores malignos.
En los últimos años, los exosomas derivados de las CD (DEX) han atraído más
atenciones debido a su capacidad inmunorreguladora y los efectos inmunoterapéuticos
en el tratamiento del cáncer. DEX tiene la capacidad de presentar Ags directa e
indirectamente a las células T, de modo que no solo pueden inducir respuestas
antitumorales dependientes de las células T sino también superar algunas limitaciones
técnicas de la inmunoterapia basada en DC. El potencial terapéutico de DEX depende
principalmente de su composición. DEX contiene moléculas MHC Clase I y II
abundantes, moléculas coestimuladoras (CD80 y CD86), miembro de la familia Ig
ICAM-1, glóbulo de grasa de leche factor EGF 8 (MFG-E8), tetraspaninas (CD63,
CD81, CD9) y el choque térmico proteína hsc73 [ 50 - 55] DEX estimula las respuestas
CTL específicas del tumor transfiriendo complejos de MHC-péptido a las células T de
las CD, lo que podría facilitarse mediante la molécula coestimuladora y la
tetraspanina. ICAM-1, MFG-E8 y hsc73 también pueden promover la reacción inmune
mediante la inducción de respuesta antitumoral dependiente de células T [ 51 , 55 ]. La
respuesta inmune antitumoral dependiente de células NK puede ser activada por IL-
15R, TNF, ligando NKp30 BAT3 y NKG2D expresado en la superficie de DEX
[ 56 - 58 ]. Sobre la base de esos estudios, las investigaciones de vacunas DEX se han
llevado a cabo para una variedad de células tumorales [ 6 , 59 - 62] Además, los ensayos
clínicos de fase I en melanoma y cáncer de pulmón no microcítico avanzado mostraron
resultados significativos [ 63 , 64 ]. La aplicación de la vacuna DEX puede proporcionar
un enfoque prometedor para la prevención y los tratamientos del cáncer.

Los TEX contienen antígeno asociado a tumores y pueden ser absorbidos por
los países en desarrollo
Los exosomas, derivados de melanoma, glioma, carcinoma de células renales y otras
células tumorales, se ha demostrado que contienen antígenos parentales
[ 7 - 13 ]. Wolfers et al. informaron que las células tumorales podrían esconder
exosomas, que expresaron fuertemente MHCI, LAMP1, HSP70 y antígenos tumorales
por primera vez [ 7 ]. Andre et al encontraron que los antígenos de los exosomas podían
captarse y presentarse cruzados por las moléculas del MHC-I en los CD derivados de
monocitos HLA-A2 + [ 65 ]. Las DC no solo expresan moléculas de OVA y pMHC-I,
sino que también expresan ambas después de ser co-cultivadas con EXO EG7 . Esto
correspondía al estudio anterior de que las DC se volvieron positivas para CFSE o
CD45.1 después de incubarse con EXO CFSE o EXO 6.1., y la expresión de H-2Kb,
pMHC.I, Ia b , CD40, CD54 y CD80 en las CD se mejoró después de la incubación
con OVA EXO [ 66 , 67 ]. Si bien el bloqueo de los anticuerpos anti-LFA-1 y anti-
DEC205 o el tratamiento con citocalasina D podría reducir la absorción de exosomas en
las CD, lo que sugiere que las interacciones LFA-1 / CD54 y tipo C-lectina / receptor de
lectina tipo C rica en manosa podrían ser crítico para el mecanismo de absorción de
exosomas por los países en desarrollo [ 67]] MHC-I (un factor importante responsable
de capturar péptido antigénico), ICAM-1 (una molécula adhesiva que está
potencialmente involucrada en la selección celular), HSP70 (una chaperona crucial para
unirse a las CD) y proteína MAGE-1 (un específico para el glioma antígeno tumoral), se
enriquecieron en exosomas de glioma maligno que lisados [ 8 ]. Los TEX Hepa1-6
expresan dos antígenos de HCC bien caracterizados-alfa-fetoproteína (AFP) y glipicano
3 (GPC3), y pueden ser absorbidos por las CD, promoviendo así la maduración de DC
mediante la mejora de los niveles de expresión de CD11c, MHC, coestimulador factores
(CD80, CD86) y molécula de adhesión intercelular (ICAM) [ 12] WEHI3B-TEX,
caracterizado por la expresión regulada positivamente de los receptores CD90, CD44,
MFGE8, HSP70 y las tetraspaninas CD9 y CD63, puede ser absorbido eficazmente por
los países en desarrollo, induciendo así la maduración de DC sin deterioro. Los TEX
que portan antígenos tumorales específicos pueden activar la maduración de las CD,
mejorando la respuesta inmune antitumoral.

Los DC cargados con TEX provocan inmunidad antitumoral dependiente de

células T CD8 +
En estudios previos, se ha demostrado que la absorción de TEX por las CD podría
inducir una respuesta CTL específica de antígeno. Las células tumorales expresan
antígenos que pueden ser reconocidos por CTL. Las DC absorben los TEX que
contienen antígenos del donante, induciendo de ese modo la respuesta CTL específica in
vitro o in vivo . Andre et al. encontraron que las DC cargadas con exosomas de ascitis a
partir del melanoma podrían aumentar el número de células T positivas para CD8 en
sangre periférica y estimular linfocitos para lisar células tumorales autólogas o liberar
interferón gamma. Sin embargo, la adición de anticuerpos a moléculas de MHC de clase
I podría inhibir la reacción inmune [ 65] Ning Bu et al. observaron que la absorción de
TEX por DC podría activar los linfocitos T para convertirse en CTL especializados en
glioma, y demostraron que los anticuerpos de las moléculas CD8 podrían inhibir la
citotoxicidad mediada por CTL a la célula diana tumoral, sin embargo los anticuerpos
contra CD4 no podrían [ 8 ]. En la inmunoterapia del carcinoma hepatocelular, el
número de linfocitos T CD8 + se incrementó significativamente en el suero y los tejidos
tumorales de los ratones tratados con TEX-DC pulsadas [ 12 ]. Ye Yao et
al. encontraron que las células dendríticas EXO EG7 dirigidas a células T CD8 +
estimuladas más fuertes se diferencian en efectores de CTL in vivo [ 66].] Todas las
investigaciones revelaron que las DC cargadas con TEX podrían aumentar el número de
células T CD8 +, mejorando así las inmunidades antitumorales.

Los TEX muestran inmunidades antitumorales más fuertes que el lisado

derivado de tumor
En los últimos años, cada vez se dedican más investigaciones para explorar las vacunas
de DC para la prevención y los tratamientos del cáncer. Los lisados tumorales
representan una de las fuentes de antígenos tumorales más frecuentemente utilizados
para las vacunas de DC. Obtienen algunos logros y también exhiben una tasa de
respuesta limitada [ 68 ]. Los estudios relevantes demostraron que el efecto de los TEX
era obviamente mejor que los lisados tumorales. En el estudio de Niken M. Mahaweni,
la mediana de supervivencia para el grupo DC cargado con exosomas fue más
prolongada que el grupo DC cargado con lisado tumoral (29.5 con 18.5 días), aunque
los exosomas derivados de mesotelioma contenían menos proteínas que los lisados
tumorales necróticos [ 10].] Ning Bu et al. encontraron que la citotoxicidad de los
exosomas DC-estimuladas células T contra las células de glioma fue significativamente
mayor que los niveles en tumor lisado DC-estimulado de células T en todas las
relaciones E: T [ 8 ]. Hepa1-6 TEXs muestra superioridad a los lisados celulares al
provocar inmunidad antitumoral mediada por DC in vitro , a pesar de la capacidad de
inhibir el crecimiento tumoral y los números de linfocitos T en tejidos tumorales in
vivo y tasas de citolisis frente a células hepa1-6 in vitro [ 12 ]. Algunos estudios también
mostraron que se logró una supresión tumoral significativamente más fuerte en ratones
tratados con DC cargados con exosoma tumoral en comparación con DC cargados con
lisado tumoral, debido al crecimiento más lento del tumor, activación de CTL más
fuerte y tasa de absorción de DC [7 , 69 ]. Los DC cargados con TEX pueden ser
prometedores para la inmunoterapia tumoral sin efectos secundarios graves y resistencia
al tratamiento.

Expansión
En resumen, los exosomas tienen funciones enormes en la inmunidad tumoral. Los
exosomas se pueden utilizar como un antígeno altamente eficaz en comparación con los
lisados tumorales tradicionales debido a su fuerte antigenicidad, aplicabilidad y
conveniencia de almacenamiento y extracción. Los TEX se pueden separar de la sangre
mediante un biomarcador específico, que es adecuado para todos los pacientes,
incluidos los pacientes que no pueden tolerar la resección quirúrgica del tumor. Las DC
capturan y procesan antígenos en péptidos, y luego los presentan a receptores de células
T a través del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) clase I o II activando así
la señal 1. Las moléculas coestimuladoras upregulating como CD4 +, CD8 + hacen DC
más maduras y tienen una capacidad más poderosa al presentar antígenos, de este modo
se activa la señal 2 para liberar una gran cantidad de citoquinas, que deben completarse
con adyuvantes. La inmunidad terapéutica de las vacunas de DC puede reforzarse
mediante el pulso de algunos agentes, tales como los agonistas del receptor Toll-like
(TLR), el ligando CD4 +, el ligando CD7 +, TNFRSF4, los ionóforos de calcio y el
ligando GITR. Por ejemplo, estudios recientes demostraron que la potente α-
galactosilceramida (α-GalCer) agonista sintética de iNKT combinada con vacunas de
DC podría mejorar la capacidad de impulsar respuestas convencionales de células T a
través de factores inmunoestimuladores upregulating tales como CD4 + al fomentar
interacciones iNKT: DC, luego expresar altamente efectivo en inmunoterapia de glioma
[70 ]. Además, la eficacia de la vacuna de DC es variable en la actualidad, y la razón
más posible puede ser la respuesta inmunosupresora causada por el microambiente
tumoral. Estudios recientes muestran que los inhibidores del punto de control
inmunológico como los anticuerpos PD-1 tienen la capacidad de aliviar la
inmunosupresión y mejorar el microambiente tumoral [ 71 , 72 ]. Sin embargo, la
aplicación de DC cargados de TEX para la terapia del cáncer tiene varios desafíos
potenciales. En primer lugar, es bien sabido que los pacientes malignos solo producen
DC disfuncionales en etapas tempranas de la enfermedad. Se deben pagar más
atenciones para aislar los CD elegibles con alta calidad para uso clínico. En segundo
lugar, aunque in vitro demostró que los TEX podrían promover la maduración de DC,
hubo una gran cantidad de TEXin vivo que podría suprimir la función de los DC
cargados con TEX. Por lo tanto, los enfoques de la aplicación para el uso de DC en la
terapia del cáncer requieren mejoras adicionales.
En conclusión, la combinación de exosomas cargados por la vacuna de DC con
adyuvantes e inhibidores del punto de control inmunológico puede ser crucial para la
oncoterapia en el futuro. Se deberían dedicar más investigaciones para mejorar las
estrategias de aplicación de la vacuna de DC cargada con TEXs para tratamientos de
cáncer en la clínica.