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a) Métodos directos
Se consideran los métodos básicos, siendo los principales los métodos de la estufa, la destilación y los
rayos infrarrojos.
Método de la estufa. Para determinar la humedad de los granos se somete una muestra de granos de peso
conocido al secado y se calcula el porcentaje de humedad a través del peso que se pierde durante el
secado. Para obtener el porcentaje de humedad se divide la pérdida de peso de la muestra entre el peso
original de ella y el resultado se multiplica por 100:
b) Métodos indirectos
Son los más usados en la práctica e incluyen, sobre todo, los métodos eléctricos. Los aparatos eléctricos
tienen que ser calibrados con los métodos directos.
Método manual
El método manual consiste en separar las impurezas por medio de cernidores o zarandas manuales; por lo
general se utilizan dos cernidores, uno sobre el otro. Los orificios del primer cernidor deben ser de un
tamaño que permita el paso del producto y que no deje pasar las impurezas mayores. Los orificios del
segundo cernidor deben retener los granos y deben dejar pasar las impurezas menores. En el Cuadro 2 se
presentan las dimensiones de los orificios de las zarandas para cada producto.
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CUADRO 2: Dimensiones básicas de los cernidores recomendados para cada producto (en milímetros)
Producto Primera Zaranda Segunda Zaranda
Maíz 13 5
Trigo Sarraceno 14 x 10 3
Frijol 9 5
Sorgo 6 3
Arroz 4 x 12 1,75 x 22
Soja 9 3,165
Para determinar el contenido de impurezas por este método se procede de la siguiente manera.
Se toma una muestra representativa, de más o menos 500 g de peso.
Se limpia el producto utilizando el juego de zarandas adecuadas, mediante un movimiento de
vaivén.
Se pesa la totalidad de las impurezas.
Se determina el valor porcentual de impurezas presentes en el producto, como aparece en el
siguiente ejemplo
Objetivo.- Conocer el porcentaje de grasa contenida en diferentes semillas y frutas oleaginosas a objeto
de elegir un método de extracción.
Materiales.- Aparato tipo goldfisch o soxhlet y sus accesorios; algodón absorbente; mortero o molino;
balanza analítica, cápsulas de fondo plano para humedad en harinas.
Reactivos. Solvente (hexano o éter de petróleo).
ORDEN DE EJECUCION
% Grasa = (peso del vaso con aceite – peso del vaso vacio) * 100
Peso de muestra húmeda * (1 – H)
Principio.- Caracteres organolépticos son las cualidades de las sustancias grasas perceptibles directamente
por los sentidos. Por lo tanto, su determinación es fundamentalmente subjetiva no permitiendo establecer,
en general, métodos concretos y definidos.
Aspecto.- Se considerará de aspecto correcto cuando sometida la muestra de aceite durante 24 horas, a
una temperatura de 200C +- 20C, se observa homogénea, limpia y transparente.
Olor y sabor.- Serán los normales según el tipo de aceite, y con los aromas propios y característicos, sin
que se advierta en ningún caso síntomas organolépticos de rancidez.
Color.- Variará del amarillo al verde. Para los aceites de oliva y orujo se medirá por el método “índice de
color A.B.T.”. En los demás aceites refinados se medirán en el sistema Lovinbond, utilizando cubetas de
5,25 pulgadas.
Principio.- Se establecen las condiciones adecuadas para la determinación, en las materias grasas, del
agua y de las materias volátiles, operando en las condiciones del ensayo. Es aplicable a las grasas animales
y vegetales, con la excepción de los aceites secantes o semisecantes y los aceites del grupo del coco.
Material y aparatos.- Estufa de desecación, con regulación de temperatura, pudiéndose calentar hasta
1500C como mínimo; la regulación se efectuará entre los límites de oscilación de ±2 ºC, siendo, además,
la temperatura uniforme en todo el espacio inferior, tolerándose diferencias que no excedan de 1 0C entre
posiciones extremas.
Cápsulas de fondo plano, con dimensiones aproximadas de 80 mm de diámetro y 20 mm de altura,
preferiblemente de acero inoxidable o aluminio, o en su defecto de porcelana.
PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra.- La muestra debe ser previamente homogenizada antes de pesar la cantidad
con que se vaya a operar. Esto se logra, con las grasas fluidas, agitando fuertemente el frasco que contiene
la muestra y vertiendo rápidamente la cantidad aproximada que se vaya a pesar en la cápsula en la que se
efectúa la desecación. Si se tratase de grasas sólidas o semisólidas a temperatura ambiente, calentar
suavemente en baño de agua hasta conseguir el grado de fluidez conveniente, cuidando de no llegar a
fundir completamente y homogenizar con un mezclador adecuado o simplemente con una espátula si no se
dispusiese de ese elemento.
Técnica operatoria.- En una cápsula, desecada previamente en estufa a 105 0C y enfriada en un desecador,
pesar, con exactitud de 1 mg, una cantidad de entre 5 o 10 g de muestra, según el contenido de humedad.
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Colocar en la estufa, previamente regulada a 105 C manteniéndola allí 3 horas. Sacar y pasar a un
desecador, donde se deja enfriar, pesando a continuación. Repetir el tratamiento, en operaciones
sucesivas, hasta que la diferencia entre dos pesadas consecutivas no exceda del 0.05%
Principio.- Se determina la masa de la unidad de volumen, expresada en gramos por centímetro cúbico, a
una temperatura dada. La densidad se expresa con la letra d. La temperatura se ha de controlar
exactamente ya que la densidad de las materias grasas varia aproximadamente 0.00068 por grado. La
temperatura de la determinación no diferir en más de 5 0C de la de referencia.
Material y aparatos.- Picnómetro normal, o con el termómetro acoplado de 50 ml aproximadamente.
PROCEDIMIENTO
CALCULO
Calcular la densidad expresada en g/cc y referida a una temperatura que generalmente ser de 20 0C para
los aceites y de 40 0C para las grasas sólidas.
( p" p )
Para aceites: Densidad = g/cc.
( p ' p )
( p" p )
Grasas sólidas: Densidad = g/cc.
[( p ' p ) ( p" ' p" )]
Siendo:
δ=densidad del agua
p = peso del picnómetro vacío
P'= " " " lleno con agua a la temperatura de lectura
P"= " " " con aceite a la temperatura de lectura
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P"'= " " " con grasa y agua a temperatura de lectura
CORRECCIONES. El valor de la densidad calculado anteriormente puede corregirse del efecto del
empuje del aire por la fórmula:
δac corregida =δa + 0.0012(1- δa ) donde δa es densidad del aceite sin corregir.
La temperatura de la determinación y la temperatura de referencia se relacionan en la siguiente forma:
Material y aparatos.- Frascos de vidrio de unos 115 ml, limpios y secos; baño de agua y hielo troceado.
Llenar un recipiente de 2 o 3 litros de capacidad con hielo finamente machacado, y añadir agua fría en
cantidad suficiente para que quede cubierto el cierre del frasco que contengan la muestra.
PROCEDIMIENTO
Filtrar una cantidad suficiente de muestra (200 a 300 ml) a través de papel filtro. Calentar el
filtrado, agitándolo continuamente hasta que adquiera una temperatura de 130 0C
Llenar completamente un frasco con el aceite muestra filtrado y tapar suavemente con un tapón de
corcho. Llevar a 25 0C en un baño de agua y recubrir el tapón con parafina.
Sumergir el frasco en el baño agua - hielo de forma que quede cubierto el cierre de aquel. Reponer
hielo para mantener los 00C y el nivel primitivo.
Al cabo de cinco horas y media retirar el frasco del baño y examinarlo detenidamente para ver si se
han formado cristales o enturbiamiento. No confundir burbujas de aire finamente dispersas con los
cristales de grasa. La muestra habrá resistido la prueba si se conserva clara, limpiamente y
brillante.
La expresión de resultados consiste en Negativa o Positiva.
El objetivo del calentamiento inicial es eliminar las trazas de humedad y destruir los núcleos cristalinos
que puedan existir. Ambos interfieren la prueba ocasionando enturbiamiento por cristalización prematura.
Principio.- El índice de refracción de una sustancia dada es la razón de la velocidad de un rayo de luz en
el vacío a la velocidad de la luz a través de la sustancia. Por conveniencia práctica se refiere a la relación
aire - sustancia. Es igualmente la relación del seno del ángulo de incidencia al seno del ángulo de
refracción.
El índice de refracción de una sustancia dada varía con la longitud de onda del rayo de luz refractado y
con la temperatura. Salvo indicación contraria el índice de refracción viene referido a la longitud de onda
correspondiente a la línea D, 589.5 nm de la luz de sodio. El índice de refracción se indica con la notación
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nt* para t C y longitud de onda de la línea D del sodio. Para otra radiación de distinta longitud de onda a
t0C, la rotación ser nt* longitud de onda.
Material y aparatos.- Refractómetro de precisión, que permita apreciar como mínimo las diesmilésimas,
con prismas calentados por circulación de líquido termostático.
PROCEDIMIENTO
El aceite debe estar limpio y exento de agua. Filtrar sobre papel filtro seco, con la ayuda, si es necesario,
de sulfato sódico anhidro. Llenar con la materia grasa el espacio comprendido entre los prismas. Hacer la
lectura después de 5 minutos, al menos, de contacto. La temperatura de lectura no debe sobrepasar en 2 la
temperatura de referencia.
CALCULO
Calcular el índice de refracción referida a la temperatura a 20 0C para las grasas líquidas a esa
temperatura, y referido a 40, 60, 80 0C o temperaturas superiores para las materias grasas sólidas.
Principio.- La acidez que figura normalmente en los boletines de análisis es una expresión convencional
del contenido en tanto por ciento de los ácidos grasos libres (A.G.L.). También se denomina grado de
acidez. El índice de acidez, expresa el peso, en mg de hidróxido de potasio necesario para neutralizar un
gramo de muestra grasa.
Objetivo.- Conocer el contenido de ácidos grasos libres presentes en el aceite crudo o refinado.
Materiales.- Erlenmeyer de 250 ml; buretas; vasos de precipitados; balanza analítica; pipetas graduadas.
Reactivos. Etanol al 96% o mezcla 1:1 etanol-éter dietílico neutralizado; hidróxido de potasio o de sodio
0.1 N o si es necesario 0.01 N; fenolftaleína como indicador al 0.5 o 1% en alcohol al 96% v/v.
Fundamento teórico. Valor ácido es el número o cantidad de miliequivalentes de NaOH requeridos para
neutralizar los ácidos grasos libres, expresados como oleico, láurico o erúcico. El método consiste en
disolver en una mezcla de etanol + eter dietílico, una determinada cantidad de aceite extraído de las
semillas (Norma Boliviana N.B. 278-78), seguidamente determinar los ácidos grasos libres presentes,
utilizando una solución etanólica de NaOH.
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ORDEN DE EJECUCION
Pese 5 a 10 g de muestra (alto contenido de A.G.L.) o 20-30 g (bajo contenido de AG.L.) y disuelva en la
mezcla etanol ‚éter dietílico, previamente neutralizado. (Aproximadamente 50 ml)
Titule, con la solución 0.1 N de NaOH por encima del punto final del indicador (rosado para la
fenolftaleina) y que persista cuando menos 10 segundos. Si la cantidad de NaOH 0.1 N excede los 20 ml,
utilice una solución 0.5 N. Por el contrario si la titulación con NaOH no excede a 0.5 ml, use NaOH 0.01
N. Para aceites o grasa que contienen ácido láurico, la temperatura de la solución etanol ‚eter dietílico,
debe mantenerse entre 15 y 200C durante la titulación.
Exprese los resultados del análisis como valor ácido (índice de acidez) con la fórmula siguiente dado en
mg de NaOH:
donde:
La acidez puede determinarse según el tipo de aceite o grasa. Para ácido láurico en los aceites de coco,
palma y otros similares; como ácido erúcico el de las crucíferas y como oleico para expresar simplemente
ácidos.
VNM
Porcentaje acidez =
10m
donde: V = volumen de NaOH, N = Normalidad del NaOH, m = masa de muestra, M = peso molecular,
del ácido utilizado; oleico, 282; láurico, 200; erúcico, 338.
Los límites máximos de calidad de "consumo" varían considerablemente según el aceite, pero como
norma general se puede admitir un límite crítico del 0.1%. Como límites máximos se consideran por
ejemplo de 2% para el de oliva, 0.5% para el maní (cacahuete) y 2% para el de almendra.
Principio.- Se entiende por ácidos grasos insolubles de una grasa, los obtenidos por saponificación de
aquella, descomposición del jabón formado y aislamiento según el procedimiento descrito posteriormente.
Este debe ser aplicado rigurosamente por la posible presencia de ácidos grasos mas o menos solubles en
agua.
PROCEDIMIENTO
Observaciones.- Si la preparación de los ácidos grasos tiene por objeto la determinación del peso
molecular medio, asegurarse que la última capa acuosa eliminada es neutra al naranja de metilo. Si la
preparación de los ácidos grasos tiene por objeto la determinación del título, dejar los ácidos grasos
cristalizar en un desecador a la temperatura del laboratorio durante 24 horas antes de la determinación.
Objetivo.- Conocer la cantidad de KOH necesaria para que reaccione con una determinada cantidad de
aceite.
Materiales.- Frascos erlenmeyer de 250 ml; refrigerantes; hornilla eléctrica; balanza analítica; pipetas de
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10,25 y 50 ml; mangueras de conexión; frasco con tubo de desprendimiento para destilación.
Reactivos.- Solución alcohólica de KOH; HCl 0.5 N; fenolftaleina; gránulos u hoja de aluminio;
muestra de grasa.
ORDEN DE EJECUCION
N
Indice de Saponificación.= 56.1(VB VM )
G
donde:
PREPARACION DE REACTIVOS
a) Disolución alcohólica de KOH. Hiérvase a reflujo 1.2 a 1.5 l de etanol, 5 a 10 gramos de KOH y 5
g de gránulos u hoja de Al durante 30 a 60 minutos.
b) Destílese y recójase un litro de alcohol descartando los primeros 50 a 75 ml.
c) Disuélvanse 40 g de KOH libre de carbonatos, en un litro de alcohol destilado, manteniendo la
temperatura por debajo de 10 0C.
Objetivo.- Conocer el grado de insaturación de un aceite animal o vegetal a fin de conocer su oxidación
potencial.
Materiales.- Balanza analítica; navecilla de vidrio; erlenmeyer de 500 ml; matraz aforado de 1000 ml;
bureta de 50 ml; vaso de precipitados.
Reactivos.- Acido acético glacial, tetraclouro de carbono; solución de yoduro de potasio al 15%; yodo
sublimado; solución de tiosulfato de sodio; solución de almidón; solución de Wijjs.
Definición.- Se define como el porcentaje en peso de halógeno, calculado como yodo, absorbido en las
condiciones del ensayo.
Fundamento del método.- En condiciones normalizadas, los glicéridos de los ácidos grasos insaturados
presentes en el aceite se unen con una cantidad definida de halógeno contenida en solución de Wijjs de
monocloruro de yodo. El grado de absorción se estima valorando el yodo en exceso con tiosulfato. Cada
aceite o grasa posee un cierto rango de índice de yodo, el cual, por consiguiente, sirve de ayuda en su
identificación; por ejemplo, las grasas sólidas tienen valores m s bajos que los aceites más insaturados.
Preparación del reactivo de Wijjs.- Se disuelven 8 g de tricloruro de yodo en 200 ml de ácido acético
glacial y se mezclan con una disolución de 9 g de yodo en 300 ml de tetracloruro de carbono. La mezcla
se diluye a 1000 ml ácido acético glacial.
ORDEN DE EJECUCION
a) La muestra debe estar limpia y brillante, en caso contrario, se calienta en baño-maría unos 15 0C
por encima de su punto de fusión y si a esa temperatura se mantiene turbia, se agrega sulfato de
sodio anhidro, se agita y se filtra.
b) Cada ensayo comprende dos determinaciones sobre la muestra y dos en blanco, efectuando las
operaciones en forme que medie entre ellas el menor intervalo posible y en el siguiente orden:
1º Determinación en blanco
2o Determinación sobre la muestra
3o Determinación en blanco
c) Pese en una navecilla de vidrio, la cantidad de muestra indicada en la tabla siguiente, de acuerdo
con el índice de yodo que se presume para la muestra y se introduce en un frasco de vidrio
incoloro, de 500 cc que tenga tapón esmerilado y previamente lavado con mezcla sulfocrómica.
d) Se agregan 20 ml de tetracloruro de carbono y 25 de la solución de Wijjs, se tapa se agita y se
agregan una gotas de solución de IK alrededor al tapón, para lograr un cierre hidráulico. Se deja el
frasco en reposo en un lugar oscuro, durante una hora a 20 0C si el índice de yodo es mayor a 150,
y 30 minutos para las grasas de índice de yodo menor.
e) Si su otra cantidad de muestra diferente a la indicada en la tabla, deberá cuidarse siempre que el
volumen de la solución de Wijjs añadida asegure por lo menos un exceso del 100%.
M=26/I donde:
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M = masa de muestra
I = índice de yodo que se espera encontrar
f) Se agregan 20 ml de la solución de yoduro de potasio y 100 ml de agua, lavando con ésta el tapón
y el cuello del frasco, se valora con la solución 0.1N de tiosulfato de sodio, añadiendo
gradualmente y con agitación constante y vigorosa, hasta que el color amarillo casi haya
desaparecido; luego agregar 2 ml de solución de almidón y se continua la titulación, hasta la
desaparición del color azul.
g) Determine el índice de yodo por la siguiente expresión:
Iy = (V1-V2)*12.69*N/m
donde:
I = índice de yodo
V1 = promedio de los volúmenes de la solución de tiosulfato de sodio, empleados en las determinaciones
en blanco en ml.
V2 = volumen de tiosulfato de sodio empleado en la determinación sobre la muestra en ml.
N = normalidad del tiosulfato de sodio.
12.69 = peso equivalente de yodo 0.1N
h) Los valores obtenidos por duplicado, por un mismo analista, pueden diferir entre si, como máximo,
en los valores que se indican, expresados en unidades de índice de yodo y de acuerdo a éste.
PREPARACION DE SOLUCIONES
El ácido acético de grado reactivo para análisis, para la preparación del reactivo de Wijjs, deber probarse
de la siguiente manera. Se diluyen 2 ml de ácido con 10 de agua destilada y se agrega 0.1 ml de solución
0.1N de permanganato de potasio. La coloración rosada no deber desaparecer por completo durante dos
horas.
Con tricloruro de yodo.- Pesar 9 g de tricloruro de iodo ICl 3, en un matraz de vidrio topacio de 1500 ml;
disolver en un litro de una mezcla compuesta de 700 ml de ácido acético y 300 ml de tetracloruro de
carbono. Determinar en contenido de halógeno de la forma siguiente:
1. Medir 5 ml y agregar 5 ml de la solución acuosa con yoduro potásico y 30 ml de agua. Valorar con
solución de tiosulfato de sodio 0.1N en presencia de engrudo de almidón como indicador.
2. Agregar al reactivo 10 gr de yodo pulverizado, y disolver agitando.
3. Determinar el contenido en halógeno como anteriormente; debe ser igual a 1.5 veces de la primera
determinación. Agregar todavía una pequeña cantidad de yodo, de forma que sobrepase
ligeramente el límite de 1.5 veces, por ser necesario que no quede ninguna traza de tricloruro de
yodo, cuya presencia provocaría reacciones secundarias.
4. Dejar decantar después de verter el líquido claro en un matraz o frasco de color topacio. La
solución, bien conservada al abrigo de la luz, puede usarse durante varios meses.
Con monocloruro de yodo. Disolver 19 g de monocloruro de yodo en un litro de una mezcla de 700 ml
de ácido acético y 300 ml de tetracloruro de carbono.
Después de agregar una pequeña cantidad de yodo puro (algunos miligramos), determinar el contenido en
halógeno, como se realizó anteriormente, y diluir si es necesario con la mezcla de disolventes hasta que 5
ml de reactivo correspondan aproximadamente a 10 ml de solución de tiosulfato de sodio 0.1N.
REACTIVO DE HANUS
Otro método de preparación.- Pesar entre 13 y 13.5 g de yodo bisublimado y disolver en 1000 ml de
ácido acético glacial con un calentamiento moderado para ayudar la disolución. Luego, separar entre 100
y 150 ml de esta solución y al resto agregar suficiente bromo como para doblar el contenido de halógeno
con respecto al valor inicial (3 ml de bromo aproximadamente). La valoración de cada uno se realiza
como se indica a continuación:
Medir 5 ml y agregar 5 ml de la solución acuosa con yoduro potásico y 30 ml de agua. Valorar con
solución de tiosulfato de sodio 0.1N en presencia de engrudo de almidón como indicador.
Objetivo.- Esta norma tiene por objeto establecer un método para la determinación del
índice de peróxidos en grasas y aceites.
ORDEN DE EJECUCION
100VN
I=
m
Principio.- Este método detecta cualitativamente el aceite de algodón en mezcla con otros
aceites o grasas vegetales o animales.
PROCEDIMINTO
100( S F P )
%Fibra = M (1 H )
donde:
0.112 (VM VB )
%N2= y % de Proteína = %N2*Factor
M (1 H )
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donde:
1- Pesar entre 3.2 a 3.5 g de muestra de aceite en una cápsula de porcelana y agregarle
0.5 g de óxido de zinc (ZnO) y agitar sin varillas.
2- Llevar a una cocinilla y calentar hasta carbonización completa del aceite.
3- Llevar a calcinación en una mufla a 600 oC por 2 horas y luego enfriar.
4- Agregar a la cápsula 5 ml de agua y 5 ml de HCl concentrado y luego llevar a
ebullición por unos 10 minutos.
5- Filtrar recibiendo el filtrado en un matraz aforado de 100 ml y enjuagar la cápsula y
el papel filtro varias veces con agua destilada y recibir en dicho matraz aforado.
6- Neutralizar con KOH 4 N hasta que se forme una pequeña cantidad de precipitado,
luego disolver ese precipitado con una pequeña cantidad de HCl.
7- Luego medir alicuotas de 10 ml o más y llevar a un matraz aforado de 50 ml,
agregar 2 ml de solución al 0.15 % de sulfato de hidracina y 5 ml de solución al
2.5% de molibdato de amonio.
8- Llevar al agua hirviente por 10 minutos, luego enfriar, llevar a volumen y leer en el
Spectronic 20 u otro equipo que se pueda leer en una longitud de onda de 650 nm.
9- Determine el % de fósforo por la siguiente fórmula:
10 y
%P = y Y = 0.0383 + 0.1623X donde:
mV
a- Pesar una cantidad de muestra que contenga entre 100 y 300 mg de fósforo y
colocar en un balón de digestión. (3 a 4 g de muestra de harina).
b- Agregar 15 ml de ácido sulfúrico concentrado y luego lentamente o gota a gota 3
ml de peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) de 30 volúmenes.
c- Poner a digestión durante 3 horas y si la mezcla no es clara o cristalina, agregar
otros 3 ml de agua oxigenada con precaución y poner a digestión. Repetir esto hasta
decoloración completa.
d- Retirar el balón del digestor y dejar enfriar. Luego agregar unos 40 a 50 ml de agua
destilada lentamente, con agitación y enfriamiento.
e- Pasar todo en contenido mediante un embudo a un matraz aforado de 100 ml,
lavando varias veces el balón de digestión con poca agua y agregando esto al matraz
aforado. Complete a volumen con agua destilada.
f- Luego realizar la operación como se indica en el paso 07 de la técnica anterior,
usando la misma fórmula.