Clase 6 Inmunohematologia

PRETEST 6 : características de la Membrana del eritrocito, leucocitos y plaquetas.
Características. Importancia en los procedimientos inmunohematológicos
Con respecto a las características de la Membrana del eritrocito y su importancia en

inmunohematología se afirma que :
- La flexibilidad es proporcionada por una membrana celular unida a un

citoesqueleto subyacente. ( )
- Las proteínas integrales de membrana se halla total o parcialmente incluido
en el espesor de la bicapa lipídica, de forma que muchas de ellas pueden
desplazarse libremente a lo largo y ancho de la misma, confiriéndole gran
fluidez. ( )
- Estructuralmente, las proteínas integrales, poseen en su dominio Extracelular,
un receptor glicosilado con los determinantes antigénicos de los grupos
sanguíneos. ( )
- Las glicoforinas del grupo I, aunque sintetizadas por diferentes genes, son
estructural mente homologas y asociadas a los antigenos de los grupos
sanguineos MNS. ( )
- Las GPA y GPB contribuyen con mas del 90% del acido sialico de la
membrana eritrocitaria, que es el compuesto que confiere carga negativa a la
superficie de los eritrocitos. Gracias a ello, estos no se adhieren entre si ni
con las celulas del endotelio vascular. ( )
- La GPA atraviesa todo el espesor de la bicapa, y el polimorfismo de los
aminoácidos situados en posición 1 y 5 de su extremo terminal determina la
antigenicidad de los grupos sanguíneos M y N. ( )
- Las glicoforinas del grupo II se hallan asociadas a los antígenos de los grupos
sanguineos Gerbich (Ge) . ( )
- Junto a las glicoforinas y la banda 3, existen otras proteinas integrales que
intervienen en la determinacion antigenica de grupos Rh, Duffy y Kell. ( )
- Cuando se inyectan eritrocitos que contienen el factor Rh, a una persona Rh
negativa aparecen las aglutininas anti-Rh lentamente, y se alcanza una
concentración máxima de aglutininas 2-4 meses después. Con múltiples
exposiciones al factor Rh, una persona Rh negativa finalmente llega a
≪sensibilizarse≫ con mas fuerza al factor Rh. ( )
- Persona Rh- no se ha expuesto nunca antes a la sangre Rh+ • la transfusión
de sangre Rh +a esta persona no provocara una reacción inmediata • Pueden
aparecer ac anti-Rh suficientes en las siguientes 2 a 4 semanas • Reacción
transfusional retardada, leve. ( )
- Persona que ya esta inmunizada frente al factor Rh • la reacción transfusional
aumenta mas y puede ser inmediata. ( )
- Enfermedad hemolítica del recién nacido o hidropesía fetal. Aglutinación y la
fagocitosis de los eritrocitos del feto. Madre es Rh negativa y el padre Rh
positivo. El bebe hereda el antígeno Rh positivo del padre y la madre produce
aglutininas anti-Rh por la exposición al antígeno Rh del feto. las aglutininas
(IgG) de la madre se difunden a través de la placenta hasta el feto y
aglutinan los eritrocitos. ( )
EN RELACION A LOS ANTIGENOS PLAQUETARIOS SE SABE QUE:
- Antígenos ABO: SU importancia transfusional ES variada.
- Antígenos Lewis, Ii y P: son DE nula significación clínica transfusional. ( )
- Antígenos HLA: son intrínsecos, sintetizados endógenamente, DE gran significación
clínica transfusional ( refractariedad plaquetaria y las reacciones febriles
postransfusionales). ( )
- Importancia clínica de los antígenos y anticuerpos plaquetarios POR
TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE NEONATAL (Ag. HPA-1a (75-85% de los casos ) y
HPA-3a : los casos más severos ), PURPURA POSTRANSFUSIONAL (aloinmunización
frente al Ag. HPA-1a) ),REFRACTARIEDAD PLAQUETARIA. ( )
EN RELACION A ANTIGENOS Y ANTICUERPOS LEUCOCITARIOS HUMANOS (HLA) SE
SABE QUE:
- Los antígenos y anticuerpos del sistema HLA juegan un papel destacado en la Medicina
Transfusional, en el trasplante de órganos, tejidos y células y en el desarrollo de ciertas
enfermedades en especial en aquellas de posible etiología autoinmune. ( )
-
Dentro de la Medicina Transfusional, el sistema HLA influye en la
aloinmunización y refractariedad plaquetaria, las reacciones febriles no
hemolíticas (RFNH), pulmonares agudas y el injerto vs. huésped. ( )
Así fue que surgió la denominación de sistema HLA, H por humanos (según
algunos, por Histocompatibilidad), L por leucocitos y A por el primer locus
descrito (y no por el antígeno). ( )
Inicialmente se le asignaba un número correlativo a cada nuevo antígeno,
pero
debido a la complejidad de sus interrelaciones, se decidió adjudicar una
tarea
mayúscula para cada locus (sitio del gen en el cromosoma), reservando el
prefijo
HLA para todo el sistema. Actualmente se conocen los diferentes locus A, B,
Cy
D (o DR). ( )
Los antígenos A, B y C están presentes en la membrana de leucocitos,
plaquetas y reticulocitos pero no sobre glóbulos rojos, y en forma soluble se
encuentran en el suero. ( )
Los antígenos D se detectan por cultivo mixto de linfocitos( )
Los antígenos linfocitarios humanos (HLA) son de estructura glucoproteica polimérica,
que se dividen en tres regiones diferenciadas que contienen los HLA de clase o tipo I, II
Y III; cada tipo de molécula tiene a su vez distintas funciones. El tipo HLA-I está
constituido de receptores para antígenos endógenos ubicados en la mayoría de las
células nucleadas; el tipo II tiene receptores para antígenos exógenos sólo en células
presentadoras de antígenos (CPA) y el tipo III tiene grupos mixtos de proteínas incluido
el sistema de complemento. ( )
Membrana del eritrocito
Generalidades
Eritrocito es un disco bicóncavo
Diametro 7.5ɥm
Grosor 2.5ɥm
140 ɥm2 área de superficie
Vida aprox. 120 días
Existen aprox. 5 millones de eritrocitos/ mm3
La forma del eritrocito permite una gran deformabilidad
La membrana representa el 1% de su peso
Membrana tiene un exterior resbaladizo
Soporta grandes variaciones
La flexibilidad es proporcionada por una membrana celular unida a un citoesqueleto
subyacente.
Este es adaptable a: - Cambios de forma - Elongación - Deformación
Constituida fundamentalmente por: 50% proteínas 40% lípidos 10% carbohidratos
La bicapa lipídica proporciona la continuidad de la membrana de la célula.
La bicapa lipídica formada sobretodo por colesterol y fosfolípidos
Ademas de glucolipidos y acidos Grasos
Lípidos de la membrana del eritrocito
Los fosfolípidos están dispuestos asimétricamente en la bicapa:
Fosfatidilcolina y esfingomielina sin carga en el exterior de la membrana
Fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina con carga negativa en el interior de la membrana
Esta asimetría es común es membranas de células eucariotas
El colesterol se mueve libremente dentro y fuera de la bicapa, y hacia y desde el plasma circundante.
Intercambio de lípidos y acilacion de ácidos grasos como mecanismo de reparación y renovación.
Glucolipidos presentes en zona externa Fosfatidilcolina esfingomielina Fosfatidiletanolamina
fosfatidilserina
Proteinas de la membrana del eritrocito
Se clasifican en: -Proteínas integrales -Proteínas periféricas Proteínas integrales: Forman parte
estructural de la doble capa lipídica a la que se unen mediante fuertes enlaces. Se hallan total o
parcialmente incluidas en el espesor de la Bicapa Lipídica.
Las proteínas periféricas: interactúan con las proteínas integrales o con los lípidos en un lado de la
membrana pero no la penetran.
Esqueleto de la membrana eritrocitaria
El esqueleto de la membrana eritrocitaria esta formado por largos filamentos de α y β espectrina,
dispuestos en una red de estructura hexagonal y con conglomerados de proteínas o nudos de
unión en el centro y en los vértices.
Esta estructura establece dos interacciones básicas (zonas de anclaje) con la doble capa lipídica en
las proteínas integrales banda 3 y glicoforina C
1) Unión β espectrina -anquirina - banda 3 con soporte de la proteína 4,2
2) Unión proteína 4,1- nudo proteico - glicoforina C, con soporte de la proteina p55
El esqueleto de la membrana recubre por completo la superficie interna de la doble capa lipidica
Las proteínas del esqueleto presentan gran diversidad estructural, pero su núcleo básico lo constituyen
la espectrina (bandas 1 y 2) y la actina (banda 5).
Las restantes proteínas establecen con ellas diferentes interacciones, contribuyendo con ello a
mantener la estabilidad del conjunto.
Entre estas proteínas destacan la anquirina (banda 2,1), proteinas 4,1 y 4,2 (palidina), proteina 4,9
(desmatina), aducina, miosina, tropomiosina y tropomodulina.
ESPECTRINA . Es la proteina mas abundante de la membrana eritrocitaria. Esta formada por un

dimero de dos subunidades, α y β entrelazadas en espiral alrededor de un eje comun y
orientadas de forma antiparalela. La subunidad α corresponde a la banda 1, y es codificada por un
gen situado en el cromosoma 1 (SPTA1) La subunidad β corresponde a la banda 2, y es codificada por
un gen situado en el cromosoma 14 (SPTB).
Mediante la interacción del aminoácido terminal NH2 de la cadena α con el aminoácido terminal COOH
de la cadena β los dímeros se unen entre ellos para formar tetrámeros (αβ)2
Los extremos de los dímeros se unen a pequeños filamentos de actina de forma que cada seis unidades
de espectrina se unen a un oligomero de actina, formando una red irregular de estructura
aproximadamente hexagonal.
Cada unión espectrina-actina resulta estabilizada por la proteína 4,1 y reforzada por la tropomiosina y la
aducina, proteínas que forman un complejo ternario o “nudo proteico” conocido como junctional
complex
Puntos de unión del esqueleto a la bicapa lipídica
La unión β espectrina-anquirina-proteina 4,2, que, a su vez, se une al dominio citoplasmático de la
banda 3, forma el principal punto de unión del esqueleto a la bicapa lipídica (interacción vertical)
La interacción β espectrina-actina-proteina 4,1 con la glicoforina C (GPC)constituye el segundo
punto de unión del esqueleto a la capa lipídica (interacción vertical)
La sintesis de cadenas de α espectrina es de 3 a 4 veces mayor que la de las cadenas β espectrina, y su
ritmo de regradacion es menor
Espectrina- espectrina, espectrina – actina (interacción horizontal)
Puntos de unión del esqueleto a la bicapa lipídica Principal punto de unión segundo punto de
unión
INTERACIÓN ENTRE PROTEÍNAS DE MEMBRANA Ankirina Sinapsina Verticales Horizontales
21. Proteínas del citoesqueleto ACTINA (banda 5): Forma parte del núcleo proteico esta organizada
en pequeños filamentos en doble hélice, estabilizados por sus interacciones con la espectrina, aducina,
proteína 4,1, tropomiosina y tropomodulina.
La union de la espectrina a la bicapa es imposible sin la presencia de la proteína 4,1, y aunque
la actina es el estabilizador del nudo proteico, existen un grupo de proteinas que contribuyen a
reforzarlo.
Entre ellas, destacan la aducina, la desmantina (proteina 4,9) que une los filamentos de actina
agrupándolos. La tropomiosina, que interacciona con la actina, y la tropomodulina, que asociada a la
actina interacciona con la tropomiosina en los residuos terminales NH2.
La miosina esta formada por dos cadenas ligeras y una pesada, tiene actividad ATPasa y se
une a la actina y, posiblemente, también a la proteína 4.1
1. Anquirina o banda 2,1. 2. Proteina 4,1. 3. Proteina 4,2 (CD47). 4. Proteina p55. 1 3 4 2
Proteínas integrales de la membrana del eritrocito
Forman parte estructural de la doble capa lipidica, a la que se unen mediante fuertes enlaces.
Este tipo de proteínas se halla total o parcialmente incluido en el espesor de la bicapa lipídica, de
forma que muchas de ellas pueden desplazarse libremente a lo largo y ancho de la misma,
confiriéndole gran fluidez.
La gran mayoría son glucoproteínas casi siempre acido sialico (sialoglicoproteinas) y que se exterioriza
hacia la superficie externa del eritrocito formando el llamado glicocalix
Estructuralmente, poseen tres dominios:
Extracelular, que es un receptor glicosilado con los determinantes antigénicos de los grupos
sanguíneos
Intramembranal, muy hidrofobico, que interactúa con los fosfolípidos de la bicapa
Citoplasmatico, que es el lugar de unión de las proteínas periféricas
Las principales son:
Banda 3
Glicoforinas A,B,C,D,E,F
Las proteínas Rh
Otras proteínas relacionadas con el flujo de iones
-ATPasas Intervienen en el intercambio de sodio y potasio (Na, K- ATPasa), Calcio y magnesio.
Acuaforina-1
BANDA 3 (B3) ó canal aniónico: - Es una glucoproteína con 3 dominios. - Hay cerca de 1,2
millones de copias por célula. - Constituye el 20 a 30% de las proteínas de membrana. - Es
codificada por un gen situado en el cromosoma 17 (EPB3). - Une el esqueleto de la membrana a
la bicapa lipídica - Transporta iones entre el interior y el exterior del eritrocito.
A través de la banda 3, el HCO,- es intercambiado por Cl~ del plasma y de esta forma es transportado a
través del plasma hasta los pulmones donde, mediante una reacción inversa, es liberado en
forma de CO2.
Glicoforinas:Las glicoforinas son proteinas integrales de caracteristicas similares a la banda 3, y se
caracterizan por su elevado contenido en acido sialico.
Basandose en sus propiedades y estructura genica, pueden clasificarse en dos grandes grupos:
Grupo I, glicoforinas A, B ,E Grupo II, glicoforinas C y D.
Las glicoforinas del grupo I, aunque sintetizadas por diferentes genes, son estructural
mente homologas y asociadas a los antigenos de los grupos sanguineos MNS
Las GPA y GPB contribuyen con mas del 90% del acido sialico de la membrana eritrocitaria, que es el
compuesto que confiere carga negativa a la superficie de los eritrocitos.
Gracias a ello, estos no se adhieren entre si ni con las celulas del endotelio vascular.
La GPA atraviesa todo el espesor de la bicapa, y el polimorfismo de los aminoácidos situados en
posición 1 y 5 de su extremo terminal determina la antigenicidad de los grupos sanguíneos M y
N.
Las glicoforinas del grupo II se hallan asociadas a los antígenos de los grupos sanguineos Gerbich
(Ge) y a los receptores para el Plasmoclium falciparum.
La GPC Esta glicoforina tiene gran importancia funcional, ya que se une a la proteina 4,1 y constituye un
importante punto de anclaje del esqueleto de la membrana a la bicapa lipídica.
Junto a las glicoforinas y la banda 3, existen otras proteinas integrales que intervienen en la
determinacion antigenica de grupos Rh, Duffy y Kell.
Otras proteinas integrales relacionadas con el flujo de iones a traves de la membrana
eritrocitaria son las-ATPasas, que intervienen en el intercambio de sodio y potasio o de calcio y
magnesio. Los eritrocitos poseen un transportador acuoso denominado acuaforina-1
"Un carácter heredado de la superficie de la célula roja, detectado por un anticuerpo específico”
Los antígenos de los grupos sanguíneos pueden ser: Proteínas. Glicoproteínas, con el
anticuerpo que reconoce la cadena principal del polipéptido. Glicoproteínas, con el anticuerpo
que reconoce el resto de carbohidrato. Glicolípidos, con el anticuerpo que reconoce la porción de
carbohidratos. Proteínas y glicoproteínas son estructuras integrales de la membrana de
eritrocitos. Daniels, Geoff. Bromilow, Imelda.(2010) Essential Guide to Blood Groups. Second ed.
La Sociedad Internacional de Transfusión de Sangre reconoce 328 antígenos sanguíneos, 284
de ellos se clasifican en alguno de los 30 sistemas de grupos sanguíneos. En la actualidad hay
339 autenticados antígenos de los grupos sanguíneos, 297 de los cuales caen en una de 33
sistemas de grupos sanguíneos El sistema MNS comprende tres genes. Rh, Xg, y Chido /
Rodgers, dos genes de cada uno, y cada uno de el resto representa un único gen. Rh y MNS
son los sistemas más complejos, con 52 y 46 antígenos, ocho sistemas consisten en un solo
antígeno. Daniels, G. (2013). Human Blood Groups. Bristol, UK: Wiley-Blackwell. Eiji Hosoi.
Biological and clinical aspects of ABO blood group system. The Journal of Medical Investigation
(2008)
36. } • En 1980, la Sociedad Internacional de Transfusión de Sangre (ISBT) estableció una
terminología numérica basada en caracteristicas genéticas de los grupos sanguíneos. • El
sistema tiene un número de tres dígitos más un símbolo con letras mayusculas (3-5). Ej. el
sistema Kell es 006 o KEL. Cada antígeno dentro de ese sistema tiene un número de tres
dígitos. K es de 001 y kPa es 003, y así se converte en 006001 o KEL1 y 006003 o KEL3,
Daniels, Geoff. Bromilow, Imelda.(2010) Essential Guide to Blood Groups. Second ed.
37. Descubierto por Karl Landsteiner a en 1900 El cuarto y más raros del grupo, en el que
ambos antígenos están presentes en los glóbulos rojos, y el suero no contiene anticuerpos anti-
A ni anti-B, fue descrita por un año más tarde por Decastello y Sturly (1902) En 1918, L. Hirszfeld
y H. Hirszfeld mostraron las frecuencias de los grupos sanguíneos A y B, difieren entre las
poblaciones. El Premio Nobel 1930 de Medicina fue otorgado a Karl Landsteiner "por su
descubrimiento de los grupos sanguíneos humanos" como la principal causa de las reacciones
de transfusión de sangre. El descubrimiento del sistema ABO y los resultados de la aglutinación
de glóbulos rojos en el suero y el reconocimiento de los grupos sanguíneos sentó las bases
científicas para la práctica segura de la transfusión de sangre Yamamoto F. Molecular genetics
of ABO blood groups. Vox Sang. 2000 WM Watkins. The ABO blood group system: historical
background. Transfusion Medicine. 2001
La sangre se clasifica en 4 tipos principales A, B, AB, O Algunas personas del grupo A producen
un anticuerpo que aglutina los glóbulos rojos de la mayoría de los otros individuos A. Por lo tanto
se subdivide en A1 y A2. A1 es el fenotipo más común en todas las poblaciones Daniels, G.
(2013). Human Blood Groups. Bristol, UK: Wiley-Blackwell.
Dos genes, determinan el tipo sanguineo O-A-B. Estos genes pueden ser cualquiera los tres
tipos, pero solo un tipo en cada uno de los dos cromosomas: tipo O, tipo A o tipo B. El gen del
tipo O es no funcional, de manera que da lugar a un aglutinogeno del tipo O no significativo en
las celulas. Por el contrario, los genes de los tipos A y B dan lugar a aglutinogenos fuertes en las
celulas. Blood Group Antigens Present on RBCs Antibody Present in Serum Genotype A A
antigen Anti-B AA or AO B B antigen Anti-A BB or BO AB A antigen B antigen None AB O None
Anti-A, anti-B, anti-A,B OO Gonsorcik, V. K. (2013). Medscape. Recuperado el 1 de noviembre
de 2013, de http://emedicine.medscape.com/article/1731198-overview#a1
Genes ABO El gen FUT 1 , cromosoma 19q13.3, síntesis de antígenos AB y H. Cromosoma
9q34 codifica para glicosiltransferasas A y B. Transferasas necesarias para producir antígenos
ABO (glycolipoproteinas) gen FUT2; "secretor"/"se” en el cromosoma 19q13.3, codifica para las
transferasas necesarias para producir antígenos ABO (principalmente glicoproteínas) que están
afiliados a los fluidos corporales que no sean sangre (saliva). La mayor parte de la población (
80%) expresa el gen secretor. Gonsorcik, V. K. (2013). Medscape. Recuperado el 1 de
noviembre de 2013, de http://emedicine.medscape.com/article/1731198-overview#a1
El precursor de la glicoproteína que permite la expresión de todos los antígenos ABO se
compone de cadenas de oligosacáridos con la adición esencial de fructosa. Gonsorcik, V. K.
(2013). Medscape. Recuperado el 1 de noviembre de 2013, de
http://emedicine.medscape.com/article/1731198-overview#a1
La prevalencia de los diferentes tipos sanguíneos entre un grupo de personas estudiadas fue
aproximadamente: O 47 % A 41% B 9% AB 3% Los genes O y A aparecen con frecuencia, y que
el gen B es infrecuente.
Después del nacimiento, la cantidad de aglutininas en el plasma es casi nula.
De 2 a 8 meses después del nacimiento, el niño empieza a producir aglutininas anti-A o anti-B
La concentración máxima se alcanza normalmente a los 8 a 10 años de edad, y declina a lo
largo de los años restantes de vida.
Gammaglobulinas que se producen en células de la medula ósea y los ganglios linfáticos. La
mayoría de ellos son moléculas de inmunoglobulina IgM e IgG. ¿Pero por que se producen estas
aglutininas en personas que no tienen los aglutinógenos respectivos en sus eritrocitos?
Cantidades pequeñas de antígenos de los tipos A y B entran en el cuerpo a través de la comida,
las bacterias y otras formas, y estas sustancias inician el desarrollo de estas aglutininas anti-A y
anti-B. Los ac que se forman como consecuencia una transfusión o un embarazo, suelen ser
IgG. Los ac IgG se unen al anticuerpo a temperaturas más elevadas y pueden hemolizar a los
eritrocitos.
Lea y Leb no son sintetizados por las células rojas, pero se adquieren a partir del plasma, se
consideran antígenos de grupo sanguíneo, ya que se reconocieron por primera vez en los
eritrocitos. Anti-Lewis, posteriormente llamado anti - Lea, fue descrito por Mourant en 1946.
Estos anticuerpos aglutinan los glóbulos rojos de aproximadamente el 25% de las personas
inglésas. Andresen descubrio un anticuerpo que más tarde se convertiría anti-Leb, que sólo se
encuentra en Le (a -) de células de adultos. Antígenos de Lewis son estructuras de
carbohidratos transportados en glicolípidos Aunque La terminología Lea y Leb es engañosa ya
que estos antígenos no son el producto de alelos. Daniels, G. (2013). Human Blood Groups.
Bristol, UK: Wiley-Blackwell.
El producto del gen de Lewis (FUT3) es una fucosiltransferasa que cataliza la transferencia de
fucosa a partir de GDP-fucosa para el precursor Tipo 1 de H para formar Lea y al Tipo 1 H para
formar Leb. La configuración con dos fracciones de fucosa tiene actividad Leb. Por lo tanto, Leb
refleja la presencia de tanto genes Le y Se. Los individuos que poseen genes tanto Le y Se
tendrán eritrocitos que expresan Leb pero no Lea. Los eritrocito de personas con el gen Le, pero
no el Se expresarán Lea.
Landsteiner y Witt (1926) examinaron sueros humanos en busca de ac distintos a anti-A y anti-B,
pero pudieron encontrar sólo aglutininas débiles activas a bajas temperaturas. Se le ocurrió a
Landsteiner y Levine (1927) que podrían ser capaces de revelar otros antígenos mediante la
inyección de diferentes muestras de glóbulos rojos humanos en conejos. Se obtuvieron
anticuerpos que identifican tres nuevos antígenos humanos, a la primera de ellas la letra M se le
dio para indicar que el antígeno se había identificado con suero inmune (se evitó 'I' debido a la
confusión con el número 1; Levine 1944) Mollison’s Blood Transfusion in Clinical Medicine.
(2005) 11th Ed.
M y N son antígenos polimórficos en todas las poblaciones analizadas. • Anti-M es un
anticuerpo relativamente común 'natural', mientras que los anti-N es bastante raro. • La mayoría
anti-M y-N no son activos a 37 ° C y no son clínicamente significativos. • Muy ocasionalmente
anti-M y-N han sido implicados como la causa de RTH inmediata o retardada. • Anti-M ha sido
responsable de HDFN severa. Las frecuencias de los fenotipos en los caucásicos son: M + N-
28% M + N+ 50% M-N+ 22%.
Se encontraron en dos formas diferentes. Landsteiner y Wiener (1940, 1941) inyectaron
eritrocitos de monos rhesus en conejos y conejillos de indias y probaron el suero resultante
contra las células rojas humanas. Levine y Stetson (1939) encontraron un anticuerpo (que
posteriormente demostró ser anti-Rh D) en el suero de una mujer cuyo feto había muerto en el
útero. Mollison’s Blood Transfusion in Clinical Medicine. (2005) 11th Ed.
Dos genes ( RHD , RHCE ) situados en el cromosoma 1p34 - p36 codifican las proteínas Rh:
RHD y RHCE , uno lleva el antígeno D y el otro lleva antígenos CE en diferentes combinaciones
( ce , Ce , cE, o CE ) Existen seis tipos frecuentes de antígenos Rh, cada uno llamado factor Rh.
RH ABO aglutininas forma lenta aglutininas manera espontanea Reacciones transfusionales
Primero hay que exponer a la persona de forma muy intensa a un antígeno Rh, a través de una
transfusión de sangre que contenga el antígeno Rh. C, D, E c, d, e •cada persona tiene uno de
estos tres pares de antígenos. •Ambas proteínas se predice que cruzan la membrana 12 veces .
vs C.M.WESTHOFF.(2005) Review: the Rh blood group D antigen . . . dominant, diverse, and
difficult. IMMUNOHEMATOLOGY
Antígeno del tipo D •Una importante consideración en la inmunogenicidad de un antígeno es el
grado de extrañeza al huesped. •RhD y RHCE difieren por 32 a 35 aminoácidos, lo que explica
por qué RhD, cuando es visto por el sistema inmune de un persona D, a menudo induce una
respuesta inmune muy robusta. •El gran número de diferencias de aminoácidos explica los
numerosos epítopos del antígeno D, desde 9 a más de 30. Raza blanca 85% Rh (+) 15% Rh (-)
Raza negra 95% (Rh +) Estadounidenses 100% (Rh+ )africanos C.M.WESTHOFF.(2005)
Review: the Rh blood group D antigen . . . dominant, diverse, and difficult.
IMMUNOHEMATOLOGY
Cuando se inyectan eritrocitos que contienen el factor Rh, a una persona Rh negativa aparecen
las aglutininas anti-Rh lentamente, y se alcanza una concentración máxima de aglutininas 2-4
meses después. Con múltiples exposiciones al factor Rh, una persona Rh negativa finalmente
llega a ≪sensibilizarse≫ con mas fuerza al factor Rh. Persona Rh- no se ha expuesto nunca antes a la
sangre Rh+ • la transfusión de sangre Rh +a esta persona no provocara una reacción inmediata •
Pueden aparecer ac anti-Rh suficientes en las siguientes 2 a 4 semanas • Reacción transfusional
retardada, leve. Persona que ya esta inmunizada frente al factor Rh • la reacción transfusional
aumenta mas y puede ser inmediata
Enfermedad hemolítica del recién nacido o hidropesía fetal. Aglutinación y la fagocitosis de los
eritrocitos del feto. Madre es Rh negativa y el padre Rh positivo. El bebe hereda el antígeno Rh
positivo del padre y la madre produce aglutininas anti-Rh por la exposición al antígeno Rh del
feto. las aglutininas (IgG) de la madre se difunden a través de la placenta hasta el feto y
aglutinan los eritrocitos.
Los sistemas de Kidd (Jk) Lutheran (Lu), Kell (K), Duffy (Fy) y fueron descubiertos por la
búsqueda de aloanticuerpos en el suero de los pacientes transfundidos o de las madres de los
bebés con enfermedad hemolítica del recién nacido (HDN). Otros sistemas descubiertos de la
misma manera son Diego (Di), Cartwright (Yt), Xg, Scianna (Sc), Dombrock (Do), Colton (Co),
Chido / Rodgers (CH / Rg), Kx, Gerbich (Ge ), Cromer (Cr), Knops (Kn) y el indio (In). Mollison’s
Blood Transfusion in Clinical Medicine. (2005) 11th Ed.
55. REFERENCIAS • Daniels, Geoff. Bromilow, Imelda.(2010) Essential Guide to Blood Groups.
Second edition. • Daniels, G. (2013). Human Blood Groups. Bristol, UK: Wiley-Blackwell. • Eiji
Hosoi. Biological and clinical aspects of ABO blood group system. The Journal of Medical
Investigation (2008) • Yamamoto F. Molecular genetics of ABO blood groups. Vox Sang. 2000 •
WM Watkins. The ABO blood group system: historical background. Transfusion Medicine. 2001 •
Gonsorcik, V. K. (2013). Medscape. Recuperado el 1 de noviembre de 2013, de
http://emedicine.medscape.com/article/1731198-overview#a1 • Mollison’s Blood Transfusion in
Clinical Medicine. (2005) 11th Ed. • C.M.WESTHOFF.(2005) Review: the Rh blood group D
antigen . . . dominant, diverse, and difficult. IMMUNOHEMATOLOGY • Guyton & Hall. Tratado de
Fisiologia médica. 12 edicion. Elsevier
MEMBRANA PLAQUETARIA
Proceso de hemostasia en cuatro fases:

- adhesión
- reacción de liberación
- agregación
- actividad procoagulante
Membrana plaquetaria:
GLICOPROTEINAS ( GP) que se asocian entre ellas formando complejos que actúan como
receptores, que median dos importantes funciones:
- adhesión al subendotelio
- adhesión plaqueta a plaqueta ( agregación plaquetaria)
Glicoproteínas de la membrana plaquetaria
Designación Peso molecular Forma complejo con Interac. con el citoesqueleto Función
Ia 153.000 IIa Si Rc. de colágeno
Ib 170.000 IX Sí Rc. de Factor vW
Ic 148.000 IIa ? Rc. Fibronectina
IIa 130.000 Ia, Ic Sí -
IIb 136.000 IIIa Sí Rc. Fibrinógeno
IIIa 95.000 IIb Sí vW, Fibronectina y vitronectina.
IV 95.000 - - Trombospondina
V 82.000 - - Sustrato trombina
IX 17.000 Ib - Union con Ac. Drogadependiente
ANTIGENOS PLAQUETARIOS
Antígenos no específicos: son aquellos que se expresan en las plaquetas y en otras líneas
celulares:
Antígenos ABO: las plaquetas tienen antígenos A y B controlados por gen H, independientes de
los genes secretores y Lewis.
- la expresión es variable y en ocasiones muy débil.
- su localización se asigna a las GP IIa, IIIa y Ib.
- importancia transfusional variada.
Antígenos Lewis, Ii y P: son adsorbidos íntegramente del plasma.

- están presentes solo en pequeñas cantidades.
- nula significación clínica transfusional.
Antígenos HLA: son intrínsecos, sintetizados endógenamente.

- están presentes solo los de Clase I ( A y B , los C en menor cantidad).
- gran significación clínica transfusional ( refractariedad plaquetaria y las reacciones
febriles postransfusionales).
Antígenos específicos: son aquellos que se expresan únicamente en las plaquetas :
• Desde 1990 se propuso una nomenclatura uniforme HPA ( Human platelet antigen) para
designar a cada sistema.
• Son sistemas bialélicos, y los antígenos son identificados con las letras a y b.
• Cada sistema antigénico está asociado con glicoproteínas ( GPs).
• Estos sistemas tienen una distribución diferente según población.

SISTEMAS HPA ( Human Platelet Antigens)
• IPD: The Immuno Polymorphism Database que fue creado en el 2003 para proveer un
sistema centralizado para el estudio del polimorfismo en genes del sistema inmune, con la
colaboración del European Bioinformatics Institute (EBI).
• IPD-HPA Database : es un sistema centralizado que define los ag. HPA. Fue
desarrollado en 1990 y revisado en 2003.
Sistemas Antígenos Nombres

alternativos
Frecuencia Glicoproteína
HPA-1a HPA-1b
HPA-2a HPA-2b
HPA-3a HPA-3b
HPA-4a HPA-4b
HPA-5a HPA-5b
Zwa, P1 A1
Zwb, P1 A2
Kob Koa, Siba

Baka, Leka Bakb
Yukb, Pena Yuka, Penb
Brb, Zavb Bra, Zava
97.9%
28.8%
>99.9%
13.2%
80.95%
69.8%
>99.9%
<0.1%
99.0%
19.7%
GP III a GP I b GP II b GP III a GP I a
Sistemas Antígenos Nombres alternativos CD Glicoproteína

HPA-6bw Caa, Tu a CD 61 GP IIIa
HPA-7bw Moa CD 61 GP IIIa
Sra GP IIIa
HPA-9bw Maxa CD 41 GP IIb
HPA-10bw Laa CD 61 GP IIIa
HPA-11bw Groa CD 61 GP IIIa
HPA-12bw Iya CD 42c GP Ib
HPA-13bw Sita CD 49b GP Ia
SISTEMAS HPA ( Human Platelet Antigens) Año 2009
Sistemas Antígenos Nombre original CD Glicoproteína

HPA-14bw Oea CD 61 GP IIIa
HPA-15 HPA-15a HPA- 15b Govb Gova CD 109 CD 109
HPA-16bw Duva CD 61 GP III a
HPA-17bw Vaa CD 61 GP IIb/IIIa
HPA-18bw GP Ia
HPA-19bw HPA-20bw HPA-21bw GP IIIa GP IIb GP IIIa
Frecuencia de los antígenos plaquetarios en diversas poblaciones y grupos étnicos ( en %)

HPA España
Muñiz-Diaz 1998 Holanda
Simsek 1993 Finlandia
Kekomaki 1995 USA
Kim 1995 Japón
Tanaka 1996 Corea
Seo 1998
HPA -1a *
HPA -1b 96.02
33.83 97.9
28.8 99
26.5 98
20 100
0.30 99.5
2
HPA -2a 99.79
18.4 100
13.5 99
16.5 97
15 99.2
19.7 99
14
HPA -2b
HPA -3a
HPA -3b 86.71
55.59 81
69.8 83.5
66.5 88
54 85.1
66.2 82.5
71.5
HPA -4a
HPA -4b 100
0 100
0 100
0 100
2 100
2
HPA -5a
HPA -5b 99.34
24.51 100
0 99.50
10 98
21 99
7 100
4.5
• * HLA−DRB3*0101: gen asociado a HPA 1a negativos que sintetizan acs. Anti−HPA 1a (

50% de caucásicos y 3.8% en asiáticos).
• HPA− 15 a ( Gov): descriptos casos de sensibilización en caucásicos .
Frecuencia de los antígenos plaquetarios en diversas poblaciones y grupos étnicos ( en %)

• Human platelet-specific antigens frequencies in the Argentinean population
C.D. De La Vega Elena, N. Nogues, A. Fernandez Montoya, S. Chialina, P.D. Blanzaco, E.
Theiller, M. A. Raillon, N.
Arancegui, E. Solis, S. Oyonarte, V. Crespo Ferrer, A. Campos Muñoz, E. Muñiz-Diaz.
Transfusion Medicine, 18: 83-90, 2008
Nº HPA
1a HPA
1b HPA
2a HPA
2b HPA
3a HPA
3b HPA
4a HPA
4b HPA
5a HPA
5b HPA
6a HPA
6b HPA
15a HPA
15b
Donantes 192 0.87 0.12 0.87 0.12 0.61 0.38 1 0 0.9
0.07 1 0 0.51 0.48
Tobas 27 1 0 0.94 0.05 0.38 0.61 1 0 1 0 1
0 0.68 0.31
• Método: PCR-SSP
• Es el primer reporte de frecuencia de alelos en población argentina
Importancia clínica de los antígenos y anticuerpos plaquetarios
− TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE NEONATAL
− PURPURA POSTRANSFUSIONAL
− REFRACTARIEDAD PLAQUETARIA
TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE FETAL/NEONATAL

(TAFN)
TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE FETAL/NEONATAL (TAFN)
Frecuencia : 1 caso cada 1.200 a 2000 R.N.

1 caso cada 800 a 1000 R.N ( año 2010)
La trombocitopenia conlleva el desarrollo de hemorragia intracraneal en un 10-20%. ( ISBT 2008

1:12500 – 25000 RN con TAN sufren hemorragia intracraneal).
En un 50% de los casos se produce en la primera gestación
90% de recurrencia en las siguientes gestaciones .
Aloinmunización frente :
- Ag. HPA-1a (75-85% de los casos ) y HPA-3a : los casos más severos.
- Ag. HPA-5b : (10%) trombocitopenia más moderada. En Brasil.

- Ag. HPA-4b: en Japón.
- Ag. HPA-15: pueden producir anemia ( las células CD34 + también expresan la
proteína CD 109).
- Ag. de baja frecuencia: revalorizar la compatibilidad con las plaquetas del padre del
neonato.
- Antígenos ABO y HLA.
Fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia. Kaplan-Gouet. XXXl International Congress of

the ISBT. Berlin. 2010.
Hemorragia intracraneal: - 80% in útero

- 40% en la semana 30 de gestación.
• HPA -1a : 25.5% de los casos reportados

• HPA- 3a : 24 %
• HPA- 5b : 15%
causa 10% de muertes

20% de secuelas neurológicas

Cuadro clínico: ( madre sana, no drogas durante el embarazo)

- RN sano con purpura cutánea, en los casos más graves : hemorragias
- recuento plaquetario variable: < 20x109/L en los casos graves
- recuento plaquetario tiende a disminuir en las primeras 24-72hs.
DIAGNOSTICO
Excluir otras causas de trombocitopenia: - Infecciones víricas o bacterianas
- Coagulopatías de consumo
- Transtornos de megacariocitopoyesis
- Hemangiomas
- Autoinmunidad materna ( PTI, Lupus)

DIAGNOSTICO SEROLOGICO
Demostrar la presencia de un aloanticuerpo plaquetario específico en el suero materno.
Evidenciar incompatibilidad HPA materno – fetal :

- ags. raros (HPA-9bw en 2% de los casos)
- diversidad etnica
El estudio debe incluir genotipificación plaquetaria de los padres y RN.
TRATAMIENTO DE T.A.F.N.

• Plaquetas maternas
• Donantes genotipados
• Plaquetas random( Kiefel 2006):
-Efectos transitorios
- Inefectivo en un nº de casos
• Plaquetas random y IVIgG
• Ecografias
MANEJO ANTENATAL DE T.A.F.N.

• Terapia maternal:
- IVIgG ( 1g/Kg por semana : 22-39 sem. Gestación) + esteroides ( Prednisona 0.5 mg/ kg/
dia)
- Toxicidad
- Impacto económico
PROTOCOLO DE ESTUDIO Y TRATAMIENTO DE T.A.F.N.
9º Simposium europeo de Inmunobiología de plaquetas y granulocitos .

Noruega( Vox Sanguinis sep-2006)
• Sobre un total de 100.448 embarazadas se tipificó HPA 1a: el 2.1% fue HPA 1a negativo
y sobre ellas el 10,6 % presentaba anticuerpos.
• La incompatibilidad materno−fetal ABO debería considerarse como causa de TAN

cuando la búsqueda de acs. plaquetarios específicos resulte negativa.
• Noruega, Escocia, Egipto : 1− Tipificación HPA −1a a todas las embarazadas.

2− Si es HPA−1a negativo hacer ag. HPA− 1a al esposo.
3− D. A. P. NEGATIVA : parto normal , control por cordón.
4− D. A. P. POSITIVA : cesárea en la semana 36−38 , control por cordón y si el recuento es
menor a 35 x 109 L transfundir plaquetas compatibles.
PURPURA POSTRANSFUSIONAL
Importancia clínica de los antígenos y anticuerpos plaquetarios PURPURA

POSTRANSFUSIONAL
Trombocitopenia aguda grave , aproximadamente una semana después de la transfu- sión de

cualquier componente sanguíneo.
Patogenia no conocida (aloinmunización frente al Ag. HPA-1a)
Mujeres entre 60-70 años de edad y con antecedentes gestacionales.
Tratamiento: IgG IV y/o recambio plasmático en los casos muy graves . La transfusión de
plaquetas compatibles resulta inefectiva.
Tras la recuperación, no vuelve a repetirse esta complicación.
REFRACTARIEDAD PLAQUETARIA
Fallo en el incremento postransfusional esperado después de dos transfusiones de plaquetas

sucesivas ABO compatibles , de menos de 72 hs de almacenamiento.
La especificidad mas frecuente es anti-HLA clase I y en menor proporción contra antígenos

plaquetarios específicos.
Entre el 20 – 70% de pacientes politransfundidos.
▪ Diagnóstico: - I.C. : (recuento post.-recuento pret.) x sup. corp. en m2

Nº de plaquetas transfundidas (x1011 )
▪ REFRACTARIEDAD: cuando I.C. es < 7.5 x 109/L a la hora o < 4.5 a las 24 hrs
▪ Incremento absoluto en adultos: 2000 /1,76 m2 /U de plaq.

▪ Incremento absoluto en niños: 3500 / m2 /U de plaq
▪ Causas NO inmunológicas de R.P.:
- Hemorragia activa - Fiebre

- Sepsis - Esplenomegalia ( secuestro)
- C.I.D. - T.M.O.
- Envejecimiento de plaquetas transf. - Almacenamiento inadecuado
- Anfotericina B, Vancomicina, Heparina - P.T.T.
▪ Causas Inmunológicas:
- Anticuerpos ABO
- Anti- HLA, contra antígenos específicos de plaquetas.
- Anticuerpos dependientes de drogas
- Autoanticuerpos, complejos inmunes
• Como prevenir la aloinmunización contra plaquetas:
La mejor manera de manejar la aloinmunización contra plaquetas es previniendo que esta

ocurra:
- El uso de plaquetas pobres en leucocitos.

- Plaquetas irradiadas con UV.
- El uso de plaquetas de un solo donante ayuda en la prevención de aloinm.
Manejo del paciente aloinmunizado
- Aumentar la dosis y acortar los intervalos de administración
- Administrar concentrados HLA compatibles y/o por cross-match.
Alternativas:
• Administración de IVIgG (inmunoglobulina intravenosa).

• Medicamentos inmunosupresores.
LABORATORIO DE
INMUNOHEMATOLOGIA PLAQUETARIA
Deteccion de Anticuerpos plaquetarios
• TAIFN
Purpura Post Transfusional
• Refractariedad Plaquetaria
Métodos de laboratorio
• Fase I
• Fase II
• Fase III
• 1950−1970
Métodos de Fase I
• Basados en la unión Ag−Ac induciendo un cambio en las plaquetas comparándolo con

testigos normales.
• Linfocitotoxicidad
Métodos de Fase II
• A partir de 1970
• Miden IgG asociadas a plaquetas especificas o inespecíficas adheridas a la membrana
plaquetaria.
• IF (Fluoresceína)
• RIA (isotopo radiactivo)
• ELISA (Enzima)
• Métodos de captura: − Métodos en fase sólida
− MASPAT
Métodos de Fase II
• Directos : Miden Ac asociados in vivo a las plaquetas del paciente.
• Indirectos: Miden unión del Ac del suero del paciente sobre la superficie plaquetaria.
Métodos de Fase III
• A partir de 1980
• Detectan Ac contra glicoproteínas específicas de membrana
• MAIPA (inmovilización de Ag plaquetarios específicos con Ac monoclonales)
• PCR
MASPAT
Tecnica de adherencia eritrocitaria en fase sólida ( MASPAT)
• Monocapa de plaquetas de donante inmovilizada por centrifugación a la superficie de los

pocillos recubiertos de Ac monoclonales de ratón plaqueta
−específicos.
Tecnica de adherencia eritrocitaria en fase sólida ( MASPAT)

GR humanos sensibilizados con IgG
Anti −IgG monoclonal de raton

Ac. Plaquetario del suero del paciente Plaquetas del donante
Ac. Monoclonal plaqueta −especifico
MASPAT
Reacción positiva
Ctl. neg
Ctl. Post.
MASPAT
• Muestra: suero, SE con EDTA

• PRP : donantes de grupo (ABO): O
• PBS: Solución de lavado
• Centrífuga para microplacas
• Incubador seco 37 ºC
• Cloroquina
Tratamiento con cloroquina

• Esta técnica se utiliza para difenciar Ac HLA de Ac HPA
Limitaciones del Kit
• Contaminación de reactivos
• Plaquetas ABO incompatibles
• Concentración plaquetaria inadecuada
• Centrifugación no optimizada
• Plaquetas sin Ag HPA−1a
• Lavados insuficientes
• Resuspensión de células indicadoras incorrecta
Ventajas del kit
• Rápida detección de Ac HLA ƒespecíficos plaquetarios

• Uso de PRP sin diluir
• Varias combinaciones de muestras estudiadas
• Resultados fáciles de interpretar
• Alto Valor predictivo
Muestras estudiadas
Desde octubre del 2006 a junio de 2009:

• Total: 302
• Embarazadas: 290
• Refractariedad plaquetaria: 8
• RN con diagnostico de TAIN: 4
Muestras estudiadas
RESULTADOS
Muestra Positivas % Tratadas con cloroquina

Embarazadas 290 8 2.7 5 (1.7%)
Refract. plaquetaria 8 5 62.5 0
RN 4 4 100 3 (75%)
BUSQUEDA DE UNIDADES COMPATIBLES
UNIDADES UNIDADES
TESTEADAS COMPATIBLES %
Paciente 1
194
27
13.9
Paciente 2
246
71
28.8
Conclusiones
• Contribuye al diagnóstico de aloinmunización plaquetaria.

• Permite la búsqueda de concentrados plaquetarios compatible.
• Permite la individualización de embarazadas con potencial desarrollo de TAIN.
Conclusiones
Las pruebas de compatibilidad plaquetaria pueden:
• Complementar exitosamente las pruebas de pareo HLA.
• Predecir mejor el éxito de transfusiones de plaquetas.
• Ofrecen un método simple y confiable para la identificación de donantes compatibles.
MEMBRANA DEL LEUCOCITO Y SU IMPORTANCIA EN INMUNOHEMATOLOGIA:
Datos Históricos del Sistema HLA

La historia del sistema HLA es reciente y forma parte de una nueva rama de la
inmunología, la inmunogenética, rama muy compleja por estar actualmente en
pleno desarrollo. La descripción de los primeros antígenos del sistema HLA se
inició en la década de 1950 cuando varios investigadores descubrieron
anticuerpos leucoaglutinantes en el suero de pacientes inmunizados por
transfusiones o embarazos. Estas leucoaglutininas revelaron una serie de
antígenos polimórficos determinados genéticamente. Jean Dausset, nacido en
Toulouse-Francia en octubre de 1916, describe en 1952 la leucoaglutinación y la
tromboaglutinación como paso previo al reconocimiento del primer antígeno
leucocitario denominado MAC, luego conocido como HLA.A2. Este descubrimiento
daría inicio posteriormente a la descripción del sistema de histocompatibidad por
lo cual es galardonado Dausset con el Premio Nobel en Medicina en 1980.
(Decaro J., Lemos F. y Magri M., 2010).
A principios de la década del 60 la comprobación del rechazo acelerado de los

injertos cutáneos en receptores preinmunizados con leucocitos periféricos de
donantes potenciales sugirió una asociación entre los anticuerpos
leucoaglutinantes humanos y los trasplantes tisulares. En 1964 se desarrolla por
Paul Terasaki la prueba de microlinfocitotoxicidad lo cual significó un gran avance
en este campo y en 1965 Dausset siendo jefe del Departamento de Inmunología
del Hospital Saint Louis de Paris describe el primer sistema de antígenos tisulares
denominado Hu-1 luego conocido como HLA. (Decaro J., et al., 2010).
En 1967 comenzó la estandarización de la nomenclatura HLA. A medida que se

lograron más antisueros monoespecíficos y los conocimientos genéticos se
acrecentaron, la nomenclatura de los antígenos HLA se amplió y sistematizó.
Actualmente la estandarización de la nomenclatura de los genes HLA y alelos es
llevada a cabo por el Comité de Nomenclatura de la Organización Mundial de la

Salud (OMS) para los factores del sistema HLA que fue constituido en 1984. A
fines de la década de 1980 se introdujeron las técnicas basadas en el análisis del
ADN que permitieron detectar los alelos determinantes de los antígenos HLA. El
establecimiento de la secuencia de los ácidos nucleicos de genes que codifican
las moléculas HLA modificó la clasificación que ahora se basa en las secuencias
alélicas. Los métodos de detección de antígenos HLA pueden dividirse en la
actualidad en tres grupos: serológicos, celulares y de ADN. (Decaro J., et al.,
2010).
En junio del 2002 se habían descrito 1531 alelos, sin embargo esta cifra ha
variado considerablemente y en enero del 2005 había 1814 alelos estudiados por
técnicas moleculares. Se ha desarrollado el estudio y descripción de los antígenos
(técnicas serológicas) y alelos (técnicas moleculares). Los antígenos y
anticuerpos del sistema HLA juegan un papel destacado en la Medicina
Transfusional, en el trasplante de órganos, tejidos y células y en el desarrollo de
ciertas enfermedades en especial en aquellas de posible etiología autoinmune.
(Decaro J., et al., 2010).
Dentro de la Medicina Transfusional, el sistema HLA influye en la aloinmunización

y refractariedad plaquetaria, las reacciones febriles no hemolíticas (RFNH),
pulmonares agudas y el injerto vs. huésped. La tipificación HLA es un
componente esencial del trasplante de órganos (riñón, páncreas, hígado, corazón
y pulmones), de tejidos como médula ósea o células progenitoras
hematopoyéticas de sangre periférica y cordón umbilical. La magnitud de la
investigación y de la compatibilidad varía con el tipo de trasplante a excepción
del trasplante de córnea donde no se realiza. (Decaro J., et al., 2010).
Características de su utilización en la era moderna
Los primeros trabajos con trasplantes de tumores en ratones habían demostrado
que las diferencias genéticas entre dador y receptor eran las que determinaban el
éxito del injerto: si el dador tenia un determinante genético que no estaba

expresado en el receptor, el injerto era rápidamente rechazado, y viceversa. Este
modelo experimental llevó al desarrollo de cepas endocriados (homocigotas entre
sí) lo que permitió a Gorer descubrir el sistema H-2 del ratón, o sistema mayor
de Histocompatibilidad cuyos determinantes fueron denominados “antígenos de
Histocompatibilidad” por Snell en 1948. Este sistema murino ha servido de
modelo para el desarrollo en el hombre del sistema correspondiente, designado
HLA. Los primeros estudios que detectaron aglutininas contra leucocitos en
sueros de politransfundidos fueron hechos por Dausset, seguidos por los de Van
Rood y Payne en 1958, empleando sueros de multíparas.
En 1964 el Dr. Paul Terasaki desarrolla prueba de microlinfocitotoxidad o test

NH1, en el cual los linfocitos viables (T-B) de la persona en estudio son expuestos
a un panel de antisueros debidamente caracterizados en donde están incluidos los
distintos tipos de HLA. La rápida acumulación de antígeno diferentes llevó a una
terminología confusa hasta que en el mismo año de 1964 se iniciaron los
International HistocompatibilityWorkshops a realizarse cada 2 años, seguidos de
una reunión de un comité de nomenclatura auspiciado por WHO (OPS).
Así fue que surgió la denominación de sistema HLA, H por humanos (según
algunos, por Histocompatibilidad), L por leucocitos y A por el primer locus
descrito (y no por el antígeno). Inicialmente se le asignaba un número correlativo
a cada nuevo antígeno, pero debido a la complejidad de sus interrelaciones, se
decidió adjudicar una tarea mayúscula para cada locus (sitio del gen en el
cromosoma), reservando el prefijo HLA para todo el sistema. Actualmente se
conocen los diferentes locus A, B, C y D (o DR).
Los antígenos A, B y C están presentes en la membrana de leucocitos, plaquetas
y reticulocitos pero no sobre glóbulos rojos, y en forma soluble se encuentran en
el suero. Los antígenos D se detectan por cultivo mixto de linfocitos. En 1971,
Cepellini y col. observaron que algunos sueros empleados para tipificar HLA-A y
–
B inhibían una reacción positiva en cultivo mixto de linfocitos. Por otra parte, se
había observado que se conseguían títulos más altos con algunos sueros frente a
linfocitos periféricos normales. Ambas observaciones llevaron al descubrimiento
del locus DR, cuyos antígenos están presentes sobre linfocitos B y no sobre
linfocitos T, lo que explica los bajos títulos obtenidos con linfocitos periféricos,
donde el 80% son linfocitos T y los mejores resultados obtenidos con líneas
celulares ya que son, casi exclusivamente, compuestas por linfocitos B (con
excepción de las establecidas específicamente a partir de linfocitos T). (Carrea R.,
1979)
Estos antígenos DR corresponderían a los (Ia) (inmune-associated) del ratón y

suelen designarse como DRw (Ia) con números de 1 a 8, por ahora. Uno de los
propósitos del VII Workshop fue identificar estos antígenos y diferenciarlos o no,
de los locus D; se llegó a una conclusión provisoria según la cual las diferencias
serían mínimas, usándose D o DR indistintamente, por ahora. Por otra parte,
Barnstable demostró en 1978 que la expresión de los antígenos A, B y C depende
de la presencia de ß2 microglobulina, con la cual están estrechamente asociados
en la membrana, lo que permite eliminarlos mediante anticuerpos preparados
contra esa substancia. La ß2 microglobulina ha sido asociada con el supuesto
receptor del linfocito T, lo que asocia aun más los antígenos A, B y C a la
respuesta inmune T-dependiente. (Carrea R., 1979)
La técnica descrita por el Dr. Terasaki en 1964, se ha utilizado históricamente por

más de 30 años en los laboratorios de histocompatibilidad y logró estandarizarse
a todo el mundo, actualmente y debido al alto grado de polimorfismo que exhibe
el HLA con numerosas variantes alélicas la tipificación basada a nivel del DNA ha
permitido mejorar la asignación del fenotipo HLA del individuo en estudio.
Sistema HLA
Los HLA forman un sistema complejo organizado bajo determinaciones de bases
genéticas (genes) de donde resultan productos moleculares que son de vital
importancia en la regulación inmune, las transfusiones sanguíneas y los
trasplantes de órganos y tejidos. Existen varios antígenos en la superficie celular
de las plaquetas, algunos de los cuales son compartidos con otro tipo de células.
Los anticuerpos significativos que reaccionan con las plaquetas caen dentro de
tres grupos: anticuerpos anti-ABO, anticuerpos HLA y anticuerpos a antígenos
específicos plaquetarios. El sistema HLA ocupa el segundo lugar en importancia,
después de los antígenos ABO.
Los antígenos linfocitarios humanos (HLA) son de estructura glucoproteica

polimérica, que se dividen en tres regiones diferenciadas que contienen los HLA
de clase o tipo I, II Y III; cada tipo de molécula tiene a su vez distintas funciones.
El tipo HLA-I está constituido de receptores para antígenos endógenos ubicados
en la mayoría de las células nucleadas; el tipo II tiene receptores para antígenos
exógenos sólo en células presentadoras de antígenos (CPA) y el tipo III tiene
grupos mixtos de proteínas incluido el sistema de complemento. (Ver en Anexos
Figura 1)
Los genes de los antígenos del sistema HLA están localizados en el complejo
principal de histocompatibilidad (MHC), en el brazo corto del cromosoma 6 que se
hereda en bloque como un haplotipo, distribuidos en diferentes locus
estrechamente ligados y denominados como clase I: A,B Y C, clase II: DR, DQ Y
DP. Estos genes contribuyen al reconocimiento de los antígenos propios y no
propios ante la respuesta inmune a un estimulo antígenico, coordinando así la
respuesta de la inmunidad celular y humoral. Los productos del gen HLA son
moléculas de glucoproteínas que se encuentran expresadas con intensidades
variables sobre la membrana de la mayoría de las células del cuerpo humano,
incluyendo: linfocitos, granulocitos y monocitos, además de plaquetas. Los
eritrocitos maduros pierden la expresión de antígeno HLA, aunque como

normoblastos nucleados si lo expresan. (Ver en Anexos Figura 2)
Antígenos leucocitarios humanos clase I

La presencia y expresión de estos antígenos está codificada genéticamente y
localizada en los locus A, B y C. Son antígenos formados por dos cadenas: una
glucoproteínas pesada (alfa) y una ligera (beta, muy similar a la beta2-
microglobulina). La función biológica de este grupo de antígenos HLA clase I es
invertir en el brazo eferente de la inmunidad, destruir células con antígenos
extraños a la propia constitución corporal del individuo e interaccionar con
linfocitos T citotóxicos (linfocitos T CD8+). (Ver en Anexos Figura 3 y 5)
11
Sistema HLA y Medicina Transfusional
Antígenos leucocitarios humanos clase II

La presencia y expresión de estos antígenos está codificada por estos genes
ubicados en los locus DR, DQ, y DP; están constituidos por dos cadenas
glucoproteicas a y b e intervienen en el brazo aferente de la inmunidad, diseñada
para conocer nuevos antígenos mediante interacción con los linfocitos T
facilitadores (T CD4+). (Ver en Anexos Figura 4 y 5)
Antígenos específicos plaquetarios

En la membrana plasmática de las plaquetas se encuentran antígenos del sistema
ABH que son componentes intrínsecos de esa membrana y otros que ésta ha
adquirido por adsorción desde el plasma. Las concentraciones de antígenos ABH
son muy variables entre los diferentes individuos, resultando que entre el 5% y el
10% de las personas que no son del grupo O tienen cantidades extremadamente
elevadas de sustancias A y B en sus plaquetas. Estas personas parecen constituir
una población que expresa una “alta expresión” de la enzima glicosiltransferasa
en sus sueros. (AAHI, 2007)
Anticuerpos del sistema HLA

La aloinmunización o presencia de anticuerpos anti-HLA se presenta
generalmente en personas que han recibido transfusiones o en las que han tenido
un trasplante, por lo que han sido estimulados por los antígenos del MHC del
donante o en las mujeres que han sido alounmunizadas por leucocitos fetales que
han pasado transplacentariamente a la madre. Estos anticuerpos son, por ello, de
origen inmune del tipo inmunoglobulina G (IgG) con propiedades citotóxicas y
leucoaglutinantes. La existencia de estos anticuerpos “preformados” en el
paciente que esta sujeto a recibir un órgano o transfusión de otro individuo,
puede favorecer que el rechazo del órgano o reacción adversa de la transfusión
ocurra en el plazo inmediato o mediano, por lo que el detectarlo de manera
previa al acto quirúrgico del trasplante o a la transfusión en pacientes altamente
aloinmunizados coadyuva al éxito del mismo.
De igual manera, la determinación de anticuerpos anti-HLA es una prueba que en

los países más desarrollados se utiliza de manera cotidiana en la evaluación
periódica de los pacientes multitransfundidos o inscritos en listas de espera de
órganos provenientes de donadores fallecidos, y su importancia es tal, que dicha
12
prueba es considerada como un parámetro importante en la asignación de los

órganos, ya que permite establecer criterios de idoneidad con respecto a las
posibilidades de éxito del trasplante basadas en conocer si el paciente presenta
en su suero anticuerpos que favorezcan el rechazo. (Martínez J., 2013)
Funciones
Las proteínas codificadas por los HLA son aquellos en la parte externa de las
células del cuerpo que son únicas para esa persona. El sistema inmune utiliza los
antígenos de leucocitos humanos para diferenciar células propias y las células no
autónomos. Cualquier célula que muestra el tipo de HLA de esa persona
pertenece a esa persona por lo tanto no es un invasor.
En la enfermedad infecciosa
Cuando un patógeno extraño entra al cuerpo, las células específicas llamadas
células presentadoras de antígeno son encargadas de engullir el patógeno a
través de un proceso denominado fagocitosis. Las proteínas del patógeno se
dirigen en trozos pequeños y se cargaron en antígenos HLA. A continuación, se
muestran por las células presentadoras de antígenos a las células T, que a su vez
producen una variedad de efectos de eliminar el patógeno.
(http://centrodeartigo.com/articulos-de-todos-los-temas/article 30166.html)
A través de un proceso similar, las proteínas producidas en el interior de la

mayoría de las células se muestran en HLA en la superficie celular. Las MC-I
toman muestras de proteínas citosólicas endógenas producidas por la misma
célula o por agentes que la han invadidas (virus, bacterias intracelulares, etc.) y
las presentan, junto a ellas, en la membrana. Estos complejos MCI-péptido son
continuamente inspeccionados por linfocitos T citotóxicos CD8+, los cuales si no
reconocen como propio al antígeno se activan y destruyen a la célula que está
sintetizado antígenos extraños al organismo.
Las MCII solo están en las membranas de las llamadas células presentadoras de
antígenos (CPA) que están constituidas por macrófagos y células derivadas,
células dendríticas y linfocitos B; estas moléculas presentan péptidos procedentes
de Antígenos externos a la CPA, captados y procesados por ella para finalmente
ser presentados en su superficie junto a la MCII. El si no debe destruir a las
células que llevan estos antígenos en su superficie; puesto que la CPA no los
13
produce, sino que los capta del interior y los procesa; el complejo MCII-péptido
exógeno es reconocido por los linfocitos T cooperadores CD4+ y se lleva a su
activación.
Presentación y procesamiento del antígeno

Las moléculas del CMH clase I se unen a péptidos derivados de procesamiento
citosólico en el retículo endoplásmatico RE (ER- Endoplasmatic Reituclum) y los
presenta a la superficie de las células T citotóxicas CD8+. El enlace de péptido es
crucial para el plegamiento y estabilidad de la molécula clase I. El plegado de la
molécula CMH clase I y el enlace del péptido involucra la acción coordinada de un
número de proteínas. El acoplamiento de la molécula CMH clase I-complejo de
captación de péptidos comienza con la interacción de la cadena pesada que
contiene los dominios extracelulares α1, 2, y 3 con la molécula de proteína
chaperona- calnexina que retiene la molécula en un estado parcialmente plegado
en el RE. Este complejo se une a continuación con la microglobulina β2. Con la
unión a la β2-microglobulina, el heterodímero de la cadena α parcialmente
doblada
– β microglobulina se disocia de la Calnexina y se une a su homólogo, la
Calreticulin, que tiene una función chaperona similar.
El complejo de la cadena α parcialmente plegada: β2 microglobulina: Calreticulina

de la molécula CMH clase I es entonces captado por complejo de captación de
péptidos (PLC- peptide loading complex) que incluye la proteína Tapasina,
formando un puente entre la molécula CMH clase I y el transportador asociado
con el procesamiento de antígeno TAP (transporter associated whit Antigen
Processing).
El PLC también incluye el retículo endoplasmático-ERp57 oxido-reductasa que

participa en la formación del enlace de disulfuro. La molécula CMH clase I es
retenida en el RE hasta ser liberada por la unión de los péptidos. El PLC mantiene
la molécula en un estado que le permite enlazar péptidos transportados en el RE
por el TAP. Las moléculas dentro del PLC contribuyen a una función de edición,
reemplazando el péptido de baja afinidad con péptidos de mayor afinidad. A
continuación de su unión a péptidos de alta afinidad, la molécula CMH clase I
14
completa su plegamiento, el PLC se desensambla y el complejo péptido MCH

clase I es capaz de salir de la RE y es transportado a la superficie de la célula.
Las moléculas CMH de clase I generalmente se unen a péptidos de longitud de 8–

10 aminoácidos que son transportados al RE por el TAP. Estos péptidos son
generados por proteínas endógenas derivadas de citosol y son transformadas en
péptidos por el complejo proteasa. Proteosoma. Los péptidos generados por la
proteasoma son optimizados en el extremo C-terminal para su enlace con la
CMHI pero a menudo se extienden en el N-terminal. Una vez en el RE, una
enzima residente en el retículo endoplasmático, el antígeno asociado a la
aminopeptidasa del retículo endoplasmático con propiedades únicas – ERAAP
(Endoplasmatic Reticulum Amonopeptidase associated whith Antigen Processing)
escinde los péptidos extendidos en el N-terminal, optimizando el péptido para el
enlace con el CMH I.
Las moléculas CMH clase II se unen a péptidos extracelulares para su

presentación a los linfocitos T CD4+ colaboradores en la vía endosmal en un sitio
denominado “compartimiento de clase II del MHC” o “MIIC”. Los antígenos
extracelulares son recogidos en vesículas intracelulares en la célula,
generalmente macrófagos y células dentríticas y el Ph de los endosomas
disminuyen progresivamente resultando en la activación de proteasas y la ruptura
del antígeno en fragmentos de péptidos que se enlazan a CMH clase II en el MIIC
para su presentación en la superficie de la célula.
Sin embargo, la molécula de CMH clase II comienza su transporte hacia el MIIC a

través de la RE y necesita por lo tanto ser protegido en el RE para evitar su
enlace prematuro al peptídico. El enlace peptídico de CMH de clase II en el RE es
impedido por una proteína conocida como la cadena invariante (li). La cadena
invariante forma un trímero, con cada una de sus subunidades vinculándose en
forma no covalente a un heterodímero de CMH clase II, con la cadena invariante
de polipéptido en la hendidura del sitio de unión al péptido bloqueado así a la

unión. Mientras que el complejo del CMH clase II/Ii se esta formando, se asocia
con la molécula chaperona Calnexin. (http://tratado.uninet.edu/c080301.html)
En el rechazo del injerto

15
Cualquier célula que muestra otro tipo de HLA es “no-yo”, y es visto como invasor
por el sistema inmunológico del cuerpo, lo que resulta en el rechazo del tejido
que lleva esas células. Esto es particularmente importante en el caso de tejido
trasplantado, ya que podría conducir a rechazo de trasplantes. Debido a la
importancia de HLA en el trasplante, los loci HLA son algunos de los escritos con
más frecuencia por serología y PRC.
En la autoinmunidad
Los Tipos de HLA se heredan, y algunos de ellos están relacionados con
enfermedades autoinmunes y otras enfermedades. Las personas con ciertos
antígenos HLA son más propensas a desarrollar ciertas enfermedades
autoinmunes, como la Diabetes tipo I, la Espondilitis Anquilosante, Enfermedad
Celíaca, Lupus Eritematoso Sistémico, Miastenia Grave, Miositis por cuerpos de
inclusión etc. La Tipificación de HLA ha dado lugar a algunas mejoras y la
aceleración en el diagnóstico de la Enfermedad Celíaca y la Diabetes tipo 1, sin
embargo para la tipificación DQ2 para ser útil, se requiere ya sea de alta
resolución B1, DQA1, o DR serotipificación. En la serotipificación actual puede
resolver, en un solo paso, así mismo la DQ8-HLA en la autoinmunidad se está
utilizando cada vez más como una herramienta de diagnóstico. En la enfermedad
celíaca, es el único medio eficaz para discriminar entre familiares de primer grado
que están en situación de riesgo de los que no están en riesgo, antes de la
aparición de los síntomas a veces irreversibles, tales como alergias y
enfermedades autoinmunes secundarias.
En el cáncer
En algunas enfermedades medidas por HLA están directamente involucrados en la
promoción del cáncer. Enteropatía por sensibilidad al gluten se asocia con mayor
prevalencia de linfoma de células T asociado a enteropatía y DR3-DQ2
homocigotos se encuentran dentro del grupo de mayor riesgo, con cerca del 80%
de las células T de los casos de linfoma enteropatía sensible al gluten asociados.
Más a menudo, sin embargo, las moléculas HLA desempeñan un papel protector,
reconociendo el aumento de antígenos que no son tolerados debidos a bajos
niveles en el estado normal. Las células anormales pueden ser objeto de
apoptosis, que se cree que mediar en muchos tipos de cáncer antes del
diagnóstico. (http://centrodeartigo.com/articulos-de-todos-los-temas/
16
article 30166.html)
Factores biogenéticos y herencia

Los antígenos HLA clase I y II son glucoproteínas de la superficie celular,
productos de la expresión de genes ligados, localizados en la banda p21.3 del
brazo corto del cromosoma 6. Esta región del ADN se denomina CMH y suele
heredarse en bloque como un haplotipo. Los diversos loci poseen alelos múltiples
con expresión codominante de los productos cromosómicos. El sistema HLA es el
sistema de genes más polimórfico descrito en humanos.
Los genes HLA-A, HLA-B, HLA-C codifican los antígenos A, B, y C, de clase I. el

grupo génico HLA-DR, HLA-DQ y HLA-DP codifica la síntesis de los antígenos del
mismo nombre, de clase II. Entre los genes de clase I y II existe un grupo de
genes no CMH, que codifica moléculas que incluyen a las proteínas del sistema
complemento C2, Bf, C4A y C4B; una enzima esteroide (21-hidroxilasa) y una
citoquina (factor de necrosis tumoral). Esta región se denomina CMH clase III.
Organización de las regiones genéticas HLA

La región HLA de clase I contiene, además de los genes clásicos HLA-A, HLA-B, y
HLA-C, otros loci génicos designados como HLA-R, HLA-F, HLA-G, HLA-E, HLA-J,
HLA-K, HLA-L, MICA y MICAB. Estos últimos genes codifican para las proteínas no
clásicas o HLA clase Ib, que se caracterizan por un polimorfismo limitado y bajos
niveles de expresión. Algunos genes de clase I expresan proteínas no funcionales
o no expresan ninguna proteína. Los genes incapaces de expresar productos
proteicos funcionales se denominan pseudogenes y podrían representar una vía
evolutiva muerta.
Los antígenos HLA-E regulan a las células natural Killer. Los antígenos HLA-G se
expresan en el trofoblasto y podrían estar involucrados en el desarrollo de la
tolerancia inmunológica materno del fetal, la hemocromatosis hereditaria (HH),
un cuadro caracterizado por sobre carga de hierro, con una frecuencia de
portadores del 10% entre los noreuropeos, se asocia a dos mutaciones sin
sentido de un gen de tipo clase I. el gen responsable de la HH se llamaba HLA-H,
no obstante , el comité de nomenclatura de la organización mundial de la salud
(OMS) ya había adjudicado la designación HLA-H a un pseudogen HLA de clase I.
17
Ahora este gen se denomina HFE. Las moléculas clase I también se encuentran
fuera del CMH, como el CD1 que puede presentar antígenos no proteicos (como
lípidos) a las células T.
La organización genómica de la región clase II (HLA-D) del CMH es más

compleja. Las moléculas CMH clase II consisten en un complejo no covalentes de
dos cadenas estructuralmente similares, alfa y beta. Ambas cadenas se codifican
dentro de CMH. El polimorfismo de las moléculas de HLA clase II resulta de
diferencias en la cadena alfa y en la cadena beta que dependen de la isoforma de
clase II. Por ejemplo, con HLA-DR la cadena alfa es monomórfica, pero la cadena
beta muy polimórfica. Muchos loci codifican cadenas alfa y beta de las proteínas
CMH de clase II.
Los diferente haplotipos exhiben distinto número (distinta cantidad) de genes y

pseudogenes. Las proteínas codificadas por los genes DRA y DRB1 resultan ser
HLA-DR1, a DR18. Los productos de los genes A y B3 (si está presente) expresan
HLA-DR53 y los genes A y B5 (si está presente) expresan HLA-DR52. Los
antígenos HLA-DQ1 a DQ9 se expresan en las glucoproteínas codificadas por los
genes DQA1 y DQB1 del grupo DQ. Muchos de los otros genes del grupo DQ son,
probablemente, pseudogenes. Se encuentra una formación similar en el grupo
génico HLA-DP.
La región CMH de clase III contiene cuatro genes del sistema complemento, que
en general se heredan como una unidad llamada complotipo. Existen más de 10
complotipos distintos hereditarios en humanos. Dos de los genes de clase III,
C4A y C4B, codifican variantes de la molécula C4. Estas variantes poseen
estructuras proteicas y funciones definidas; la molécula C4A (si está presente)
porta el antígeno Rodgers y la molécula C4B (si está presente) porta el antígeno
Chido, que se absorben en los glóbulos rojos de los individuos poseedores del
gen.
Patrones de Herencia
Aunque la organización del Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) es muy
complicada, su herencia sigue los principios genéticos establecidos. Todas las
personas poseen dos cromosomas 6 y, por lo tanto, dos haplotipos HLA, uno de
cada progenitor. Un haplotipo individual se determina generalmente tipificando a
18
múltiples miembros de la familia de diferentes generaciones y observando que los

alelos se heredan juntos. Los productos génicos expresados constituyen el
fenotipo, que puede ser determinado por un individuo realizando la tipificación de
los antígenos HLA. Como los genes HLA son autosómicos y codominantes, el
fenotipo representa la expresión combinada de los dos haplotipos.
Encontrar hermanos HLA idénticos.

Cada hijo recibe una copia del cromosoma 6 y, por lo tanto, un haplotipo CMH, de
cada progenitor. Como cada progenitor posee dos copias diferentes del
cromosoma 6, hay cuatro combinaciones de haplotipos posibles en los hijos (en
ausencia de recombinación). Este patrón de herencia es importante para predecir
si los miembros de la familia podrían ser donantes compatibles. La probabilidad
de que dos hermanos sean HLA idénticos es del 25%. La probabilidad de que una
persona con “n” hermanos tenga por lo menos uno HLA idéntico es de 1 (3/4) n.
tener dos hermanos eleva la probabilidad al 44% y tres, al 58%. Cualquiera sea
el numero de hermanos disponibles la probabilidad nunca será del 100% (excepto
para gemelos idénticos). (Ver en Anexos Figura 6)
Ausencia de antígenos
Generalmente, ambas copias de los genes dentro del CMH se expresan como
antígenos; sin embargo, en ciertos individuos, solamente se puede identificar un
solo antígeno. Esto podría ocurrir si el individuo es homocigoto para el alelo o si
expresa antígenos para los que no se disponen de antisueros apropiados (a lo que
se refiere como alelo vacío). En instancias excepcionales, la ausencia de un
antígeno puede ser ocasionada por un alelo nulo.
Un alelo nulo se caracteriza por sustituciones dentro de la región codificadora del

gen que no permite la expresión de una proteína funcional en la superficie de la
célula. Esta desactivación de un gen puede causarse por sustituciones, deleciones
o inserciones de nucleótidos que llevan a la interrupción prematura de la síntesis
del antígeno. Para referirse a los fenotipos, el estado “vacío”, se indica con
frecuencia como “x” (para locus A), “y” (para locus B). Para determinar el
genotipo correcto se requieren estudios familiares.
Entrecruzamiento
21
En ocasiones, los genes de la región HLA revelan entrecruzamiento cromosómico,

en el cual durante la meiosis o gametogénesis se intercambian segmentos que
contienen material genético ligado. Estas recombinaciones se transmiten
entonces a los hijos como haplotipos nuevos. La frecuencia de entrecruzamiento
se relaciona en parte con la distancia física entre los genes. Por ejemplo, los loci
HLA-A, HLA-B y HLA-DR se encuentran muy próximos entre sí, con
entrecruzamiento del 0,8%, entre el loci A y B y 0,5% entre los loci B y DR. En
los estudios familiares y pruebas de paternidad es preciso tener en cuenta la
posibilidad de recombinación.
Desequilibro de Ligamento
El sistema CMH es tan polimórfico que, teóricamente, el número de fenotipos HLA
únicos más grande de la población humana. Además, permanentemente se
descubren y caracterizan nuevos alelos. Hasta el año 2004, existían 309 alelos
HLA-A, 563 HLA-B, y 368 DRB1. En realidad, existe una sobre-representación de
muchos haplotipos comparado con lo que debería esperarse si la distribución de
los genes fuera al azar. El fenómeno de desequilibrio de ligamento explica la
discrepancia entre la frecuencia de haplotipos esperada y la observada.
La frecuencia esperada de los haplotipos HLA deriva de la multiplicación de las

frecuencias de cada alelo. Es así que en los caucásicos, la frecuencia global del
gen codificador de HLA A1 es de 0,15 y las del gen codificador de HLA B8, de
0,10; por lo tanto, cabe anticipar que el 1,5% (0,15 x 0,10) de los haplotipos HLA
de los caucásicos contiene genes codificadores de HLA-A1 y HLA-B8, sí éstos se
distribuyen al azar. No obstante, la frecuencia real de la combinación A1 y B8 en
los caucásicos es del 7%-8%.
Ciertas combinaciones alélicas son más frecuentes en distintos grupos étnicos y

constituyen los haplotipos comunes de esas poblaciones. Estos se llaman
haplotipos ancestrales por que la herencia parece provenir de un único ancestro

en común. El haplotipo ancestral más común en los europeos del norte es el A1,
B8, DR3, DQ2, que incluyen regiones de clases I y II. No se sabe si los haplotipos
ancestrales representan haplotipos relativamente jóvenes en los cuales todavía
no hubo recombinación o si son haplotipos antiguos, resistentes a la
recombinación debido a selección.
22
El desequilibrio de ligamento del sistema HLA es importante en los estudios de

paternidad, por que las frecuencias de los haplotipos en la población relevante
incrementan la posibilidad de transmisión de ciertas combinaciones génicas con
respecto a otras. El desequilibrio de ligamento también influye en la probabilidad
de encontrar donantes no relacionados apropiados para transfusiones de
plaquetas y trasplantes hematopoyéticos HLA compatibles. (AABB, 2007)
Medicina Transfusional
La medicina transfusional (Terapia transfusional o hemoterapia), es la medicina a
base de componentes sanguíneos, utilizada en el tratamiento de enfermedades o
deficiencias, que no pueden ser tratadas con otro tipo de terapia, si no es con
sangre y sus componentes. La administración terapéutica de hemocomponentes
debe ser útil. Aún cuando la indicación es correcta, podría producirse efectos
adversos. Por lo tanto, la transfusión solo se lleva a cabo cuando los beneficios
previstos superan a los riesgos potenciales, existen algunas alternativas
farmacológicas y situaciones transfusionales especiales. (Rocha J., 2014)
La Medicina Transfusional es, por tanto, una disciplina compleja con tecnología
médica muy avanzada, que involucra a un sinnúmero de especialidades no sólo
médicas, sino también de otros campos del conocimiento, las cuales tienen
repercusiones en el mundo de la ciencia y la tecnología, con sus respectivas
implicaciones éticas, a la par de sus sistemas administrativos, por lo que
podemos
inferir la importancia del desarrollo con calidad que ha tenido la Medicina

Transfusional. (Salvatella M., 2008)
La transfusión es sustancialmente segura en la actualidad. Sin embargo, las
transfusiones de sangre alogénicas están aún asociadas con varios riesgos, que
van desde errores clericales hasta transmisión de agentes infecciosos y
complicaciones inmunológicas. Además, es importante señalar que la búsqueda
permanente de la reducción de los riesgos de transmisión de infecciones por
transfusión y la posibilidad de garantizar la disponibilidad y oportunidad en la
entrega de unidades, está basada en la donación voluntaria de sangre, que surge
de la fuente limitada de su obtención: las personas sanas. Las reacciones
transfusionales son un grupo diverso de eventos que ocurren como resultado de
23
una transfusión que usualmente se presentan durante o poco tiempo después de

una transfusión. (Cerdas C, 2013)
Importancia del sistema HLA en la Medicina Transfusional

Los antígenos y anticuerpos del sistema HLA desempeñan un papel destacado en
muchos eventos transfusionales, incluyendo la aloinmunización y la refractariedad
a las plaquetas, las Reacciones Febriles No Hemolíticas (RFNH), la Lesión
Pulmonar Aguda por Transfusiones (TRALI) y las Enfermedades del Injerto contra
Huésped (EICH). Los antígenos HLA son muy inmunogénicos. En respuesta a los
embarazos, transfusiones o trasplantes, las personas normales desde el punto de
vista inmunológico tienden más a desarrollar anticuerpos contra los antígenos
HLA que contra cualquier otro sistema antigénico.
Refractariedad Plaquetaria
Refractariedad Plaquetaria mediada por acción inmune, Se reporta en un 60% de
los receptores que han sido multitransfundidos. La aloinmunización HLA se
genera contra antígenos clase I que ha sido provocada por los leucocitos
residuales presentes en los hemocomponentes celulares (concentrados
plaquetarios, paquetes globulares y/o sangre total). Estudios clínicos han
demostrados que
niveles de leucocitos de 5 X 106 puede ser la dosis de inmunización. Los

receptores con este tipo de aloinmunización y refractariedad a plaquetas deben
ser transfundidos con unidades de concentrados plaquetarios obtenidas por
aféresis de un donante HLA compatible.
Se produce en receptores con anticuerpos anti-HLA o antiantígenos plaquetarios

específicos por transfusiones o embarazos previos. Estos anticuerpos producen la
destrucción de las plaquetas que contengan el antígeno correspondiente,
manifestándose generalmente en un mínimo incremento del recuento plaquetario
inmediatamente después de la transfusión de plaquetas y una pobre respuesta
terapéutica. Debe diferenciarse aquellos casos de supervivencia acortada de las
plaquetas por razones no inmunológicas (coagulación intravascular diseminada
[CID], sepsis, esplenomegalia, etc.).
Donantes Compatibles
24
En los individuos transfundidos, los anticuerpos anti.HLA podrían estar dirigidos

contra especificidades individuales de las células del donante o contra
aloantigénicos públicos. La caracterización precisa podría ser dificultosa. La
evaluación global del grado de aloinmunización se logra midiendo el nivel de ARP
en el suero del receptor. Los pacientes refractarios con nivel de ARP alto
presentan aloinmunización significativa y podría ser difícil de tratarlos con
transfusiones de plaquetas.
Las plaquetas compatibles recolectadas por aféresis podrían ser útiles en algunos,
no en todos los casos. Como no es fácil encontrar donantes compatibles para los
cuatro tipos de antígenos, las estrategias para obtener las plaquetas HLA
apropiadas para los receptores inmunizados varían. De acuerdo con los grupos
serológicos con reactividad cruzada, se enfatiza la selección de donantes con
compatibilidad parcial, pero podrían no proporcionar una respuesta transfusional
adecuada in vivo.
Otro enfoque alternativo se basa en la concordancia de las especificidades

públicas más que en los antígenos “privados”. Puede ser difícil contar con un
número adecuado de donantes tipificados disponibles; se estima que para cumplir
con los requerimientos transfusionales de la mayoría de los pacientes HLA
inmunizados, se necesitan 1000-3000 o más donantes. El uso de perlas de
antígenos simples para identificar adecuadamente las especificidades de los
anticuerpos HLA permitirá una mejor selección de donantes con antígenos no
compatibles aceptables.
Reacciones transfusionales febriles no hemolíticas.

Las reacciones de este tipo están relacionadas con los anticuerpos anti-HLA
específicos, tanto de granulocitos como de plaquetas. Los anticuerpos reaccionan
con los antígenos del donador provocando la liberación de citocinas que causan
fiebre.
Lesión Pulmonar Aguda por transfusiones

En la Lesión Pulmonar Aguda por Transfusiones (LPAT), reacciones
transfusionales cada vez más frecuentes, se produce edema pulmonar agudo no
cardiogénico. La patogenia parece reflejar la presencia de anticuerpos anti.HLA en
25
la sangre del donante, que reaccionan y fijan complemento a los granulocitos del
receptor, llevando a extravasación capilar grave y edema pulmonar. Alguna vez,
los anticuerpos anti-HLA del receptor reaccionan con los leucocitos del donante.
Se comunicaron casos de Lesión Pulmonar Aguda por Transfusión (TRALI)

aparentemente causados por anticuerpos del donante contra los antígenos clase
II del receptor. Como los antígenos clase II no se expresan en neutrófilos, debe
haber una explicación alternativa para la activación de los neutrófilos en estos
casos. Una hipótesis es que estos anticuerpos activados por complemento
capturan los antígenos clase II en los macrófagos pulmonares del receptor. La
liberación posterior de citoquinas y quimioquinas sería la que provoca el

reclutamiento y la activación de los neutrófilos en los pulmones.
Quimerismo y Enfermedad del Injerto contra Huésped (EICH) post

transfusional
El quimerismo es la presencia de células del donante en el receptor. El
quimerismo persistente después de una transfusión puede llevar al desarrollo de
EICH en el receptor, el desarrollo de EICH post transfusional depende de varios
factores: grado de compromiso inmunológico del receptor; número y viabilidad de
los linfocitos del componente transfundido y similitud HLA entre el donante y el
receptor. (Ver en Anexos Figura 6).
La observación de EICH después de la transfusión de componentes de la sangre

frescos, provenientes de familiares del receptor, destaca el papel del sistema HLA
en este cuadro. Otras unidades seleccionadas, como las plaquetas HLA
compatibles, también podrían incrementar el riesgo de EICH postransfusional.
Existen muy pocos casos de EICH postransfusional después de la transfusión de
sangre de donantes no familiares.
También se ha propuesto que el quimerismo puede ser responsable de la

preservación de la tolerancia en algunos receptores de trasplante de órganos y de
la preservación de la sensibilización HLA. La esclerodermia puede ser una forma
de EICH causada por células quiméricas derivadas de células fetales que
atravesaron la placenta durante el embarazo.
Reacciones Transfusionales Hemolíticas

26
La incompatibilidad HLA podría ser causa de acortamiento de la supervivencia de

los glóbulos rojos en pacientes con anticuerpos contra antígenos HLA como los
Bga corresponden a los HLA-B7, Bgb a los HLA-17 y Bgc a los HLA-A28, un cuarto
tipo de anticuerpos de algunos sueros anti-leucocitarios reacciona con los
glóbulos rojos de las personas que expresan HLA-A10, estos se expresan en estas
células de forma débil. Esta incompatibilidad podría pasar inadvertida en las
pruebas pretransfusionales convencionales.
Compatibilidad HLA
Es importante comprender los fenómenos básicos de compatibilidad tisular y
conocer las funciones del grupo de genes denominado complejo mayor de
histocompatibilidad (CMH) y sus productos: los antígenos leucocitarios humanos,
que constituyen el sistema HLA, el más polimórfico conocido en el humano.
Existen dos clases de moléculas HLA, las de tipo I, HLA-A, -B y –C, y las de clase
II, HLA-DR, -DQ y –DP. La función habitual del sistema HLA consiste en reconocer
péptidos y exhibirlos en la superficie de las células presentadoras de antígenos,
como los macrófagos, para que sean revisados por las células T y se establezca
una distinción entre los antígenos propios y los extraños. Los antígenos del
sistema HLA, debido a su polimorfismo, constituyen a su vez antígenos capaces
de despertar una respuesta aloinmune muy poderosa. Las moléculas HLA de clase
I son conocidas como antígenos clásicos de trasplante, ya que fueron los
primeros descubiertos durante el estudio de la respuesta a un aloinjerto. Sin
embargo, las de clase II, detectadas posteriormente, son las de mayor
importancia para asegurar una adecuada histocompatibilidad.
(www.imbiomed.com.mx/1/1/ articulos.php?method...)
Cada persona tiene un número de pares de antígenos HLA. Nosotros heredamos

uno de esos pares de cada uno de nuestros padres (y le pasamos uno de cada
par a cada uno de nuestros hijos). Los médicos tratan de compatibilizar estos
antígenos encontrando un donante para la persona que recibe un trasplante de
células madre. La compatibilidad HLA entre el donante y el receptor tiene un
papel muy importante en determinar si el trasplante funcionará. La mejor
compatibilidad ocurre cuando todos los seis antígenos HLA principales y conocidos
son iguales (una compatibilidad 6 de 6). Las personas con estas
27
compatibilidades tienen una
probabilidad menor de padecer enfermedad de injerto contra huésped, rechazo

de injerto, presentar un sistema inmunológico debilitado y contraer infecciones
graves. Para los trasplantes de células madre de médula ósea y de sangre
periférica, a veces se usa un donante con un solo antígeno que no es compatible;
una compatibilidad 5 de 6. Para el éxito con los trasplantes de sangre del cordón
umbilical, una compatibilidad HLA perfecta no es tan importante, ya que hasta
una compatibilidad 4 de 6 puede resultar aceptable. (www.cancer.org ›...).
Haplotipos y relación con la Terapia Transfusional

En la condición de EICH se demuestra el papel que juegan los haplotipos HLA en
las transfusiones sanguíneas. Los progenitores poseen un haplotipo HLA en
común. Por lo tanto, los hijos tienen una posibilidad de uno en cuatro de heredar
el mismo haplotipo de cada progenitor y el hijo 1 es homocigoto para ese
haplotipo HLA. La transfusión de sangre de esta persona a un receptor no
relacionado, sin este haplotipo, no provoca consecuencias deletéreas. No
obstante, si el hijo 1 donara sangre a algunos de sus familiares heterocigotos
para ese haplotipo (ambos progenitores y el hijo 3), el receptor no reconocería
ningún antígeno extraño en los linfocitos transfundidos y no los eliminaría. Sin
embargo, las células del donante reconocerían los antígenos HLA extraños del
receptor, que podrían activarse, proliferarse y atacar al huésped.
En cuanto a la dinámica de los Haplotipos del sistema HLA y la relación con la

terapia transfusional, se demuestra en la herencia de haplotipos de los
progenitores a sus hijos, estos explican que la transfusión entre familiares
heterocigotos para ese haplotipo puede causar reacciones adversas. Lo cual
demuestra la función que tienen de diferenciar lo propio de lo ajeno y asegurar la
respuesta inmune. El Sistema HLA y la Medicina Transfusional de acuerdo a la
investigación realizada concluye que los haplotipos del sistema HLA juegan un rol
importante en las reacciones transfusionales como la refractariedad de las
plaquetas, lesiones pulmonares agudas transfusionales, quimerismo y
enfermedad
injerto contra huésped post transfusional, las reacciones transfusionales

28
hemolíticas y no hemolíticas, en algunas reacciones solo se relacionan en algunos

aspectos y en otros el sistema está bien involucrado. El roll consiste en
diferenciar lo propio de lo ajeno y en cuanto al reconocimiento de aloantígenos,
las células del donante reconocerían los antígenos HLA extraños del receptor, que
podrían activarse, proliferarse y atacar al huésped.
Métodos de detección del sistema HLA

Los métodos de detección de los antígenos y alelos HLA pueden dividirse en tres
grupos: pruebas celulares, serológicas y moleculares (basadas en ADN). Según la
situación clínica, puede preferirse un método particular de detección o tipificación
de antígenos HLA. (Ver en Anexos Figura 8)
Métodos Celulares
En el pasado se empleaban los cultivos linfocitarios mixtos (CML) (o reacciones
mixtas – RLM) para identificar las diferencias genéticas en la región de clase II.
En las RML se cultivan linfocitos de distintos individuos, que pueden reconocer los
antígenos HLA-D extraños y responder multiplicándose. (AABB, 2007)
Métodos Serológicos
La tipificación serológica es una técnica importante para la identificación de los
alelos HLA presentes en una persona puesto que los resultados se obtienen de
manera rápida y eficaz, además, de servir como apoyo para pruebas
confirmatorias como la PCR SSP en cuanto a HLA. (http://www.monografias.com)
El método serológico es más sencillo, económico y rápido para la tipificación HLA;

se utilizan antisueros que contienen anticuerpos contra los antígenos leucocitarios
humanos a estudiar. Los anticuerpos anti-HLA son altamente específicos para los
determinantes estructurales que caracterizan a los diferentes antígenos del
sistema HLA. (Arrazola M., 2005)
La Prueba de Microlinfocitotoxidad puede emplearse para detectar los antígenos

HLA-A, HLA-B, HLA-C, HLA-DR y HLA-DQ, se utilizan linfocitos porque es fácil
obtenerlos de sangre periférica anticoagulada y, a diferencia de los granulocitos,
proporcionan resultados reproducibles. Se colocan sueros HLA de especificidad
conocida en microcubetas y se agrega una suspensión de linfocitos. Luego se
29
añade complemento de conejo y, si el monto de anticuerpos fijados a la

membrana linfocitaria es suficiente, el complejo de ataque a la membrana activa
la cascada del complemento, que lleva a la linfocitotoxidad. El daño de la
membrana celular se detecta mediante colorantes; las células sin anticuerpo
adheridos, que no activan el complemento y no experimentan lesión de la
membrana, no permiten el ingreso de colorantes vitales, mientras que aquellas
con membranas dañadas permeables sí.
Las pruebas serológicas pueden usarse para evaluar muestras séricas y células
seleccionadas. Se llevan a cabo en la compatibilidad HLA cruzada, que consiste en
examinar el suero de un receptor potencial y linfocitos no fraccionados (o
linfocitos T y B fraccionados) de un donante potencial. Una variante de esta
técnica, que emplea un reactivo antiglobulínico, se utiliza para incrementar la
sensibilidad. En la actualidad se han desarrollado también métodos más sensibles
que la prueba convencional. Estas son las técnicas por Citometría de Flujo y la
Prueba Cruzada con Globulina Antihumana (AGH), las cuales permiten detectar
niveles muy bajos de anticuerpos circulantes, lo que facilita una mejor evaluación
de la pareja receptor/donador para el trasplante. Aunque la citrometría de flujo
es muy sensible, su alto costo no permite todavía su uso rutinario, al menos en
nuestro medio. (AAHI, 2007)
Métodos Moleculares (Hibridación, Electroforesis, DNA

conformacional) El uso de métodos moleculares para la tipificación de los alelos
HLA clase I y II tienen un papel importante dentro de las técnicas utilizadas en un
laboratorio de
histocompatibilidad, por ofrecer algunas ventajas en comparación con los

métodos serológicos tradicionales: flexibilidad en la resolución, reproducibilidad y
mayor precisión. Las ventajas de los métodos de tipificación basados en la
reacción en cadena de polimerasa (polymerase chain reaction) han permitido su
amplia utilización a tal grado que en algunos centros de trasplantes han
reemplazado en su totalidad a los métodos serológicos.
 La PCR-SSOP
La PCR-SSOP (polymerase chain reaction-sequence specific oligonucleotide
probe) es la más amplificación especifica del locus HLA por medio de la reacción
31
en cadena de la polimerasa (PR), con la subsiguiente hibridación del producto

amplificado por medio de sondas de oligonucleótidos de secuencias especificas .la
mayor parte del amplio polimorfismo del sistema HLA resulta de eventos en los
cuales pequeñas secciones de nucleótidos de un alelo ( usualmente no más de
100 bases ) son transferidos a otro alelo .
De esta manera, muchas de las secuencias tienden a compartir alelos y no son

alelo-específicos, surgiendo el uso de sondas de secuencias especificas. Para
estudiar los alelos se requiere un juego de sondas y el patrón de reactividad de
estas sondas es lo que permite diferenciar los alelos HLA. El sistema de detección
utilizado consiste en marcar las sondas con digoxigenina y la detección de la
hibridación de estas sonda. La secuencias complementaria presente en el
producto amplificado del alelo HLA de un individuo se realizara adicionando un
anticuerpo antidigoxigenina conjugado con fosfatasa alcalina, el cual utiliza CSPD
como sustrato quimioluminiscente y la luz emitida es detectada por
autorradiografía.
 PCR-SSP
La especificidad de los alelos HLA amplificados por PCR-SSP (polymerase chain
reaction-sequence specific priming) se determina por los iniciadores (primers).
[
CLASE 6INMUNOHEMATOLOGIA: características de la Membrana del eritrocito, leucocitos
y plaquetas.
Características. Importancia en los procedimientos inmunohematologicos
Cada par de iniciadores utilizados amplifica uno o varios alelos. El número

total de iniciadores utilizados deberá amplificar todos los alelos conocidos
para el locus a determinar: dependiendo de su selección, la PCR-SSP puede
ser baja, mediana o alta resolución.
Esta técnica requiere de varios controles. Cada pozo contiene un par de

iniciadores control que reacciona con una secuencia de DNA diferente a las
regiones polimórficas HLA, y que sirve como control interno para todo el
proceso de amplificación. Un segundo control, denominado “tubo abierto”,
contiene todos los reactivos, excepto el DNA, este se deja abierto durante el
proceso de amplificación y si resulta positivo indica contaminación.
Una prueba exitosa muestra la banda control en cada reacción negativa y la

banda del tamaño apropiado en los pozos positivos. Si una reacción de
amplificación no muestra bandas después de la electroforesis, el proceso de
amplificación fallo, lo que puede deberse al control inadecuado de la
temperatura del bloque del termociclador, cantidad suficiente de DNA o falla
al adicionar la Taq polimerasa. Esta técnica no es recomendable para
grandes volúmenes de trabajo, siendo la limitante el número de
termocicladores y unidades de electroforesis. Sin embargo para altos
volúmenes de trabajo, la técnica PCR-SSO se considera más práctica.
Los métodos que se utilizan para la detección del sistema HLA se dividen en
tres grupos: pruebas celulares, serológicas y pruebas moleculares (basadas
en ADN). Las que han venido avanzando y mejorando en el transcurso de la
historia para tipificación especifica de los antígenos y alelos HLA. (Arrazola
M., 2005)
[Escribir texto] Página 32

PEDRO ANIBAL LEON ALVAREZ MEDICO PATOLOGO EMAIL PLEON24@YAHOO.COM FACEBOOK: PLEON24@YAHOO.COM
FONO: 976361918

Clase 6 Inmunohematologia

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Clase 6 Inmunohematologia

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PRETEST 6 : características de la Membrana del eritrocito, leucocitos y plaquetas.

Características. Importancia en los procedimientos inmunohematológicos

Con respecto a las características de la Membrana del eritrocito y su importancia en

- La flexibilidad es proporcionada por una membrana celular unida a un

ESPECTRINA . Es la proteina mas abundante de la membrana eritrocitaria. Esta formada por un

Proceso de hemostasia en cuatro fases:

Glicoproteínas de la membrana plaquetaria

Antígenos Lewis, Ii y P: son adsorbidos íntegramente del plasma.

Antígenos HLA: son intrínsecos, sintetizados endógenamente.

Antígenos específicos: son aquellos que se expresan únicamente en las plaquetas :

• Cada sistema antigénico está asociado con glicoproteínas ( GPs).

• Estos sistemas tienen una distribución diferente según población.

SISTEMAS HPA ( Human Platelet Antigens)

Sistemas Antígenos Nombres

Kob Koa, Siba

SISTEMAS HPA ( Human Platelet Antigens)

Sistemas Antígenos Nombres alternativos CD Glicoproteína

SISTEMAS HPA ( Human Platelet Antigens) Año 2009

Sistemas Antígenos Nombre original CD Glicoproteína

Frecuencia de los antígenos plaquetarios en diversas poblaciones y grupos étnicos ( en %)

• * HLA−DRB3*0101: gen asociado a HPA 1a negativos que sintetizan acs. Anti−HPA 1a (

Frecuencia de los antígenos plaquetarios en diversas poblaciones y grupos étnicos ( en %)

Importancia clínica de los antígenos y anticuerpos plaquetarios

− TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE NEONATAL

TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE FETAL/NEONATAL

TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE FETAL/NEONATAL (TAFN)

Frecuencia : 1 caso cada 1.200 a 2000 R.N.

La trombocitopenia conlleva el desarrollo de hemorragia intracraneal en un 10-20%. ( ISBT 2008

En un 50% de los casos se produce en la primera gestación

90% de recurrencia en las siguientes gestaciones .

TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE FETAL/NEONATAL (TAFN)

- Ag. HPA-5b : (10%) trombocitopenia más moderada. En Brasil.

TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE FETAL/NEONATAL (TAFN)

Fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia. Kaplan-Gouet. XXXl International Congress of

Hemorragia intracraneal: - 80% in útero

• HPA -1a : 25.5% de los casos reportados

causa 10% de muertes

TROMBOCITOPENIA ALOINMUNE FETAL/NEONATAL (TAFN)

Fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia. Kaplan-Gouet. XXXl International Congress of

Cuadro clínico: ( madre sana, no drogas durante el embarazo)

Fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia. Kaplan-Gouet. XXXl International Congress of

Demostrar la presencia de un aloanticuerpo plaquetario específico en el suero materno.

Evidenciar incompatibilidad HPA materno – fetal :

El estudio debe incluir genotipificación plaquetaria de los padres y RN.

Fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia. Kaplan-Gouet. XXXl International Congress of

MANEJO ANTENATAL DE T.A.F.N.

Fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia. Kaplan-Gouet. XXXl International Congress of

PROTOCOLO DE ESTUDIO Y TRATAMIENTO DE T.A.F.N.

9º Simposium europeo de Inmunobiología de plaquetas y granulocitos .

• La incompatibilidad materno−fetal ABO debería considerarse como causa de TAN

• Noruega, Escocia, Egipto : 1− Tipificación HPA −1a a todas las embarazadas.

Importancia clínica de los antígenos y anticuerpos plaquetarios

Importancia clínica de los antígenos y anticuerpos plaquetarios PURPURA

Trombocitopenia aguda grave , aproximadamente una semana después de la transfu- sión de

Mujeres entre 60-70 años de edad y con antecedentes gestacionales.

Tras la recuperación, no vuelve a repetirse esta complicación.

Fallo en el incremento postransfusional esperado después de dos transfusiones de plaquetas

La especificidad mas frecuente es anti-HLA clase I y en menor proporción contra antígenos

Entre el 20 – 70% de pacientes politransfundidos.

▪ Diagnóstico: - I.C. : (recuento post.-recuento pret.) x sup. corp. en m2

▪ Incremento absoluto en adultos: 2000 /1,76 m2 /U de plaq.

- Hemorragia activa - Fiebre

• Como prevenir la aloinmunización contra plaquetas:

La mejor manera de manejar la aloinmunización contra plaquetas es previniendo que esta