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Acta Tropica 85 (2003) 173 −182

Traducido por Kevin Arthur Vilca Arias ©Todos los derechos reservados, www.parasitology-online.com
hecho bajo fines de lucro. Traducciones KAVA™.

Artículo de Revisión

Desarrollo de Em18-immunoblot y Em18-ELISA para el


diagnóstico específico de la equinococosis alveolar
Akira Ito a,*, Yasuhito Sako a, Hiroshi Yamasaki a, Wulamu Mamuti a,b,
Kazuhiro Nakaya c, Minoru Nakao a, Yuji Ishikawa a
a
Department of Parasitology, Asahikawa Medical College, Midorigaoka-Higashi 2-1-1-1, Asahikawa 078-8510, Japan
Department of Parasitology, Xinjiang Medical University, Urumqi, People’s Republic of China
b

c
Animal Laboratory for Medical Research, Asahikawa Medical College, Midorigaoka-Higashi 2-1-1-1, Asahikawa 078-8510, Japan

Resumen

La amplia experiencia ha documentado que Em2plus-ELISA, Em10-ELISA y Em18-immunoblot y Em18-ELISA


son métodos serológicos confiables para la detección de la equinococosis alveolar (AE) causada por los metacestodos
de Echinococcus multilocularis. Entre estos, los ensayos basados en la detección de anticuerpos contra el antígeno
específico de Em18, ya sea inmunoblot o ELISA, parecen ser los más específicos para EA. Entre el 90 y el 97% de los
casos de EA con lesiones hepáticas con características detectables mediante análisis de imágenes han sido positivos en
la serología Em18. Por el contrario, el antígeno-B (8 kDa) -inmunoblot es el más sensible para todas las formas de
equinococosis, aunque no puede diferenciar EA de la equinococosis quística (EC). El cribado serológico primario para
la equinococosis, especialmente para CE, con líquido hístico hidatídico de Echinococcus granulosus parece ser
altamente sensible en áreas endémicas. Las glucoproteínas (GPs) purificadas a partir del líquido del quiste de Taenia
solium son altamente específicas para el diagnóstico de neuorcisticercosis por T. solium (NCC). Usando los antígenos
actualmente disponibles, no es difícil diferenciar estas tres cestodiasis de larvas serológicamente. Recomendamos que
(1) la detección primaria de EC en áreas endémicas se lleve a cabo utilizando líquido hidatídico de E. granulosus
preparado a partir de quistes en ovejas, humanos o ratones para inmunoblot y de ovejas o ratones para ELISA, (2) Tanto
el cribado y la confirmación de EA en áreas endémicas se deben llevar a cabo utilizando Em18-ELISA, Em18-
immunoblot o Em2plus-ELISA. El serodiagnóstico en áreas donde tanto EA como CE son endémicos, como en China,
se debe llevar a cabo como una combinación de (1) y (2), y (3) la serología del NCC se debe realizar usando GP-ELISA
o GP- inmunoblot. Todas las muestras que muestran anticuerpos contra Em18 son exclusivamente de casos de
equinococosis. No ha habido reacciones positivas falsas con sueros de otras enfermedades. Los respondedores más
fuertes de Em18 son todos de pacientes con EA, pero se pueden encontrar respuestas débiles en el suero de personas
con lesiones complejas avanzadas de CE. Estos métodos serodiagnósticos altamente confiables que usan antígenos
nativos, recombinantes y sintéticos se resumen y se revisan las experiencias con estos métodos en Japón. Creemos que
el uso de estos antígenos específicos en los programas de detección y confirmación de EA en Japón mejorará la
especificidad y reducirá la confusión, ansiedad y gasto en personas cuyos sueros dan reacciones falsas positivas con
antígenos equinococos crudos. # 2002 Elsevier Science B.V. Todos los derechos reservados.

Palabras clave: equinococosis alveolar; Echinococcosis quística; Neurocisticercosis; Zoonosis de céstodos; Serodiagnóstico; revisión

* Corresponding author. Tel.: ‡/81-166-68-2420; fax: ‡/81-166-68-2429


E-mail address: akiraito@asahikawa-med.ac.jp (A. Ito).

0001-706X/02/$ - see front matter # 2002 Elsevier Science B.V. All rights reserved.
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1. Introducción recombinante. (Helbig et al., 1993, Hubert et al.,


1999). El grupo Asahikawa Medical College
El serodiagnóstico diferencial para la equinococosis (AMC) identificó Em18 (aproximadamente 18
alveolar (AE), la equinococosis quística (EC) y la kDa) como otro marcador específico para EA (Ito
neurocisticercosis (NCC) es importante para el et al., 1993, 1995). Las evaluaciones comparativas
diagnóstico precoz y el tratamiento curativo de los de estos ensayos serológicos indican buenas
pacientes y para describir la epidemiología de estas correlaciones entre los resultados de EM2 o
zoonosis de cestodos. Estas tres cestodiasis larvales,
Em2plus-ELISA, Em10-ELISA y Em18-
causadas por tres cestodos táénidos estrechamente
relacionados, se encuentran entre las enfermedades inmunoblot (Gottstein et al., 1993; Helbig y otros,
emergentes y reemergentes en todo el mundo. La EA 1993, Hubert et al., 1999; Ito et al., 1995, 1998a,
causada por la fase larvaria de la tenia zorro. 1999a; Craig et al., 2000). Los trabajadores
Echinococcus multilocularis, es una de las infecciones franceses han producido recientemente un kit
parasitarias más letales en el hemisferio norte, mientras inmunoblot que usa antígenos crudos de
que la EC causada por la fase larvaria de la tenia del protoscolex de E. multilocularis para la detección
perro y Echinococcus granulosus aún están muy
de respuestas de anticuerpos contra Em18,
extendidas en el mundo (Craig et al. ., 1992, 1996;
Schantz et al., 1998; Schantz, 1999; Eckert et al., 2001;
Antígeno B y otros antígenos específicos (Liance
Ito et al., 2002a). El NCC causado por Taenia solium es et al., 2000).Los trabajadores chinos han
otra zoonosis de cestodo importante a nivel mundial y se producido un kit Em18-ELISA basado en la
discute aquí principalmente porque la respuesta de información de Asahikawa (Jiang et al., 2001). El
anticuerpos a menudo es de reacción cruzada con grupo AMC ha mejorado la especificidad de sus
pruebas usadas para la equinococosis (Tabla 1; Craig et ensayos mediante (a) la purificación de Em18, que
al., 1996; Ito, 1999, 2002; Ito et al., 1999a, 2002a, b). muestra una sola banda mediante análisis de
inmunoblot y es un buen marcador para controlar
el pronóstico de EA, (b) purificación de Em18
2. Serodiagnóstico diferencial de EA de CE o mediante cromatografía de afinidad y (c)
NCC producción de antígeno recombinante Em18
(rEm18) (Ito et al., 2000, 2001a, 2002b, c; Sako et
2.1. AE al., 2002). La Tabla 2 muestra la sensibilidad y
especificidad informadas de tres antígenos, Em18,
Los científicos suizos informaron por primera vez Em18 purificado por afinidad, rEm18 y otros
Em2-ELISA (Gottstein, 1985) y Em2plus-ELISA antígenos obtenidos por varios grupos. Jiang et al.
(Gottstein et al., 1993) pueden ser usados para el (2001) han demostrado que Em18 está presente no
diagnóstico diferencial de EA. Estos ensayos han
solo en protoscolezas de E. multilocularis sino
sido evaluados y se sabe que son altamente
también en las de E. granulosus (Eg18), aunque no
específicos para EA y están disponibles
purificaron Em18 sin contaminación de Em16 (Ito et
comercialmente. El grupo de Wurzburg en Alemania
identificó otro componente serodiagnóstico al., 1997).
Tabla 2
específico, Em10 y lo produjo como antígeno Serodiagnóstico disponible y confiable para EA, CE y NCC
AE Em2-ELISA, EmII-3-ELISA, Em2plus-ELISA, rEm10-
ELISA, Alkaline phosphatase-ELISA, Em18-IB, Em18-
ELISA, AffEm18-IB, AffEm18-ELISA, rEm18-IB,
rEm18-ELISA, EmC-ELISAa, EgCF-ELISAb
Em18a Antigen B (8 kDa)a GPsa CE Antigen B-ELISA, Antigen B-IB, EgCF-ELISA, EgCF-
IB, EmC-ELISA, EmC-IB
AE ‡/‡/ ‡/ v‡/‡/ —/ NCC GP-IB, GP-ELISA
CE —/ ‡/‡/ —/
NCC —/ —/ ‡/‡ El antígeno B, EgCF y EmC tienen reactividad cruzada con
EA y CE.
a
E. multilocularis (Em) extracto de quiste completo..
b
Líquido quístico hidatídico E. granulosus crudo.
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Sin embargo, la serología Em18 es altamente 3. Estrategias para el serodiagnóstico de EA, CE y


confiable para la diferenciación de EA de CE. Por lo NCC
tanto, se está volviendo evidente que las respuestas Aunque en nuestro laboratorio estamos cambiando a
de anticuerpos en pacientes EA difieren de los la producción de antígenos recombinantes y péptidos
pacientes con CE debido a diferencias críticas en las sintéticos para la mejora del serodiagnóstico para
características biológicas o patológicas de estas dos estas cestodiasis de larvas en países desarrollados,
especies de parásitos. Por lo que se sabe, todos los otras estrategias pueden ser más factibles en algunos
antígenos candidatos adecuados para el países.
serodiagnóstico diferencial de EA tienen una alta 3.1. AE
homología genética con E. granulosus, sin embargo,
el nivel de expresión de ciertas proteínas Como es muy fácil preparar grandes cantidades de
identificadas difiere entre las dos especies (Felleisen protoscolezas de E. multilocularis en roedores,
y Gottstein, 1994; Frosch et al., 1994; Sako et al., especialmente en ratas (Ito et al., 2001b), es
2002). relativamente fácil para nosotros preparar Em18 u
otros antígenos nativos mediante cromatografía de
afinidad usando anticuerpos monoclonales contra
2.2. EC
rEm18.
3.2. EC
Aunque no se han identificado marcadores
serológicos con especificidad absoluta para CE, dos
lipoproteínas, Antígeno 5 (arco 5 por Como el ratón es un huésped de laboratorio
inmunoelectroforesis) y Antígeno B son los mejores adecuado para la infección secundaria por E.
candidatos actuales como antígenos serodiagnósticos granulosus, podemos obtener líquido quístico que
(Pozzuioli et al., 1975; Leggatt et al., 1992; Frosch no contenga componentes con reactividad cruzada
et al., 1994; Ioppolo et al., 1996; Siles-Lucas et al., para humanos, ovejas u otros animales domésticos.
1998; Ito et al., 1999a; Poretti et al., 1999; Por lo tanto, el modelo de ratón puede ser muy útil
Gonzalez-Sapienza et al., 2000; Ortona et al. , 2000; para la estandarización de la serología del Antígeno
Mamuti et al., 2002). El Antígeno B recombinante y B (Mamuti et al., 2002).
el Antígeno B sintético ahora están disponibles y se 3.3. NCC
usan para el serodiagnóstico (Gonzalez-Sapienza et
al., 2000). Como los anticuerpos monoclonales o policlonales
específicos para T. solium GP están disponibles, es
relativamente fácil preparar GP usando cromatografía
2.3. NCC de afinidad y quistes intactos o fluido de cisticercos
de T. solium. Un enfoque alternativo utilizando GP
3. El primer trabajo para la detección de componentes purificadas a partir del líquido de quistes de Taenia
específicos de la cisticercosis por T. solium se crassiceps podría ser útil para el diagnóstico en
llevó a cabo por Gottstein et al. (1986). Parkhouse humanos. Sin embargo, tales antígenos purificados
y Harrison (1987), Tsang et al. (1989), Rodriguez- tienen reactividad cruzada con los componentes del
Canul et al. (1997) confirmaron que los quiste de otros céstodos taenidos (Chung et al., 1999),
componentes específicos son glicoproteínas (GP) y y es imposible usarlos en animales domésticos,
se purificaron mediante cromatografía de afinidad especialmente en cerdos que están comúnmente
de lectina de lenteja. Más recientemente, el grupo
infectados con Taenia hydatigena. Por lo que hemos
AMC tuvo éxito en la purificación de GP mediante
examinado, no existe una reacción cruzada con T.
un preparado enfoque isoeléctrico de un solo paso
hydatigena en cerdos cuando utilizamos GP
(Ito et al., 1998b). Tales antígenos candidatos se
producen ahora como antígenos recombinantes o preparados por isoelectroenfoque (Ito et al., 1998b)
péptidos sintéticos (Chung et al., 1999, Sako y para la detección de cerdos y perros, así como
otros, 2000, Greene et al., 2000). humanos en Irian Jaya (Wandra et al. al., 2000;
Subahar et al., 2001; Ito et al., 2002e).
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4.2 Serología Em18 en China.


4. Experiencia con serodiagnóstico de
equinococosis quística y alveolar y cisticercosis Según lo informado por Qiu et al. (1999), Craig et al.
en Japón y otros países (2000), la serología usando el criterio Em18 puede
diferenciar aproximadamente 90% de los casos de EA
4.1. Serología Em18 en Japón
en Sichuan y Qinghai, China, donde tanto EA como
CE son endémicos (Qiu et al., 1999) y en Gansu
En nuestra experiencia en AMC, nunca se ha
donde EA es endémica exclusivamente (Craig et al. ,
confirmado un caso de EA que no fuera 2000). En ese momento, utilizamos Em18, ya sea en
seropositivo a Em18. Todos los casos de EA extracto crudo (Qiu et al., 1999) o en extracto
confirmados quirúrgicamente han mostrado parcialmente purificado (Craig et al., 2000, Tabla 3).
respuestas específicas a Em18 antes de la cirugía. Sin embargo, ahora tenemos tanto (a) Em18
El laboratorio de AMC ahora proporciona soporte purificado por afinidad con una sensibilidad mucho
de diagnóstico a cualquier otra institución en mayor que Em18 purificado por isoelectroenfoque y
Japón, como la Universidad de Hokkaido, siempre (b) un rEm18 tanto para ELISA como para
que los médicos consulten directamente a AMC inmunoblot (Ito et al., 2001a, 2002c; Sako et al.,
con pacientes sospechosos de EA. Dos pacientes 2002)
con EA fueron informados oficialmente de la isla 4.3. Serología Em18 en Francia
principal, Honshu, en 1999 y 2000. Se sospechó
serológicamente que eran EA por serología Acabamos de comenzar un proyecto de colaboración
continua utilizando antígenos de Em crudo. Sin para la evaluación de la serología Em18 con colegas
embargo, fueron Em18 negativos y finalmente se en Francia (Liance et al., 2000). La Tabla 4
confirmaron como fascioliasis e indicaron CE, proporciona un breve resumen preliminar de los
respectivamente (Ito, 2002). Detectamos 25 casos resultados con Em18-IB purificado por afinidad (Ito
de EA como Em18-positivo EA, otros seis fueron et al., 2002e). Todos los casos de EA mostraron una
negativos, aunque se sospechó que los pacientes respuesta clara a Em18 purificado por cromatografía
eran EA oficialmente basados en los sistemas de de afinidad. Aproximadamente el 90% de EA (18/20)
detección serológica en curso en Japón durante respondieron exclusivamente de forma fuerte,
mientras que ningún suero de pacientes con CE o
2000 y 2001. Se confirmó que los 25 pacientes
NCC se clasificaron como respondedores fuertes.
Em18-positivos eran EA. después de cirugía. En
Estas muestras de suero ahora se están sometiendo a
contraste, dos de los seis pacientes con Em18
un análisis adicional usando Em18-IB con Em18-
negativo han sido confirmados como hemangioma ELISA purificado por afinidad y rEm18-ELISA (Ito
después de la cirugía. Recientemente, et al., 2002c).
proporcionamos soporte de diagnóstico a un caso 4.4. Serología Em18 en Afganistán
que había sido seropositivo en Japón. Este caso fue
muy positivo en las pruebas (ELISA e inmunoblot Hubo un paciente de Afganistán con presunta EA que
utilizando antígenos de Em crudo) realizadas en ingresó en un hospital en el Reino Unido. En base a la
otras instituciones. Los sueros de este paciente serología Em18, confirmamos que es EA. Después del
permanecieron negativos para anticuerpos contra tratamiento quirúrgico, se confirmó patológicamente
Em18 en pruebas realizadas en AMC. La que la lesión era EA (Craig et al., Sin publicar). Hasta
proyección de imagen hepática en AMC no apoyó ahora se sabe que es el primer caso de EA reportado
EA pero el diagnóstico seguía siendo desconocido. desde Afganistán.
El paciente eligió la resección quirúrgica de la 4.5. Casos de CE en Japón (de 1997 a 2000)
lesión hepática en el hospital AMC. Se determinó
que la lesión era un quiste hepático benigno (Aoki Se han confirmado cuatro casos de EC
et al., Sin publicar). Este caso ilustra que el quirúrgicamente en Japón (Ito et al., 1998 c;
serodiagnóstico de EA se está volviendo más Kimura et al., 1999). Un paciente era un hombre
confiable y más sensible utilizando Em18- japonés, de 26 años, que nació en Argentina y
inmunoblot purificado por afinidad (IB) y rEm18- vivió allí hasta los 5 años de edad. Se sospechó
IB. Dentro de pocos años, esperamos establecer que este caso era EA por serología en curso en
buenos kits para ELISA o IB usando rEm18 o Japón y oficialmente se informó que era EA en
Em18 purificado por afinidad. 2000.
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Tabla 3
Resumen de pruebas serológicas positivas (%) (ELISA o blot, modificado de Craig et al., 2000)

Imagen de EEUU Número EmCa Em2b EmPc EgCFd Em18e

EA evolutivo 80 92.5% 83.8 87.8 96.3 90.4


EA abortivo 88 18.2 15.9 29.3 31.8 20.5
Nodular (temprano?) 40 15.0 12.5 31.8 57.5 15.8
a
E. multilocularis (Em) extracto de quiste completo
b
Em Antígeno carbohidrato purificado.
c
Em extracto protoscolex.
d
Líquido quístico hidatídico E. granulosus crudo.
e
Antígeno Em 18 kDa específico.

Tabla 4
Resultados preliminares de Em18-IB para 60 muestras de suero (20 EA, 35 CE, 3NCC, 1 E. vogeli, 1 FP (falso positivo) de Francia
2001: el diagnóstico se basó simplemente en la presencia o ausencia de respuesta de anticuerpos a Em18 utilizando solo afinidad
purificada Em18-IB (modificado de Ito et al., 2002c)

Puntuación de Em18-IB Número de muestras Confirmación Clínica

3+ 18 All EA
2+ 9 1 EA, 7 CE, 1 E. Vogeli
1+ 2 2 CE
1+? (muy débil) 3 2 CE, 1 NCCa
Negativo 28 1 EAb, 24 CE, 2 NCC, 1 FP
Total 60 (20 EA, 35 CE, 3 NCC, 1 E. Vogeli , 1 FP)
a
Positivo por el kit de inmunoblot disponible comercialmente en Francia (Liance et al., 2000).
b
Caso inactive.

Sin embargo, cuando el suero fue probado por el Su tomografía computarizada (TC) y las imágenes
anticuerpo Em18 en AMC, fue negativo a Em18 de resonancia magnética (IRM) no son típicas de
pero positivo al Antígeno B y se confirmó que era NCC, sin embargo, su respuesta serológica no deja
CE. Después de que informamos los resultados dudas de que es NCC. Los datos de imagen parecen
serológicos al médico, pudimos obtener datos de sugerir la presencia de un quiste agonizante de T.
imágenes de ultrasonido (EE. UU.) Y también lo solium con pérdida de líquido del quiste que causa
confirmamos como tipo CE 3 de WHO IWGE. edema.
(OMS, Grupo de trabajo informal sobre
equinococosis )(Pawlowski et al., 2001). 5. Sistema en curso para la diferenciación de
EA en Japón
4.6. Casos de NCC en Japón (de 1997 a 2000)
Ha habido más de diez casos confirmados de NCC, Hace poco se publicó una buena revisión histórica del
ya sean japoneses o extranjeros (Ito et al., 1999b), control de la equinococosis en Hokkaido (Minagawa,
confirmados como NCC serológicamente en AMC. 1997, 1999; Doi et al., 2000a). Los sistemas oficiales
Otro paciente, una niña japonesa, tenía un único de detección serológica para la detección de pacientes
quiste de T. solium en el cerebro, pero era con EA en Hokkaido se utilizaron históricamente para
completamente negativo para el anticuerpo (Ohsaki la detección de pacientes con EA. Sin embargo, el
et al., 1999). Por el momento, tenemos un estudiante diagnóstico mejorado por escáner de EE. UU. Y CT
nepalí en Japón. en lugar de serología ha mejorado enormemente el
sistema. En 1997, diez pacientes de EA fueron
confirmados oficialmente en Hokkaido.
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Tabla 5
Serodiagnóstico de sospecha de EA y no equinococosis (NE) en Japón: comparación de la fiabilidad del serodiagnóstico llevado a cabo
en AMC y otras instituciones en Japón desde 1999 (de Ito et al., Sin publicar)

Casos de EA y -NE sospechosos basados Serodiagnóstico en AMC basado Examen patológico de confirmación final
oficialmente en Japón en Em18

De Hokkaido, Isla del norte (2000 ~ )


30 EA a 24 EA+/6 NE 24 EA b+/3 NE+/3NEc
2 NEd 2AE 2AE
De Honshu, Isla principal (1999 ~ )
1 EA a 1 NE 1 fascioliasis (1999)
1 EA a 1 NE (EC) 1 CE (2000)
a
Se diagnosticó en base a varias pruebas que incluyeron ELISA para el cribado primario e inmunoblot confirmatorio para cribado
secundario utilizando antígenos de Em crudo en Japón.
b
Incluye algunos casos de EA confirmados previamente en la Universidad de Hokkaido y en AMC.
c
No confirmado sin cirugía
d
Negativo por ELISA para detección primaria.

Un total de 360 personas (108 personas de 72 801 La mayoría de los casos confirmados de EA
personas locales evaluadas principalmente por distintos de Hokkaido se han notificado en la
ELISA en 1997 y 252 personas que se sospechaba prefectura de Aomori (Takahashi et al., 1986; Doi
eran EA en encuestas de años anteriores) fueron et al., 2000b). Sin embargo, es posible que no haya
reexaminadas mediante la denominada detección habido nuevos pacientes con EA después de 1986
serológica confirmada de inmunoblot ( cribado que carecen de antecedentes de haber vivido en
secundario). Un total de 81 personas fueron Hokkaido y, en consecuencia, presuntamente
serológicamente positivas en este examen secundario, estuvieron expuestos a huevos de E. multilocularis
mientras que solo tres personas finalmente se en Hokkaido. Hay otros incidentes, que ilustran la
confirmaron como EA en la cirugía. Por el contrario, falta de fiabilidad de los antígenos crudos para el
siete casos de EA se diagnosticaron en cirugía cribado diagnóstico de EA y la confusión,
independiente del sistema de detección o en personas ansiedad y gasto ocasionados por este enfoque. Por
locales que fueron excluidas en la etapa de detección
lo tanto, creemos que el uso de esos antígenos
primaria. Por lo tanto, hay un argumento crítico sobre
específicos en los programas de cribado y
la eficiencia del sistema de evaluación en curso.
confirmación de EA en Japón mejorará la
Desde el 1 de abril de 1999, hemos iniciado una
reevaluación conforme a la nueva Ley de vigilancia especificidad y reducirá la confusión, ansiedad y
para el control de enfermedades infecciosas en Japón. gasto en personas cuyos sueros dan reacciones
Echinococcosis así como malaria, giardiosis, falsas positivas con antígenos crudos de Em
cryptosporidiosis, amebiosis son las cinco (Liance et al., 2000 ; Ito et al., 2002a, b, c, d, e).
enfermedades parasitarias objetivo bajo la nueva ley. Un nuevo proyecto de vigilancia de EA en Japón
En 1999, hubo un caso de EA en una mujer reportado patrocinado por el Ministerio de Salud y Bienestar
en la prefectura de Akita, la parte norte de Honshu, de Japón comenzó como un proyecto de 3 años
justo después de que los medios de comunicación desde 1997. Ahora se encuentra en una segunda
anunciaran la detección informal de dos cerdos fase del proyecto de 2000 durante 3 años, que se
infectados con E. multilocularis en la prefectura de ha centrado principalmente en la vigilancia de
Aomori, en la parte norte de Honshu. Se sospechó animales. La información actual no permite un
serológicamente que este caso era EA y se trató aumento preciso en los pacientes con EA
mediante intervención quirúrgica. Este caso, sin detectados en los últimos 2 años (Tabla 5, Doi et
embargo, no fue EA sino fascioliasis (Yoshimura, al., 2000b). ¿Es debido al aumento en el número
2000; Ito, 2002). Un segundo caso serodiagnosticado de personas infectadas o debido a la mayoría de
como EA fue de la prefectura de Fukushima. El los casos de casos de EA confirmados previamente
clínico sospechaba que era CE, sin embargo, la para el seguimiento o debido a las personas que se
serología llevada a cabo en Japón era sugestiva de mostraron ansiosas por ser controladas después de
EA. (Ito, 2002). cualquier propaganda a través de medios de
comunicación como los programas de televisión?
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No hay duda de que los sistemas de cribado


serológico en curso en Hokkaido solían tener alguna
función de cribado históricamente, pero que no son
ni sensibles ni específicos para el diagnóstico en la Referencias
nueva fase de 1999 (Ito, 2001). La mayoría de los
casos de EA históricamente identificados por el Chung, J.Y., Bahk, Y.Y., Huh, S., Kang, S.-Y., Kong, Y., Cho,
sistema en curso han estado en la etapa avanzada. En S.-Y., 1999. A recombinant 10 kDa protein of Taenia solium
consecuencia, la vigilancia con estos métodos no es metacesodes specific to active neurocysticercosis. J. Infect.
confiable y es imposible evaluar la situación real de Dis. 180, 1307 −/1315.
epidemia de EA en Japón. Es una tarea urgente para Craig, P.S., Liu, D., Macpherson, C.N.L., Shi, D., Reynolds,
D., Barnish, G., Gottstein, B., Wang, Z., 1992. A large focus
nosotros establecer una mejor resolución para la of alveolar echinococcosis in central China. Lancet 340,
detección de EA en Japón. 826 −/831.
Craig, P.S., Rogan, M.T., Allan, J.C., 1996. Detection, screen-
ing and community epidemiology of taeniid cestode zoo-
6. Conclusión noses: cystic echinococcosis, alveolar echinococcosis and
neurocysticercosis. Adv. Parasitol. 38, 169 −/250.
Los resultados de las colaboraciones internacionales Craig, P.S., Giraudoux, P., Shi, D., Bartholomot, B., Barnish,
en investigación han producido métodos serológicos G., Delattre, P., Quere, J.P., Harraga, S., Bao, G., Wang,
confiables para la diferenciación de la equinococosis Y., Lu, F., Ito, A., Vuitton, D.A., 2000. An epidemiological
and ecological study of human alveolar echinococcosis
de otras enfermedades, incluido el NCC o la transmission in south Gansu, China. Acta Trop. 77, 167 −
diferenciación de EA de CE. Las pruebas ahora 177.
disponibles son factibles para los sistemas de Doi, R., Nakao, M., Nihei, N., Kutsumi, H., 2000a. Epide-
cribado y confirmación de rutina. Con base en las miology of alveolar hydatid disease (AHD) and estimation
mejoras en la sensibilidad y especificidad, las of infected period of AHD in Rebun island, Hokkaido. Jpn.
pruebas serológicas deberían convertirse en la J. Public Health 47, 145 −/152 (in Japanese with English
summary).
primera opción para el diagnóstico de la
Doi, R., Kanda, E., Nihei, N., Uchida, A., 2000b. Occurrence
equinococosis con la confirmación del análisis de of alveolar hydatid disease (multilocular echinococcosis)
imágenes de EE. UU., CT, RM pero no viceversa. outside of Hokkaido and a proposal for its prevention. Jpn.
Creemos que el uso de estos antígenos específicos J. Public Health 47, 111 −/126 (in Japanese with English
en los programas de detección de EA en Japón summary).
mejorará la especificidad y reducirá la confusión, la Eckert, J.E., Pawlowski, Z.S., Meslin, F.-X., Gemmell, G.M.,
ansiedad y los gastos en personas cuyos sueros dan 2001. WHO/OIE Manual on Echinococcosis in Humans
and Animals: A Public Health Problem of Global Concern.
reacciones falsas positivas con antígenos Organisation Internationale des Epizooties, Paris, pp. 1 −/
equinococos crudos. Además, el inconveniente y la 265.
confusión emocional causados a los pacientes Felleisen, R., Gottstein, B., 1994. Comparative analysis of full-
pueden evitarse utilizando solo marcadores length antigen II/3 from Echinococcus multilocularis and E.
específicos (por ejemplo, Em18) para un diagnóstico granulosus . Parasitology 109, 223 −/232.
final específico. Frosch, P.M., Muhlschlegel, F., Sygulla, L., Hartmann, M.,
Frosch, M., 1994. Identification of a cDNA clone from the
larval stage of Echinococcus granulosus with homologies to
Agradecimientos the E. multilocularis antigen Em10-expressing cDNA clone.
Parasitol. Res. 80, 703 −/705.
Gonzalez-Sapienza, G., Lorenzo, C., Nieto, A., 2000. Improved
Este trabajo fue apoyado en parte por Grant-in immunodiagnosis of cystic hydatid disease by using a
Aid for International Scientific Research synthetic peptide with higher diagnostic value than that of
its parent protein, Echinococcus granulosus antigen. J. Clin.
(Investigación conjunta) (060344089,
Microbiol. 38, 3979 −/3983.
07044243, 09044279, Gottstein, B., 1985. Purification and characterization of a
11694259) y para Scientific Research specific antigen from Echinococcus multilocularis . Parasite
(10480235, 10557029, 12557024) a A. Ito y la Immunol. 7, 201 −/212.
NIH-Grant para Zoonosis parasítica
(Echinococcosis) en China a P.S. Craig (1R01
TWO1565-01).
A Kevin Arthur ™ Por traducir esta lectura. ♥
180 A. Ito et al. / Acta Tropica 85 (2003) 173 −/182

Gottstein, B., Tsang, V.C.W., Schantz, P.M., 1986. Demonstra- method for preparation and evaluation for serodiagnosis.
tion of species-specific and cross-reactive components of Am. J. Trop. Med. Hyg. 59, 291 −/294.
Taenia solium metacestode antigens. Am. J. Trop. Med. Ito, A., Okamoto, M., Ishiguro, T., Ma, L., Suzuki, H., Yasui,
Hyg. 35, 308 −/313. A., Shigeta, H., Matsuura, T., Hosokawa, T., Chai, J.-J.,
Gottstein, B., Jacquier, P., Bresson-Hadni, S., Eckert, J., 1993. 1998c. An imported case of cystic echinococcosis in Japan
Improved primary immunodiagnosis of alveolar echinococ- diagnosed by imaging and serology with confirmation of
cosis in humans by an enzyme-linked immunosorbent assay Echinococcus granulosus -specific DNA sequences. Am. J.
using the Em2plus antigen. J. Clin. Microbiol. 31, 373 −/376. Trop. Med. Hyg. 58, 790 −/792.
Greene, R.M., Hancock, K., Wilkins, P.P., Tsang, V.C.W., Ito, A., Ma, L., Schantz, P.M., Gottstein, B., Liu, Y.-H., Chai,
2000. Taenia solium : molecular cloning and serological J.-J., Abdel-Hafez, S.A., Altintas, N., Joshi, D.D., Light-
evaluation of 14- and 18-kDa related, diagnostic antigens. owlers, M.W., Pawlowski, Z.S., 1999a. Differential sero-
J. Parasitol. 86, 1001 −/1007. diagnosis for cystic and alveolar echinococcosis using
Helbig, M., Frosch, P., Kern, P., Frosch, M., 1993. Serological fractions of Echinococcus granulosus cyst fluid (antigen B)
differentiation between cystic and alveolar echinococcosis and E. multilocularis protoscolex (Em18). Am. J. Trop.
by use of recombinant larval antigens. J. Clin. Microbiol. Med. Hyg. 60, 188 −/192.
31, 3211 −/3215. Ito, A., Nakao, M., Ito, Y., Yuzawa, I., Morishima, H.,
Hubert, K., Cordero, E., Frosch, M., Solomon, F., 1999. Kawano, N., Fujii, K., 1999b. Neurocysticercosis case
Activities of the EM10 protein from Echinococcus multi- with a single cyst in the brain showing dramatic drop in
locularis in cultured mammalian cells demonstrate func- specific antibody titers within 1 year after curative surgical
tional relationships to ERM family members. Cell Motil. resection. Parasitol. Int. 48, 95 −/99.
Cytosketeton 42, 178 −/188. Ito, A., Nakao, M., Sako, Y., Nakaya, K., 2000. Neurocysti-
Ioppolo, S., Notargiacomo, S., Profumo, E., Franchi, C., cercosis and echinococcosis in Asia: recent advances in the
Ortona, E., Rigano, R., Siracusano, A., 1996. Immunolo- establishment of highly reliable differential serodiagnosis for
gical responses to antigen B from Echinococcus granulosus international collaboration. SE Asian J. Trop. Med. Pub.
cyst fluid in hydatid patients. Parasite Immunol. 18, 571 −/ Health 31 (Suppl 1), 16 −/20.
578. Ito, A., Sako, Y., Ishikawa, Y., Nakao, M., Nakaya, K., 2001a.
Ito, A., 1999. Differential serodiagnosis for larval cestode
Differential serodiagnosis of cystic and alveolar echinococ-
infections: cystic echinococcosis, alveolar echinococcosis and
cosis using native and recobinant antigens in Japan. SE
neurocysticercosis. Arch. Int. Hidatidosis 33, 165 −/170. Ito, A.,
Asian J. Trop. Med. Pub. Health 32 (Suppl 2), 111 −/115.
2001. Introduction of ongoing research projects on
Ito, A., Kanazawa, T., Nakao, M., Sako, Y., Ishikawa, Y.,
echinococcosis at Asahikawa Medical College and some
Nakaya, K., 2001b. Comparison of the antigenicity of
comments on the surveillance, prevention and control of
protoscoleces and microvesicles of Echinococcus multilocu-
alveolar echinococcosis in Japan. Hokkaido J. Med. Sci. 76,
laris prepared from rats. J. Helminthol. 75, 355 −/358.
3 −/8 (in Japanese with English summary).
Ito, A., 2002. Cry wolf. Trends Parasitol. 18, 47 −48. Ito, A., Urbani, C., Vuitton, D.A., Heath, D.D., Craig, P.S.,
Ito, A., Nakao, M., Kutsumi, H., Lightowlers, M.W., Itoh, M., Feng, Z., Qiu, J.M., Schantz, P.M., 2002a. Control of
Sato, S., 1993. Serodiagnosis of alveolar hydatid disease by echinococcosis and cysticercosis: a pulbic health challenge
Western blotting. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 170 −/ to international cooperation in China. Acta Trop., in press.
172. Ito, A., Sako, Y., Ishikawa, Y., Nakao, M., Nakaya, K.,
Ito, A., Schantz, P.M., Wilson, J.F., 1995. Em18, a new Yamasaki, H., 2002b. Differential serodiagnosis for alveolar
serodiagnostic marker for differentiation of active and echinococcosis by Em18-immunoblot and Em18-ELISA in
inactive cases of alveolar hydatid disease. Am. J. Trop. Japan and China. In: Craig, P.S., Pawlowski, Z.S. (Eds.),
Med. Hyg. 52, 41 −/44. Cestode Zoonoses: An Emergent and Global Problem. IOS
Ito, A., Ma, L., Itoh, M., Cho, S.Y., Kong, Y., Kang, S.Y., Press, Amsterdam, pp. 147 −/155.
Horii, T., Pang, X.L., Okamoto, M., Yamashita, T., Light- Ito, A., Xiao, N., Liance, M., Sato, M.O., Sako, Y., Mamuti,
owlers, M.W., Wang, X.G., Liu, Y.H., 1997. Immunodiag- W., Ishikawa, Y., Nakao, M., Yamasaki, H., Nakaya, K.,
nosis of alveolar echinococcosis by enzyme-linked Bardonnet, K., Bresson-Hadni, S., Vuitton, D.A., 2002c.
immunosorbent assay using a partially purified Em18/16 Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay
enriched fraction. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 4, 57 −/59. (ELISA) with affinity-purified Em18 and an ELISA with
Ito, A., Ma, L., Paul, M., Stefaniak, J., Pawlowski, Z.S., 1998a. recombinant Em18 for differential diagnosis of alveolar
Evaluation of Em18-, Em16-, Antigen B-Western blots, echinococcosis: results of a blind test. J. Clin. Microbiol. 40,
Em2plus-ELISA and four other tests for differential sero- in press.
diagnosis of alveolar and cystic echinococcosis patients in Ito, A., Nakao, M., Okamoto, M., Sako, Y., Yamasaki, H.,
Poland. Parasitol. Int. 47, 95 −/99. 2002d. Mitochondrial DNA of Taenia solium : from basic to
Ito, A., Plancarte, A., Ma, L., Kong, Y., Flisser, A., Cho, S.-Y., applied science. In: Singh, G., Prabhakar, S. (Eds.), Taenia
Liu, Y.-H., Kamhawi, S., Lightowlers, M.W., Schantz, solium Cysticercosis: from Basic to Clinical Science. CABI
P.M., 1998b. Novel antigens for neurocysticercosis: simple Press, Oxon, pp. 47 −/55.
A. Ito et al. / Acta Tropica 85 (2003) 173 −/182 181

Ito, A., Putra, M.L., Subahar, R., Sato, M.O., Okamoto, M., Global Concern. Organisation Internationale des Epizoo-
Sako, Y., Nakao, M., Yamasaki, H., Nakaya, K., Craig, ties, Paris, pp. 20 −/71.
P.S., Margono, S.S., 2002e. Dogs as alternative intermediate Poretti, D., Felleisen, E., Grimm, F., Pfister, M., Teuscher, F.,
hosts of Taenia solium in Papua, Indonesia confirmed by Zuercher, C., Reichen, J., Gottstein, B., 1999. Differential
highly specific ELISA and immunoblot using native and immunodiagnosis between cystic hydatid disease and other
recombinant antigens and mitochondrial DNA analysis. J. cross-reactive pathologies. Am. J. Trop. Med. Hyg. 60,
Helminthol 76, 311 −/314. 193 −/198.
Jiang, L., Wen, H., Ito, A., 2001. Immunodiagnostic differ- Pozzuioli, R., Piantelli, M., Perucci, C., Arru, E., Musiani, P.,
entiation for alveolar and cystic echinococcosis using 1975. Isolation of the most immunoreactive antigens of
ELISA test with 18 kDa antigen extracted from Echinococ- Echinococcus granulosus from sheep hydatid fluid. J.
cus protoscoleces. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 95, 285 −/ Immunol. 115, 1459 −/1463.
288. Qiu, J.-M., Liu, F.-J., Wang, H., Ito, A., Schantz, P.M., 1999.
Kimura, M., Nakamura, T., Iwamoto, A., Nishimura, Y., A survey of hydatid disease (echinococcosis) in Tibetan
Egawa, T., Ito, A., 1999. Cystic echinococcosis in a populations in China: correlation of ultrasound and radi-
Jordanian patient: albendazole in a short-term immigrant. ologic imaging and serologic results. Arch. Int. Hidatidosis
J. Travel Med. 6, 249 −/253. 33, 211 −/213.
Leggatt, G.R., Yang, W., McManus, D.P., 1992. Serological Rodriguez-Canul, R., Allan, J.C., Fletes, C., Sutisna, I.P.,
evaluation of the 12 kDa subunit of antigen B in Echino- Kapti, I.N., Craig, P.S., 1997. Comparative evaluation of
coccus granulosus cyst fluid by immunoblot analysis. Trans. purified Taenia solium glycoproteins and crude metacestode
R. Soc. Trop. Med. Hyg. 86, 189 −/192. extracts by immunoblotting for the serodiagnosis of human
Liance, M., Janin, V., Bresson-Hadni, S., Vuitton, D.A., T. solium cysticercosis. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 4, 579 −/
Hourin, R., Piarroux, R., 2000. Immunodiagnosis of 582.
Echinococcus infections: confirmatory testing and species Sako, Y., Nakao, M., Ikejima, T., Piao, X.Z., Nakaya, K., Ito,
differentiation by a new commercial Western blot. J. Clin. A., 2000. Molecular characterization and diagnostic value
Microbiol. 38, 3718 −3721. of Taenia solium low-molecular-weight antigen genes. J.
Mamuti, W., Yamasaki, H., Sako, Y., Nakaya, K., Nakao, M., Clin. Microbiol. 38, 4439 −/4444.
Lightowlers, M.W., Ito, A., 2002. Usefulness of hydatid cyst Sako, Y., Nakao, M., Nakaya, K., Yamasaki, H., Gottstein, B.,
fluid of Echinococcus granulosus developed in mice with Lightowlers, M.W., Schantz, P.M., Ito, A., 2002. Alveolar
secondary infection for serodiagnosis of cystic echinococ- echinococcosis: characterization of diagnostic antigen Em18
cosis in humans. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 9, 573 −/576. and serological evaluation of recombinant Em18. J. Clin.
Minagawa, T., 1997. Survey of echinococcosis in Hokkaido and Microbiol. 40, 2760 −/2765.
measure against it. Hokkaido J. Med. Sci. 72, 569 −/581 (in Schantz, P.M., 1999. Echinococcosis: world distribution and
Japanese with English summary). prospects for control. Arch. Int. Hidatidosis 33, 230 −/237.
Minagawa, T., 1999. The reconsideration of natural history of Schantz, P.M., Wilkins, P.P., Tsang, V.C.W., 1998. Immigra-
echinococcosis at Rebun island. Hokkaido J. Med. Sci. 74, tion, imaging, and immunoblots: the emergence of neuro-
113 −/134 (in Japanese with English summary). cysticercosis as a significant public health problem. In:
Ohsaki, Y., Matsumoto, A., Miyamoto, K., Kondoh, N., Scheld, W.M., Craig, W.A., Hughes, J.M. (Eds.), Emerging
Araki, K., Ito, A., Kikuchi, K., 1999. Neurocysticercosis Disease 2. ASM Press, Washington, DC, pp. 213 −/242.
without detectable specific antibody. Internal Med. 38, 68 −/ Siles-Lucas, M., Gottstein, B., Felleisen, R.S., 1998. Identifica-
70. tion of a differentially expressed Echinococcus multilocularis
Ortona, E., Rigano, R., Margutti, P., Notargiacomo, S., protein Em6 potentially related to antigen 5 of Echinococcus
Ioppolo, S., Vaccari, S., Barca, S., Buttari, B., Profumo, granulosus . Parasite Immunol. 20, 473 −/481.
E., Teggi, A., Siracusano, A., 2000. Native and recombinant Subahar, R., Hamid, A., Purba, W., Wandra, T., Karma, C.,
antigens in the immunodiagnosis of human cystic echino- Sako, Y., Margono, S.S., Craig, P.S., Ito, A., 2001. Taenia
coccosis. Parasite Immunol. 22, 553 −/559. solium infection in Irian Jaya (West Papua), Indonesia: a
Parkhouse, R.E., Harrison, L.J., 1987. Cyst fluid and surface pilot serological survey of human and porcine cysticercosis
associated glycoprotein antigens of Taenia sp. metacese- in Jayawijaya District. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 95,
todes. Parasite Immunol. 9, 263 −/268. 388 −/390.
Pawlowski, Z.S., Eckert, J., Vuitton, D.A., Ammann, R.W., Takahashi, A., Yamaguchi, T., Inaba, T., 1986. A review of
Kern, P., Craig, P.S., Dar, K.F., De Rosa, F., Filice, C., multilocularis echinococcosis cases reported from Honshu,
Gottstein, B., Grimm, F., Macpherson, C.N.L., Sato, N., Japan, during a period from 1926 to 1984. Jpn. J. Parasitol.
Todorov, T., Uchino, J., von Sinner, W., Wen, H., 2001. 35, 95 −/107 (in Japanese with English summary).
Echinococcosis in humans: clinical aspects, diagnosis and Tsang, V.C., Brand, J.A., Boyer, A.E., 1989. An enzyme-linked
treatment. In: Eckert, J., Gemmell, M.A., Meslin, F.-X., immunoelectrotransfer blot assay and glycoprotein antigens
Pawlowski, Z.S. (Eds.), WHO/OIE Manual on Echinococ- for diagnosing human cysticercosis (Taenia solium ). J.
cosis in Humans and Animals: a Public Health Problem of Infect. Dis. 159, 50 −/59.
182 A. Ito et al. / Acta Tropica 85 (2003) 173 −/182

Wandra, T., Subahar, R., Simanjuntak, G.M., Margono, S.S., donesia, 1991 −/95. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 94, 46 −/
Suroso, T., Okamoto, M., Nakao, M., Sako, Y., Nakaya, 50.
K., Schantz, P.M., Ito, A., 2000. Resurgence of Yoshimura, K., 2000. A confirmation of fascioliasis for a case
cases of epileptic seizures and burns associated with reported as echinococcosis in October 1999 */Akita. In-
cysticercosis in Assologaima, Jayawijaya, Irian Jaya, In- fectious Agents Surveillance Report 21, 170 −/171 (in Japa-
nese).

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