“AÑO DEL DIÁLOGO Y

RECONCILIACIÓN NACIONAL”
UNIVERSIDAD SAN PEDRO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

PERFIL HEPÁTICO

“AÑO DEL DIÁLOGO Y

RECONCILIACIÓN NACIONAL”

UNIVERSIDAD SAN PEDRO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ALUMNOS:

 ALVARADO ALVA Yashira

 SEGURA CERNA Fernando

DOCENTE:

Q.F. CAMONES MALDONADO Rafael

ASIGNATURA:

Análisis Clínico

CICLO:

IX
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INDICE

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PERFIL HEPÁTICO

El hígado realiza diferentes funciones bioquímicas, sintéticas y excretoras. No solo las

pruebas bioquímicas pueden detectar la función global del hígado. Los valores anormales
de las pruebas de función hepática pueden ser causados por enfermedades no relacionadas
al hígado o pueden ser normales en pacientes que tienen enfermedad hepática avanzada.

La determinación de concentraciones séricas de enzimas hepáticas, tales como las

transaminasas, es frecuentemente usada para el monitoreo de efectos hepáticos
indeseados.

 Test de capacidad del hígado para transportar aniones orgánicos y metabolizar

drogas.
 Test que detectan lesión a los hepatocitos (integridad hepatocelular).
 Test de capacidad biosintética del hígado.

1) AMINOTRANSFERASAS

Son un excelente marcador de lesión hepatocelular (citólisis hepatocelular). La alanina

aminotransferasa (ALT o TGP) se encuentra principalmente en los hepatocitos(1), y ya
que se expresa en pequeñas cantidades en otros tejidos como los músculos o en el
corazón, se considera hepatoespecífica; sin embargo, esta especificidad no es absoluta,
pues pueden ocurrir elevaciones de ALT en otras condiciones, tales como las miopatías.
En menor proporción se encuentra actividad de ALT en el músculo esquelético, corazón,
riñón, páncreas y eritrocitos, esto en orden decreciente. La aspartato aminotransferasa
(AST o TGO) se encuentra en el hígado, miocardio, músculo esquelético, riñones,
cerebro, páncreas, pulmones, leucocitos y eritrocitos, en orden decreciente de
concentración.

La AST es menos sensitiva y específica para el hígado. ALT es exclusivamente

citoplasmática y, tanto la forma mitocondrial como la citoplasmática de AST se
encuentran en todas las células.

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2) FOSFATASA ALCALINA

En el hígado, la fosfatasa alcalina es encontrada histoquímicamente en el microvilli del

canalículo biliar y sobre la superficie sinusoidal de los hepatocitos. En el hueso, la enzima
está involucrada con la calcificación. La fosfatasa alcalina, involucrada en el transporte
de metabolitos a través de las membranas celulares, se encuentra en orden decreciente
de abundancia en la placenta, mucosa ileal, riñón, hueso e hígado. La vida media de la
isoenzima hepática es tres días y su clearance del suero es independiente de la
capacidad funcional del hígado o la permeabilidad de los ductos biliares. Valor referencial
de fosfatasa alcalina es 65–300 U/L.
Utilidad clínica: En enfermedad obstructiva hepática y en enfermedad metabólica osea,
asociada al incremento de la actividad osteoblastica.

2.1. SIGNIFICACION CLÍNICA

La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida en el organismo.
Hidroliza los monoésteres del ácido ortofosfórico en medio alcalino. En el adulto
proviene en parte del hígado (fracción termoestable) y en parte del hueso, sistema
reticuloendotelial y vascular (fracción termolábil), dando lugar a distintas isoenzimas.

La actividad sérica de fosfatasa alcalina ósea, en condiciones normales, alcanza su

mayor actividad en los niños en edad de crecimiento (llegando a triplicar los niveles
del adulto) debido a que esta isoenzima se localiza en los osteoblastos (relacionados
con la calcificación y formación de estructuras óseas). También es fisiológico el
aumento que se produce al final del primer trimestre del embarazo, a expensas de la
isoenzima placentaria que en este período alcanza niveles máximos
(aproximadamente el doble de los valores normales).
Entre las patologías que afectan la actividad sérica de fosfatasa alcalina, se pueden
citar: carcinomas metastásicos en hígado y en hueso (productores de enzima),
colestasis biliar, fenómenos osteoblásticos, trastornos de malabsorción
acompañados de lesiones ulcerosas (donde la deficiencia de vitamina D produce
osteomalacia con el consecuente aumento de fosfatasa alcalina ósea) e incluso
lesiones en vías de reparación tales como infarto agudo de miocardio, infarto
pulmonar o renal. (1)

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2.2. FUNDAMENTOS DEL MÉTODO

La fosfatasa alcalina desdobla al fenilfosfato de sodio en medio alcalino tamponado

con aminometil propanol (AMP). El fenol liberado se determina por reacción con 4-
amino-antipirina y ferricianuro como agente oxidante. El color desarrollado es
directamente proporcional a la actividad enzimática y se mide a 520 nm. (1)

2.3. REACTIVOS PROVISTOS

A. Reactivo A: 4-aminoantipirina 29 mmol/l en solución de aminometil propanol 3

mol/l.
B. Reactivo B: fenilfosfato de sodio, 1,4 mmoles.
C. Reactivo C: ferricianuro de potasio, 10 mmol/l.
D. S. Standard: solución de fenol equivalente a 200 UI/l.

2.4. MUESTRA
 Suero
a) Recolección: usar únicamente suero fresco, no hemolizado.
b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulantes producen
inhibición de la reacción en un 50 a 90%.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si la determinación no
puede ser efectuada en un plazo de 6 horas, la muestra debe conservarse
congelada (- 4oC) ya que a temperatura ambiente o en refrigerador (2-10oC)
hay aumento de actividad de 30 a 50% en 24 horas. (1)

2.5. MATERIAL REQUERIDO

 Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
 Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
 Tubos.
 Probeta.
 Baño de agua a 37oC.
 Reloj o timer.

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2.6. CONDICIONES DE REACCION

 Longitud de onda: 520 nm en espectrofotómetro o en fotocolorímetro con filtro
verde (500-550 nm).
 Temperatura de reacción: 37Oc
 Tiempo de reacción: 10 minutos
 Volumen de muestra: 50 ul
 Volumen final de reacción: 3,05 ml

2.7. PROCEDIMIENTO

2.8. ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL

El color de la reacción es estable durante 30 minutos por lo que la absorbancia debe
ser leída dentro de ese lapso. (1)

2.9. CALCULO DE LOS RESULTADOS

Fosfatasa alcalina (UI/l) = factor x (D-B) donde:

2.10. VALORES DE REFERENCIA

 Adultos: 68 - 240 UI/l
 Niños: 100 - 400 UI/l

Nota: Debido al proceso osteoblástico, la isoenzima ósea se encuentra aumentada

en la niñez y adolescencia (hasta los 18 años aproximadamente), proporcionando
valores de fosfatasa alcalina más elevados que en los adultos, habiéndose

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observado valores de hasta 700 UI/l en niños sin patología que justificara un origen
extraóseo de la enzima. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia. (1)

3) BILIRRUBINA

La bilirrubina es un producto derivado del metabolismo de la hemoglobina en el Sistema

Retículo Endotelial. Los hematíes al degradarse liberan la hemoglobina que se
metabolizada a dos moléculas el grupo hemo y el grupo globina, el grupo hemo se
transforma en biliverdina y está en bilirrubina a la cual se le llama no conjugada o
indirecta. Al pasar por el hígado esta bilirrubina se conjuga con ácido glucurónido
transformándose en bilirrubina conjugada o directa.

El hígado segrega esta bilirrubina directa a través de las vías biliares hacia el intestino,
al metabolizarse por la flora intestinal se convierte en urobilinas que dan el color marrón
a las heces. Parte de estas urobilinas se reabsorben y pueden aparecer en la orina en
forma de urobilinógeno. Cuando se eleva la bilirrubina, la piel y los tejidos toman un color
amarillo que se llama ictericia.

Según cual sea el origen de la bilirrubina elevada podemos saber si es un problema de

hígado (elevación de la bilirrubina no conjugada) o de las vías biliares (elevación de la
bilirrubina conjugada).Cuando se realiza un análisis de rutina se mide la bilirrubina total
(directa más indirecta), el 70 al 85 %corresponde a la bilirrubina no conjugada o indirecta.

 El Sistema Retículo Endotelial está formado por la unión de macrófagos a un conjunto

de células formado por monocitos, histocitos, fibroblastos, células endoteliales y
reticulares), móviles y tisulares fijos.

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 Síntesis de Bilirrubina Indirecta: en la sangre

 Síntesis de Bilirrubina Directa: en el hígado

3.1. SIGNIFICACION CLINICA

La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina, es captada por el

hígado para su conjugación y excreción en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares
u obstrucciones biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias. La eritroblastosis fetal
o anemia hemolítica del recién nacido es una patología provocada por
incompatibilidad materno fetal en la que se produce una destrucción excesiva de
glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la bilirrubina sérica con el
consecuente riesgo de difusión del pigmento al sistema nervioso central, por lo que
la determinación de la bilirrubina en estos niños recién nacidos resulta sumamente
importante. (2)

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3.2. FUNDAMENTOS DEL METODO

La bilirrubina reacciona específicamente con el ácido sulfanílico diazotado
produciendo un pigmento color rojo-violáceo (azobilirrubina) que se mide
fotocolorimétricamente a 530 nm.
Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazorreactivo,
la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un desarrollador
acuoso (Reactivo A) que posibilite su reacción. De forma tal que, para que reaccione
la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) presente en la muestra, debe
agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción. (2)

3.3. REACTIVOS PROVISTOS

A. Reactivo A: solución acuosa de benzoato de cafeína 0,13 mol/l, tamponada y
estabilizada.
B. Reactivo B: solución de ácido sulfanílico 29 mmol/l y ácido clorhídrico 0,17 mol/l.
C. Reactivo C: solución de nitrito de sodio 0,07 mol/l.

3.4. MUESTRA
Suero, plasma o líquido amniótico
 Recolección: obtener suero o plasma de la manera usual. Proteger de la luz natural
o artificial, envolviendo el tubo con papel negro. También es posible realizar la
determinación en líquido amniótico.
 Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma, debe usarse heparina
para su obtención.
 Sustancias interferentes conocidas: hemólisis moderada o intensa inhibe la
reacción directa, obteniéndose valores de bilirrubina total falsamente aumentados.
 Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la muestra debe ser
preferentemente fresca. En caso de no efectuarse el ensayo en el momento, el suero
debe conservarse hasta 48 horas en el refrigerador (2-10oC) y la sangre entera no
más de 24 horas en refrigerador o 12 horas a temperatura ambiente. El líquido
amniótico es conveniente mantenerlo congelado hasta el momento de efectuar el
ensayo. (2)
La acción de la luz es capaz de destruir en una hora hasta un 50% de la bilirrubina
presente en la muestra. Es por tal motivo que debe protegerse cuidadosamente. (2)

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3.5. MATERIAL REQUERIDO

 Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
 Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
 Frasco de vidrio color caramelo.
 Tubos.
 Reloj o timer.

3.6. CONDICIONES DE REACCION

 Longitud de onda: 530 nm en espectrofotómetro o 520-550 nm en
fotocolorímetro con filtro verde.
 Temperatura de reacción: temperatura ambiente
 Tiempo de reacción: 5 minutos
 Volumen de muestra: 200 ul
 Volumen final de reacción: 2,9 ml

3.7. PROCEDIMIENTO

Mezclar de inmediato cada tubo por inversión. Luego de 5 minutos, leer en

espectrofotómetro a 530 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (520-550 nm),
llevando el aparato a cero con agua destilada. Las lecturas pueden efectuarse entre
4 y 15 minutos, excepto para la bilirrubina directa que debe leerse a los 5 minutos
exactos. Si se lee antes, habrá subvaloración de los resultados por reacción
incompleta. Si se lee después, habrá sobrevaloración porque comienza a reaccionar
la bilirrubina libre. (2)

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Sueros ictéricos: debe emplearse la técnica descripta pero con menores cantidades
de muestra, de acuerdo a la severidad de la ictericia. De tal forma, en caso de ictericia
moderada se usarán 50 ul de suero mientras que frente a una ictericia intensa se
requieren sólo 20 ul. Multiplicar los resultados obtenidos por 3,79 y 9,38
respectivamente. (2)

3.8. VALORES DE REFERENCIA

Bilirrubina en suero o plasma
 Adultos:
Directa: hasta 2 mg/l
Total: hasta 10 mg/l

 Recién nacidos:

Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el nivel promedio del adulto al mes
del nacimiento. En los prematuros, los niveles de bilirrubina tardan más en alcanzar la
normalidad, dependiendo del grado de inmadurez hepática.

X. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

(1) Viviana E. Cétola determinación de la actividad de fosfatasa alcalina en suero

wiener Laboratorios S.A.I.C. Riobamba 2000 Rosario - Argentina

(2) Viviana E. Cétola determinación de bilirrubina directa y total wiener Laboratorios

S.A.I.C. Riobamba 2000 Rosario – Argentina

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Hay personas que consideran que defender los puestos de trabajo de la gente es prioritario
confrontado con la salud de las personas…
Puede ser razonable defender un trabajo digno que tiene una utilidad razonable (hasta 25%
máximo y menor % si hay mayor volumen o incremento de costo unitario) que permite
Mantener adecuadamente el servicio, pues si eso es absolutamente razonable y justo, además
que el servicio útil difícilmente desaparece, precisamente por su utilidad.
Sin embargo pretender defender ganancias por encima de éste porcentaje es INACEPTABLE!!!!
Observen la utilidad económica[i] que rinde la Colistina 50 mg/ml/2ml/ (antibiótico que en casos de multi
resistencia antibiótica se usa en hospitales de alta complejidad a pesar de no estar en el PENUME y con
autorización expresa del Comité farmacoterapéutico previa revisión exhaustiva de la historia clínica del
paciente) a la distribuidora que lo trae al país 1733.7%!!!!!
Y observen la utilidad que rinde la doxorubicina 20 mg/10 ml (antineoplásico) a la distribuidora que lo
trae al país, 616.7%!!!!!!
Ese tipo de ganancias tratándose de salud son INACEPTABLES!!!!!!!
El Estado peruano puede solucionar esto! Con facilidad!!!! Siempre que haya voluntad política!!!!
ACCESO UNIVERSAL A MEDICAMENTOS ESENCIALES!!!
COMENCEMOS LA UNIVERSALIZACION POR LOS MEDICAMENTOS ESENCIALES!!!! Y
NECESARIOS!!!!!
EL ESTADO DEBE COMPRAR TODO PARA TODOS Y SERA MAS EFICIENTE EN EL
GASTO!!!!!
SOMOS UN PAIS DIGNO!!!!!
SOLO DEBEMOS HACER LO CORRECTO PARA NUESTRA GENTE!!!!!
LA SALUD NO ES UN NEGOCIO… LA FARMACIA NO ES UN NEGOCIO!!!!!
COMENCEMOS LA UNIVERSALIZACION DE LA SALUD, POR EL ACCESO UNIVERSAL A
LOS MEDICAMENTOS ESENCIALES!!!! NECESARIOS!!!!!
Y NOS SALDRÍA MÁS BARATO DE LO QUE AHORA PAGAMOS PARA MENOS
PERUANOS!!!!!!

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