c UNI~RSIDAD

AUT~NOMAMETROPOLITANA
c
Y
UNIDAD IZTAPALAPA

DIWSIÓN CIENCIAS BÁSICAS Y DE LA SALUD

SEMINARIO DE IWESTIGACI~N
c

ESTUDIOS PRELIMINARES PARA EL ESTABLECIMIENTO DE

UNA COLONIA DE Ambystoma mexicanum EN LABORATORIO.

h
IU

..
h

h
.
Asesor: ARMANDO FERREIRA NUN0
..”

Presentado por:

JUAN RICARDO CRUZ A UÑA

ENERO I993
c
c ESTUDIOS PRELIMINARES PARA EL ESTABLECMIENTO DE UNA
COLONlA DE Ambystoma mexicanum EN LABORA TOMO.
f EN LA UAM-IZTAPALAPA

I
I
II
OBJETIVO GENERAL.:

I
I - Recopilar y poner en práctica los conocimientos que existan sobre el axolote
mexicano Ambystoma mexicanurn ( S b ,1769)para poder establecer una colonia bajo
c,
L condiciones de laboratorio en la UAMIztapalapa.
c
Ir

OBJETIVOS PARTICULARES:

- Capturar o comprar ejemplares vivos de Ambystoma mexicanurn. .

-Establecer las condiciones básicas necesariaspara su menimiento en laboratorio.

- Obtener la reproducción de Ambystoma mexicanum ya sea de manera natural o

artificial.

- Establecer algunos patrones reproductivos básicos de Ambystoma mexicanurn

obtenidos V e r t i l i w jecundiM, porcentaje de eclosión graab de madurez gonadal).

- Conocer los requerimientos básicos para su manutención en dverentes etapas de

desarrollo.
m
.u

h
- Lograr obtener al menos un ciclo completo.
.c

METAS

-MEDIANTE ESTE ESTUDIO Y OTROS POSTERIORES PODER ESTABLECER EN

UN PLAZO MEDIANO UNA COLONIA AUTOSOSTmIBLE DE (Ambystoma
mexicanum):

- PROPONER ESTRATEGIAS DE CONSERVACION PARA UN POSIBLE

REPOBLAMIENTO EN SUMWIO ORIGINAL.

HIP~TESIS

- SI SE ESTABLECEN LAS CONDICIONES OPTIMS PARA EL MANTENIMIENTO

Y MADURACION GONADAL DE Ambystoma mexicamrm, ENTONCES SE PODRA
LOGRAR SU REPRODUCCION Y SI SE CONOCEN SUS REQUERLMIENTOS
NUTRICIONALES PARA CADA ETAPA DE DESARROLLO ENTONCES DE PODRA
LOGRAR SU CRECIMIENTO HASTA COMPLETAR UN CICLO.
c
c
México esta considerado dentro de los p o s paises megabiaiiversos, sin
embargo el conocimiento biologico, ecologico que se tiene de su fauna es excipiente.

De acuerdo con el estudios realizado por Ticul-Alvarez (I 99I), la anfibiofana

mexicana es, en comparación con los otros grupos de vertebrados, bastante pobre en
especies, p e s t o que apenas se conocen algo nuis de 280. Sin embargo, al comparar
G este número con las especies de anfibios que existen en otros países, resulu que es
c proporcionalmente bastante eleva&. Por ejemplo, de las I8 familias de anjibios que

c
hay en América, I2 de e l h , que corresponden al 66%. se encuentran representadas en
territorio mexicano. Lo anterior se debe, en gran mea%, a la geografh, orografí y
c variedad de climas que existe en nuestropaís.

c De las I8 familias que hay en América, la de los Ambystómidos se caracteriza

por localizarse exclusivamente en la zona norte del continente, ya que sus cuatro
géneros se distribuyen desde el sur de Alaska hasta México (Barnes, 1987).

En México se conocen alrededor de 19* especies del género Ambystoma los

c cuales se distribuyen en la Mesa Central, desde el estado de Chihuahua hasta Puebla y
que corresponde a los límites de la region neártica de América del Norte ( B r d n ,
1989). Entre estas especies destacan el Ambystoma schmidti,, de 6cm. de longitud, que
se encuentra al este de San Martin, en el Estado de México; el Axolote lacustre,
Ambystoma laastris, de 35cm. de largo, que se localiza en el Lago de Zumpango; el
Axolote de Velaxo, Ambystoma velasci muy cormin el los Lagos de la Altiplanicie
mexicana (Puebla, México, etc.); el Axolote rosado, Ambystoma rosaseum, que vive en
Mojárachic, Chihuahua; el Axolote de las salinas9Ambystoma subsalsum, que vive en
las aguas salobres de la hguna de Alchichica, Puebla; el Axolote tigre, Ambystoma
tigrinium que vive de& el centro de Nebraska hasta el noreste de México, el cual es el
Ambystomido con más amplia distn'bución,y del que se cree que surgieron otros tipos
de Axolotes con formas semejantes, como es el caso de Ambystoma mexicanum o
Axolote mexicano. (Cendrero, 1972).

Los Anfibios del género Ambystoma se caracterizan por presentar el fenómeno

de la neotenia, que es la capacidad que tienen algunos organismos para reproducirse
c u d aún conservan una organización nuis o menos larvaria o juvenil (Grassé,
1978). En los raielos los principales cambios que se presentan h a n t e la
metamorfosiss,son la desaparición de las branquias tanto externas como internasy su
sustitución progresiva por pulmones; la maijicación de la piel y en algunos casos la
pérdida de la aleta caudal, (Grassé, 1978). Teniendo en cuenta lo anterior el
Ambystoma mexicanum es un claro ejemplo de especie neoténica facultativa (Barnes,
1987) y que además es endémica del Valle de México, (Armstrong, et al. 1989).

*Se tomó un criterio conservacionista diversos autores señalan solo17 sp. de

ambystómidospara Mexico

Ambystoma schmidti = A. teumum (Nussbaum, 1989, J. Herp. 23: 78-79),

I.-

Ambystoma teumum no ocurre en México,

 AI Ambysioma mexicanum se le ha &ab el nombre vernáculo de “Ajolote”,
palabra que proviene del mihail “Axolotl”,cuyo signijicado aún no esta bien &@nido
y que podría ser monstruo del lago, perro de agua o gemelo acuático (Smith, 1989).
Esta saknnandra llega al medir 25 cm. de largo y se dyerencia de los demás
Ambysiómidos en que su lengua es r e h d a d a , akzrgada, y entera, libre solamente en
su circunferencia; tiene una sola hilera de dientes transversalesformando una curva en
arco o una llave en los extremos, de la cual se observan los orijicios nasales
posteriores; su glándula parótida es larga, poco saliente, pero recorrida en tala su
longiiud su longitud patrón por un surco que sigue la dirección de la hendidura de la
boca. Sus patas son pequeñas, no palme&, provistas de cuatro debs en las
extremidades delanierasy cinco en las traseras. Sus debs son delgados, disiintos, bien
separados, aunque corios. Su piel es lisa, con surcos transversales en losflancos, que
son rehnabs. Su cola es corta, gruesa de su base, pero comprimida sobre todo hacia
su tercio terminal; su coloración es par& vercácsca y su cuerpo es rechoncho. La
coloración de las larvas es basianie clara, de verde oliva a amarillo verabso, que con el
transcurso del tiempo se va haciendo más obscura, (Herrera, 1889).

ANTECEDENTES

En la excelenie revisión bibliográ@ca realizada por Smith et al. (1971),

denominacía ‘Xnálisis de la Literaiura on the mexican Axolotl” se mencionan los
siguientes aniecedenies:

‘‘Laprimerareferencia impresa sobre el Axolotl apareció en el trabajo de

Ximénes (1615), seguida por los irabajos de Nieremberg (1635)y Jusionus
(1639). Estos tres primeros trabajosfueron la base para la publicación post
moriem de Hernádz en I649 quien hizo una descripción amplia del Axoloil
basada en los apuntes de campo que realizó durante sus viajes por el Centro de
México de I570 a 1577. Por estas mismas épocas se difunaYó el papel que
representó el Axolotl en la vi& cotidiana de los aztecas en iiempos de Coriés,
por la traduccióndel Cáíice Floreniino (Mahidy Vaticano) al español por
Fray Bemardino de Sahgún, en el período de 1558 a 1577. D e p é s de esias
publicacionespasa un largo período de tiempo en el que no se regisiran
trabajos sobre el Axolotl. En I863 llegan al Museo de Hisioria Natural de
Park los primeros 34 organismos vivos procedentes de México, donde se les
aclimaiay reproduce; este aconiecimienio causo gran adniración entre los
naturalistasde la época, ya que consi&raron al Axoloil como un animal raro,
exóticoY. muy interesante. A pariir de este acontecimiento, en 1865 comienza a
surgir un auge por el esrudio de e-stosorganismos en cautiverio, destacnndo los
aspectos sobresalientesy biológicosde la especie.
A l p 0 del iiernpo de esos 34 organismos iniciales sólo sobrevivieron 6 (5
machos negros y I hembra albina) número que fue incrementado después por
la donación de algunos Axoloies por parte del Museo de Mehedin @umeril,
1870). Dumeril en 1872, escribe que ya para esa época existían colonias de
Ambystoma mexicanum en Inglaierra, I r h d a , Italia (uilán y Nápoles),
H o l d , Bélgica, Suiza, Alemania (Bavariay Prussia), Rusia y Suecia.
 Subsecuentemenie llegó a otrospaíses como: Australia, Nueva Z e l d ,
E. U., Polonia, C&, eic. Para noviembre de I886 miles de ajolotesfueron
Astribuidos a Institutos de Investigación en toda Europa. Debido a la rápida
adquisición de ejemplares de Axolotl en el mundo, la actividad científica no se
ha deienidoy sigue aún en nuestros días”.

Smith et al. (1971). luego de analizar las publicaciones de América y de Europa

que se habían hecho sobre este animal hasta ese año, menciona que existían 3311
libros y publicaciones sobre el Ambysioma mexicanum, desgloshdose de la siguiente
forma: 830 trabajos sobre embriología, 328 sobre regeneración, 259 sobre
meiamor$osis, I69 de endocrinología, I56 sobre su cultivo, I34 sobre radiación y I18
sobre transplantes.

Su cultivo en acuarios ha sido una actividad muy poplar, debido a su

susceptibilidad para la propagacióny experimentación en laboraiorio.

La Journal Wochens Chrif~y la Blditer for Aquarien ha publicado una gran

cantidad de artículos sobre cui-, tratamientoy enferme&s y hábitos del Axolotl,
existen alrededor de 156publicacionesserias sobre su cultivo de las cuales a excepción
de 6 publicaciones realiza& en E. U., t& las demásfueron realiza& en Alemania.

En I989 Armstrong ei al dio a conocer al público su libro Developmental

Biology of the Axolotl, que es una recopilación sobre las investigaciones realiza&
sobre el Axolotl hasta ese año.

JUSTIFICAC Z ~ N

Al Ambystoma mexicanum se le ha llegado ha considerar como el animal

mexicano más importantey másfmoso en el mundo entero (Smith et al. 1971), además
de formar parie de la mitología y de las costumbres culinarias del México aniiguo
perrera, 1889). Cosiumbre que aún en nuestros días se conserva en algunospequeños
lugares de nuestropais (Llamas, 1935).

El Ambysioma mexicanum es un animal nativo, endémico de los canales de

Xochimilco (Armstrong. 1989), que en el pasado gozaba de una más amplia
distribución, sin embdrgo, su actual distribución se encuentra restringida a unos pocos
canales libres de la presencia humana y de su conlaminación, misma que ha hecho
estragos en la población en las últimas décadas a tal grado que a partir del I7 de mayo
de 1991, la normaiividad mexiuma coloca al Ambysioma mexicanum en el listado de
especies “raras”,amenazadas y en peligro de exiinción. (Diario Oficia.!).
 En algunos países el Axolote se utiliza como un animal de experimentación con
II tal frecuencia como lo puede ser un ratón, una rana o un conejillo de indias, es a tal
c grado la magnitud de la producción de este organisno que incluso se v e d a
instituciones de investigación, a escuelas o incluso a acuarios, con una gran wieahd
.In de característicasgenotbicas y fenotípicas.
c
c.
Es por estas razones que resulta p r d j i c o pensar que mientras en el
c extranjero existen casi un ciento de colonias de estos organisnos, en donde el problema
de la reproducción en cautiverio es un asunto casi irrisible, en México su pals de
m origen, no se cuente ni con una sola colonia autosostenible,y aunado a este problema
.l

c
se sume otro más grande, su extinción.
cr

a
c ME TO DO LOG^^
,c,
cr
Durante los primeros días del proyecto, se efectuará una revisión bibliográfica
intensiva sobre la información relaciona& con el axolote Ambystoma mexicanurn,
principlmente de aquellos aspectos relacionados con su mantenimientoy reproducción
en acuarios. Se empezará a trabajar con la información disponible en México y se
m&án solicitar al extranjeroaquellos articulos sobresalientes al respecto.

Se obtendrán los primeros organismos vivos de Ambystoma mexicanum de ser

posible en mercados públicos y si no se puede, se recolectarán en su medio natural
realizandopara ello los trámites necesarios con las autoriddes correspondientes. Los
organismos que se obtengan serán transportados al laboratorio S-335 del Área de
Psiconeuroendocrinología de la UAMI donde serán someti& a cuarentena y a un
m h
‘L tratamientopara prevenir enfermeddes. Para ello se colocarán en j a u h individuales
ah
de 10 1. c/u con aireación y temperatura controlah si así lo requiere su salud Así
~* mismo, se les dará un baño de azul de metileno, verde malaquita, sal común,
I C pergamanato de potasio, anfibióticos en concentracionesy combinaciones variables de
c
acuerdo con el tipo de agente infeccioso que manifiesten. Los animales que fallezcan
serán regmtrds y conservados enformo1al 10%. Dos vecespor semana, durante esta
etapa se les cambiará el agua de h tinas y se les dará una alimentación a base de
hígado de res, complementada con alimento natural, como son pulgas de agua,
artemia, tubifex y peces.

m
I
Una vez que los animales muestren buen estado de salud, serán pesados,
medihs, sexados e identflcados y serán colocados en peceras a una temperatura de
20+/-3T, pH de 7, fotoperíodo natural aireacióny filtro de caja o biológico continuo,
h
.*
diariamente a lo largo del experimento se registrarán en una bitiícora todos los datos
anteriormente señalados, así como su comportamiento.

rh

h
.”
 A partir del mes de enero (mes del año en el que normalmente se reproducen),
los organismos serán evaluados en relación a su grado de madurez tomando en cuenta
r aspectos externosy conhuctuales y se les colocará en parejas dentro de acuarios de 70
litros de ccy>aCiw con dimensiones de 60x40x40 cm., provistos con unfirrzo biolOgrco
y colocados en un lugar poco iluminado (íUatz, 1979). Durante este período se
vigilarán y registrará constantemente su comportamiento sexual así como los datos de
temperatura,pH y amonio del acuario,

Una vez que las parejas empiecen a mostrar signos de actividad sexual (durante
los primeros 20 d h del mes de enero), de no ser así se les adninistrarán 0.2 U1 de
Gonadotrofina Coriónica por hembra, se les sacará fotografms y un video de su
comportamiento hasta que ocurra lafecuruhción y el desove.

Una vez ocurrido esto, se establecerá una relación de los pesos de las hembras
c antes y después del desove, el mimero de huevos puestos por hembra, cuantos inician el
desarrollo embrionario, cuantos eclosionan y cuantos llegan a la etapa de crib. Así
mismo, se establecerá una relación entre la fertilidad y fecunddad entre las hembras
que desovaron naturalmente con respecto a las que lo hicieron de manera inducida.

h
c

im
I
 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

BUSQUWA
BIBUOGRAFICA '
ADQUISICI~NE
INSTALACION DE
EQUrPO Y
MATERIAL

~ W l j o DDE
o
ACUMTACION '
OBTENCION DE
REPRODUClVRES

REPRODUCCION

ECLOSION

RESULTADOS

ANAUSIS DE LOS
RESULTADOS

REmRTE FINAL
 RECURSOS HUMANOS

9-
c
Para llevar a cabo los objetivos del proyecto se contará con el siguiente
‘C personal.
h
Lr

Encargado del Proyecto

Hiakobiólogo Juan Ricardo Cruz Aviña

M. en C. Armando Ferreira Nuño.

Asesores

Dr. Gustavo Casas A d e u

.,”
. Mantenimiento de la colonia

4 estudiantes de Bachillerato (Preparatoria No. 5).

I estudiante de la U M - I (Servicio Social)
I supervisor o encargado de la colonia.

Lh
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n
 PRESUPUESTO

DESCRIPCION CANTIDAD VALOR WITAIUO TOTAL

(en miles de pesos)

ORGANISMOS Axolotes adultos I O0 5 500

ALIMENTO
Alimenio vivo $ $
100
Hígado de res $
$ I00

EQUIPO
Microscopio de disección I 5,000 5,000
Microscopio óptico I 5,000 5,000
Refrigerador I I,500 1,500
Balanza analíiica I 5,000 5,000
Balanza granaiaria I 150 I50
Báscub para pesar animales I I50 I50
Filiro de agua Turmix I 500 500
Medidor de pH I 300 300
Peceras (70 x 40 x 40 em.) I O 50 500
Tinas de plástico de IO I 30 IO 300
Tambospara almacenamienio
de agua declorinada 2 50 I O0
Anaqueles de lámina 2 I50 300
(2.00 x 1.80 m)
Gavetas 2 100 200

EQUIPO DE COMPUTO

computadora personal 386 I 3,000 3,000

Impresora Lasser Jet I 3,000 3,000
Caja de papel para imprimir i I 00 100
Caja de diskette 2 50 I O0
Cintapara impresora 5 20 I 00
 EQUIPO FO TOGRAFICO

P”
1” Cúmarafotogrújica de 35mm i 500 500
Accesorios de cámara 4 500 500
Cúmara de video I I , 500 I,500
Rollos de diapositivas I5 30 450

MATERIAL PARA LOS ACUARIOS

Rejillas de acrílico I0 50 500

(tipo cancel)
Filtros biológicos I0 20 200
Filtro de caja para agua 30 I0 300
Calentadorespara agua 30 I0 300
(de 5 a I 00 watts)
Cubetas de 20 litros 5 I0 50
Termómetrosde -10 a 100T 5 I5 75
Manguerapara agua I0 m 20 40
(de 3.5 cm diam)
Manguera para aire 50 m I 50
Calafateadora I I0 I0
Redes de mano I0 I0 I 00
Tubo de silicon para I0 I5 I50
pegar vidrio
F
.& Fibra de vidriopara 50 papeles 5 25
jiltro de caja
Carbón activadopara 50papetes 5 25
jiltro de caja
Piedras aireadoraspara 50 5 25
jiltro de caja

UATERIAL QrJIRURGICO E HISTOLOGIC0

rm
”” Estuche de disección 2 I00 200
*Fii Jeringas de 3, 5 y I 0 ml. 60 5 300
.” Charola de disección 2 30 60

,*-
.
Y

1.5

Y
 SUSTANCIAS Y REACTIVOS
i74
L Am1 de metileno 25 g 100 100
Alcohol absoluto * * I O0
Acetona * * 50
Acido acético I galón 45 45
Aciabpícrico I litro 50 50
,a-
u
Bemocaina * 50 50
Bicarbonato de sodio 500 g 40 40
Cloruro de sodio IO00 g 84 84
Cloruro de potasio 500 g 50 50
Cloruro de calcio 500 g 70 70
Cloramfenicol IO cqias 7 7
Formo1 * I O0 I O0
Hematoxiha 50 g I20 240
Eritromicina IO cajas 8 80
Tetraciclina * * I O0
Oxiietraciclina * * 50
Bemal * * 50
Iodo * * 50
Metano1 2 galones 80 80
Nitrato de calcio 500 g 50 50
Surfato cupric0 500 g 35 35
Surfatoferroso 500 g 43 43
Surfato de magnesio 500 g I20 I20
Gonadotropina coriónica IO I O0 I000
(vial con I0,OOO I¡/)
Progesterona IO * IO00
Estrógenos IO * IO00
Ertracios hipojsiarios 100 * 550
Tetosterona * * 300
u Tris-Bufler Base 500 g I O0 IO0
Proiactina * * 300
m
\Y H.Luieinizante * * 500
..
m Verde de malaauita
Permanganato de potasio
100 g
IO0 g
120
40
I20
40

..-.u
ch
Y

rih
Y

-,
Y.
.*.. I.,.

fl
CI

#* CRISTALEHA
c

Vasosde ppab de 60 ml 5 10 50
Vasos de ppdo de I O0 ml. 5 20 I O0
Vasosde ppab de 500 ml. 5 20 IO0
Probeta de IO ml 5 IO 50
Probeta de 50 ml 5 IO 50
Probeta de IO0 ml 5 20 100
Probeta de IO00 ml 5 30 I50
m
C I
Porta objetos (cajas) 5 5 25
ic
Cubreobjetos (cajas) 5 2 10
Frascos viales con tapa I O0 I I O0
Frascos con tapa de 500 ml 50 3 150
Frascos con tapa de 100 ml 50 5 250
Pipetas de I ml 5 3 15
Pipetas de 5 ml 5 5 25
Pipetas de IO ml 5 5 25

MATERIAL BIBLIOGRAFICO

Armstrong, J.B. y Malacinskz. (I 989). Developmental biology of the Axolotl.

Oxford University Press.

Smith, H.M. y Smith, R.B. (I971). Anabsis of the literature on the Mexican
Axolotl. En: Eric Lundberg, Sjnopsis of the Herpetofmna of México. Augusta W. V.
USA.
m.
4"

Suscripción a la revista Herpetológica.

I-

Fondopara solicitud de revistas en el SECOBI.

CII
- APOYO PARA CONGRESOS,ASOCIACIONES, CERTIFICACIONES Y SOBRETIROS

Y Inscripción a la Sociecúld Herpetoiótica Mexicana.

Inscripción a la American Herpetological Sociew.

Congreso anual de la Sociecúld Herpetológica Mexicana.

Gastos para envío, intercambioy cerrificación de ejemplares a una institución

extranjera.

Pago de sobretiros a una revista científica en donde se publiquen los resultaabs.

 INFRAESTRUCTURA

Para la realización del proyecto se cuenta con los laboratorios S-335 y S-330
del Departamento de Biología de la Reproducción dentro del Area
rlh
,L. Psiconeuroehrinologúi. En estos laboratorios se cuenta con algunas instrutneniosy
aparatos.

EQUIPO

Microscopio de disección I
Básculapara pesar animales I
Peceras (70 x 40 x 40 cm} 3
Tinas de p h t i c o de I O I I5
Tambospara almacenamiento I
h
u de agua declorinada
Anaqueles de Iámica I
(2.00 x I.80 m}
Gavetas I

MATERIAL PARA LOS ACUARIOS

Filtros biológicos 5
Filtros de caja para agua 5
Calentadorespara agua 5
(de 5 a IO0 watts}
Cubetas de 20 litros 2
Calafaieadora I
Redes de mano 3

MATERIAL QUIRURGICO E HISTOLOGIC0

Estuche de disección I

CRISTALERIA

Yasmdeppdode60ml
Vasos de ppdo de I O0 ml
Vasos de ppdo de 500 ml
Frascos con tapa de I000 ml
Pipeias de I ml
Pipetas de 5 mi
Pipeias de IO ml
F
CI COSTO DEL PROYECTO
i h
i.

Para la realización del proyecto se requerirá de un monto total de $50'000,000.00

(cincuenta millones de pesos).

"I
 BZBLZOGRAFú1

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