Aula 5 - Mutação gênica –

Mutações de pequenas escalas pode ser de uma simples troca de uma base com outra,
mutações relacionadas a lesões na estrutura química do DNA. Lesões moleculares mesmo cujo
métodos de diagnóstico são técnicas moleculares.

As mutações de grande escala são aquelas que atingem uma região grande cromossômica!

 Qual a definição de mutação gênica?

Alteração na sequência de DNA de um gene. E os eventos mutacionais podem ser forma

espontânea pois os eventos moleculares são complexos, replicação, transcrição,
tradução....são eventos passíveis de erros. Como somos todos expostos a agentes
mutagênicos, principalmente ambientais, a maioria delas são mutações induzidas. Andamos na
rua e estamos expostos, não tem como evitar a exposição à agentes mutagênicos.

 Mutação Gênica Espontânea

 Lesões espontâneas – Desaminação, Depurinação e Danos oxidativos de bases
 Desaminação – Perda de um grupamento amina.

Exemplo: A base citosina perde seu grupamento amina e vira uma uracila. Qual é o problema
disso? Pareamento!!! Esse problema vai acontecer principalmente quando a celular for replicar!
Enquanto a célula não estiver dividindo, isso não fará o menor problema. Porém, no momento
da replicação, essa citosina que sofreu desaminação, vira uma uracila e seu pareamento acaba
sendo com uma adenina e não uma guanina. E essa mutação vai ser passada para todas as
células pois elas sofrem divisão, até ter o sistema celular inteiro alterado. Isso gera uma mutação
pois a propriedade de pareamento muda!

 Depurinação – Perda do anel aromático das purinas, gerando morte

celular na hora. Na prática, inativa-se base.

A consequência disso depende de uma series de fatores, depende da posição, de qual gene é
afetado, de qual célula isso foi afetado. Por exemplo, se isso acontece na pele, a célula acaba
preferindo morrer pois a célula epitelial se renova muito rápido. Logo, essa mutação na pele não
tem um significado clínico tão importante assim justamente por ela se renovar, então eu não
preciso usar o meu sistema de reparo nesse caso, mato a célula de vez! Agora se isso acontece
em órgão cuja taxa de renovação é baixa, principalmente pulmão, coração, eu não vou induzir
morte celular, eu vou tentar consertar de alguma forma. E nesse conserto eu posso induzir uma
mutação. O sistema de reparo, quando o dano é muito grande, acaba adicionando qualquer
base para se evitar morte celular, esse reparo se chama SOS – coloco qualquer base ali pra evitar
morte! Isso acontece também pq muitas vezes a mutação é insignificante, ou seja, não gera
nada! (Mutação silenciosa)

Por que a célula tumoral fica imortal? Pois ela evita dois processos: Sistema de Reparo e a
Morte. Na célula carcinogênica, tem um reparo ineficaz, ou seja, vc não consegue consertar a
célula e também evita a morte. Logo, com isso, vai ter mutação pois a célula não consertou e
não matou, mutação!!!!!

 Danos oxidativos de base – o oxigênio em níveis elevados passa a ser

tóxico, inativando bases e gerando morte celular. ROS – Espécies
Reativas de Oxigênio.

O que é fagocitose? Como o macrófago efetivamente mata a célula? O macrófago engloba a

bactéria, por exemplo, por pseudópodes e faz uma endocitose. Porém, essa bactéria ainda tá
viva. Tendo do macrófago, forma-se um envoltório de lisossomos sob a bactéria, uma cápsula.
Essa cápsula chama-se de fagossomo. Agora, é realizada a digestão através da liberação de
espécie reativa de oxigênio, elevando a quantidade de oxigênio. Por isso que tem que
encapsular pois se não a sua célula morre também devido a espécie reativa de oxigênio.
Inserção de O2 na guanina, de OH na timina – problemas no pareamento! Inativação!

As espécies reativas de oxigênio são: superóxido, H2O2, OH, NO!

 Erros na replicação
 Trocas de bases – bases mal pareadas. C-A, G-T.
 INDEL – IN de inserção e DEL de deleção (de bases) MUTAÇÃO GRAVE!
Falha no sistema de replicação

Qual é a consequência da inserção de um nucleotídeo no meio de um gene? O código genético

é lido em códons. Por exemplo, eu tenho o seguinte segmento: ACC GGC ACG. A troca de uma
base por outra, eu chamo de mutação de ponto, pontual (alterações de um ou mais bases no
DNA dentro de um único gene). Pois eu só afeto um códon, os restantes dos códons não são
afetados. Agora, se ocorre uma inserção de um C, eu acabo mudando a proteína inteira, isso
chamamos de mudança de matriz de leitura. O segmento ia ficar assim: CAC CGG CAC G. Ou
seja, há um deslocamento, todos os códons acabam sendo afetados. A matriz inteira de leitura
é mudada! (Relação com a doença de Huntington)

O mesmo ocorre com a deleção, se eu deletar o G por exemplo, o segmento também irá se
deslocar e todos os códons serão afetados. Todo mundo dá um passo pro lado!

Consequência disso? Depende do local em que ocorrem no gene

Isso que são os Hot Spots, áreas de instabilidade genética, principalmente em zona de
repetição!

É comum no nosso genoma área com bases repetidas. Só que se essas áreas forem inseridas a
mais, gera mutação!! A pessoa do vídeo que ele passou em sala, que tinha distrofia muscular,
CGTCGTCGT, todo mundo tem essa sequência só que nós (normais) temos 10 disso, se a
pessoa tem algum tipo de sintoma deve ter umas 20/30 disso, se isso for passado pra sua
prole, essa área mutada, a prole vai ter mil, ou seja, deslocou completamente a proteína,
gerou uma mutação.

 Mutação Gênica Induzidas (Sempre associada ao câncer) – Agentes mutagênicos

(alteram os nucleotídeos) e mecanismo de reparo nem sempre eficiente!
 Substituição de uma base

Compostos químicos análogos às bases nitrogenadas normais  Podem ser incorporadas ao

DNA  Propriedades de pareamento diferentes  Mutações: Inserção incorreta de
nucleotídeos na replicação !

Principal exemplo é o Bromo (Br), a sua composição química é extremamente semelhante a do

nosso DNA. Se o bromo é incorporado, qual é o problema? Ele é análogo a timina. Problema
também no pareamento! Logo, colocar um bromo no lugar de uma timina, ele tem afinidade
complementar a (análogo complementar) guanina. (Mutágeno 5-bromouracil)

 Alteração de uma base

Mutágenos não são incorporados ao DNA  alteram uma base normal  Inserção do
grupamento alquila ao O na posição 6 da guanina!

- Mal pareamento com timina

- Mutação na próxima replicação

 Dano de uma base

A pessoa ingeriu aflatoxina B1 que tá na castanha do pará, e isso levou a quebra da minha base
transformando a num sítio apurínico, foi quebrada a base purina! Se eu quebro a base, a célula
morre. Se isso for numa célula que constantemente renova, deixa morrer!!! Porém, se for
numa célula com uma baixa taxa de renovação, parte para o método do SOS, adiciono uma
base qualquer!

Na mutação de ponto, a base não é inserida e sim trocada!

 Qual a consequência de uma mutação de ponto?

Depende do local em que acontece no gene. O gene tem na ponta 5´a enzima Cap, na 3´a
cauda poliA, promotor (TATAbox), íntrons e éxons! Se eu tiver uma mutação de ponto tanto na
5´quanto na 3´, cap ou poliA, a consequência disso é afetar na proteção, fico com o RNAm
tecnicamente instável, ele pode ser degradado. Logo, uma possível degradação do RNAm pois
ele está sem proteção!

Se essa mutação acontece no promotor? Fudeu total!! Uma das piores, pois, eu não consigo
iniciar a replicação pois é no promotor que a enzima reconhece aquilo como um gene! Não
reconhecimento do gene, posso ter uma proteína totalmente deletada!

Se tiver mutação nos íntrons? Bem, muitas vezes essa mutação possa ser justamente a não
retirada dos íntrons pois foi mudada a sequência, essa região de íntrons pode ter sido
transformada em éxons, afetando o Splicing!!!!

Se tiver mutação de ponto nos éxons? São as mais estudadas! Estão listadas abaixo:

 Mutação Silenciosa  A troca de bases não interferem pois o códons podem ser de
um mesmo aminoácido. Por exemplo, a troca da base G pelo A, no códon GCG 
GCA, ambos os códons são de um mesmo aminoácido, a Alanina. O código genético é
redundante! Qual a consequência disso? Nenhuma! Imagina, se vc faz um reparo SOS
e gera uma mutação silenciosa, ou seja, pode ser que ela não afete em nada sua
proteína.

Como uma mutação silenciosa afeta a proteína?

 Mutação Não Silenciosa  Troca de bases que mudam o aminoácido! (Anemia

Falciforme) Consequência é uma grave alteração na estrutura da proteína!

Se isso pode afetar o enovelamento da proteína? Vai depender se um aminoácido é parecido

com o outro ou não, a estrutura química.

 Mutação Sem Sentido  A troca de um nucleotídeo provoca o término da tradução.

Códon de parada! Ocorre um stop códon no meio da proteína! Consequência?
Término prematuro da tradução e proteína truncada e inativa!

IMPORTANTE: Quanto mais próximo da 5´ for a mutação de ponto de stop códon, pior é o
caso. E quanto mais próximo for da 3´ menos pior é o caso! Exemplo é a distrofia muscular de
Duchenne, tem diferentes sintomas. No vídeo passado em sala, mostrou a mulher que
apertava a mão e soltava bem de leve, o filho dela sofreu aborto. Logo, elas tem praticamente
a mesma patologia, só que uma tem sintoma leve (mutação mais próxima a 3´) e a outra foi
aborto (mutação próxima a 5´) e num outro caso pode ter tido paraplégica (mutação mais o
menos no meio) – Por que uma doença pode apresentar diferentes níveis ? Pois depende da
posição da mutação!!!!!!

 Mutação da Matriz de Leitura  Deslocamento de quadro de leitura! Coloca uma

base e todo mundo anda pra um lado! Explicada acima!