ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DEL LITORAL

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA VIDA

FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO BIOG1001

(Nombre del laboratorio donde se realiza la práctica)

LABORATORIO:

PRÁCTICA Nº 6 FECHA

NOMBRES
COMPLETOS:
PARALELO:
TEMA DE LA Extracción de ADN
PRÁCTICA:
VALOR DE LA CALIFICACIÓN
PRÁCTICA:

1.1 INTRODUCCIÓN:

Todo organismo vivo está formado por la ampliamente estudiada y conocida molécula de ADN.
Sabemos que los organismos vivos provienen de una única célula ancestral llamada LUCA. Este
hecho nos indica que entre organismos vivos compartimos mucho más de lo que nos podríamos
llegar a imaginar. Por ejemplo, los humanos compartimos el 50% de ADN con el plátano. Sin
embargo, el porcentaje del ADN que compartimos depende de cómo se mida. Si medimos
secuencias idénticas de pares de bases, entonces es bastante bajo, pero si nos fijamos en los genes
con funciones idénticas o similares entonces es de hecho el 50%. Algunas de las cosas para las
que estos genes codifican son de bioquímica básica: la replicación del ADN, la transcripción, la
traducción, el metabolismo de ADN (recombinación, reparación) y la regulación del ciclo celular
(mitosis). Este tipo de genes son nombrados por los biólogos como “secuencias conservadas”.

Para poder estudiar esta molécula con detalle se precisa su aislamiento de la célula, y para ello es
necesario un conjunto de materiales e instrumentos de laboratorio complejos. Lo que este
experimento pretende es un acercamiento simple a la técnica de extracción de ADN que se puede
realizar de manera sencilla con materiales de la vida cotidiana.

1.3 OBJETIVO GENERAL:

Extraer ADN de la frutilla mediante un procedimiento sencillo con materiales caseros.

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1.4 EQUIPOS Y MATERIALES:

- 4 frutillas maduras
- Cuchillo y tabla
- Fundas plásticas (ziplock)
- 1 vaso de precipitación
- Detergente común diluido (añadir 10ml de detergente en 90 ml de agua potable)
- 1 colador o papel toalla
- Sal
- Tubos de ensayo
- Etanol al 95%
- Varilla de madera

1.2 EXPLICACIÓN CIENTÍFICA DEL PROCEDIMIENTO:

El ADN se encuentra en el interior del núcleo de las células eucariotas rodeado de proteínas
(histonas) que lo mantienen unido y compactado. Por ello, para poder aislarlo y observarlo se
deben deshacer la membrana plasmática y la envoltura nuclear, y también se precisa la
desnaturalización de las proteínas. A continuación, se explicará detalladamente la función de cada
procedimiento y reactivo usado en la práctica:

Trituración: Incrementa el área superficial, permitiendo destruir más fácilmente la membrana de

sus células, permitiendo una absorción más efectiva del calor y de las soluciones que se añadirán.

Detergente: tiene como función destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos
usando. El detergente disuelve grasas, que es el componente principal de la membrana plasmática
y nuclear de las células. Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al
exterior. La licuadora también ayuda en la rotura mecánica de estas células.

Filtración: este paso permite separar los restos de los tejidos de la frutilla y de las células que
hemos roto en los pasos anteriores. Ese material no nos interesa y quedará retenido en el papel
filtro o colador. El líquido filtrado es el que contiene el ADN libre de membrana nuclear.

Alcohol: el ADN es una molécula polar, pero la reacción con el etanol a muy baja temperatura hace
que se vuelva apolar e insoluble en el etanol. Esto se hace visible porque las diferentes cadenas se
van aglutinando entre sí al precipitarse debido a la acción de las fuerzas físicas. El alcohol al ser
menos denso que el agua del extracto, flota sobre esta.

Sal: la molécula de ADN es soluble en agua y por tanto invisible, pero si se pone une ADN en un
medio salado, junto a alcohol frío, esta molécula se vuelve insoluble y precipita. Por lo tanto, el
agua salada ayuda a la precipitación en el alcohol. La sal también ayuda a separar el ADN de las
histonas.

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1.5 PASOS PARA LA EXTRACCIÓN DE ADN CASERO:

1. Cortar la frutilla en trozos pequeños.

2. Colocar los trozos de la frutilla en una bolsa de plástico (funda ziplock) y amasar bien. Si la frutilla
no estuviera suficientemente madura o sacara poco jugo, agregar hasta un volumen equivalente
de agua.
3. Agregar una pizca de sal gruesa y el detergente diluido (10ml) a la masa de la frutilla. Mezclar
bien.
4. Luego de 5 a 10 minutos, filtrar la masa de la frutilla con un colador o papel absorbente.
5. Distribuir 10 ml del líquido filtrado en cada uno de los tubos de ensayo.
6. Inclinar levemente el primer tubo y muy despacio dejar escurrir 10 ml de etanol 95% sobre el
líquido. El etanol formará una segunda capa por encima de la solución.
7. Esperar 10 minutos y observar cómo el ADN precipita en la interfase de las dos capas y llega hasta
la superficie.
8. Retirar el ADN con una varilla de madera o con una aguja de
crochet.

ADN en la
interfase
de las dos
capas

Figura 1. ADN
precipitándose.

1.6 REFERENCIAS DE LA GUÍA:

- Martínez, Laura 2015. Extracción de ADN. Experimentos con reactivos de la vida cotidiana. UAB.
- Malajovich, Maria. Guías de actividades, Biotecnología: enseñanza y divulgación.
http://www.bteduc.bio.br

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