I.

INTRODUCCIÓN:

La bioquímica estudia la base molecular de la vida. Al conjunto de

reacciones que suceden dentro de los seres vivos se le llama
metabolismo.

Actualmente se conoce a detalle la estructura tridimensional de las

macromoléculas de mayor importancia biológica, los ácidos nucleicos y
las proteínas, lo que ha permitido entender a nivel molecular sus
funciones biológicas.

Conocer a detalle la estructura de varias proteínas ha sido muy útil en la

elucidación de los mecanismos de las reacciones enzimáticas.
Prácticamente todas las reacciones que integran el metabolismo son
reacciones enzimáticas.

En seguida presentaré la información más resaltante, para entender la

microbiología, tanto como los materiales y equipos que se utilizaran en
el experimento relacionado a un equipo.

II. MATERIALES Y METODOS

EQUIPOS:

 Microscopio: El microscopio es un instrumento que permite

observar objetos no perceptibles a al ojo humano. Esto se logra
mediante un sistema óptico compuesto por lentes, que forman y
amplifican la imagen del objeto que se está observando.

 Autoclave: Es un dispositivo que sirve para esterilizar material de

laboratorio, utilizando vapor de agua a alta presión y temperatura,
evitando con las altas presiones que el agua llegue a ebullir a
pesar de su alta temperatura.
 Horno: Usado para deshidratar reactivos de laboratorio o secar
instrumentos.

 Baño maría: Es un equipo que se utiliza en el laboratorio para

realizar pruebas serológicas y procedimientos de incubación,
aglutinación, inactivación, biomédicos, farmacéuticos y hasta
industriales.

 Incubadora: Es un dispositivo que sirve para mantener y hacer

crecer cultivos microbiológicos o cultivos celulares. La incubadora
mantiene la temperatura, la humedad y otras condiciones en
grado óptimo, tales como el contenido de dióxido de carbono
(CO2) y de oxígeno en su atmósfera interior.
 Centrifuga: Es utilizado para poder observar diferentes tipos de
muestras tanto biológicas como químicas. Las cuales se
encuentran encerradas dentro de la placa.

 Estereoscopio: Es un instrumento donde se presentan al mismo

tiempo dos imágenes del mismo objeto, una a cada ojo, tomadas
desde ángulos ligeramente diferentes y se observan a través de
dos objetivos con lentes separadas e inclinadas para que
coincidan y se fundan las dos imágenes en una tridimensional.

 Espectrofotómetro: Es un instrumento usado en el análisis

químico que sirve para medir, en función de la longitud de onda,
la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica
relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o
reacciones químicas que se miden en una muestra.
MATERIALES:
 Placas Petri: Es utilizado para poder observar diferentes tipos de
muestras tanto biológicas como químicas. Las cuales se
encuentran encerradas dentro de la placa.

 Asas bacteriológicas:Es utilizado para poder observar diferentes

tipos de muestras tanto biológicas como químicas. Las cuales se
encuentran encerradas dentro de la placa.

 Matraz: El matraz erlenmeyer es un recipiente de vidrio que se

utiliza en los laboratorios, tiene forma de cono y tiene un cuello
cilíndrico, es plano por la base. Se utiliza para calentar líquidos
cuando hay peligro de pérdida por evaporación.
 Probeta: Tubo de cristal alargado y graduado, cerrado por un
extremo, usado como recipiente de líquidos o gases, el cual tiene
como finalidad medir el volumen de los mismos.

 Tubos de ensayo: Es utilizado para poder observar diferentes

tipos de muestras tanto biológicas como químicas. Las cuales se
encuentran encerradas dentro de la placa.

 Campanas Durham: De vidrio, que se coloca dentro de los tubos

de ensayo, para observar si el microorganismo desprende gases,
que quedan retenidos dentro de la campanita colocada con su
base hacia arriba y abertura hacia abajo

 Viales: Es utilizado para poder observar diferentes tipos de

muestras tanto biológicas como químicas. Las cuales se
encuentran encerradas dentro de la placa.
 Laminas: Lamina de vidrio rectangular de color transparente
utilizada para almacenar muestras y objetos con el fin de
observarlas bajo el microscopio. Las dimensiones típicas de un
portaobjeto son de 75mm x 25mm, sin embargo están pueden
variar dependiendo del tipo de objeto o muestra (en geología
suelen utilizarse portaobjetos de 75 x 50 mm).

 Laminillas: es una lámina cuadrada o rectangular similar al

portaobjeto pero de menores dimensiones

 Gradillas: Una gradilla es un utensilio utilizado para dar soporte a

los tubos de ensayos o tubos de muestras. Normalmente es
utilizado para sostener y almacenar los tubos. Este se encuentra
hecho de madera, plástico o metal.

 Mechero de alcohol: Se utiliza cuando no se necesita un gran

poder calorífico. Poseen una mecha impregnada de alcohol, que
es la que arde.
III. PROCEDIMIENTO
Uso de Espectrofotómetro
Determinación de colesterol

1. Seguir el procedimiento indicado en la caja de marca VALTEK

para la determinación de colesterol.
2. Lavar las cubetas con agua destilada y secarlas
3. En tres tubos de ensayo:
i. Blanco (B) : Reactivo enzimático (1ml)
ii. Calibrador (S) : Reactivo enzimático (1 ml) + 0.01 ml
de estándar.
iii. Muestra (M) : Reactivo (1ml) + 0.006 ml de
estándar.
4. Después de tener las muestras preparadas, colocarlas en las
cubetas.
5. Llevar las cubetas al espectrofotómetro.
6. Calcular los resultados.

IV. RESULTADOS

Para calibrar Como muestra

Blanco 0.0416 absorbancia
Calibrador 0.4676 absorbancia 216.1 mg/dL
Muestra 99.98 mg/dL 104.6 mg/dL

- El blanco al pasar los minutos indicados no se obtuvo ninguna

cloración.

- El calibrador o estándar se tornó de un color rosa intenso.

 - Muestra se tornó de color rosa muy suave.

V. DISCUSION

 Si nosotros queremos hacer el estudio de colesterol con un

conocimiento general, este no dará resultados exactos ya que
existen diferentes marcas y con estas diferentes procedimientos y
reactivos.
 Los materiales, si no están en buen estado o esterilizados, esto
conllevará a dar un resultado erróneo ya que la muestra estaría
contaminada.

VI. COLCLUSIONES

 Saber el adecuado uso del espectrofotómetro permitió obtener en

el laboratorio los resultados más precisos.
 En el laboratorio la limpieza en tanto en los equipos como en los
materiales es fundamental para que no se altera ninguna
muestra.
 Siempre usar guantes y materiales esterilizados para la buena
manipulación de los reactivos y muestras.
 Los resultados obtenidos con respecto a la muestra (M) se trabajó
con el estándar pero a menor cantidad para simular el suero de la
sangre.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 file:///C:/Users/PERSONAL/Desktop/colesterol%20hdl%20pp.pdf
 https://es.slideshare.net/juandavidjaramilloorozco1/laboratorio-de-
espectrofotometra-1
 https://ellaboratorioencasa.wordpress.com/2016/11/10/determinacion-del-hdl-
colesterol-por-espectrofotometria/
 https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-
instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/centrifuga-de-laboratorio.html
 http://www.monografias.com/trabajos93/materiales-e-instrumentos-
laboratorio/materiales-e-instrumentos-laboratorio.shtml