Métodos de determinación del kLa

La transferencia másica de oxígeno por unidad de volumen del reactor, NO2, se

obtiene de multiplicar la intensidad de flujo promedio por el área interfasial por
unidad de volumen gas-líquido. Se tiene así la expresión (3.4)
𝑁𝑂2 = 𝐾𝐿 ∙ 𝑎. (𝐶 ∗𝐴 − 𝐶𝐴,𝐿 ) (3.4)
Debido a la dificultad de medir Kl y a separadamente, usualmente el producto kLa
es el que se mide y este parámetro, conocido como el coeficiente volumétrico de
transferencia de masa, caracteriza el transporte de oxígeno del gas al líquido
(García-Ochoa, 2009)
La determinación del kLa en biorreactores es esencial para establecer la eficiencia
de la aireación y para cuantificar los efectos de las variables de operación en la
provisión de oxígeno disuelto.

El balance de masa para el oxígeno disuelto en una fase líquida bien mezclada
puede verse como:

𝑑𝐶
= OTR − OUR
dt

Donde,
dC/dt= tasa de acumulación del oxígeno en la fase líquida, mol ∙ L-1∙ s-1
OTR= tasa de transferencia del oxígeno del gas al líquido, mol ∙ L-1∙ s1
OUR= tasa de utilización del oxígeno por parte de los microorganismos, mol ∙ L-1∙
s-1
La ecuación anterior puede ser expresada de la siguiente manera:
𝑑𝐶𝐴𝐿
= 𝑘𝐿 𝑎(𝐶 ∗𝐴𝐿 − 𝐶𝐴𝐿 ) − 𝑞𝑜2 ∙ 𝐶𝑥 (4.5)
𝑑𝑡

En la cual la tasa de utilización del oxígeno por parte de los microorganismos

puede ser expresada como qO2∙Cx, donde el primer término corresponde a la tasa
específica de consumo del microorganismo empleado y el segundo a la
concentración del microorganismo en el medio (García-Ochoa, 2009).
El método dinamico se basa en la técnica propuesta por Taguchi (1967) que mide
la actividad respiratoria de los microorganismos que están creciendo activamente
en el biorreactor. Si la entrada de aire al biorreactor se restringe, la concentración
de oxígeno disuelto disminuirá a una tasa equivalente al consumo de oxígeno
producto de la respiración del microorganismo. Bajo estas condiciones, la
ecuación (4.5) puede simplificarse

𝑑𝐶𝐿
= −𝑞𝑜2 ∙ 𝐶𝑥
𝑑𝑡

De donde se obtiene la tasa de utilización del oxígeno por parte de los microorganismos, de
la pendiente de la curva de concentración de oxígeno disuelto en función del
tiempo luego de haberse detenido la aireación (Ver Figura 4.2). (García-Ochoa,
2009).
Figura 3.2.Descripción esquemática de la medición directa del OTR en bioprocesos
por medio de la técnica dinámica clásica (García-Ochoa, 2009).

Cuando la aireación se reanuda, la concentración de oxígeno disuelto aumenta

hasta que alcanza la concentración del estado estacionario. Utilizando el valor
estimado de tasa de utilización del oxígeno por parte de los microorganismos, mol
∙ L-1∙ s-1

OUR el kLa puede ser determinado a partir del perfil de concentración de oxígeno
disuelto utilizando nuevamente la ecuación (3.5). Bajo estas condiciones, para una
concentración dada de biomasa y una vez que el valor de qO2 es conocido, la
ecuación (3.5) puede ser integrada tomando en consideración el tiempo en el cual
la aireación del cultivo se reanuda (t = t1 y C = CL, ambos parámetros conocidos)
obteniéndose la siguiente expresión:

𝑡2
𝑞𝑜2 ∙ 𝐶𝑥 ∙ ∆𝑡 + ∆𝐶𝐿 = 𝑘𝐿 𝑎 ∙ ∫ (𝐶 ∗ − 𝐶𝐿 ) ∙ 𝑑𝑡
𝑡1
La ecuación (3.24) puede ser utilizada para determinar la transferencia volumétrica
de oxígeno varias veces durante el proceso de producción al resolver esta
ecuación para cada conjunto de datos experimentales de CL en función del
tiempo. Este método es simple y puede aplicarse durante una fermentación real
(García-Ochoa, 2009).

Garcia-Ochoa, F.; Gomez, E. (2009). Bioreactor scale-up and oxygen transfer rate
in microbial processes: an overview. Biotechnology Advances. 27, pp.153-176

http://repositorio.sibdi.ucr.ac.cr:8080/jspui/bitstream/123456789/2426/1/37234.pdf

También conocido solamente como método dinámico, en este se miden los niveles
de O2 en cultivos que están creciendo en el fermentador, este método puede
determinar el kLa durante una fermentación real, consiste en detener de forma
temporal el flujo de gas (oxígeno puro o aire dependiendo del requerimiento) en el
biorreactor para eliminar la adición de oxígeno al caldo líquido de tal manera que
la disminución de la concentración de oxígeno en el biorreactor puede
ser atribuida enteramente a su consumo por el microorganismo. La medición se
divide en dos secciones como puede observarse en la figura 1
Primero se mide la actividad respiratoria de microorganismos que crece
activamente en biorreactor en el caldo de cultivo. Se suspende la aireación hasta
que la concentración de oxígeno disuelto llegue cerca de su valor crítico (oxígeno
suficiente para utilización en el mantenimiento de los microorganismos). Antes de
que la OD alcance su valor crítico, el aire se introduce nuevamente en el
biorreactor y suponiendo que la reoxigenación del caldo es suficientemente rápida
para permitir el crecimiento de las células, el nivel de OD alcanzará un valor de
estado estacionario que refleja un balance entre el suministro de oxígeno y el
consumo existente. Este método permite la determinación del kLa a través del
análisis gráfico y la ecuación característica del mismo que permite relacionar la
concentración y el cambio de esta en el tiempo (velocidad de transferencia de
oxígeno) mediante la ecuación (Taguchi H, 1966)

A través del sistema de control del biorreactor se obtienen mediciones directas de oxígeno
disuelto en el tiempo. Con la información obtenida se lleva a cabo la construcción de la
gráfica P, la cual nos da una idea de la dinámica del proceso.
Gráfica P. Método dinámico directo: Porcentaje de oxígeno disuelto contra el tiempo [s].

El balance de masa para el oxígeno disuelto en una fase líquida bien mezclada
puede verse como:

𝑑𝐶𝐴𝐿
= 𝑘𝐿 𝑎(𝐶 ∗𝐴𝐿 − 𝐶𝐴𝐿 ) − 𝑞𝑜2 ∙ 𝐶𝑥
𝑑𝑡

Como se está trabajando con oxígeno disuelto (OD), para realizar los cálculos se
debe tener en cuenta la ecuación anterior y la relación existente entre el CAL y el
OD.

𝐶𝐴𝐿 = 𝑏 × 𝑂𝐷

Siendo b una constante de proporcionalidad que depende de la presión,

temperatura y composición del gas de entrada y de la composición y de la
temperatura del medio de cultivo, sin embargo despreciando este hecho, podemos
ver que CAL y el OD son proporcionales y por ende obtenemos la siguiente
ecuación:

𝑑𝑂𝐷 𝑞𝑜2 𝑥
= 𝑘𝐿𝑎 ∙ ∇𝑂𝐷 −
𝑑𝑡 𝑏
Mediante el uso de la linealización de la curva obtenida en la gráfica P, se obtiene
una nueva grafica que expresa la velocidad de transferencia del oxígeno disuelto
con respecto % OD como se observa en la gráfica , y por medio de la ecuación
característica de esta línea podemos conocer el valor numérico del kLa.

Gráfica O. Linealización de la variación de oxígeno disuelto respecto al tiempo contra el porcentaje

de oxígeno disuelto
La ecuación de la curva de tendencia lienal asociada a la gráfica O es la siguiente:

𝑑𝑂𝐷
Donde y es y x es % OD en el medio.
𝑑𝑡

A partir de esta ecuación y sabiendo que independientemente la naturaleza

negativa de la gráfica o puede aplicarse valor absoluto a la pendiente, se obtiene
para el método dinamico de kLa= s-1
INFORME PRÁCTICA: TRANSFERENCIA DE OXÍGENO EN PROCESOS FERMENTATIVOS.
Cindy Yurani Correa Villa1, Iowel Montoya Valencia2, María Susana Pérez Grisales3, David Eduardo
Tibaduiza García4 & Ana María Valencia Palacios
https://es.scribd.com/document/365583713/Determinacion-Del-KLa

Nolasco Terrón Eder Yair Reactores Biológicos Cinética de un biorreactor y transferencia de

oxígeno 2015 https://es.slideshare.net/edya69/cinetica-y-kla
 ANEXO III

Medición dinámica de kLa para transferencia de oxígeno en fermentadores

La determinación del kLa en birreactores es esencial para establecer la eficiencia

de la aireación y para cuantificar los efectos de las variables de operación en la
provisión de oxígeno disuelto.

El método dinamico se basa en la técnica propuesta por Taguchi (1967), que

permite la determinación del kLa a través del análisis gráfico y la ecuación
característica del mismo relacionando la concentración y el cambio de la velocidad
de transferencia de oxígeno en el tiempo.

A través del sistema de control del biorreactor se obtienen mediciones directas de

oxígeno disuelto en el tiempo. Con la información obtenida se lleva a cabo la
construcción de la gráfica P, la cual nos da una idea de la dinámica del proceso, la
demanda de oxigeno es función del tiempo que considera la fase logarítmica de
crecimiento celular.

Gráfica P. Método dinámico directo: Porcentaje de oxígeno disuelto contra el

tiempo [s].
El balance de masa para el oxígeno disuelto en una fase líquida bien mezclada
puede verse como:

𝑑𝐶𝐴𝐿
= 𝑘𝐿 𝑎(𝐶 ∗𝐴𝐿 − 𝐶𝐴𝐿 ) − 𝑞𝑜2 ∙ 𝐶𝑥
𝑑𝑡

Como se está trabajando con oxígeno disuelto (OD), para realizar los cálculos se
debe tener en cuenta la ecuación anterior y la relación existente entre el C AL y el
OD.

𝐶𝐴𝐿 = 𝑏 × 𝑂𝐷

Siendo b una constante de proporcionalidad que depende de la presión,

temperatura y composición del gas de entrada y de la composición y de la
temperatura del medio de cultivo, sin embargo despreciando este hecho, podemos
ver que CAL y el OD son proporcionales y por ende obtenemos la siguiente
ecuación:

𝑑𝑂𝐷 𝑞𝑜2 𝑥
= 𝑘𝐿𝑎 ∙ ∇𝑂𝐷 −
𝑑𝑡 𝑏

Mediante el uso de la linealización de la curva obtenida en la gráfica P, se obtiene

una nueva grafica que expresa la velocidad de transferencia del oxígeno disuelto
con respecto % OD como se observa en la gráfica , y por medio de la ecuación
característica de esta línea podemos conocer el valor numérico del kLa.
Gráfica O. Linealización de la variación de oxígeno disuelto respecto al tiempo
contra el porcentaje de oxígeno disuelto

La ecuación de la curva de tendencia lienal asociada a la gráfica O es la siguiente:

𝑑𝑂𝐷
Donde y es y x es % OD en el medio.
𝑑𝑡

A partir de esta ecuación y sabiendo que independientemente la naturaleza

negativa de la gráfica o puede aplicarse valor absoluto a la pendiente, se obtiene
para el método dinamico de kLa= s-1
Característica Valor

Diámetro tanque 0,598 [m]

Altura tanque 1,196 [m]

Volumen total 0,2920 [m3]

Tipo de turbina Rushton

Número de turbinas 2

Número de paletas 6

Diámetro de turbina 0,276 [m]

Altura de paleta 0,069 [m]

Ancho de paleta 0,0552 [m]

Número de Deflectores

Altura de deflectores 0,1993 [m]

Ancho de deflectores 0,0498 [m]

Potencia nominal 0.5 hp