A.

METODO DE KAHANE
Se basa en la acción de una mezcla fuertemente oxidante sobre la muestra en
cuestión, a fin de romper la unión entre los metales y la materia orgánica
llevándolos a su máximo estado de oxidación.El HNO3 es un agente oxidante
(punto de ebullición: 56ºC). 2HNO3 ____________________H2O + NO + 3 O*__
en frío. 2HNO3 ___________________ H2O + 2 NO2 +1O* en caliente. Luego O*
+ H (de la materia orgánica)___________H2O
El H2SO4 permite trabajar a mayor temperatura (270ºC). Es un indicador de la
destrucción de la materia orgánica: cuando se acaba el ácido nítrico que brinda el
poder oxidante comienza a actuar el ácido sulfúrico que ataca la materia orgánica
dando Carbono de color negro. En ese momento es necesario detener el
calentamiento porque falta medio oxidante, entonces se agregará ácido nítrico y
se continúa el calentamiento. (El C es reductor y podrá reducir el As a AsH3
perdiéndose por volatilización).
Además el H2SO4 rompe cadenas de glúcidos, proteínas y grasas, dando
moléculas más pequeñas que serán fácilmente atacadas por el ácido nítrico.
El ácido sulfúrico es también un deshidratante fuerte.
Es indicador de que la materia orgánica ha sido totalmente destruida, cuando no
aparece color negro y se observan humos blancos de SO3
El HClO4 posee un poder oxidante muy fuerte. Explota en presencia de materia
orgánica, por eso nunca se lo usa sólo sino como mezcla ácido nítrico-ácido
perclórico. Además de ser oxidante produce el clivaje de cadenas.

4 HClO4 2 H2O + 2 Cl2 + 7 O2 (4 HClO4 :14 O*)

4 HClO4 HClO4 4 ClO2 + 3 O2 +2 H2O
4 ClO2 + C (de la materia orgánica) 4 CO2 + Cl2

La principal desventaja de la mezcla SNP es que resulta ser peligrosa por los
ácidos oxidantes empleados, asimismo se generan vapores tóxicos e irritantes así
como pueden producirse explosiones. Entre las ventajas se menciona la rapidez y
utilidad si se trabaja con cuidado. La presencia de materia grasa en la muestra
permite romper cadenas carbonadas mientras que la calcinación por vía seca no
resulta suficiente.
MUESTRAS
Sangre: se emplean 5 a 10 ml de sangre entera.
Orina: se usan 50 ml
Vísceras se emplean 1 g. de material desmenuzado
 REACTIVOS
Ácido nítrico (p.a.)
Ácido sulfúrico concentrado exento de As, Tl y Pb.
Mezcla en la proporción 1: 2 de ácido perclórico y nítrico
Oxalato de amonio, solución saturada a temperatura ambiente.
EQUIPO
Balón de Kjeldahl de 100ml

PROCEDIMIENTO
Si se trata de vísceras, se colocan 2 g de vísceras desmenuzadas en un balón
Kjeldahl de 100 ml de vidrio Pyrex tratando de no ensuciar las paredes. Se
agregan 10 ml de ácido nítrico concentrado y se calienta sobre tela metálica hasta
disgregar todo el material. Se continúa calentando directamente sobre llama
pequeña, hasta disolver el material Se retira y se deja enfriar.
Si se trata de orina, se colocan 50 ml de orina en un vaso de precipitados y se
calienta sobre tela metálica hasta reducir el volumen a un quinto del original. El
líquido remanente se pasa a un balón Kjeldhal de 100 ml y se incorporan 10 ml de
ácido nítrico concentrado.
De allí en adelante se procede de la misma manera en ambos casos.
Se agrega al contenido del Kjeldhal 2 ml de ácido sulfúrico concentrado. Se
calienta el contenido para mineralizar hasta llegar a carbonizarse la materia
orgánica. En ese momento debe suspenderse el calentamiento dado que se
genera un ambiente reductor y se corre el riesgo de perder metales como el
arsénico o el antimonio por volatilización. Se deja enfriar y se agrega lentamente
por el cuello del balón 2 ml de ácido nítrico y se vuelve a calentar. Si se observa
nuevamente oscurecimiento se agrega 2ml de la mezcla nítrico-perclórico. Se
continúa calentando hasta la aparición humos densos y pesados de trióxido de
azufre. Llegado este punto, se retira el balón del fuego quedando un líquido
incoloro o con un ligero precipitado blanco o amarillento de sulfato de calcio o de
hierro respectivamente. Se deja enfriar y se agrega 1 ó 2ml de agua destilada y se
calienta para desprender vapores de agua. Se repite el agregado de agua y se
calienta humos blancos de trióxido de azufre. Se continúa calentando hasta
obtener un líquido residual de 2ml, se deja enfriar y se trata el líquido y el residuo
sólido si lo hubiera con agua destilada transvasándolo a un matraz de 25ml. En
estos 25 ml de investigará los metales de interés toxicológico como son el Tl, As y
Pb.
 B. METODO DE DENIGES
PROCEDIMIENTO
La muestra se pone en una capsula o matraz kjeldal y se cubre con ácido nítrico
fumante. Se deja un tiempo para favorecer la oxidación de iones As y P, que
pudieran volatilizarse, a iones arseniato o fosfatos. Se calienta hasta casi
sequedad y se añaden ácido nítrico hasta disolver la muestra. Luego se agrega
H2SO4 concentrado y se continúa el calentamiento hasta casi sequedad. Se
aumenta permanganato de potasio 1%, y al calentar 3 horas, el residuo es
coloreado, y se quita el color con agente reductor NaS03 10%.
En este procedimiento se trata la muestra con una cantidad relativamente
pequeña de ácido sulfúrico y con cantidades mayores de ácido nítrico, hirviendo
hasta desprendimiento de humos blancos y densos de SO3. Este tratamiento
suele funcionar bastante bien para muestras vegetales, pero puede ser muy lento
con tejidos animales.

Reacción. Método volumétrico de Deniges.

I. VIA FRIA (metaloides y no metales)

PROCEDIMIENTO DE FRENESIUS- VON BABO1

Este procedimiento resulta de eleccion para todos aquellos toxicas que
pueden volatilizarse en el curso del tratamiento como consecuencia de un
excesivo calentamiento. Presenta en cambio la desventaja de no efectuar
una destrucción integral y exigir purificaciones.

Procedimiento:
Preparar una fina papilla con el material a analiza, agregar HCl 8% c/v y
luego unos gramos de clorato de potasio en polvo, agitar y colocar en baño
maria.
 Una vez mineralizada la materia orgánica se deja enfriar y se filtra, se trata
el filtrado con bisulfito de sodio para reducir el cloro a anión cloruro. Se
concentra el volumen y se hace pasar una corriente de gas sulfhídrico
Desplazar el exceso de gas sulfhídrico con gas carbónico
Obtenido la precipitación del toxico en forma de sulfuro se filtra en forma
rápida, en este líquido se encuentra todos los metales y no metales de
importancia toxicológica (mercurio, arsénico, bismuto, cobre, antimonio,
plomo, etc.)7

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Guatelli M. Manual Práctico de Química Toxicológica. Editorial Universitaria.

Macchi Hnos. Buenos Aires, 1958.
2. Bautista J. XXIX. —Nuevo método de destrucción de la materia orgánica en
el análisis toxicológico. p (512-517)
3. Mineralización y disolución. Biblioteca Digital de la Universidad de Chile.
[Sitio web en internet]. Disponible en:
http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuti
cas/lachicam01/parte04/03-6.html
4. Gallego A, Garcinuño R, Morcillo M. Experimentación en química analítica.
Universidad Nacional de Educación a Distancia. Madrid 2013. p (16-20)
5. Fernández R. 2007. Marcha toxicológica de urgencia. Argentina. Pp. 9
6. Repetto M. 2009. Toxicología fundamental. 4ta edición. Sevilla. Pp. 525
7. Gorsuch T.T. the destruction of organic matter, Editorial Pergamon Press
Ltd, Toronto 1970