Lic.

Tecnólogo Médico
Alejandro Bustamante del Río
Servicio de Hemoterapia y Banco de Sangre
Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen
 Conjunto de Actividades procesos y
procedimientos previos para cumplir los
requisitos mínimos para alcanzar la
calidad.

 Programa de Control Calidad.

 Programa de Garantía de Calidad

 SGC
 Calidad total
 Garantía de Calidad
 Satisfacción del usuario
◦ Aseguramiento de la calidad.
 Controlar y validar todos los materiales, insumos y
equipos que intervengan o se utilicen para lograr
desarrollar una labor o tarea en un área especifica.
 El punto de partida de todo Sistema de Control de
Calidad es el conocimiento detallado de la
metodología de cada reactivo empleado. El control
de calidad debe realizarse diariamente.
 Reactivos deben de ser de procedencia confiable y
tener licencia de la FDA o de la CE o similar.
 Instrucciones de uso.
 Certificado de Origen y Calidad.
 Equipos
 Reactivos
 Personal
 AVIDEZ: Es la velocidad e intensidad de la
reacción Ag-Ac al inicio de la aglutinación
se mide en segundos.

 ESPECIFICIDAD: Es la capacidad del Ac.

para reconocer únicamente a su Ag.
correspondiente.
 TITULO: Es la dilución en la que reacciona el
Antisuero (Ac.) con su respectivo Antígeno se
realiza en tubo y se cuantifica en cruces de ½ +
a 4 + se considera el titulo hasta 1+
 SCORE: Es la puntuación que se le da a cada
una de las reacciones de las diluciones.
4+ : 10 ptos
3+ : 8 ptos
2+ : 6 ptos
1+ : 4 ptos
½+: 3 ptos
 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024
11

100 ul de Salina a todos los tubos + 100 ul del suero al tubo 1,luego 2, 3, ……..
Pasar 2 gotas de cada dilucion a los tubos con los glóbulos rojos, centrifugar y leer
11

1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024

AC
 1 GOTA DE GLOBULOS ROJOS CONOCIDOS
+
 2 GOTAS DEL SUERO A TITULAR
 Todas los Servicios de Bancos de Sangre
antes de adquirir los reactivos que van a
utilizar deben de comprobar que cumplen
con las especificaciones técnicas mínimas.
Ello significa, que los proveedores deberán
someter sus muestras a controles por parte
del usuario, lo que deben abarcar:
 Sueros hemoclasificadores, suero de
coombs, células, potenciadores, sueros
raros, Lectinas etc.
 Registrar, en el momento de la recepción de los
reactivos, que las condiciones de transporte,
temperatura y fecha de expiración.
 Se deberá de evaluar cada lote nuevo antes de
usarlo en el laboratorio.
 Se deberá cumplir con las instrucciones del
fabricante para garantizar resultados correctos.
 Se deberá realizar controles internos diarios
apropiados para garantizar la repetitibilidad de
los resultados.
 SERVICIO DE HEM OT ERAPIA Y BANCO DE SANGRE
CONTROL DE CALIDAD DE ANTISUEROS PARA GRUPOS SANGUINEOS

I ) Antisuero Anti : Anti A Anti B Anti AB Anti D Otros

II ) Caracteres Físicos
1.- Aspecto Macroscópico : Turbio : Lig. Turbio Tra nspa re nte :
2.- T ipo : Monoclona l : Huma no : Otros :
3.- Marca :
4.- Pais de Procedencia :
5.- Volumen :
6.- Lote :
7.- Fecha de Expiración :
8.- Proveedor :

III ) Especificidad
C. Pant C.I T° A Alb 37°C C.Ind C.C.C.
P I
P II
P III

Cel A1: Cel B : Cel O :

Cel A1: Cel B : Cel O :
Cel A2: Cel AB : Cel O :

IV ) Potencia
Avidez ( segundos )
Cel Cel Cel Cel

V ) T ítulo
1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024
T ítulo
Score

VI ) Examén Microbiológico :
1.- Se Aislaron Germenes 2.- No se aislaron Germenes
3.- Germenes aislados :

Observaciones y Conclusiones :
Registro de Evaluación
Registro de Evaluación
 ANTISUEROS TIPIFICADORES
 POTENCIADORES y ENZIMAS
 ANTIGLOBULINAS
 GLOBULOS ROJOS
Parámetros que Requerimientos de Frecuencia Control
se deben calidad de control Ejecutado
controlar por

• Apariencia Ausencia de precipitado o Diario T.M

partículas por inspección responsable
visual del área

No hemólisis inmune, ni Cada lote T.M

• Reactividad formación de Rouleaux ni nuevo responsable
y fenómeno prozona. del área
especificidad Reacciones claras con GR
que contengan los antígenos
correspondientes, no
reacciones falsas

• Potencia Suero no diluido debe dar Cada lote T.M

una reacción 3+ - 4+ usando nuevo responsable
suspensión GR 3% en del área
solución salina temperatura
ambiente. Los títulos deben
ser 128 dils para anti-A, anti-
B y anti-AB con A1- y células
B; 64 dils con A2 y A2B
Realizar el Control de Calidad de los
Sueros Hemoclasificadores Anti-A,
Anti-B y Anti-AB utilizando hematíes
A1 , A2 , B, AB y O
Parámetros a Requerimientos de Frecuencia Control
revisar calidad de control Ejecutados
por
• Apariencia Similar a antisuero Diario T.M
ABO responsable
del área

• Reactividad Similar a antisuero- Cada lote T.M

y ABO nuevo responsable
del área
especificidad
• Potencia Suero no diluido debe Cada lote T.M
dar una reacción de nuevo responsable
3+ a 4+ en prueba del área
designada para cada
suero y un título de
16dils para anti-D,
anti-C, anti-E, anti-c,
anti-e y anti-CDE
usando GR
heterocigotos
apropiados
Utilizar Glóbulos Rojos Controles
D positivos y D negativos
Hematíes de detección ( pantalla )
Expresión Heterocigota
Hematíes “D” negativo A y B para
grupo inverso
Utilizar Células de fenotipo conocido
(pantalla o panel) para Controles
positivos y negativos.
Los controles positivos con expresión
heterocigota del antígeno.
Debe realizarse el día de su uso.
 LECTIN A1 : DOLICHUS BIFLORUS

 LECTIN H : HULEX EUROPAEUS

 Las lectinas son proteínas o glicoproteínas

naturales de origen no inmune que pueden
aglutinar células y son capaces de un
reconocimiento específico para un
determinado carbohidrato uniéndose
reversiblemente, sin alterar la estructura
covalente de los ligandos glicosídicos
 Fitohemaglutininas
 Valores Referenciales
Antisuero Células Titulo Avidez
Anti A A1 256 dils 15 seg
A2 128 dils 30 seg
Anti AB A1B 128 dils 30 seg
A2B 64 dils 45 seg
Anti B B 256 dils 15 seg
Anti Rho R1R1/DCe 32 dils 60 seg
(D) R2R2/DcE 32 dils 60 seg
Datos referenciales de valores en sueros policlonales o humanos
Actualmente se trabaja con sueros de origen monoclonal
 ANTISUEROS TIPIFICADORES
 POTENCIADORES Y ENZIMAS
 ANTIGLOBULINAS
 GLOBULOS ROJOS
 Potenciadores
◦ Albumina bovina 22% (proteinograma electrof)
◦ Polietilenglicol PEG
◦ Solución Liss.
* Control negativo cada día que se use
Considerar las indicaciones de fabricante
 Parámetros Requerimientos de Frecuencia Control
que se deben calidad de control Ejecutado
controlar por

• Apariencia No precipitados, Diario T.M

partículas o formación responsable
de gel a la inspección del área
visual
• Pureza Más de 98% en Cada lote T.M
albúmina por nuevo responsable
determinación del área
electroforética.
• Reactividad No aglutinación de GR Diario T.M
desensibilizados; no responsable
actividad hemolítica; no del área
fenómeno prozona o de
"encolamiento" .
 Enzimas
◦ Bromelina
◦ Papaina
◦ Ficina
◦ Tripsina
*Células Antígeno Duffy,M,N,S y s (+)
Control positivo y negativo
*Antígeno Rh débil
*Las enzimas rompen las cadenas de las
Glicoforinas exponiendo los Ags de
membrana a la superficie del GR.
 ANTISUEROS TIPIFICADORES
 POTENCIADORES Y ENZIMAS
 ANTIGLOBULINAS
 GLOBULOS ROJOS
Cada día que se usen.
Controles positivos y negativos.
Poliespecífico-control para Anti-IgG
Hematíes sensibilizados con IgG (CCC)
* Confirman la actividad de la antiglobulina
* Verifican el lavado adecuado de la prueba
Hematíes revestidos con C3d
Parámetros que Requerimientos de calidad Frecuencia Control
se deben de control Ejecutado
controlar por

• Apariencia No precipitados, ni partículas en la Diario T.M

inspección visual responsable
del área

a. No actividad hemolítica; no Diario T.M

• Reactividad y aglutinación de GR responsable
especificidad desensibilizados de cualquier
del área
grupo ABO

b. Aglutinación de GR
sensibilizados con suero anti-D,
conteniendo no más de 10 ng/ml
de actividad de anticuerpos Diario

c. Aglutinación de GR
sensibilizados con
aloanticuerpos que fije
complemento (ej.: anti-Jka) a un Cada lote
título mas elevado en presencia nuevo
que en la ausencia del
complemento
1. Seleccionar de 3 a 5 unidades de GR de grupo “O positivo”. Tomar las
muestras de un fragmento de la tubuladura distal.
2. Colocar las muestras en un único tubo y realizar 3 lavados con
solución fisiológica. Al decantar el sobrenadante en el último lavado
se obtendrá un volumen de paquete globular y se diluirá al 50% con
solución salina.
3. Preparar un volumen igual al obtenido de GR al 50% de reactivo anti
D diluido 1/10. Mezclar ambas soluciones e incubar a 37°C durante 1
hora. Mesclando por inversión cada 15 min.
4. Realizar 3 a 4 lavados con solución salina, y preparar una suspensión
al 2-5%.
5. Colocar una gota de la suspensión en un tubo y centrifugar 15
segundos a 3500 rpm.
Observar el patrón de aglutinación: si se observa aglutinación,
continuar con los lavados hasta obtener una suspensión de glóbulos
rojos que NO aglutine al ser centrifugada
6. Una vez obtenida dicha suspensión globular, enfrentar una
gota de esta con una gota de suero de Coombs .
Centrifugar 15 segundos a 3500 rpm. Observar
aglutinación. Para considerar que el resultado ha sido el
esperado la aglutinación deberá ser positiva (2 + o 3+).

7. Pasar la muestra obtenida a un frasco con gotero.

Registrar en la etiqueta del mismo:” Células para Control
de Coombs”, concentración, fecha de elaboración y fecha de
vencimiento (15 días a partir de la fecha de elaboración).
8. Almacenar a 2º a 4°C
 ANTISUEROS TIPIFICADORES
 POTENCIADORES Y ENZIMAS
 ANTIGLOBULINAS
 GLOBULOS ROJOS
Parámetros que Requerimientos Frecuencia de Control
se deben de calidad control Ejecutados
controlar por

• Apariencia No hemólisis ni Diario T.M

turbidez en el responsable
sobrenadante por del área
inspección visual

• Reactividad y Reacciones claras Cada nuevo lote T.M

especificidad con antisueros en el primer y responsable
selectivos contra último día de la del área
antígenos de vida de
glóbulos rojos almacenamiento
Inspección visual
* Hemólisis
* Cambio de color
Reactividad de los antígenos
Pruebas con suero/plasma de
pacientes o con un Ac de bajo titulo.
 No Hemolisis
 Expiración
 Suspensión adecuada
 Especificidad
 Fenotipo conocidos
 No Coombs Directo +
 Equipos
 Reactivos
 Personal
 El personal deberá tener los títulos apropiados y la
adecuada formación en la especialidad que garantice
los resultados obtenidos a nivel profesional y técnico.
 El personal debe saber no solo cómo realizar las
pruebas, sino el porqué de las mismas y las
consecuencias de no seguir los procedimientos
normatizados.
 Antes de encomendarle la responsabilidad de una
determinada tarea a un miembro del personal, es
necesario que este haya superado una formación
adaptada a su puesto y algunas pruebas de pericia.
 Se establecerá una formación continuada de
capacitación en forma periódica y una formación
específica ante variaciones de las tareas, la
aplicación de nuevas técnicas, o cualquier otro
cambio.
 El personal deberá firmar siempre el trabajo que
realiza y estará sujeto a auditorias internas para
el mejoramiento y aseguramiento de la calidad
en las pruebas.
 Los no conformidades serán motivo de
capacitación adicional.
 Competencia
- La capacidad de la persona de realizar
ciertas tareas
 Proficiencia
- Determina el grado de pericia del personal
en la resolución de problemas.
(palabra de origen Ingles proficiency que se refiere al dominio de algo)
 Disminución de errores
 Documentación de la capacidad de realizar
las pruebas
 Identificación de debilidades del personal
 Aumento en la productividad
 Personal puede sentirse amenazado.

 Puede causar resentimiento entre el

personal y la persona a cargo del programa.
 INTERNO  EXTERNO
FORMACION CONTINUA ORGANIZACIONES
EVALUACION INTERNA SALUD
MUESTREO CIEGO MUESTREO CIEGO
PRECISION CIRCULOS CALIDAD
EXACTITUD ACREDITACION
 Qué se va a evaluar?
 Qué método de evaluación se va a emplear?
 Quién será evaluado y con que frecuencia?
 Quién revisará los resultados?
 Cómo se documentarán los resultados?
 El objeto principal de las pruebas de Control
de Calidad en el laboratorio es asegurar que
los resultados obtenidos son correctos

 Debe mantenerse lo más simple posible

 Son varios los aspectos que deben
controlarse para conseguir resultados
correctos. En esta búsqueda de la calidad
desempeñan un papel determinante
factores tales como los reactivos utilizados,
la precisión de los equipos, las técnicas
utilizadas y, desde luego, la formación y
destreza del personal que las ejecuta
 Cometer errores es parte consustancial de la
condición humana, pero a su vez es algo que
en la práctica no se puede permitir. Por esta
razón, la organización y los métodos de trabajo
de cualquier centro deben tener como objetivo
establecer barreras contra posibles fuentes de
error. Toda organización debe recoger y
analizar los errores observados, así como los
que estuvieron a punto de cometerse, porque
de su estudio deben nacer las medidas
encaminadas a evitar que se repitan. Las
causas de error más frecuentes en un
laboratorio de inmunohematología suelen ser
de origen organizativo o técnico:
 Identificación incorrecta de las muestras. Puede
no estar indicado el origen del tubo de sangre piloto
o el de la unidad de sangre correspondiente, o bien
el del tubo piloto y la identidad del paciente al que
se le debe transfundir la sangre. Para evitar errores
de identificación se debe usar de modo rutinario un
sistema numérico que debe ser bien conocido por
todos los miembros de la organización encargados
de ejecutar tareas transfusionales, sea o no
informatizado el sistema. En el caso de las unidades
de sangre, siempre se deberá proceder a analizar los
grupos ABO y D por duplicado, una vez con la sangre
del tubo que acompaña a la bolsa de sangre y otra
con el tubo piloto, anotando cuidadosamente la
identidad de ambos.
 Errores en la transcripción de los resultados
a los registros, sean estos informáticos o
manuales.
 En el caso de registros informáticos se evitan los
errores en los procesos que se realizan
automáticamente mediante conexiones en línea.
Cuando la transcripción es manual, el T.M. que
hace el análisis y transcribe los resultados está
obligado a firmar y su firma sirve como
comprobante. Aunque la existencia de protocolos
obliga a todos los técnicos a realizar las pruebas
de una misma manera, no se recomienda que
una persona inicie una técnica y que otra la
termine y registre el resultado.
 Los reactivos.
 Los problemas pueden deberse, por
ejemplo, a la caducidad de los reactivos o
a su alteración por almacenamiento en
condiciones poco idóneas. Es necesario
realizar un control de la reactividad de los
mismos con una o más muestras conocidas.
 Las muestras. La calidad de las muestras
puede verse afectada por las técnicas de
extracción y de conservación.
 El equipo. Los instrumentos empleados
pueden ser defectuosos.
 Los métodos. Pueden surgir errores
debido, entre otras cosas, a prácticas
inadecuadas o a no seguir las instrucciones
del fabricante de los reactivos usados.
 2.- De donde proviene la Lectina A1 y la
Lectina H

3.- Cuál es el potenciador de la reacción

antígeno anticuerpo más común que usa:

pponce@minsa.gob.pe