PRACTICA Nº 6

DETERMINACION DE NITROGENO TOTAL

1. INTRODUCCION

El nitrógeno es uno de los elementos principales para la vida. Es esencial para la vida de las plantas
porque estimula el crecimiento por encima del suelo, y contribuye al brillante color verde
característico de las plantas saludables. Aunque el nitrógeno molecular (N2) compone el 78% de la
atmósfera, esta forma de nitrógeno no puede usarse por los animales ni por la mayoría de las plantas
en la fabricación de aminoácidos y proteínas esenciales. Este nitrógeno molecular, primero, ha de
"fijarse" (combinado con oxígeno o hidrógeno) para formar compuestos tales como amoniaco (NH3)
o nitrato (NO3-), o alguna otra forma orgánica de nitrógeno. Alguna fijación del nitrógeno ocurre por
los efectos de los rayos, y alguna, por las algas verde-azules, sin embargo, la mayor parte de la fijación
del nitrógeno se lleva a cabo por bacterias que viven en el suelo. Una variedad de bacteria fijadora de
nitrógeno vive libre en el suelo, mientras la otra variedad vive dentro de los nódulos de las raíces de
las legumbres (la soya, o soja, el maní, las habichuelas, el trébol, la alfalfa). La descomposición de
materiales en el suelo de los bosques, también, constituye una fuente de nitrógeno porque el amoniaco
o el amonio (NH4+) se produce en el proceso de descomposición.

La tasa de crecimiento de las plantas, generalmente, es proporcional a la tasa a la cual se provee el

nitrógeno. Si el suelo tiene deficiencia de nitrógeno, las plantas se vuelven altas y débiles, raquíticas
y pálidas. Como suele aparecer en relativamente pequeñas cantidades en el suelo de los bosques, el
nitrógeno, junto con el fósforo, a menudo, se convierte en el nutriente que limita el crecimiento de
las plantas, y, por consiguiente, limita la productividad de los bosques. El ión de amonio puede atarse
a las partículas de arcilla para permanecer en el suelo, sin embargo, el ión de nitrato, no, y, con
frecuencia, el agua lo lava o "lixivia" del suelo. La mayor parte del nitrógeno en el suelo se ha de
hallar en los horizontes superiores de los suelos, y, como consecuencia, el nitrógeno puede drenarse
fácilmente de los suelos cuando ocurre alguna perturbación.

2. METODO

Micro-kjeldahl (modificado por bremner 1965).

3. INTERFERENCIAS

No aplica

4. FUNDAMENTO

El Método desarrollado por Kjeldahl consta de tres etapas:

1. Digestión: conversión del Nitrógeno (proveniente de las proteínas, por ejemplo) en ion amonio
mediante calentamiento (a una temperatura de 400º C aproximadamente) en bloque de digestión con
adición previa de ácido sulfúrico y catalizador (sulfato de cobre (II) ), que desencadenan la conversión
del nitrógeno de la muestra en amonio.

2. Destilación: separación por arrastre con vapor del amoníaco y posterior solubilización en una
solución ácida de concentración conocida. En esta etapa se adiciona NaOH a la disolución de amonio
obtenida previamente, generándose NH3 y vapor de agua, que arrastra al mismo. La solubilización
posterior en la solución ácida permite la conversión de NH3 a catión amonio, el cual se encuentra
junto con el exceso de solución ácida añadido. El NH3 puede recogerse sobre dos medios: ácido fuerte
en exceso de concentración conocida, o bien, ácido bórico en exceso medido.

3. Valoración: medición de la cantidad de ácido neutralizado por el amoníaco disuelto, lo que indica
la cantidad de Nitrógeno presente en la muestra inicial. Según el medio de recogida en la destilación,
el amonio se valora de dos formas:

Recogida sobre ácido fuerte en exceso medido: se emplea una base y el indicador rojo metilo.

Recogida sobre ácido bórico en exceso medido: se emplea un ácido y el indicador rojo metilo.

5. OBJETIVO

Determinar el porcentaje de nitrógeno en una muestra de suelo

6. MATERIAL Y EQUIPO

 Muestra de suelo seco

 Balanza analítica
 Matraces kjeldahl
 Vasos precipitados
 Probetas
 Matraz aforado de 1L.
 Pipeta
 Destilador
 Bureta
 Campana con extractor de gases

SOLUCIONES Y REACTIVOS

 Solución de ácido bórico con indicador

 Solución de hidróxido de sodio 0.1N
 Mezclas de catalizadores
 Solución de ácido sulfúrico 0.01N
 Solución valorada de carbonato de sodio
 Solución de anaranjado de metilo
 Ácido sulfúrico concentrado
 7. PROCEDIMIENTO

A. digestión

 Pesar 1 g de una muestra de suelo.

 Colocar la muestra un matraz kjeldahl seco.
 Adicionar 2g de mezclas de catalizadores CuSO4 Y K2 SO4
 Agregar 10ml de ácido sulfúrico concentrado.
 Poner a calentar en el digestor a una temperatura media hasta que la muestra se torne clara.
La temperatura debe ser regulada de modo que los vapores de ácido sulfúrico se condensen
en el tercio inferior del cuello del matraz kjeldahl
 Hervir la muestra en 30 min a partir de ese momento
 Una vez terminada la digestión tapar los matraces para dejar enfriar.

B. destilación

 Añadir al matraz kjeldahl 25 ml de agua destilada fría y agitar

 Transferir el líquido a un balón de destilación de 5000 ml. colocar 5 a 6 perlas de ebullición
 Adicionar 3 granallas de zinc. Añadir 15 ml de la solución de hidróxido de potasio 10 N.
 Colocar en la salida del aparato de destilación un matraz Erlenmeyer que contenga 10 ml
de la solución de ácido bórico mas indicador verde de bromo crisol
 Conectar el flujo de agua e iniciar la destilación.
 Titula el nitrógeno amoniacal con la solución de ácido sulfúrico 0.01 N hasta que vire de
verde a rosa fuerte.

8. CRITERIO DE EVALUACION

Tabla. 1 criterios para evaluar un suelo con base en su contenido de nitrógeno total.

Categoría Valor (%) de N en suelo

Extremadamente pobre Menor 0,032

Pobre 0.032-0.063

Medianamente pobre 0.064-0.095

Medio 0.096-0.126

Medianamente rico 0.127-0.158

Rico 0.159-0.221

Extremadamente rico Mayor 0. 221

 9. REPORTE DE RESULTADOS

Peso de la muestra 1.0053 g

Volumen de ácido sulfúrico gastados en la muestra 6.1 ml

Volumen de ácido sulfúrico gastado en el blanco 0.00 ml

Estandarización de ácido sulfúrico 0.1005 N

% Nitrógeno total 0.854 %

CALCULOS

Estandarización de ácido sulfúrico

𝟐𝒆𝒒
𝟎. 𝟎𝟓𝟑𝟎𝒈 𝑵𝒂𝟐𝑪𝑶𝟑 ∗ 𝟏𝟎𝟔𝒈
= 𝟎. 𝟏𝟎𝟎𝟓 𝑵
𝟏𝑳
𝟔. 𝟏𝒎𝒍 ∗
𝟏𝟎𝟎𝟎𝒎𝒍

(𝑻 − 𝑩) ∗ 𝑵 ∗ 𝟏. 𝟒
%𝑵=
𝑺
(𝟔. 𝟏𝒎𝒍 − 𝟎, 𝟎𝟎𝒎𝒍) ∗ 𝟎. 𝟏𝟎𝟎𝟓 𝑵 ∗ 𝟏. 𝟒
%𝑵 = = 𝟎. 𝟖𝟓𝟒 %
𝟏. 𝟎𝟎𝟓𝟑𝒈

10. CONCLUCIONES

Con el resultado de 0.854 % podemos concluir que la muestra analizada tiene un alto contenido de
Nitrógeno es decir que de acuerdo con nuestros criterios de evaluación es un suelo muy rico en
Nitrógeno.

11. BIBLIOGRAFIA

www.sian.inia.gob.ve/repositorio/manuales_suelos/metodos

www.grupo-selecta.com/notasdeaplicaciones/sin.../metodo-kjeldahl/

Greenfield, H. and Southgate, D.A.T. 1992. Food Composition Data. London, Elsevier Appllied
Science.

King. 1978. Developments in Food Analysis Techniques. London, Applied Science Publisher