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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Perú, Decana de América

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA DE FARMACIA
DEPARTAMENTO TOXICOLOGÍA Y QUÍMICA LEGAL

“Año de la consolidación del Mar de Grau”

AÑO ACADEMICO: 5TO

ÇÇ CURSO
DETERMINACIÓN DEL R1 y EL R4
TOXICOLOGIA

N° : 10
DOCENTE: APESTEGUIA INFANTES , JOSE
GRUPO: JUEVES MESA 4

INTEGRANTES:

 CADILLO ESPINOZA KATHERINE 12004003

 DE LA CRUZ TITO,FIORELLLA 12040008
 QUISPE HILARIO, GISELL 12040122
 NIÑO DE GUZMAN CORTEZ NAJHELIND 12040078
 MERINO CABALLERO JOSE 11040071

FECHA DE LA PRÁCTICA: jueves 06 de mayo horario: 11 – 3 pm

Semestre Académico 2016-I

 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

I. INTRODUCCIÓN

Constituyen un grupo de compuestos derivados del ácido salicílico: aspirina o ácido

acetilsalicílico, derivados no acetilados, metabolizados a ácido salicílico, como salsalato o
ácido salicilsalicílico, salicilato sódico, salicilato de colina, salicilato magnésico, salicilato
magnésico de colina y acetil salicilato de lisina y, por último, diflunisal, no metabolizado a
ácido salicílico. Están disponibles para ingestión como comprimidos y sobres efervescentes,
pero también son ingredientes activos de hierbas chinas, del subsalicilato de bismuto (8,7
mg/ml de ácido salicílico) y de una amplia variedad de preparaciones tópicas disponibles en
el mercado como especialidades sin receta (OTC) utilizadas para problemas de dentición
(salicilato de colina) y para el alivio de dolores musculo esqueléticos. El potencial tóxico de
todos estos preparados es, a menudo, subestimado, teniendo en cuenta que infra estimar
la severidad de una intoxicación salicílica es común y peligroso. Las tasas de morbilidad y
mortalidad asociadas con intoxicación aguda son 16% y 1%, respectivamente. Aunque la
tasa de mortalidad global de la intoxicación aguda es baja, esta cifra puede ser engañosa,
ya que en casos de intoxicación severa aumenta a un 5%, incluso al 15% si se asocia retraso
diagnóstico.
Las benzodiacepinas son medicamentos de amplio uso. El nombre de benzodiacepinas se
debe a la presencia, en su estructura química, del anillo benzodiazepínico, compuesto por
un anillo de benceno unido a uno de diazepina, de 7 miembros heterocíclicos. 2,3 Las
diversas sustituciones en dicho anillo provocan cambios en el espectro y la potencia
farmacológica con que ejercen un efecto determinado, así como en las propiedades
farmacocinéticas que influyen de manera decisiva, tanto en la distribución del producto
como en la duración de su efecto. Las benzodiacepinas se caracterizan por ejercer un
cuádruple efecto farmacológico: ansiolíticos, sedantes o hipnóticos, anticonvulsivos y
miorrelajantes. Estos cuatro componentes del efecto aparecen en cada BDZ en una
proporción distinta, lo que determina su perfil de acción.
Mecanismo de acción las BZD son agentes depresores del sistema nervioso central, más
selectivos que otras drogas como los barbitúricos, que actúan particularmente sobre el
sistema límbico, comparten estructura química similar y tienen gran afinidad con el
complejo de receptores benzodiazepínicos. Son agonistas completos a nivel de su receptor
celular en la producción de propiedades sedantes y ansiolíticas.
Mecanismo de toxicidad.-las benzodiacepinas potencian la acción inhibitoria del
neurotransmisor ácido gaba amino butírico (gaba), favoreciendo el ingreso de iones de cloro
a la célula, lo cual genera hiperpolarización celular y disminuye la excitabilidad neuronal.
Dosis tóxica en general el nivel de toxicidad para las benzodiacepinas es muy alto. Los
efectos de la sobredosis por vía oral son leves o moderados.

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

II. PARTE EXPERIMENTAL

OBJETIVO

 Identificación de salicilatos por cromatografía en capa fina con revelador de FeCl3

 Identificación de benzodiacepinas con reactivo Dragendorff

REACTIVOS

 Agua destilada
 solución de FeCl3 5%
 Reactivo de Trinder
 Solución de FeCl3 5%
 Solución estándar de salicilato 5mg%
 Reactivo de dragendorff
 Reactivo de popoff
 N-naftilendiamino
 Solvente: MeOH, NH4OH (100:1.5)

MATERIALES

 Probeta 25ml.
 Matraz
 Tubo de ensayo
 Placa cromatografica
 Silicagel
PROCEDIMIENTO

CROMATOGRAFÍA
Se dejó correr la muestra
en un sistema de solventes
Se resuspendió Se sembró la
el R1 y R4 Con 1 muestra en una R1: metanol: acetona (5: 5)
mL de metanol placa
R2: metanol: acetona:
cromatografía
trietanolamina (5:5:0,3)
de silica gel

Se revelo:

R1: Rvo. trinder

R4: Rvo. Dragendorf

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

III. REACCIONES

1. SOLVENTES EMPLEADOS EN LA EXTRACCION ACIDA Y NEUTRA

La solución de bicarbonato es añadida con el objeto de neutralizar el toxico en forma de

tartrato.La solución de hidróxido de sodio tiene como fin llegar a pH alcalino de 8.15,
descomponer el tartrato y liberar los tóxicos correspondientes a los barbituratos que a
diferencia de los neutros son mucho más afines al agua.

El ácido clorhídrico tiene como fin acidificar el medio y concentrar el toxico acido en forma
no ionizada en el solvente orgánico.

2. SOLVENTES EMPELADOS EN LA EXTRACCION ALCALINA

El hidróxido de amonio tiene como fin basificar el medio y concentrar el toxico alcalino en
forma no ionizada en el solvente orgánico.

REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN

A. Residuo 1- Análisis de salicilatos:

La determinación de los salicilatos se hace generalmente con cloruro férrico (FeCl3)

proveniente del reactivo de Trinder. El reactivo de Trinder en general está conformado por
40g de HgCl, 120mL de HCl 1N y 40g de Fe (NO3)3 agregando agua csp 1L.

Cabe resaltar que en el organismo, el ácido acetil salicílico sufre una biotransformación
condicionada por el medio básico proporcionado por el intestino delgado, que es el lugar
de absorción, por lo general, de los salicilatos.

O OH O OH

O O OH O
+ -
OH + H3C
H3C OH

ASA Ácido salicílico

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

Al agregar el reactivo de Trinder, se obtiene un complejo coloreado de salicilato férrico. Este

complejo de color azul puede ser usado para cuantificación espectrofotométrica de ASA a
una longitud de onda de 540nm.

O
O OH HO
-
O
OH -
OH 3+
O O
3 + FeCl3 Fe
-
O
Ácido salicílico O OH

B. Residuo 4- Análisis de alcaloides, fenotiazinas y benzodiacepinas:

1. Identificación fenotiazinas:

La identificación de fenotiazinas ha sido un tópico de amplia investigación sobretodo

aplicado al ámbito clínico. Forrest F.M y Forrest F.L, en 1960, propusieron un método de
determinación cualitativa basado en el uso de FeCl3, HClO3 y HNO3 (el reactivo FPN, de
fierro, perclórico y nítrico), el cual produce un radical libre con coloración variable (azul,
azul violáceo).

La composición del reactivo FPN consiste en 5 partes de 5% de FeCl3, 50 partes de 50% de

ácido nítrico y 45 partes de 20% de ácido perclórico. Este último funciona como un

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

estabilizador del radical, al cual le da una vida de 3 horas, mientras que el ácido nítrico ayuda
a intensificar el color.

2. Identificación benzodiacepinas:

Por lo general, las benzodiacepinas son identificadas por el reactivo de Dragendorff

(Tetraiodobismutato de potasio), formándose un precipitado de color naranja
correspondiente al tetrayodo bismuto de potasio, el cual da para los compuestos
alcaloideos.

IV. RESULTADOS

CUANTIFICACIÓN DE SALICILATO

5mg de salicilato 1OOmL de solución

0 .1mL x

X = 0. 005mg de solución estándar

 Concentración del estándar : 0. 005mg

Densidad óptica (DO) “absorbancia” del estándar 0.095

Densidad óptica ( DO) “Absorbancia” de la muestra problema 2.7

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

Y = DO Mp x concentración del estándar / DO estándar

Y = 2.7 x 0. 005mg / 0.095
Y = 0.14mg
Y = 14mg %

Y =concentración de la muestra problema: O.14mg

Y = 14 mg % menor 3O mg% reacción medicamentosa

CROMATOGRAFIA DEL SALICILATO

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

Frente de solvente total : Frente del soluto de la

muestra problema de
8.5 cm RF: 6.8 / 8.5= O.8 cm
Salicilato : 6.8 cm

Frente de solvente total: Frente del soluto del

estándar de Salicilato :
8.5 cm RF: 7.3 / 8.5 = O.85 cm
7.3 cm

CROMATOGRAFIA DE BENZODIAZEINA

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

Frente de solvente total : Frente del soluto de la

11.6 cm muestra problema de
RF: 9.5 / 11.6 = O.81
benzodiacepina: 9.5 cm

Frente de solvente total: Frente del soluto del

11.6 cm estándar de
RF: 10 / 11.6 = O.86
benzodiacepina: 10 cm

V. DISCUSIONES
Los salicilatos se elimina principalmente vía renal, dependiendo la excreción de
salicilato libre de la dosis y el pH urinario y, aumentando con la dosis hasta que se
saturan las vías de metabolización, por lo que pasa de una cinética de orden 1
(eliminación proporcional al nivel sérico) a una cinética de orden 0 (constante) ; un pH
alcalino favorece también la eliminación, pues disminuye la reabsorción pasiva en
túbulo distal porque aumenta la fracción ionizada del metabolito y difunde menos. Por
tanto, la vida media varía entre 2 y 40 horas conforme aumenta la dosis de salicilato
ingerido hasta la sobredosis aguda. Asimismo, un aumento de la diuresis aumenta
también la eliminación, por aumento del filtrado glomerular.
Los niveles aceptados de salicilatos, generalmente como asociados a toxicidad clínica
son 30 mg/dl. Entonces con relación a los análisis realizados en la práctica y a los
resultados obtenidos podemos decir que la cantidad de salicilatos encontrados está por
debajo del nivel máximo aceptado ( 14 mg/dl ) y se podría decir que esto se puede dar
porque el paciente consumió fuentes de salicilatos como fuente medicamentosa mas
no como toxica.
Con relación a la cromatografía realizada se pude evidenciar en comparación con el
estándar que si hay muestra y corresponde al estándar, ya que la diferencia de Rf está
cerca a la unidad.
Las benzodiacepinas potencian la acción inhibitoria del neurotransmisor ácido gaba
amino butírico (GABA), favoreciendo el ingreso de iones de cloro a la célula, lo cual
genera hiperpolarización celular y disminuye la excitabilidad neuronal.

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

En general el nivel de toxicidad para las benzodiacepinas es muy alto. Los efectos de la
sobredosis por vía oral son leves o moderados. Se han descrito ingestiones de diazepam
de 15–20 veces la dosis terapéutica sin presentarse deterioro importante de la
conciencia; sin embargo, la administración intravenosa rápida, aun en dosis
terapéuticas, puede inducir paro respiratorio, posiblemente debido en parte al vehículo
de la ampolla (propilenglicol). La coingestión de benzodiacepinas con otras sustancias
sedantes, hipnóticas, etanol o antipsicóticos, potencializa el efecto depresor sobre la
respiración y la conciencia.
Con relación a la práctica, no se determinó cuantitativamente las benzodiacepinas pero
si se determinó su presencia mediante la pruebas cromatografías obteniendo la
división de Rf cercano a uno lo que nos indica que este compuesto es similar naturales,
demostrando así su presencia en la muestra de orina analizada.
Con relación a la determinación de fenotiazidicos no se logró determinar la presencia
debido a que hubo una mala praxis de esta y no se pudo observar los resultados finales;
sim embargo se cree que los resultados fueron negativos ya que solo una de las
muestras tubo el espacio suficiente como para considerarlo y se observó que no hubo
resultado positivo para la muestra.
VI. CUESTIONARIO
1. TÉCNICA DE STAS OTTO

Una porción de la papilla de la muestra se trata con dos volúmenes de etanol acidificándolo
con ácido tartárico dejando en maceración, si se sospecha que no están presentes alcaloides
lábiles en la muestra, se mantiene la mezcla de 60/70°C durante la maceración .A
continuación se filtra y se procede a la evaporación del etanol, obteniéndose un residuo
siruposo, se trata nuevamente con un volumen de etanol tibio, se filtra y se evapora,
obteniéndose un residuo granular seco. Finalmente se trata con una porción de ácido
sulfúrico al 5%, obteniéndose un filtrado acuoso libre de proteínas.
FUNDAMENTO
La separación de un compuesto por extracción se basa en la transferencia selectiva del
compuesto desde una mezcla sólida o líquida con otros compuestos hacia una fase líquida
(normalmente un disolvente orgánico). El éxito de la técnica depende básicamente de la
diferencia de solubilidad en el disolvente de extracción entre el compuesto deseado y los
otros compuestos presentes en la mezcla inicial.6

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 EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Santiago Mintegi “Manual de intoxicaciones pediátricas” ASOCIACION ESPAÑOLA DE
PEDIATRIA AEP, 3er Edición, Arboleda, 1. 28221 Majadahonda (Madrid), pag:
133_135.
2. Calero González LM, Oropesa Pupo D, González Morales M, Roca Socarras AC,
Blanco Torres K. La prescripción de benzodiacepinas en el adulto mayor, un
problema médico social actual. Correo Científico Médico de Holguín 2009;13(2)
[consulta: 16 mayo 2016 ].
3. Repetto, Manuel; Repetto, Guillermo. Toxicológica fundamental. 4 a ed. Sevilla:
Editorial Díaz de Santos; 2009.
4. Guatelli M. Manual práctico de química y toxicología. Editorial Universitaria, 1º
edición. Buenos Aires. 1958. Pg. 149-152
5. Gil F, Pla A, Hernández A, Rodrigo L, López O. Extracción de Tóxicos Orgánicos de
una Muestra de Orina. Fraccionamiento del Extracto. Universidad de Granada,
España. Página principal- Departamento de Medicina Legal, Toxicología y
Psiquiatría. [http://www.ugr.es /~fgil/proyecto/index.html]
6. Alberto L. Peña. Influencia de la Formulación en la Excreción Urinaria de Ácido
Acetilsalicílico. Acta Farm. Bonaerense 11 (1): 17-24 (2014)
7. Uvier Gómez, MD. Intoxicación por benzodiacepinas. Departamento de Toxicología.
Facultad de Medicina. Universidad de Antioquia. Guías para manejo de urgencias.
Véase en:
http://www.aibarra.org/apuntes/criticos/guias/intoxicaciones/intoxicacion_por_b
enzodiacepinas.pdf
8. López Parra Ana “aportaciones del laboratorio en diagnóstico y el tratamiento de
intoxicaciones” facultad de medicina, universidad complutense de Madrid.
Disponible en: http://myslide.es/education/metodos-de-extraccion-de-
alcaloides.html

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