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Reacciones de cuantificación
La tabla 1 resume los ensayos para cuantificar proteínas totales más comunes. Es importante evaluar la
compatibilidad de cada ensayo con los tipos de muestra, el rango del ensayo, el volumen de muestra y la
disponibilidad de un espectrofotómetro adecuado, así como el tiempo y el costo.
Reacciones de identificación
Entre las principales reacciones de identificación de los aminoácidos se encuentran las siguientes:
Reacción con la ninhidrina: El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la
ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es primario, amarillo para la
prolina e hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene un grupo amido en la cadena lateral. Esta reacción
también identifica los grupos alfa-amino libres presentes en péptidos y proteínas.
Reacción de Millón: El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio
a pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina y las proteínas que la
contienen.
Reacción Xantoprotéica: Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con ácido
nítrico concentrado formando nitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo cual esta reacción
permite reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y Triptófano.
Reacción de Sakaguchi: El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con
soluciones de alfanaftol en presencia de Bromo en medio alcalino formando complejos coloreados rosados
o rojos.
Reacción de Ehrlich: La presencia de anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados en la cadena lateral de los
Aminoácidos se puede identificar mediante la reacción con ácido sulfanílico y nitrito de Sodio por formación
de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así detectar la presencia de Tirosina e Histidina
libres o formando péptidos y proteínas.
Reacción de Hopkins Cole: El anillo indólico presente en la cadena lateral de los alfa-aminoácidos libres o
haciendo parte de péptidos y proteínas se puede reconocer mediante reacción con el ácido glioxílico a pH
ácido, puesto que forma complejos de coloración violeta o amarillo violeta, permitiendo así identificar al
triptófano.
Reacción con acetato de Plomo alcalino: Los Aminoácidos azufrados como Metionina, Cisteína y Cistina se
reconocen por la formación de precipitados de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se forman
cuando reacciona con Acetato de Plomo en medio alcalino.