Ciclo Celular

Fase permanente en
células que no entran Síntesis de proteínas Replicación del ADN
nunca en mitosis. y aumento del tamaño y síntesis de
Estado de quiescencia. celular. histonas.

G0 G1 S
División del
citoplasma
Citocinesis
M Interfase
División
celular Mitosis
Mitosis o
Meiosis

G2

Transcripción y traducción de
G1: 4-6 HORAS
genes que codifican proteínas
S: 10-12 HORAS
necesarias para la división. G2: 4 -6 HORAS
Duplicación de los centriolos MITOSIS: < 1 HORA
Las kinasas dependientes de ciclinas controlan el ciclo celular

Cuando se forma un complejo ciclina-cdk, la kinasa se activa.

En ausencia de ciclina, la cdk es inactiva.
 CICLO CELULAR ESTANDAR

CICLO CELULAR EMBRIÓN (1ªS ETAPAS)

Algunas células se dividen rápidamente, otras como los glóbulos rojos pierden la
capacidad de dividirse.
Algunas (hepatocitos), conservan, aunque la utilizan muy escasamente. Se dividen si
se remueve parte del hígado. Hasta que retorna a su tamaño normal.
G1
Intervalo entre mitosis y comienzo de la replicación del ADN. La célula es
metabólicamente activa y está creciendo.

La célula supervisa su entorno, su propio tamaño. Los complejos ciclinas-kinasas se

expresan.

La célula decide si continúa en el ciclo proliferativo que lo conducirá a la

replicación del ADN o si deriva a la diferenciación.

Se defosforilan las proteínas encargadas de activar a las ADN polimerasas.

Para terminar la G1 e ingresar a la fase S, la ciclina G1 aumenta su concentración a partir del punto
R y activa la quinasa cdk2.

FACTOR PROMOTOR DE LA REPLICACIÓN (FPR): activa la síntesis del ADN.

Cuando la concentración de ciclina decrece, la cdk2 se libera y el complejo FPR se desactiva.
Los niveles de cdk2 son constantes en todo el ciclo.
Fase S
Duplicación o síntesis. Se produce la replicación del ADN y de los centrómeros.
Comienza cuando la célula adquiere el tamaño suficiente y ATP necesario.

Los nuevos “ADNs” quedan unidos por el centrómero hasta la mitosis, recibiendo
el nombre de cromátidas hermanas, la fase S tiene una duración de 10-12 horas
aprox. Se sintetiza ADN e Histonas
G2
Tiempo que transcurre entre la duplicación del ADN y el inicio de la mitosis.
Prosigue el crecimiento de la célula, hay síntesis de proteínas que constituirán el
huso mitótico. Se asegura que se ha completado la replicación y no se sintetizan
más ciclinas.
Se repara el ADN que se ha replicado.
Se transcriben y traducen genes para proteínas implicadas en la división celular.
Los cromosomas empiezan a condensarse.
Sólo entran en mitosis las células que hayan completado la duplicación del ADN.

Al final de la G2 aumenta la concentración de ciclina mitótica que se une a la cdK2 componiendo

el FACTOR PROMOTOR DE LA MITOSIS que fosforila proteínas esenciales.
Se fosforilan las enzimas que controlan la condensación de los cromosomas, la desorganización de
la envoltura nuclear y el ensamblaje del huso mitótico.
Cuando todos los cinetocoros se han ligado a las fibras del huso se desactiva este complejo.
Interfase:
Replicación Cromosómica (ADN/Prot). Transcripción de la eucromatina
(Cromatina activa).

Mitosis:
• Comienza con la condensación de la eucromatina. Pérdida de transcripción.
• Metafase: Máxima condensación cromosómica. Fibra cromatina (30nm).
• Cromosoma metafásico: contiene 2 cromátidas hermanas unidas por su
centrómero.
• Anafase: Separación de cromátidas hermanas.
M
Mitosis: División Celular: separación de las cromátidas hermanas.

En la profase, los cromosomas replicados, formado

por dos cromátidas hermanas, se condensan

En la metafase, los cromosomas se alinean

en el ecuador del huso
En la anafase, las cromátidas hermanas se
separan de forma sincrónica formando los dos
cromosomas hijos.

Enzimas:

Complejo Promotor de la Anafase (APC/C). Miembro de la familia de enzimas ubiquitína ligasa

Inician la anafase.

Degradan las cohesinas que mantienen unidos las cromátides hermanas.

En telofase, los cromosomas hijos llegan
a los polos del huso y se descondensan.

Se reorganiza una nueva envoltura

nuclear y marca el final de la mitosis.
La división del citoplasma empieza con la
contracción del anillo contráctil.
Cambios de la Cromatina durante el Ciclo Celular

Fosforilación, metilación, desacetilación

compactación, heterocromatinización e inactivación.

Defosforilación, hipometilación, acetilación

Expresión génica!

Heterocromatinización
silenciamiento génico, condensación.

Eucromatina
actividad en la expresión génica.

Hetero-Cromatina inactiva, muy condensada
Se replica tardíamente

en Fase S. La fase S ocurre una sola vez en el ciclo.
Eu-Cromatina activa, poco condensada
Se replica temprano en Fase S.
 Cohesinas y condensinas
Son complejos proteicos que contienen dímeros de proteínas SMC y
pueden unirse al ADN por sus extremos globulares

Unión de
Dímero de SMC (Structural cromátides Enrollamiento del ADN
maintenance of Chromosomes) en hermanas por condensinas
complejo de condensina o cohesina por cohesina
Las cohesinas “unen” a las cromátides hemanas a lo largo de toda su extensión
Las condensinas hidrolizan ATP y pueden “enrollar” el ADN bajo condiciones
experimentales. No se conoce el mecanismo preciso de condensación por condensina
 REGULACIÓN DEL CICLO
CELULAR
CÉLULAS
ANIMALES
Punto de restricción
o inicio
FACTORES DE
CRECIMIENTO

Si no se cumplen condiciones
de tamaño celular, presencia
de nutrientes, temperatura,
el ciclo se detiene y la célula
deja de crecer o dividirse.
Control del ciclo celular
A) patrón de metilaciones de citocinas (introducción de grupos metilos –
CH3 en el anillo de citocinas del ADN).
B) longitud de los telómeros, telomerasa.
C) expresión de genes necesarios para que ocurra el ciclo celular.

En la replicación del ADN que precede a cada división celular se puede producir
una metilación de las citocinas.
Si éstas forman parte del promotor y quedan metiladas, se reprime la expresión
del gen.
Proteínas de Control del ciclo celular

Genes que codifican proteínas para el ciclo: enzimas y precursores de la síntesis

de ADN, enzimas para la síntesis y ensamblaje de tubulina, etc.

Genes que codifican proteínas que regulan positivamente el ciclo

(Protooncogenes). Activan la proliferación celular, para que células pasen a la fase S.
Sistema de ciclinas (C) y quinasas dependientes de ciclinas (CDK).

C
proteínas reguladoras de vida corta: CG1, CS, CM.

CDK
enzimas que activan o inactivan otras proteínas fosforilándolas.

Las C y CDK se asocian formando el complejo C-Cdk y determinan la ocurrencia de

las distintas etapas del ciclo.

Antioncogenes o Genes Supresores de Tumores:

Genes que codifican proteínas que regulan negativamente el ciclo.
Regulan el ciclo evitando que la mitosis continúe si se ha producido una alteración
del proceso normal.
La mayoría de las moléculas de señalización extracelular que afectan la división
crecimiento y supervivencia celular son proteínas solubles secretadas por otras
células o presentes en la matriz extracelular:

Mitógenos. Sustancias (mayormente proteínas) que estimulan la división celular

contrarrestando los mecanismos intracelulares de freno que bloquean la progresión
del ciclo celular

Factores de Crecimiento. Estimulan el crecimiento celular (aumento de la masa

celular) mediante la promoción de la síntesis y la inhibición de la degradación de
proteínas y otras macromoléculas.

Factores de Supervivencia. Promueven la supervivencia celular por supresión de la

apoptosis.

Estas categorías no se excluyen mutuamente ya que numerosas moléculas de

señalización cumplen más de una de las funciones señaladas.
PUNTOS DE CONTROL DEL CICLO CELULAR
Mecanismos de regulación del ciclo celular

Cada subunidad catalítica Cdk

puede asociarse con diferentes
ciclinas y la ciclina asociada
determina que proteínas serán
fosforiladas por el complejo Cdk-
ciclina.

Genes 'de verificación', codifican:

• productos que evitan mutaciones de genes reguladores del ciclo.
• proteínas que inactivan las CDK por fosforilación/desfosforilación.
• proteínas inhibidoras del ciclo (por ej., p53).
• proteínas que inducen la salida del ciclo hacia un estado celular diferenciado o
hacia la apoptosis.
 Tres ciclinas principales regulan el ciclo celular
1. Ciclinas G1/S: controladas por ciclinas G1. Activan las Cdk en las últimas etapas
de G1 y desencadenan el Inicio. Sus niveles descienden en la fase S.

2. Ciclinas S: se unen a las Cdk poco después del Inicio y ayudan a estimular la
duplicación de los cromosomas. Los niveles de las ciclinas S permanecen elevados
hasta la mitosis y contribuyen al control de algunos acontecimientos mitóticos
iniciales.

3. Ciclinas M: activan las Cdk que estimulan la entrada en la mitosis en el punto de

control G2/M. Las ciclinas M son degradadas hacia la mitad de la mitosis.
Ciclina D = Ciclina S
 Actividad de los complejos cdk-ciclinas
1. Síntesis y acumulación de las ciclinas de la fase G1 de interfase.

2. Formación de complejo G1 CDK-ciclina. Fosforilación de proteínas que promueven

actividades en G1. Primer punto de control (R).

3. Síntesis y acumulación de las ciclinas de la mitosis.

4. Formación del complejo CDK-ciclina mitóticas. Fosforilación de proteínas que

promueven inicio de mitosis y del complejo de enzimas que promueve la anafase.

Fosforilación de cdk
Sitio activo Salida del asa T del sitio activo en el asa T por CAK
bloqueado y activación de la kinasa
por asa T
 Formación del
complejo CDK-
ciclina mitótica

Síntesis y
acumulación de las
ciclinas
Punto Control

Punto Control

Punto R
Síntesis y
acumulación de
las ciclinas de la
mitosis Formación de
complejo G1
CDK-ciclina

Primer punto de
control
 CONTROL DEL CICLO CELULAR

Transición metafase-anafase. Se
monitorea la alineación y anclaje
correctos de los cromosomas a través
del huso mitótico

Punto G2. responsable de iniciar la fase M.

Influyen: tamaño, daños en ADN y la
replicación de la fase S. Punto R. Primer punto
de verificación.
Influyen: Factores de
crecimiento, daños en
el ADN y disponibilidad
de nutrientes.

El daño celular en el
punto R activa a p53,
que favorece la
reparación el DNA,
promoviendo la
apoptosis.
Regulación de las concentraciones de ciclinas mitóticas
 Regulación de las concentraciones de ciclinas mitóticas
• Al inicio de la mitosis el MPF fosforila residuos de serina específicos en las tres
láminas nucleares y así se produce la despolimerización de estas.

• La despolimerización de las proteínas láminas produce ladesintegración de la

malla que es la lámina nuclear, lo que contribuye a la ruptura de la envoltura
nuclear.

• El MPF fosforila proteínas que integran el complejo condensina. Este complejo

fosforilado es capaz de inducir superenrrollamientos en el ADN.

• La fosforilación de proteínas asociadas a los microtúbulos por parte del MPF es

probable que sea necesaria para generar los cambios en la dinámica microtubular
que traen como consecuencia la formación del huso mitótico y los ásteres.

• La función de la cohesina es regulada por el inhibidor de la anafase.

• Conforme las células entran en anafase, este inhibidor es poliubiquitinizado por el

APC y degradado por el proteasoma. Como consecuencia se permite separar las
cromátides hermanas hacia los polos opuestos.

• La fosforilación de la cadena liviana de la miosina inhibe su interacción con la

proteína miosina para la formación del anillo contractil.
 Las fosforilaciones inhibidoras y las proteínas inhibidoras
de Cdk (CKI) pueden inhibir la actividad Cdk
El aumento y descenso de los niveles de las ciclinas es el principal determinante
de la actividad de las Cdk.

Además, otros mecanismos regulan la actividad Cdk.

1. La fosforilación del sitio activo de la cdk por la kinasa Wee, linhibe la

actividad de los complejos Cdk-ciclina.
2. La desfosforilación del sitio activo de la cdk por la fosfatasa Cdc25,
aumenta la actividad cdk-ciclinas.
Los complejos Cdk-cicllna también se regulan por la unión de proteínas inhibidoras
de kinasas (CKI; Cdk inhibitor proteins).

Inhibidores de las Cdk

Familia Complejos Cdk/ciclina Fase del ciclo afectada

Kip (kinasa inhibitor proteins) Cdk4/ciclina D G1
(p21,p27,p57) Cdk6/ciclina D G1
Cdk2/ciclina E G1/S
Cdk2/ciclina A S
Ink4 Cdk4/ciclina D G1
(p15,p16,p18, p19) Cdk6/ciclina D G1
• La proteínas p53 hace que se expresen
otros genes de proteínas reguladoras
como los p21 y p16 que bloquean la
actividad de la cdk2.

• Las células, al no replicar su ADN se

estabilizan en la fase G1.

• Si el ADN replicado tiene un daño

peligroso para las células hijas, la p53
se encarga de la muerte celular o
apoptosis (muerte celular programada).
 La transición de la metafase a la anafase NO se desencadena mediante
la fosforilación, sino por degradación proteica
El complejo promotor de la anafase o ciclosoma (APC/C), es el regulador de la transición de la metafase a
la anafase.

La proteína ubiquitina marca proteínas, provocando su degradación proteolítíca en los proteosomas.

El APC/C cataliza la ubiquitización y degradación de la segurina (protege los cinetocoros). La

degradación de la seguirina, activa una proteasa que separa las cromátidas hermanas y desencadena la
anafase.

El APC/C degrada las ciclinas S y M inactivando las Cdk, por lo cual las kinasas de la fase S y mitosis son
defosforiladas permitiendo laa la finalización de la fase M.
Otra ubiquitina ligasa (SCF) ubiquitiniza ciertas proteínas CKI a finales de GI y facilita el control de la
activación de Cdk-S y la replicación del DNA

Subunidades
activadoras de
APC/C
Enzimas APC/C, degradan las cohesinas
que mantienen unidos las cromátidas
hermanas.

cohesina
Punto R.
Primer punto de verificación, al final de G1. La célula decide si debe o no avanzar
en el ciclo.
La mayoría de las células se paran en esta etapa y entran en G0.

Factores verificados: factores de crecimiento, tamaño celular, daños en el ADN y

disponibilidad de nutrientes.
Las células detienen el ciclo si las condiciones ambientales son inhóspitas.

La detección de daño celular en el punto R activa a p53, proteína que favorece la

reparación el DNA, lo cual detiene el ciclo promoviendo la apoptosis.

Punto G2.
Final de la fase G2. Responsable de iniciar la fase M.
Se verifica: tamaño, daños en ADN y si la replicación (S) ocurrió sin errores.
Si se pasa, la célula iniciará la mitosis.

Punto metafase-anafase.
Ocurre en metafase luego de la alineación de los cromosomas al huso.
Se verifica: alineación y anclaje correctos de los cromosomas a través del huso
mitótico.
Proteína p53: punto de control G1
Ejerce control de tipo negativo frenando la división a nivel de G1, antes de punto R.
Es sintetizada por la propia célula en respuesta a alteraciones del ADN.
Se origina por el gen p53 perteneciente a la categoría de genes supresores de tumores.
 El gen p53 controla la transición G1-S.

Poblaciones con el gen p53 mutado luego de irradiadas

no detienen su progresión en el ciclo.

Las líneas celulares son más radiosensibles cuando:

1. Están menos diferenciadas
2. Cuando tienen mayor actividad proliferativa
 El síndrome de Li-Fraumeni
es una enfermedad
hereditaria que se transmite
según un patrón autosómico
dominante.

Mutación del gen supresor tumoral TP53 situado en el cromosoma 17p.

Los pacientes son propensos a desarrollar diferentes tipos de cáncer a edades tempranas:
osteosarcomas, sarcomas, cáncer de mama, leucemias, linfomas y tumores cerebrales.
Resumen
Factores que regulan el pasaje por los puntos de control del ciclo celular

1. Disponibilidad de factores tróficos: lo estimulan (protooncogenes).

2. Integridad del ADN: su alteración lo detiene (proteínas supresoras de tumores:
retinoblastoma, p53, p21).
3. Duplicación completa del ADN: la falta de la misma detiene el ciclo (proteínas
supresoras de tumores).
4. Alineación de los cromosomas en el plano ecuatorial durante la metafase
con los cinetocoros de cada cromátide unidos a los microtúbulos respectivos:
fenómeno necesario para la activación del complejo promotor de la anafase.

El ADN no se duplica dos veces en el mismo ciclo celular ya que

durante la replicación del ADN se separan del sitio de inicio de
la replicación las proteínas MCM que no pueden volver a unirse
a dicho sitio hasta la interfase siguiente.
Telómeros

Mecanismo destinado a "contar" el número de duplicaciones. Los telómeros se

acortan en cada replicación. Cuando el acortamiento llega a cierto límite las
células entran en senescencia.

La telomerasa es muy activa en células fetales, pero poco activa en células de

tejidos adultos. Las células tumorales expresan niveles elevados de telomerasa y
su inhibición podría ser terapia contra el cáncer.

La reactivación de la telomerasa coopera durante tumorogénesis con mutaciones

en oncogenes como ras y genes supresores como p53 y Rb.

La eliminación de la telomerasa, causa inestabilidad cromosómica, errores en la

segregación y aparición de anomalías y diversos tipos de mutaciones. La inducción
del gen supresor p53 puede provocar la muerte celular y evitar así la acumulación
de mutaciones y malignización de las células.

Si la expresión de p53 se anula por mutación se produce una “catástrofe

genética», con masiva acumulación de mutaciones.
Apoptosis

Muerte celular programada. Implica la activación de mecanismos específicos.

Se produce de modo natural durante el desarrollo embrionario y postnatal temprano
en múltiples tejidos.

Durante el ciclo celular, se produce apoptosis mediada por el gen supresor p53
entre otros, en casos que ADN replicado presente alteraciones, evitándose así la
generación de células anormales.

Cuando una célula normal completa su función fisiológica o percibe un daño genético
o celular pone en funcionamiento el proceso fisiológico de la apoptosis que induce su
propia muerte. En este proceso interviene un factor inductor de la apoptosis (AIF)
que se encuentra en las mitocondrias y que al desencadenarse el proceso migra hacia
el núcleo provocando la destrucción del ADN.

Las enzimas proteasas activas iniciando y ejecutando la apoptosis son llamadas

caspasas.
Carcinogénesis: aumento descontrolado de la proliferación de un grupo de células
que da lugar a un tumor o neoplasia, y la posterior adquisición por estas células de
capacidad invasiva, que les permite diseminarse desde su sitio natural en el
organismo y colonizar y proliferar en otros tejidos u órganos (metástasis).

Protooncogenes: genes normales que estimulan la proliferación celular. Su alteración

se denomina oncogén, que dan lugar a la excesiva y descontrolada proliferación
celular.

Genes supresores de tumores o antioncogenes: genes que inhiben la producción

anormal de células. La función normal de estos genes es codificar proteínas que
bloquean la división celular en casos en que haya errores. Se conocen 15 genes
supresores de tumores, siendo el más importante p53. Transición G1 a S.

Cancer: Acumulación de mutaciones en protoncogenes y supresores tumorales

La Ataxia-Telangiectasia-Síndrome de Louis-Barr

Enfermedad hereditaria autosómica recesiva.

Causada por una mutación en el gen ATM, localizado en el cromosoma 11, y
que codifica para una proteína fosfatidilinositol-3-kinasa, involucrada en
respuestas celulares y control de ciclo celular.

Poblaciones celulares mutantes de Ataxia Telangiectasia, presentan mayor

probabilidad de muerte que poblaciones celulares normales cuando son tratadas
con radiaciones ionizantes.
 La sensibilidad de las poblaciones celulares a diferentes agentes genotóxicos
se denomina de la fracción de sobrevida (S) en función de una dosis (x)
determinada del agente que lesiona el ADN

1. Para determinar S=f(x), luego del tratamiento se siembran las células

tratadas en medio solido.
2. Se incuban 48h a30ºC.
3. Se cuentan las colonias formadas y se calcula la probabilidad de
sobrevida.
 S = Nm/No

Nm: número de colonias formadas

No: número de células sembradas luego del tratamiento.

Parámetros radiobiológicos

Dq: dosis quasi umbral. En todo este rango la probabilidad de sobrevida es 1.

Representa la capacidad de reparación.

N: nº de extrapolación

Do: dosis letal media. Es la dosis que corresponde a una probabilidad de sobrevida
=0.37.

Modelos matemáticos: exponencial, lineal cuadrático.

Las curvas de sobrevida de poblaciones celulares a un agente que daña el ADN

constituye un método para el estudio de la probabilidad de reparación.