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INFORME EXTRACCION DE ADN

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INFORME EXTRACCION DE
ADN
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funciones necesarias para la ida
como la defensa ante infecciones,
los intercam$ios gaseosos y la
distri$ución de nutrientes. ara
éstas funciones cuenta con
diferentes células que se
encuentran en el plasma, todas
éstas células se fa$rican en la
médula ósea, ésta se encuentra en
el te#ido espon#oso de los -uesos
planos, es decir, cráneo, erte$ras,
esternón, crestas ilíacas, y en los
canales medulares de los -uesos
largos como el fémur y el -úmero.
Co)*os##"+ sa+1,3+ea:
 
Figura 6. Co%*osición sanguínea.
 /l"b,los ro4os:  ransportan
el o6ígeno de los pulmones
-acia los te#idos y captan el
an-ídrido car$ónico
producido en los te#idos que
es eliminado por las ías
respiratorias.
 /l"b,los bla+os:
De4enden al organismo
contra las infecciones
$acterianas y irales.
 Pla5,e!as:  Lmpiden
-emorragias, faoreciendo la
coagulación en la sangre.
 Plas)a:  ermite el
transporte de nutrientes,
contiene diersas proteínas
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Universidad Francisco José de Caldas.
Facultad de ciencias y educación.
Licenciatura en Biología.
que son de utilidad en la
terapia transfusional.
E6isten diferentes grupos
sanguíneos A, , A y @ y el
sistema '-esus, conocido como el
factor '-, !ositio o negatio",
éstos se encuentran presentes
simultáneamente en los seres
ios. (uando se -a$la de grupo y
factor nos referimos al sistema A@
y '-.
La sangre no se puede fabricar 
7n +rgentina, co%o en todo el %undo,
de*ende%os de la generosidad de los
ciudadanos *ara 8ue los centros de
atención de la salud *uedan reali'ar 
tras*lantes, o*eraciones y trata%ientos
oncológicos, entre otros.
La sangre no se *uede al%acenar 
inde=nida%ente ya 8ue caduca0 las
*la8uetas se tienen 8ue utili'ar antes de
cinco días, los gló-ulos ro3os antes de #2
días y el *las%a antes de un a>o.
MATERIA'ES 6 M&TODOS:
E7!ra#"+ del ADN:
7a e6tracción de ADN consta de
unos procedimientos adecuados de
lisis en donde se rompen
estructuras que con4nan el
citoplasma y li$erar al medio su
contenido y otra de puri4cación,
que implica la retirada de la
solución 4nal de la mayoría de
residuos que se encuentran a su
alrededor.
7os pasos correcta
e6tracción necesarios deparaADN
la
mediante un procedimiento se
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encuentran en el a+e7o 8  al 4nal permitiendo que ésta y las lisis
del informe. agregadas se me&clen de tal
manera que se limpie de forma
7a adecuada e6tracción del ADN se apropiada la muestra de sangre.
llea a ca$o de la siguiente
maneraH

8. Real#9a+do la l#s#s
0l,las o v#r,s. 7asdesales
las
caotrópicas ayudan a romper
la estructura tridimensional
de las macromoléculas como
las proteínas.
. De1rada#"+ de la 2ra#"+
*ro!e#a aso#ada al ADN.
/e consigue mediante la
acción de una proteasa, ésta
fracción proteica puede
precipitarse me#or con la
ayuda de las sales como el
de amonio, o el
acetato sódico. Figura '. orte9. Utili'ado *ara la %e'cla de las %uestras a

  continuación de la lisis 2

Materiales y métodos:

M!"#$L"%
 

Figura (. untas *ara %icro*i*etas de la-oratorio. @Cada

color tiene una ca*acidad di?erenteA.

Figura &. Centri?uga, con=gurada *ara centri?ugar a !#.

r*% @revoluciones *or %inutoA a lo largo de ! %inutos.

7as muestras se centrifugan

durante un tiempo estipulado,

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Figura 12. Lisis  *ara la disgregación de +D.

ara la e6tracción del ADN se
Figura 1). Micro*i*eta, regulada *ara la e9tracción de <
reali&an los siguientes pasos a
%icrolitros de cada lisis.
traés de una lisis !separación"H

0. 7isis celular.
8. 7isis nucleica.
?. recipitación nucleica !or
medio de acetato de amonio".
>. recipitación de ADN.

Figura 11. u-os de e**endor? *ara verter sangre en él.

Figura 13. Se agregan < %icrolitros de sangre a un tu-o

e**endor?.

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Figura 14. Se agregan 5 %icrolitros de lisis .

Figura 16. ellet y so-re donante o-tenido des*ués de

centri?ugar la %uestra.

Figura 14. Muestra de sangre encu-ada *or ! %inutos.

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Figura 1&. +dición de lisis  tras la e9tracción del

so-redonante.

Figura 15. Centri?ugación de tu-os e**endor? *or !

%inutos a !#. r*%. Figura 1'. Fusión de lisis y sangre en el vorte9 *or "
%inutos.

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Figura 1'. +dición de lisis < a la %uestra e9traída del
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vorte9.
>QolumePQ4rstpagePQD@LPQ
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D#s,s#o+es: PQandore6acttitlePandQtitlea$s
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Pro!oolo de e7!ra#"+ del ADN.

0" Agregar ?99 microlitros de sangre en un tu$o de eppendorf !Agitar por inmersión más de I
eces".
8" Agregar =99 microlitros de lisis 0.
?" Lncu$ar en las manos por 09 minutos.
>" (entrifugar por 0I minutos a 0?.999rpm.
I" Ealuar la calidad del pellet, si no es $uena desec-ar so$re el donante y aplicar ?99
microlitros de lisis 0.
<" Eliminar el so$redonante sin eliminar el pellet.
" Adicionar ?99 microlitros de lisis 8 !Teri4car que ésta no se encuentre precipitada".
;" Dar orte6 por I minutos.
=" Adicionar ?99 microlitros de lisis ?.
09" Dar orte6 por I minutos.
00" (entrifugar por 0I minutos a 0?.999 rpm.
08" ransferir el so$redonante a un nueo tu$o eppendorf.
0?" Adicionar ?99 microlitros de lisis >.
0>" Agitar por inersión I eces.

A+e7o 8. a$la del protocolo a seguir para la e6tracción de ADN.

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