BIOLOGÍA GENERAL BELG. YSABEL PRADO V.

PRACTICA N° 1

TEMA: DESCRIPCION, MANEJO Y CUIDADOS DEL MICROSCOPIO

COMPUESTO
MATERIAL: Microscopio compuesto, porta objetos, cubre objetos, gotero,
papel lente, pedazo de periódico, pedazo de tela suave.

INTRODUCCION
El microscopio compuesto es un instrumento óptico que permite obtener una
imagen amplificada de un objeto pequeño (células, tejidos, microorganismos,
para hacer visibles detalles que no lo son a simple vista.
Es de uso rutinario en los laboratorios de enseñanza superior, investigación; en
el campo de Biología, Medicina y ciencias afines como la Geología, que estudia
los minerales y rocas con microscopios con nicoles cruzados y polarizadores,
llamados microscopios petrográficos.
Es un instrumento de precisión delicado y caro, por lo que es preciso darle un
uso y cuidado adecuados.
El límite de resolución del microscopio compuesto es aproximadamente de 200
nanómetros, el que no es suficiente para observar orgánulos celulares, virus y
macromoléculas; esto es posible usando el microscopio electrónico cuyo límite
de resolución es de 0.5 nanómetros.
La ciencia y arte de distinguir los objetos más pequeños, se denomina
Microscopia.

OBJETIVOS:
Al finalizar la práctica, el alumno con ayuda de las pautas de la presente guía y
bibliografía sobre el tema, estará en capacidad de:
- Reconocer cada una de las partes del sistema mecánico y óptico del
microscopio convencional.
- Conocer el funcionamiento de cada una de las partes del microscopio.
- Enfocar sin error una imagen, previa iluminación correcta del campo del
microscopio.
- Realizar la debida limpieza de las partes constitutivas del microscopio,
antes y después de las observaciones.

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DESCRIPCION DEL MICROSCOPIO COMPUESTO.

Está constituido por dos partes:

A-Parte mecánica.-Constituida por los siguientes dispositivos:
1-El pié, base o estativo.-Es un dispositivo metálico pesado, en forma de
herradura o circular que permite la estabilidad del microscopio.
2-Columna.-Se encuentra en contacto con el pie
3-Tubo óptico.-Cilindro de metal de 16 cm de longitud en cuya parte superior se
dispone la lente ocular y en la parte inferior el revólver, al cual se atornillan los
objetivos. En la parte posterior se encuentra la cremallera, sistema que esta en
conexión con los tornillos.
4-Brazo.-De metal macizo en forma de “U” abierta que sirve para trasportar el
microscopio. Por su parte superior se une al tubo y por la parte inferior se pone
en contacto con la base, mediante la charnela que permite inclinar el aparato. En
su extremo superior se encuentra el tornillo macro métrico (Para movilizar el tubo
rápidamente-enfoque grosero)y, en su extremo inferior el tornillo
micrométrico(Para movimientos lentos-enfoque fino).
5-Platina.-Es la plataforma o mesa de trabajo, donde se coloca la muestra, puede
ser redonda o cuadrada, inmóvil, o móvil mediante el carro. Posee una abertura
central denominada apertura de platina, que deja pasar los rayos luminosos que
vienen del espejo o de la luz incorporada. Tiene pinzas para fijar la lámina porta
objetos que contiene la muestra a observarse.
6-El revólver.-Dispositivo metálico giratorio, posee varias roscas, donde se
atornillan las lentes objetivo, que al girar deben disponerse en reten, indicando
que se encuentra en posición de observación.
B-Parte óptica.-Las propiedades ópticas de las lentes provienen de los
fenómenos de refracción que sufren los rayos luminosos que las atraviesan.
Está constituida por:
1- Lentes Oculares.-Soportadas por cilindros rectos, cortos y huecos, y se
colocan en la parte superior del tubo óptico, interiormente tienen dos lentes, uno
a cada extremo y entre ambos hay un diafragma; la lente superior se llaman lente
ocular y la lente inferior lente de campo. Tiene aumentos de 10x o 5x. Debe su
nombre a que el observador coloca su ojo cerca de la lente ocular. Su función es
aumentar la imagen producida por la lente objetivo. La imagen producida por el
ocular es virtual y derecha.
2- Lentes objetivos.- La calidad de un microscopio depende de la calidad de la
imagen dada por el objetivo: estas lentes son de construcción complicada y se
requieren cálculos difíciles para decidir la curvatura y la

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Combinación de las lentes que la componen. Llevan este nombre por estar cerca
del objeto, del que debe conocerse:
a-El aumento b- Distancia focal c- Apertura numérica d- Distancia de trabajo
e- Profundidad de foco f- Campo de visión.
El aumento de un objetivo puede calcularse, dividiendo la longitud óptica del tubo
(160 mm) ente la distancia focal. El objetivo de más uso en la biología es de 4
mm de distancia focal, o sea: 160/4=40 x
Distancia focal es la distancia que separa el foco, del plano principal de la lente
que corresponde casi al centro de la misma.
Apertura Numérica (AN= n sen u) Esta expresión es la de mayor importancia en
microscopía. Donde n= Índice de refracción del medio interpuesto entre el objeto
y la lente frontal del objetivo; u=1/2 de la abertura angular del objetivo. Su valor
está indicado en la montura del objetivo, junto con el aumento. La calidad del
objetivo es tanto mayor cuanto más elevada es su apertura numérica, cuanto
mayor sea la apertura numérica, mayor será el poder de resolución del objetivo
y tanto más finos los detalles que podrá revelar.
Poder de resolución de un microscopio, es la capacidad del microscopio de
distinguir dos puntos vecinos como unidades. Dos puntos luminosos forman
imágenes separadas cuando existe entre ellos una distancia mínima ``r´´,
llamada límite de resolución, si la distancia es menor que ``r´´, formaran una sola
imagen, es decir se confundirán. ``r´´ tiene un valor diferente para cada objetivo,
y se calcular por la siguiente formula: r= 0.61 λ/AN Siendo 0.61 la minina
distancia a que pueden estar separados dos puntos, para que sus imágenes se
vean como separados y, λ= longitud de onda de la luz utilizada den la iluminación
Distancia de trabajo, es el espacio libre entre el objetivo y el objeto. Es menor a
medida que el objetivo tiene mayor aumento.
Profundidad de foco, es el poder de resolución en el plano vertical, y expresa la
cualidad de un objetivo de poder presentar perfectamente detallados los diversos
planos de una preparación sin variar la posición de enfoque. A medida que
aumenta la apertura numérica de un objetivo, disminuye el número de planos del
objeto que puede considerarse en foco. La imagen producida por el objetivo será
real e invertida.
TABLA DE VALORES PARA OBJETIVOS TIPOS
Aumento Distancia A.N Distancia Profundidad Campo de
del Focal de trabajo de Foco visión
objetivo
10x 16 mm 0.20-0.30 4-8 mm 10 u 1-2 mm
40x 4 mm 0.65-0.85 0.2-0.6 1-2 u 0.25-
mm 0.50mm
100x 2 mm 1.2-1.3 0.11- 0.5 u 0.1-0.2
0.16mm mm

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3 - Espejo, orienta los rayos luminosos en dirección del objeto; posee dos
superficies, una plana y otra cóncava. Cuando la fuente luminosa es el sol se
utiliza el espejo plano o el cóncavo; al u usar el espejo plano se elimina del campo
visual imágenes perjudiciales, como barras de las ventanas, etc. Cuando se
utiliza luz artificial, el espejo cóncavo permite una iluminación más intensa. En
los microscopios modernos el sistema de iluminación es incluido.
4 – Condensador, se encuentra debajo de la platina, tiene como función
condensar y enfocar la luz sobre el objeto; tiene en su parte inferior un diafragma
iris, cuyo diámetro se puede variar mediante una palanca horizontal, el tamaño
del diafragma iris controla la iluminación del objeto.
5 – Portafiltro, se localiza debajo del diafragma iris, consiste de un anillo de metal,
en el que puede colocarse un vidrio despulido o de color. El filtro de color azul o
el filtro luz-día reduce el exceso de color rojo y amarillo que produce el filamento
de una ampolleta corriente..
USO DEL MICROSCOPIO:
1- Trasladar el microscopio, cogiéndolo del brazo con la mano derecha y
sosteniendo la base con la mano izquierda, en forma horizontal.
2- Limpiar con un lienzo suave la parte mecánica del microscopio.
3- Limpiar con papel lente la parte óptica del microscopio, tratando de retirar
el polvo, la humedad, la grasa, muy perjudiciales para el sistema óptico.
4- Enfocar con el objeto de 10x, orientado el espejo cóncavo de modo que
refleje la mayor cantidad de luz hacia el condensador y, con el diafragma
completamente abierto, hasta observar el campo del microscopio
completamente iluminado en forma homogénea. El espejo debe estar
colocado a 20 o 30 cm de distancia de la fuente de luz.
5- Colocar la preparación en la abertura de la platina, de tal modo que reciba
los rayos luminosos, provenientes del espejo, diafragma y condensador.
6- Mientras se mira por el ocular hacer descender el tubo óptico, con el
tornillo macrométrico, hasta que el objetivo este a unos 0.5 cm de
distancia de la preparación, hasta que aparezca la imagen.
7- Luego se enfoca la imagen con el tornillo micrométrico.
8- Una vez ubicada la estructura que más nos interesa, observar con el
objetivo de mayor aumento, para lo cual se gira el revólver, teniendo la
preocupación de alejar el tubo óptico a fin de no dañar la preparación por
una mala manipulación.
9- Una vez la muestra ir graduando el diafragma, hasta observar los detalles
estructurales externos e internos.
10- Al terminar las observaciones, limpiar las lentes con papel lente y dejar el
microscopio con el objetivo de menor aumento en el eje óptico, cubrirlo
con su funda y guardarlo.

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PRACTICA N° 2

TEMA: ORGANISMOS VIVINETES EN AGUA ESTANCADA.

MATERIAL: Agua estancada que contenga en lo posible representantes del

reino mónera (espirilos), reino protista (protozoos), reino animalia (rotíferos,
pluricelulares).
 Microscopio compuesto
 Porta y cubre- objetos
 Gotero
 Lugol
 Pinzas, estiletes
 Papel lente, papel secante
 Lienzo suave

OBETIVOS:
Conocer la gran biodiversidad que existe en un pequeño ecosistema como son
las aguas estancadas, donde prosperan organismos que nos son visibles a
simple vista, y para ser visualizados precisa el uso de los instrumentos ópticos.

PROCEDIMIENTO:
Coloque una gota d agua estancada de la superficie del fondo del recipiente
(de boca ancha) en un porta-objetos , luego cubra con una laminilla en una
ángulo de 45º, para evitar la formación de burbujas de aire ,que obstaculice su
observación.
Observe al microscopio
 El movimiento del organismo
 Los medios de locomoción, forma y numero
 Describa las morfologías del organismo
 Dibuje los organismos observados

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PRACTICA N° 3

TEMA: LA CÉLULA VEGETAL

MATERIAL:
1. bulbo de la cebolla – allium cepa
2. fruto de aji – capsicum frutescens

OBJETIVO:
Observar y conocer la estructura y las organelas de la célula vegetal.

PROCEDIMIENTO:

A. 1.- PREPARACIÓN HÚMEDA: corte del bulbo en 4 partes, luego se

separa por si sola en capas o catafilos de cuya superficie cóncava corte
una porción pequeña (5mm) de la delicada epidermis que la cubre. Con
una pinza colocarla rápidamente en una gota de agua evitando la
formación de pliegues y luego coloque los cubre objetos.
Use el diafragma para reducir la cantidad de luz que pasa a través de la
preparación .
INFORME:
− Observe a 10xy40x
− Dibuje e indique las estructuras observadas a 40x
2.- PREPARACIÓN HÚMEDA CON COLORANTE: en la preparación
anterior añada una gota de azul de metileno en el borde del cubreobjetos

INFORME:
− Observe a 10xy40x
− Dibuje las células teñidas con azul de metileno señalando las
estructuras mas visibles(núcleo, nucléolo, vacuola)

B. haga una preparación húmeda, con un corte superficial de endocarpio de

ají.

INFORME:
− Identifique y dibuje (40x) lamina media, membrana primaria,
membrana secundaria, canal y poros de la pared celular.

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PRACTICA N°4

TEMA: CONCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS

MATERIALES: colorante azul de metileno ó lugol, porta ó cubre objetos, gotero,

hoja de afeitar, pinza, papel lente, papel lente absorbente.

1. Tubérculo de papa - solanum tuberosum

2. Raíz de zanahoria – daucus carota
3. Bulbo de ajo – allium sativum
4. Peciolo de begonia – begoania sp

OBJETIVOS: reconocer la diferentes inclusiones citoplasmáticas típicas de la

célula vegetal, como los tipos de plástidios (leucoplastos: amiloplastos,
proteinoplastos; cromoplastos: caroteno, xantofila, licopeno). Y el contenido
vacuolar (drusas, oxalatos, etc.). Los plastidios faltan en las bacterias,
cianofíceas y hongos.
a. Preparación: hacer una preparación húmeda con raspado interno de la
papa.
Observe y dibuje: granos de almidón, la posición de los hilios y las
estrillas.
b. Preparación: realice un corte longitudinal en la parte externa de la raíz de
la zanahoria y haga el montaje del agua.
c. Preparación: haga una preparación húmeda con un corte delgado del
catafilo de ajo.
Observe y dibuje: cristales de oxalato de calcio (sales de ácidos
orgánicos) y las maclas
d. Preparación: haga una preparación húmeda con un corte transversal del
peciolo de la hoja de la begonia.
Observe y dibuje: las drusas que son cristales de oxalatos de calcio en
forma de rasa náutica.

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PRACTICA N0 5

TEMA: LA CÉLULA ANIMAL

MATERIAL:
A. Colorante verde Janus o azul de metileno
B. mucosa bocal
C. porta objetos
D. cubre objetos
E. palillos de dientes
F. papel lente
G. papel absorbente
H. gotero.

OBJETIVO: conocer la estructura de la célula animal (tejido epitelial de la

mucosa bucal) y establecer diferencias entre esta y la célula vegetal.

MÉTODO DE PREPARACION:
Con el extremo ancho de un palillo de dientes frote ligeramente la cara de su
mejilla en una sola dirección, agite el palillo en una gota de agua y deje secar
5 minutos. Agregar una gota de Verde Janus o Azul de metileno y deje pasar 3
minutos .Lave la muestra con un pequeño chorro de agua para eliminar el
exceso de colorante y deje secar 5 minutos. No coloque cubreobjetos.
Observar a 10x y busque a una o dos células que estén completas y bien
planas, cambien al objetivo de 40x para dibujar.
INFORME:
-Dibuje la célula animal, indicando sus partes.
-Describa la forma y número de las mitocondrias.
-¿Cuál es la función del tejido epitelial, membrana celular, mitocondrias,
vacuolas y nucléolos?
-Establezca diferencias entre célula vegetal y animal.

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PRACTICA NO 6
TEMA: MITOSIS

MATERIAL:
A. Raíces de cebolla
B. Hoja de afeitar
C. Placas Petri
D. Porta Objetos
E. Cubre Objetos
F. Estilete
G. Pinza
H. Mechero
I. Solución de orceína acética a 1.5%
J. Microscopio Compuesto

OBJETIVOS:
Reconocimientos del proceso mitótico en las plantas, cuya multiplicación
celular se produce en los tejidos meristemáticos apicales (En este caso el
ápice, de la raíz de la cebolla), laterales o intercalares, dando por resultado el
crecimiento en altura o en grosor de la planta.

PROCEDIMIENTO:
1. En una placa Petri coloque unas gotas de orceína acética y agregue las
puntas de las raíces. Mantenga la placa Petri sobre el fuego y
agitándola, espere que hierva la orceína.
2. Coloque las raíces en otro Petri, con una pinza retire una punta de raíz
de 2mm de largo y colóquela en una lámina porta objeto con una gota de
orceína fría, coloque la laminilla y deje reposar durante 5 minutos, luego
utilizando el dedo pulgar presione el material.
3. Observe al microscopio las diversas fases de la mitosis y dibuje a 450
aumentos.

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