UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología

LABORATORIO DE FISIOLOGÍA MICROBIANA

PRACTICA 8: EFECTO DE LA TEMPERATURA
SOBRE EL CRECIMIENTO MICROBIANO

PROFESORA : Dra. Susana Gutiérrez Moreno

ALUMNO : Herrera Vivas, Adriana

CÓDIGO : 15100050

CORREO : adriana.herrera@unmsm.edu.pe

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INTRODUCCIÓN
La temperatura va a ejercer efectos opuestos sobre los organismos vivos. Por un lado a
medida que se eleva la temperatura de la célula las reacciones químicas y enzimáticas son
más rápidas (ya sabéis, un incremento de la temperatura produce un aumento de la
energía cinética, estas se mueven más y aumenta la probabilidad de que ambas choquen
con la orientación correcta y se produzca la reacción). Sin embargo por encima de una
temperatura determinada algunas proteínas pueden sufrir daños y perder funcionalidad.
Por tanto el incremento de temperatura supone un incremento del crecimiento hasta el
punto en que tienen lugar las reacciones de activación. Por eso cuando dejamos alimentos
refrigerados fuera de la nevera, es decir aumentamos su temperatura, se inicia la
proliferación de colonias bacterianas que acaban por dañar la comida, sin embargo es muy
poco probable el crecimiento de bacterias en leche que ha sido previamente hervida y se a
mantenido en buenas condiciones.
De esta manera para cada microorganismo podemos asignar lo que se conoce como
temperaturas cardinales. Es decir, una temperatura mínimapor debajo de la cuál no es
posible el crecimiento, una temperatura óptima, a la que se produce el crecimiento más
rápido, y finalmente una temperatura máxima por encima de la cuál es imposible que se
dé el crecimiento. Estas tres temperaturas son características de cada organismo y
podemos encontrar una gran variabilidad, desde organismos cuya temperatura óptima son
4ºC hasta microorganismos que crecen óptimamente a 106ºC.

2
RESULTADOS

MESA 1
Tiempo Pseudomonas Bacillus
0 0.018 0.218
1 0.35 0.3
Tabla 1: Resultados de crecimiento de Pseudomonas y Bacillus a 5°C

MESA 2
Tiempo Pseudomonas Bacillus
0 0.018 0.212
1 0.608 1.776
Tabla 2: Resultados de crecimiento de Pseudomonas y Bacillus a 20°C

MESA 3
Tiempo Pseudomonas Bacillus
0 0.04 0.194
1 1.128 1.464
Tabla 3: Resultados de crecimiento de Pseudomonas y Bacillus a 37°

MESA 4:
Tiempo Pseudomonas Bacillus
0 0.048 0.194
1 0.484 0.44
Tabla 2: Resultados de crecimiento de Pseudomonas y Bacillus a 50°C

MESA 5
Tiempo Pseudomonas Bacillus
0 0.04 0.194
1 0.224 0.48
Tabla 2: Resultados de crecimiento de Pseudomonas y Bacillus a 60°C

3
 Pseudomonas
2
1.8
1.6
1.4
Absorbancia

1.2 M1- 5ºC

1 M2 - 20ºC
0.8 M3- 37ºC
0.6 M4 - 50ºC
0.4
M5 - 60ºC
0.2
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
Tiempos

Gráfico 1. Resultados del crecimiento de Pseudomonas en distintos tiempos

Bacillus
2
1.8
1.6
1.4
Absorbancia

1.2 M1- 5ºC

1 M2 - 20ºC
0.8 M3- 37ºC
0.6 M4 - 50ºC
0.4
M5 - 60ºC
0.2
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
Tiempo

Gráfico 2. Resultados del crecimiento de Bacillus en distintos tiempos

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DISCUSIONES
En el gráfico 2, podemos observar que la cepa de Bacillus mostró crecimiento a 5OC esta cepa es
una psicrotolerante, tiene la propiedad de resistir bajas temperaturas debido a que se adaptan a
cambios bruscos de temperatura, para esto cuentan con genes de shock térmico inducibles que
incluyen proteínas chaperonas y proteasas (Petersohn et al., 2001). Las temperaturas bajas inducen
modificaciones estructurales que se encuentran correlacionadas con patrones de crecimiento
atípicos. Se ha observado la existencia de crecimiento celular pero sin división; las bacterias
sobreviven, pero por un tiempo no hay división, después de un tiempo de adaptación hay una
recuperación y comienza de nuevo la división (Neale & Chapman, 1970). Por otro lado Méndez et
al. (2004) y Budde et al. (2006), mencionan que para Bacillus subtilis las condiciones de baja
temperatura inducen en muchos casos los factores de trascripción involucrados en el proceso de
esporulación, lo que favorece más aún el proceso de adaptación.

Según lo mencionado por Rüger HJ et al. (2003), existen distintas cepas de Bacillus psicrotolerantes,
atribuyéndole esta característica en los últimos años, a las del grupo Cereus. Una de las técnicas
empleadas en el estudio de estas cepas para discriminar las cepas psicrotolerantes del resto, está
basada en la amplificación de un segmento del gen que codifica para la proteína A de choque frío
(cspA), donde una secuencia de firma específica, que hace posible la amplificación, está presente
solo en cepas psicrotolerantes.

La adaptación bacteriana a baja temperatura es un proceso complejo y multifactorial que involucra

tanto el background genético de la bacteria, una serie de distintos mecanismos que son igualmente
multifactoriales. Por ejemplo, los ajustes de la composición de la membrana de ácido graso (FA)
pueden aumentar la proporción de FA de bajo punto de fusión (como los FA insaturados y los de
cadena ramificada) (8–10). Las helicasas de ARN que permiten el despliegue del ARN necesario para
una traducción adecuada y/o La degradación del ARN también juega un papel importante en la
adaptación a baja temperatura por parte de este género de bacterias (Diamondé et al, 2014).

Entre los mecanismos que permiten que los organismos cambien en respuesta a las condiciones
ambientales son los sistemas de dos componentes (2CS), estos so]
de transducción de señales que son casi omnipresentes en las bacterias. Los 2CS son conocidos por
percibir una amplia gama de factores estresantes ambientales, que permiten a las células elaborar
una respuesta mediante la regulación de la expresión de los genes necesarios para la adaptación.
Uno de los primeros estudios sobre un 2CS involucrado en la adaptación al frío es el DesKR, que es
capaz de detectar un aumento en el grosor de la membrana en respuesta a una disminución en
temperatura en Bacillus subtilis.

En consecuencia, este sistema de 2 componentes DesKR regula la expresión de un gen desaturasa

responsable de mantener la fluidez de la membrana durante el crecimiento de B. subtilis a baja
temperatura.

En el gráfico 1, la cepa de Pseudomonas tuvo un crecimiento a 5ºC, esta cepa también es

psicrotolerante con la disminución de temperatura se da un aumento de la producción de ácidos

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grasos insaturados, estrategia que se produce para mantener la fluidez de la membrana. Con esta
modificación (saturación-desaturación) se mantiene la homeoviscocidad de la membrana celular y
su funcionalidad a lo largo del rango de temperaturas de crecimiento. (Russell NJ 1992)

Russell ha comunicado que los cambios que produce la temperatura sobre la membrana es una
alteración en la composición de los ácidos grasos y que los cambios en la parte polar de los
fosfolípidos es generalmente menor.

Cronan ha publicado la acción del aumento de la temperatura sobre la estructura de ácidos grasos
en bacterias del género Pseudomonas, en condiciones en que no se permitía la síntesis de novo, en
esos casos las bacterias respondían modificando la estereoisomería de cis (n:1 cis) a trans (n:1
trans) mediante la enzima cis-trans isomerasa. En Pseudomonas putida, esta estructura tiene una
rigidez semejante a una estructura saturada (n:0), estas modificaciones son transitorias hasta que la
bacteria pueda sintetizar nuevos ácidos grasos con estructuras más estables.

Las principales adaptaciones bioquímicas a medios fríos exhibidas por estos microorganismos
psicrófilos son:
 enzimas más resistentes al frío;
 sistemas de transporte adaptados a bajas temperaturas;
 Los fosfolípidos de la membrana celular aumentan la proporción de ácidos grasos
insaturados (y en algunas bacterias, poliinsaturados, con entre 4 y 9 dobles enlaces); ello
supone que la membrana sigue en su estado semifluido, evitándose su congelación.
Las principales adaptaciones bioquímicas a altas temperaturas en células vegetativas bacterianas
son:
 enzimas termorresistentes. Algunas de ellas tienen un interior molecular muy hidrófobo;
 ribosomas termorresistentes;
 membranas ricas en ácidos grasos saturados, que permiten enlaces hidrofóbicos más
fuertes.

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CUESTIONARIO

1. ¿Por qué la temperatura es un factor tan importante para el desarrollo de

organismos en cualquier ecosistema?
La temperatura al igual que las fuentes nutricionales es el factor más determinante del
crecimiento bacteriano, dado que proporciona la energía necesaria para la transición del
umbral de activación que es requerido en las diferentes reacciones posteriores a la fase de
adaptación.

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BIBLIOGRAFÍA
 Petersohn A., Brigulla M., Haas S., Hoheisel J., Lker U. & Hecker M. 2001. Global Analysis of
the General Stress Response of Bacillus subtilis. Journal of Bacteriology. 183: 5617–5631.

 Neale E.K. & Chapman G.B. 1970. Effect of low temperature on the growth and fine
structure of Bacillus subtilis. Journal of Bacteriology. 104: 518-528

 Cronan J (2002)Phospholipid modifications in bacteria. Curr. Op. Microbiol. 5: 202-205.

 Russell NJ (1992) Physiology and molecular biology of psychrophilic microorganisms. In:

Herbert RA, Sharp RJ (Ed), Molecular Biology and Biotechnology of Extremophiles, Blackie,
Glasgow, p. 203-224.

 Russell NJ (1984) Mechanisms of thermal adaptation in bacteria: blueprints for survival.

Trends Biochem. Sci. 9: 108-112.

 Pandiani F, Brillard J, Bornard I, Michaud C, Chamot S, Nguyen-the C, Broussolle V. 2010.

Differential involvement of the five RNA helicases in adaptation of Bacillus cereus ATCC
14579 to low growth temperatures. Appl. Environ. Microbiol. 76:6692– 6697.

 Claus D, Berkeley RCW. 1986. Genus Bacillus Cohn 1872, 174AL, p 1105–1139. In Sneath
PHA, Mair NS, Sharpe ME, Holt JG (ed), Bergey’s manual of systematic bacteriology, vol 2.
Williams & Wilkins, Baltimore, MD