Aislamiento y selección de levaduras productoras de etanol

1. INTRODUCCIÓN

El presente trabajo de investigación tuvo como objeto aislar y seleccionar Saccharomyces sp.
con mayor producción de etanol a partir de Chicha de Jora. Para ello, se tomaron muestras de
250 mL de chicha de jora, con botellas de plástico limpias y desinfectadas. Las muestras se
llevaron al Laboratorio de Biotecnología donde se homogenizó y conservó para el paso
posterior de obtención de las levaduras. El aislamiento de las levaduras productoras de etanol,
se hizo por la técnica de agotamiento por estría en placas Petri conteniendo Agar Sabouraud
Sacarosado al 4% (ASS) e incubado a Temperatura ambiente (25 ± 3ºC) por 5 días. Se aislaron
colonias típicas de levaduras, las que al analizarlos al microscopio y de manera bioquímica
mostraron ser compatibles con la morfología típica de Saccharomyces.

La capacidad fermentativa en mosto de cerveza se determina cuantitativamente midiendo el

grado de materia prima que es fermentada a partir de 100 g de extracto de cerveza: las
diferentes especies y razas de la levadura se diferencian por el grado fermentativo y por ello se
habla de razas poco fermentativas pero a su vez estas especies de levadura pueden variar
respecto a las propiedades fermentativas frente a un glúcido 4 acharomyces cerevisae es la
levadura más utilizada en dicho proceso; sin embargo, existen diferencias entre las especies y
las cepas respecto a las condiciones en que logran su mayor rendimiento 7,8 ; se considera que
para ello la cepa debe tener buena velocidad de fermentación y deberá ser tolerante a
elevadas concentraciones de glucosa y de etanol 9,10,11.

La fermentación puede definirse como un proceso de biotransformación en el que se llevan a

cabo cambios químicos en un sustrato orgánico por la acción de enzimas sintetizadas por
microorganismos conocidos como catalizadores bioquímicos biocatalizadores, en este caso
capaces de convertir las hexosas del mosto en etanol cuando las condiciones son anaeróbicas.
"l #$% de la producción de etanol la llevan a cabo diferentes especies de levaduras debido a su
alta productividad en la conversión de azúcares a etanol y a que se separanme'or después de
la fermentación. Entre las especies más utilizadas están: Saccharomyces cerevisiae.

"n la producción industrial de alcohol es importante conocer la tolerancia al alcohol, la cual

depende de la habilidad de la célula para exportar el etanol del interior al medio externo, un
proceso que depende de la composición de la membrana y de la fluidez de la misma.

2. MARCO TEÓRICO

EVADURAS

Las levaduras son organismos pertenecientes al reino de los hongos: Como tales, son
organismos heterotróficos por el hecho de que solo pueden alimentarse de materia ya
preformada (como nosotros los mamíferos), al contrario que las plantas, que son organismos
autotróficos y que al estar dotadas de clorofila pueden utilizar la energía del sol juntamente
con el aire y el agua para obtener todos los nutrientes. Las levaduras están distribuidas en
casi todos los hábitats naturales. Son comunes en las hojas de las plantas y en las flores,
también se encuentran en la superficie de la piel y en el tracto intestinal de los animales de
sangre caliente donde pueden vivir en simbiosis o como parásitos. También se encuentran
en los suelos y en el agua salada donde contribuyen a la descomposición de plantas y algas.
Las levaduras se multiplican asexualmente como células individualizadas que se dividen por
gemación o por división directa (fisión), hay especies que pueden crecer como filamentos
formando el micelio típico de los hongos. En su apartado de reproducción sexual las
levaduras producen unas estructuras llamadas ascas, que contienen hasta 8 esporas. Estas
asco esporas pue-den fusionarse entre sí y originar un nuevo individuo que podrá
multiplicarse a través de una división vegetativa. Pero los más conocido y comercialmente
significativo de las levaduras son las especies y cepas relacionadas de Saccharomyces
cerevisiae. Este organismo ha sido largamente utilizado para fermentar azúcares del arroz,
del trigo, de la cebada y del maíz para la producción de bebidas alcohólicas y en la industria
de panificación para expandir o aumentar la masa. Saccharomyces cerevisiae es común-
mente usada como levadura en el pan y para algunos tipos de fermentación. Extractos de
levadura se administran a menudo como suplemento vitamínico ya que están constituidas
en un 50% por proteínas y son fuente importante de vitaminas B, niacina, y ácido

DISCUSIONES

Centurión 14 realizó la selección secundaria de levaduras “nativas” productoras de etanol

aisladas de frutos de la Región La Libertad evaluó las productividades (en g etanol/g lev. h) de
los cultivos puros, aislado de Fragaria sp “Fresa” (2.86 x 10-2), C10 y C13, aislados de Spondias
purpurea “ciruela” (4.13 x 10-2 y 4.58 x 10-2 ) y U20, aislado de Vitis vinífera “uva”, (3.75 x 10-
2), superando, en todos los casos, a la cepa testigo S. cerevisiae MIT L51 (2.54 x 10-2).
Posteriormente, Silva 15, logró aislar Candida kefyr, Candida Krusei, Hansenula anómala y S.
cerevisiae a partir de vinos de fabricación artesanal del distrito de Cascas.

En diversos trabajos utilizando cepas de Saccharomyces sp, se encontró que produjeron entre
5.30 y 6.14 mg de PUC/mL de medio de fermentación a base de jugo de caña, equivalente en
glucosa, en un biorreactor airlift de 0.4 L de volumen con 190 mL de volumen de trabajo
incubado a 30ºC/10 h 16, asimismo, en mostos de dátiles se ha logrado producir biomasa de S.
cerevisisae entre 2.97 y 4.72 g /L, utilizando 12.8 g de sacarosa en fermentación de lote
alimentado 17. Se sabe que en la chicha de jora existen levaduras “seleccionadas” con elevado
potencial de producción de etanol. Si se aíslan, identifican y caracterizan cinéticamente tales
levaduras, se podrían proponer nuevas estrategias en la producción de etanol en las empresas
productoras del alcohol con mejores rendimientos y a bajo costo para de esta manera
satisfacer la demanda de alcohol etílico (etanol) del mercado local, regional y nacional.