AGROPECUARIA Y

AGROINDUSTRIAL

LABORATORIO N°5
Control de Microorganismos por Agentes Físicos.

NOMBRE: Maverick Prieto

Cesia Molina
Claudio Jara
CARRERA: Ingeniería en Química Industrial / Tecnología en Análisis Químico
ASIGNATURA: Microbiología Aplicada.
PROFESORA: Ruth Ortega
FECHA: 09/11/2018
.
Introducción.

Los agentes antimicrobianos son utilizados para destruir o impedir el crecimiento de los
microorganismos. Por su naturaleza pueden ser físicos o químicos, y tienen diferentes modos de
actuar sobre la estructura de la célula bacteriana y sobre sus procesos metabólicos.

Hasta ahora se ha considerado el crecimiento de las bacterias en función de su fondo genérico, en

relación con los nutrientes y en hipotéticas condiciones ideales. Sin embargo, hay que considerar
los factores ambientales es decir una serie de agentes físicos y químicos que realizan lo siguiente:

- Modifican la velocidad de crecimiento, provocando cambios que, a determinados valores de

dichos factores, que pueden ocasionar la muerte de microorganismos.
- Condicionan la distribución de los microorganismos en sus ecosistemas y hábitat.

Los principales tipos de factores físicos que afectan el crecimiento de las bacterias son los
siguientes:

- Efecto de la Temperatura: La temperatura es uno de los parámetros ambientales mas

importante que condicionan el crecimiento de las bacterias y su posterior sobrevivencia.
- Filtración: Este mecanismo funciona para separar las bacterias en un medio acuoso, existen
filtros de porosidad de 0,2 μm hasta 0,4 μm. El propósito de la filtración es ver si los
microorganismos son capaces de pasar o no a través de este, puede influir su forma, el
tamaño o su movimiento.
- La luz ultravioleta: Su principal funcionamiento es desnaturalizar ADN y ARN
impidiendo la reproducción y al mismo momento elimina bacterias, otra función es
esterilizar la superficie, los rangos de longitud de onda que se emplea son de 280 a 350 nm
para efectuar la radiación. Hay que mantener en cuenta que esta radiación no tiene la
capacidad de traspasar medios como el papel o el vidrio, es por ello por lo que se debe
someter directamente a una fuente emisora.
Objetivo General.

- Utilizar los métodos para el control de microorganismos.

Objetivo Específicos.

- Emplear y desarrollar el método de filtración para el control físico de los microorganismos.

- Usar el método de radiación ultravioleta para el control de microorganismos.
Materiales y metodología.

Materiales.

- Placas de Petri.
- Asa Loop.
- Tubos de Ensayos.
- Asa Drigalski.
- Gradilla.
- Jeringas.
- Filtros.
- Papel de Aluminio.

Reactivos.

- Agar Nutritivo.
- Caldo Nutritivo.
- Caldo Sacarosa Rojo Fenol.

Metodología.

Filtración de Caldo Nutritivo.

- Se procede a flamear la Asa Loop que luego se enfría y después se toma el inoculo.
- Al tubo que contiene el Caldo Nutritivo, se destapa y se flamea la parte superior del tubo.
- Hay que inocular en el caldo.
- Se usa una jeringa, obtener una alícuota de 2 ml del tubo inoculado.
- En un tubo esterilizado se realiza un depósito de la muestra y en otro tubo dejar la muestra
sin filtrar.
- Hay que incubar.

Filtración de Caldo Sacarosa Rojo Fenol.

- Con una jeringa tomar una alícuota de 5 ml del Caldo Sacarosa Rojo Fenol.
- En un tubo esterilizado se realiza un depósito de la muestra y en otro tubo dejar la muestra
sin filtrar.
- Incubar.
Efecto de la Luz Ultravioleta.

- Elaborar marca en la placa de Petri que contiene Agar en 4 cuadrantes.

- En el primer cuadrante se agrega entre 3 a 5 gotas del inoculo.
- Usar el Asa de Drigalski y agregar etanol, que luego se flamea y se deja enfriar para su
posterior uso.
- Con el Asa de Drigalski ya enfriada, se distribuye la muestra por toda la placa de Petri.
- Se introduce aluminio y se tapa 3 cuadrantes de cada placa.
- La parte que se encuentra expuesta se debe poner por 30 segundos bajo a luz ultravioleta.
- Posteriormente se destapa el segundo cuadrante que también se expone bajo a luz
ultravioleta por 30 segundos, después se realiza con el tercer cuadrante, pero con el ultimo
cuadrante no se debe exponer bajo luz ultravioleta.
- Finalmente se procede a incubar.

Resultados.

Muestras. Observaciones.
En esta muestra bajo la presencia de
Staphylococcus aureus durante en la
exposición a los 30 segundos bajo a luz
ultravioleta, el crecimiento de esta bacteria
disminuyo, por lo cual el efecto de la luz
ultravioleta en ese tiempo es eficaz para el
control.

En esta muestra bajo la presencia de

Pseudomonas aeruginosa, también se hizo
una exposición bajo a luz ultravioleta por 30
segundos y se observa que no hubo un
control por este agente. Esta especie de
bacteria es muy resistente a temperaturas y
a radiación Uv en modo de sobrevivencia.
 Caldo nutritivo sin filtrar en la parte
izquierda de la figura 3 presento turbidez, en
la parte derecha se encuentra el filtrado
donde no presento turbidez

En ambos tubos no se produjeron cambios

al momento de filtrar e incubar, por ende,
estos agentes físicos no controlo las
bacterias que estaban presentes en el.

Discusión.
En las placas microbianas en una de las especies de bacterias Staphylococcus aureus presento un
control en su crecimiento debido que, al aplicar agentes físicos como la radiación ultravioleta por
30 segundos, permitió ver y analizar los cambios que experimento durante su desarrollo.

En la otra muestra donde utilizamos Pseudomonas aeruginosa no presento un decrecimiento en

nuestra muestra, por el contrario, presento una colonización uniforme, esta clase de bacteria presenta
una resistencia a factores físicos como la temperatura, radiación no está muy claro hay ciertas
bibliografías que indican que hay veces que si son resistentes a radiación Uv y otros autores indican
que no son tan resistentes a este tipo de radiación. Su óptimo de crecimiento está en 37°C, pero
puede tolerar temperaturas entre 45°C a 50 °C.

En los tubos donde estaba el Caldo Sacarosa Rojo Fenol nos salió negativo debido que la
filtración no fue optima, a lo mejor se hizo mal el procedimiento o que los implementos para hacer
la filtración estaban en mal estado. Pero lo que se observó en estos tubos es su color rojizo en la
parte superior, se estableció el proceso de fermentación de sacarosa donde existe liberación de gases
y acidificación del medio.
 En los tubos con Caldo nutritivo la filtración e incubación fueron óptimos con buenos resultados
lo que permite que este método de control físico si funciona, en el filtrado se produce una
trasparencia lo que nos indica que hay una menos presencia de bacterias, lo que permite determinar
que en los filtros son capaces de retener bacterias de líquidos que los contienen esto depende del
diámetro de cada bacteria.

Conclusión

En el trascurso del laboratorio al realizar los diferentes métodos de control físico para los
microorganismos, cada proceso resulto de manera satisfactoria, aunque con la falta de experiencia
de algunos procedimientos tuvimos ciertas complicaciones al momento de ejecutarlas, por ejemplo,
el uso de las placas de Petri para hacer bien la muestra. Cada genero de bacteria tiene propiedades
distintas en materia de resistencia a ciertos factores físicos que hicimos en este practico. La
supervivencia de las bacterias frente a estos medios físicos complica su existencia y reproducción a
futuro, todo dependiendo para el uso de control por parte de los seres humanos.
Bibliografía

- Negroni, M. (2009). Microbiología estomatológica. Ed. Médica Panamericana.

- Gentilini, E., Reinoso, E., Echeverría, M., & Leardini, N. (2007). Microbiología
veterinaria (No. 576 STAm). N. O. Stanchi, & P. E. Martino (Eds.). Buenos Aires: Inter-
Médica.
- Ezziyyani, M., Sid, A. A., Pérez, S. C., Requena, M. E., & Candela, M. E. (2006). Control
biológico por microorganismos antagonistas. Revista Horticultura, 191, 8-15.