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Resumen
El excedente de banano, que resulta del rechazo de las exportaciones, debido a las rigurosas normas de
calidad, puede utilizarse como sustrato para producir proteína unicelular, por fermentación en estado
sólido. En la fermentación del banano de rechazo se utilizó el hongo Aspergillus niger; como nutrientes
urea, sulfato de amonio y ácido cítrico, este último como regulador de pH. Las pruebas de crecimiento del
hongo se realizaron a nivel de laboratorio utilizando columnas de vidrio de 2,2 cm de diámetro y 21 cm
de largo, similares al arreglo de Raimbault y Alazard. A escala semipiloto se utilizó un reactor tipo batch
de 10 bandejas con una capacidad de 75 kg de banano. Las condiciones más adecuadas de fermentación
sólida a escala de laboratorio y semipiloto fueron las siguientes: 70% de humedad inicial del banano,
30°C de temperatura de incubación, 5 litros de aire húmedo/minuto/kg de banano seco y un tiempo de 32
horas de fermentación. El banano fermentado alcanzó un contenido de proteína verdadera de 9,56% en
base seca, con 0,55 de lisina. Se realizó la evaluación del banano fermentado se realizó en dietas para
pollos de engorde y pollas ponedoras. La ganancia en peso y la conversión alimenticia en pollos de
engorde fueron similares entre la dieta control y la dieta que contenía banano fermentado, en la que se
reemplazó al maíz en un 50% en la formulación. En la evaluación con gallinas ponedoras las dos dietas
anteriores produjeron igual número de huevos, con la diferencia de que la dieta con banano fermentado
proporcionó huevos con un 4,39% en peso mayor que la dieta control.
Abstract
The surplus of the banana fruit, which results from the export rejects might be used as a substrate in order to produce a
unicellular protein by means of fermentation in solid state. Aspergllil/lIs niger fungus was used during the fermentation of
the banana fruit surplus; urea, and ammonium sulphate were used as nutrients; citric acid was used as pH regulator. The
growth tests of the fungus were made at lab level. Glass columns of 2.2 cm in diameter and 21 cm length, similar to the
Raimbault and Alzard arrangement were used. A semipilot reactor type Batch with ten trays and a capacity of 75 kg of banana
fruit was also used. The most appropriate solid fermentation conditions at lab and semipilot scales were the following: 70%
initial humidity of banana, incubation temperature 30°C, 5 liters of humid air per dry banana for 32 hours of fermentation, the
fermented banana reached a true protein content of 9.56% on a dry basis with 0.55 of lysine. The evaluation of fermented
banana was made in diets for both fattening chickens and egg - laying hens. The profit in weight and the nutritional
conversion in fattening chickens were similar between the control diet and the banana fermented one - which replaced corn in
50% in the formulation. In the egg - laying hens evaluation the two - latter diets yield the same number of eggs. The only
difference was that the fermented banana diet yield eggs with a 4.39% higher in weight than the control diet.
Palabras clave
Proteína unicelular, fermentación sólida, Asperguillus níger, banano fermentado, pollos de engorde,
pollas ponedoras.
2
1 Introducción
Dentro de la amplia gama de productos que se cultivan en el país, las frutas tropicales son
quizás uno de los mas interesantes y potenciales recursos disponibles, entre ellos el banano
ocupa un papel importantísimo en la producción y exportación agrícola ecuatoriana.
Existe la necesidad de producir grandes cantidades de proteína para el consumo animal. Han
surgido varias opciones para la solución de este problema; entre ellas, la fermentación de
sustratos sólidos, ha sido considerada en los últimos años como alternativa favorable para la
elaboración de productos de interés económico y social para la humanidad (Valiño, 1997).
Raimbault y Alazard, 1980; así como Peñaloza, 1981, presentaron resultados del
enriquecimiento proteínico de papa y café respectivamente, aplicando el principio de la
fermentación en estado sólido. El método que usaron consistió en hacer crecer un hongo
amilolítico de adecuada composición de aminoácidos, como Aspergillus niger, sobre la mezcla
de material orgánico y sales, durante 24 horas en papa y 72 horas en pulpa de café. El resultados
fue un incremento de 100 a 200% en el contenido de proteína verdadera en el material orgánico.
En los países en vías de desarrollo existe una necesidad imperiosa de utilizar sistemas de
alimentación no convencionales capaces de sustentar una producción animal económicamente
eficiente. El presente estudio pretende utilizar el banano de rechazo en la obtención de un
alimento animal mejorado, con una cantidad de proteína similar al maíz, pero con un mejor
contenido y proporción de aminoácidos disponibles.
Esperamos:
2. Materiales y métodos
2.3 Cepa
El microorganismo que se utilizó como inóculo es: Aspergillus niger, cepa N.10 del
Laboratorio ORSTOM.
Luego de la esterilización los tubos fueron colocados en forma inclinada y enfriados hasta total
solidificación del medio. Al final se inoculó el hongo en forma aséptica, se incubó a 35 ºC por 72
horas hasta su esporulación y luego los tubos fueron mantenidos por un mes en refrigeración.
laboratorio
Por cada 100 gramos de banano seco, se agregó sulfato de amonio y urea (las sales se disolvieron
en una cantidad apropiada de agua para que el banano alcance la humedad deseada), las mezclas se
llevaron a esterilizar en autoclave a 121ºC por 10 minutos. Los medios de cultivo se enfriaron
hasta temperatura ambiente, se inoculó con esporas en una concentración de 2*107 esporas/g de
banano seco y se ajustó el pH del medio con ácido cítrico al 10% hasta 4,5. Las mezclas fueron
colocadas en columnas de fermentación, hechas de vidrio de 2,2 cm de diámetro y 21 cm de largo
(previamente esterilizadas en autoclave a 121º por 20 minutos). Las columnas de fermentación
tenían entrada de aire y fueron similares al arreglo de Raimbault y Alazard, 1980. Las columnas se
colocaron en un baño maría a temperatura controlada.
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Variables Niveles
a. Humedad del sustrato Ao = 50
(%)
A1 = 70
b. Temperatura de Bo = 30
fermentación (ºC)
B1 = 37
c. Aireación Co = 3
(litros/minuto/kg
sustrato seco)
C1 = 5
d. Tiempo (horas) Do = 30
D1 = 36
5
Por cada 15 kg de banano seco, se agregó sulfato de amonio y urea (las sales se disolvieron en
una cantidad apropiada de agua), se pasteurizó a 92˚C por 10 minutos. El medio de cultivo se
enfrió hasta temperatura ambiente, se inoculó con esporas de Aspergillus niger, se ajustó el pH
con ácido cítrico estéril y luego las mezclas se colocaron en las bandejas de fermentación por un
tiempo de 32 horas.
seco
Humedad, la muestra se deseca hasta peso constante en una estufa a 105°C. AOAC
24.003
Cenizas, la muestra se calcina a 550°C en una mufla hasta peso constante. AOAC
14.006
Grasa, se extrae de la muestra utilizando solventes orgánicos y empleando el equipo de
Goldfish Labconco. AOAC 24.005
Fibra, se utiliza un digestor para fibra Labconco. La fibra es el residuo insoluble que
deja la muestra cuando se somete a un tratamiento con ácido y álcali diluido e hirviente.
AOAC 7.061
Proteína, por el método de Micro Kjeldahl. AOAC 14.068. El porcentaje de proteína
es igual al porcentaje de nitrógeno multiplicado por 6,25. Las muestras provenientes de
la fermentación sólida que contienen sulfato de amonio y urea, fueron lavadas con
abundante agua destilada hasta conseguir que las sales sean retiradas del material
fermentado, según lo recomendado por Illianes, 1992, citado por Tobar, 1993.
Carbohidratos totales, por diferencia.
pH, con un pH - metro Mettler
Pérdida de materia seca durante la fermentación por balance de masa. Relación entre la
masa seca inicial menos la masa seca fermentada, todo sobre la masa seca inicial
multiplicado por 100.
Rendimiento fermentativo. Relación entre el peso del producto fermentado y el peso del
material inicial multiplicado por 100%.
seco y fermentado
Los análisis del contenido de minerales y de aminoácidos se realizaron en el Instituto Nacional
Autónomo de Investigaciones Agropecuarias (INIAP) – Estación Santa Catalina (Quito). El
contenido de minerales fue realizado en un Espectrofotómetro de Absorción Atómica y de
aminoácidos en un Cromatógrafo Líquido de Alta Eficiencia “Shimadzu”.
ponedoras
Afrecho 4 4 4
Carbonato de calcio 1 1 1
Polivitaminas con electrolitos 1 1 1
Para esta etapa de la experimentación se utilizaron pollos Broilers de un día de nacidos, fueron
divididos al azar en 9 grupos, de 6 pollos por grupo, 3 grupos correspondieron a cada dieta, con
un total de 54 pollos. Cada grupo fue ubicado en jaulas individuales.
El análisis sensorial de las carnes provenientes de pollos de engorde alimentados con las
diferentes dietas, se realizó utilizando diez catadores semientrenados y en diferentes tipos de
preparación: Pollo frito, pollo cocinado, sopa de pollo y pollo horneado. Cada tipo de
preparación se realizó en días diferentes y las evaluaciones sensoriales se lo realizó en la
mañana.
Dieta 1 Dieta 2
Ingrediente (%) (%)
Maíz 54,8 27,4
Banano - 27,4
Soya 18,5 18,5
Harina de pescado 10,3 10,3
Para esta etapa de evaluación se utilizó pollonas de 9 meses de edad, que fueron
levantadas con una dieta estándar de crecimiento, fueron divididas al azar en 12 grupos
de 4 aves por grupo, en un total de 48 gallinas, cada grupo fue ubicado en una división
de jaula, a seis grupos de aves se las alimentó con la dieta control y a los seis restantes
con la dieta 2. El agua se ofreció ad-libitum mientras que la alimentación se
proporcionó en forma racionada para cada ave en la cantidad de 117 g por día. Se
registraron: los pesos de las aves al inicio y al final del experimento, además se
registraron el número de huevos y sus pesos durante 28 días, este registro se realizó
diariamente por cada jaula. Al final se realizó el análisis estadístico de los resultados
obtenidos en esta etapa.
3. RESULTADOS
ENSAYO # CONCENTRACIÓN
Esporas/g de banano
* 10 9
1 5,36
2 4,04
3 4,64
4 4,92
5 5,80
6 4,70
7 4,96
8 4,96
9 4,44
10 4,79
Promedio 4,86
La humedad inicial del medio de fermentación, afecta en forma altamente significativa sobre el
crecimiento del hongo Aspergillus niger y por ende en la formación de proteína, la mejor
humedad del sustrato es de 70%.
Las condiciones adecuadas de fermentación sólida del banano son las siguientes: humedad
inicial del sustrato: 70%, temperatura: 30oC, tiempo: 32 horas y flujo de aire: 5 litros
/minuto/Kg de banano seco.
20
15
10
5 pH
0
0 10 20 30 40
Tiempo (horas)
10
En el Gráfico 1, se indican los cambios en los valores de proteína, materia seca y pH del banano
fermentado a diferentes tiempos de incubación y en las condiciones seleccionadas para el
crecimiento del hongo Aspergillus niger. Esta experimentación fue realizada en columnas de
fermentación a nivel de laboratorio. Se observa la curva típica de crecimiento de
microorganismos, en la misma se distinguen las siguientes fases: 0 a 7 horas de adaptación del
hongo al sustrato; de 7 a 36 horas, la síntesis de proteína y de las 36 a 40 horas la fase
estacionaria.
La proteína aumenta con el tiempo de fermentación desde las 7 hasta las 36 horas de
incubación; a partir de ese momento comienzan a descender los valores, esto se debe al proceso
de esporulación del hongo y al agotamiento de los nutrientes en el medio de cultivo.
El pH cambia con relación al inicial, esto puede deberse al consumo de las sales de sulfato de
amonio y urea, por el hongo durante la incubación. El pH esta influenciado por los siguientes
efectos: humedad y tiempo de fermentación.
La pérdida de materia seca durante el proceso de fermentación, se debe al proceso biológico del
hongo, que transforma parte de los nutrientes en C02 y H2O. Los efectos que influyen en la pérdida
de sólidos son: la humedad inicial del sustrato, flujo de aire y el tiempo de fermentación.
que durante la fermentación ha ocurrido un incremento del 100% con respecto al contenido de
lisina del banano inicial.
Contenido de aminoácidos
(% base seca)
AMINOÁCIDOS* Banano Banano **
seco fermentado
Equipo para el proceso de fermentación sólida Columnas con banano a 32 horas de fermentación
adaptado en un baño maría
Secador de bandejas
PRODUCTO OBTENIDO
Tabla 9. Ganancia acumulada de peso promedio en gramos por pollo de engorde Broilers
EDAD DIETA 1 (0% Banano) DIETA 2 (50% Banano) DIETA 3 (100% Banano)
Gráfico 2. Ganancia acumulada de peso (g) promedio por pollo de engorde Broilers, a los
28 días de edad
600
Ganancia Acumulada de Peso
500
D IETA 2
400 D IETA 1
300
200 D IETA 3
100
0
0 5 10 15 20 25 30 35
Edad (días)
16
Pollos de engorde*
INDICADORES (g)
Dieta 1 Dieta 2 Dieta 3
Para el análisis sensorial de las carnes de pollo provenientes de los 3 tipos de dietas, se
procedió a realizar la evaluación de la calidad con jueces semientrenados, utilizando
diferentes formas de preparación: pollo frito, pollo horneado, sopa de pollo y pollo
cocinado.
Para el análisis se planteó un test de puntaje con una escala de amplitud 5, con el fin de
evaluar los siguientes parámetros indicados en el formato 1.
El análisis estadístico de los resultados obtenidos en las pruebas sensoriales nos indica
que la carne de pollo provenientes de aves alimentadas con dieta 2, no existe diferencias
significativas en comparación con la dieta 1, en general presentan buenas características
sensoriales en sus diferentes preparaciones, como por ejemplo la aceptabilidad tiene una
calificación promedio entre 4,2 a 4,6 que en la escala hedónica se halla entre
aceptabilidad buena y muy buena (Tabla 11).
Como resultado general, la inclusión del 50% de banano fermentado en reemplazo del
maíz en la alimentación de pollos Broilers, con relación a la dieta 1, que no posee
banano fermentado, no afecta en la ganancia de peso, conversión alimenticia en pollos
de engorde; ni en los atributos de su carne, como el color, sabor y aceptabilidad, en sus
diferentes preparaciones.
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Pollo frito
Pollo en
sopa
Pollo cocinado
Pollo horneado
Dieta 1
Dieta 2
Dieta 3
En la Tabla 12, se indica el efecto que tiene la dieta con banano fermentado en la
producción de huevos en pollas de 36 semanas de edad.
De acuerdo al análisis estadístico realizado para el número de huevos por ave, alimento
consumido por gallina, alimento por docena de huevos y el rendimiento de producción
de huevos por ave, se determinó que el alimento balanceado control y el balanceado que
contiene el 50% del banano fermentado en reemplazo del maíz, no presentan diferencias
significativas entre sí, con relación a las respuestas experimentales descritas en la Tabla
12; con la particularidad de que las gallinas alimentadas con la dieta 2, producen
huevos con un mayor peso que la dieta 1, como se muestra en el Gráfico 3.
Gráfico 3. Peso promedio de huevos (g) proveniente de gallinas ponedoras, alimentadas con dos
tipos de dietas diferentes (0% y 50% de banano fermentado en reemplazo al maíz)
PESO PROMEDIO DE HUEVOS
67,0
66,0
65,0
64,0
(g)
63,0
62,0
61,0
60,0
0% banano fe rme ntado 50% banano
fe rme ntado
La evaluación sensorial de los huevos provenientes de las gallinas alimentadas con las
diferentes dietas, establece que no existe diferencia significativa en su sabor y
aceptabilidad, pero sí en el color de la yema, esto puede deberse a que el banano
fermentado no posee carotenos como el maíz. La disminución de la coloración de la
yema del huevo puede superarse añadiendo productos que contienen xantofilas a los
balanceados que contengan banano fermentado. La aceptabilidad de los huevos va desde
3,9 a 4,1, con un promedio de 4,0, que en la escala hedónica representa como bueno
característico (Tabla 13).
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Huevo cocinado
Huevo frito
4 DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
En el país existen sembradas 157.146 hectáreas, con una producción de 4824.816 toneladas
métricas de banano anual, se exportaron alrededor de 3904.799 toneladas en 1999, originando
un banano de desperdicio de aproximadamente 239.514 toneladas. Está cantidad indica el gran
potencial de materia prima disponible que puede ser aprovechada en una gran diversidad de
productos o subproductos.
El banano tiene un peso que va desde 136 a 288 gramos, contiene de 60 a 65 % de pulpa
comestible, tiene un contenido en base seca de proteína de 3,8 y 5,7 de fibra.
Las condiciones seleccionadas de fermentación sólida del banano a escala de laboratorio son las
siguientes: humedad inicial del sustrato: 70%, temperatura: 30oC, tiempo: 32 horas y flujo de
aire: 5 litros/minuto/kg de banano seco.
El reactor para la fermentación en estado sólido del banano de rechazo, construido a escala
semipiloto, tiene una capacidad de 75 kg de banano en fresco (15 kg de banano seco). El rango
de temperatura durante la fermentación fue de 30 a 35°C y su tiempo de fermentación fue de 32
horas. El reactor proporcionó buenas características de regulación de temperatura y humedad,
durante el proceso de fermentación, lográndose obtener un sustrato fermentado con un mejor
balance de aminoácidos con respecto al banano de rechazo.
El crecimiento del hongo Aspergillus niger sobre banano durante 32 horas de fermentación en
el reactor a escala semipiloto, dio como resultado una masa fermentada con un contenido de
21
La evaluación sensorial de la carne de pollos provenientes de los tres tipos de dietas demuestra
que el uso de un 50% de banano en la alimentación de los pollos no afecta los atributos de
color, sabor, aceptabilidad en relación a la dieta control, pero si al utilizar la dieta del 100% de
banano fermentado.
Las gallinas alimentadas con la dieta 2 (banano fermentado que reemplaza en un 50% al maíz),
proporcionaron huevos de mayor peso, mientras que en los resultados restantes el tipo de dieta
no incide en ninguna forma, ni altera el sabor por lo que se puede reemplazar el 50% de maíz
con banano fermentado en la formulación de dietas para gallinas ponedoras.
5 Referencias
Alvarez, M., 1999. Fermentación sólida del banano de rechazo en la obtención de alimentos. Tesis
de Maestría. Escuela Politécnica del Chimborazo “ESPOCH”. Riobamba, Ecuador.
Larrea, C., 1987. El Banano en el Ecuador. Editado por la Corporación Editora Nacional. Quito,
Ecuador. pp. 52 – 101
Raimbault, M. and Alazard, D., 1980. Culture Method to Study Fungal Growth in Solid
Fermentation. European Journal of Applied Microbiology and Biotechnology. 9. 199-209
22
Riofrío, José., 1994. Mercadeo, Calidad y Presentación del Banano y Plátano. Ediciones
Producciones Agropecuarias. Guayaquil, Ecuador. 27 – 48.
Saltos, H. A., 1993. Diseño Experimental. Editorial Pío XII. Ambato, Ecuador. 71- 92.
Valiño, Elaine., 1997. Obtención de Proteína Microbiana en Sustratos con alto contenido en
carbohidratos estructurales complejos. Memorias del seminario Alimentación Alternativa para el
Trópico y IV Encuentro sobre Nutrición de Animales Monogástricos. Instituto de Ciencia Animal.
La Habana, Cuba. 209 – 214.
6 Agradecimientos
J. Chang. Programa de Modernización de los Servicios Agropecuarios “PROMSA”. Organismo
que financia económicamente para la ejecución del proyecto.
F. Muñoz y D. Cepeda. NRI – UEFC. Contribuyeron con ayuda técnica durante las actividades del
proyecto.