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La fibra dietética se define como los polisacáridos y lignina que no son digeridos por enzimas
humanas (Lee y Prosky, 1995).
Los métodos (AOAC 985.29, 993.21, Horwitz, 2005) se fundamentan en aislar la fracción del
interés con la precipitación selectiva y después determinar su peso. Una muestra gelatinizada
de alimento seco, desengrasado se digiere enzimáticamente con alfaamilasa,
amiloglucosidasa y proteasa para hidrolizar al almidón y la proteína. El contenido total de la
fibra de la muestra se determina agregando etanol al 95% a la solución para precipitar toda la
fibra. La solución entonces se filtra, se recupera, se seca y se pesa, el residuo se reporta
como fibra. (Prosky et al, 1984, Prosky et al, 1985).
Estos métodos han sido reportados oficialmente por el AOAC y son ampliamente utilizados en
la industria alimentaria para determinar el contenido de la fibra de una variedad de alimentos.
Su desventaja principal es que tiende a sobrestimar el contenido de la fibra de los alimentos
que contienen altas concentraciones de azúcares simples, por ejemplo, frutas deshidratadas,
posiblemente porque estos carbohidratos son atrapados en los precipitados formados cuando
se agrega el etanol.
Procedimiento:
Pesar por 1g de muestra (exactitud de 0.1g) en matraces de 500 mL. El peso de las muestras
no debe diferir en más de 20 mg.
Adicionar 50 mL de buffer de fosfatos 0.08M pH 6 0, Medir pH y ajustar a pH 6± 0.2 si es
necesario.
Adicionar 0.1 mL de la solución de amilasa y cubrir el matraz con papel aluminio, colocar el
matraz en un baño a ebullición durante 15 min. Agitar suavemente cada 5 minutos. Verificar
con termómetro que los matraces mantengan 95-100°C durante 15 minutos. Enfriar a
temperatura ambiente.
Adicionar 280 mL de etanol 95% precalentado a 60°C (medir el volumen antes de calentar).
Dejar en reposo 1 h
Pesar el crisol conteniendo la celita, humedecer y redistribuir la cama de celita con etanol
78%. Aplicar succión.
Para muestras sólidas se recomienda disolver una cantidad conocida en un volumen exacto
de agua y filtrar, en caso de presentarse material insoluble. Cuando las muestras son turbias o
muy coloridas se requiere de clarificación, para lo cual tomar una alícuota (entre 10 y 50 mL,
dependiendo de la cantidad de azúcares que contienen), y colocar en un matraz aforado de
100 mL. Diluir aproximadamente 50 mL y tratar con 1mL de solución saturada de acetato de
plomo, diluir al volumen y filtrar sobre papel Whatman Nº 1, recuperando una solución clara.
Para eliminar el exceso de plomo adicionar oxalato de sodio o potasio sólido, mezclar y filtrar
nuevamente, descartando los primeros mililitros.
Índice de refracción
Procedimiento:
Los refractómetros ATC-1 y N10 solamente se calibran a 0%, colocando unas gotas de agua
destilada en el prisma. Si la separación de los campos no marca 0%, en la escala, ajustar
girando el tornillo que se encuentra en la parte superior de la base del prisma.
o Método de Fehling