MANUAL DE

PROCEDIMIENTOS
OPERATIVOS
ESTANDARIZADOS
(POE)

CENTRO DE HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE

TIPO

2017
 MANUAL DE PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS

El presente manual contiene la descripción de los procedimientos operativos

estandarizados del centro de Hemoterapia Tipo I de la “Clínica Suárez” en
concordancia establecido por las normas Nacionales del PRONAHEBAS y los
estándares internacionales señalados por la Organización Mundial de la Salud (OMS)
y la Organización Panamericana de la Salud (OPS)

El PRONAHEBAS, pertenece a la Dirección Ejecutiva de Servicios de Salud de la

Dirección General de Salud de las Personas del Ministerio de Salud, y su función es
regular y normar el funcionamiento de los servicios de Medicina Transfusional del
Ministerio de Salud, la Seguridad Social, la Sanidad de las Fuerzas Armadas y
Policiales y el Sector Privado, en todo el ámbito nacional.

Por tal motivo los servicios de Medicina Transfusional en todo el mundo se están
viendo abocados a implantar algún sistema que asegure la Calidad de sus productos y
atenciones.
Mejorar la cadena de procesos de forma integral desde la atención de un donante,
hasta la transfusión de una unidad de sangre o hemoderivados y la subsiguiente
evaluación de posibles reacciones adversas, requiere de profesionales competentes,
comprometidos con mejorar los flujos de actividades y de información, de un marco
Legal que facilite la acción de los coordinadores y auditores del sistema y del
aprovisionamiento adecuado de recursos para llevar a cabo estas tareas.

La presente guía de Procedimientos Operativos Estandarizados ha sido elaborada

con la finalidad de brindar una herramienta para estandarizar el trabajo del Centro de
Hemoterapia Tipo I de la Clínica Suárez.

Consta de dos secciones:

 Procedimientos de Inmunohematología
 Procedimientos de Control de Calidad
 PROCEDIMIENTOS

DE

INMUNOHEMATOLOGÍA
 Nº DE POE 01
DETERMINACION DE
CENTRO DE GRUPO SANGUINEO PAGINA 1 de 2
HEMOTERAPIA TIPO I
Determinar el grupo globular ABO en donantes y pacientes, mediante el
OBJETIVO uso de antisueros específicos, que actúen aglutinando las células
portadoras del antígeno respectivo. Correlaciona con el grupo sérico con
células de tipificación conocida.
ALCANCE Tecnólogo Medico del Centro de Hemoterapia
MUESTRA Sangre entera anticoagulada y Suero o Plasma.
Reactivos: Sueros comerciales anti A, anti B, todos los reactivos deben
utilizar de acuerdo a las instrucciones del fabricantes.
MATERIALES Y Glóbulos rojos A1, y B al 5% (Opcional A2)
EQUIPOS Equipos: Centrifuga de Inmunohematología,
Aglutinoscopio,
Tubos de 12 x 75, pipetas de 100 ul y de 50 ul
Solución salina al 0.9%
PROCEDIMIENTO / FACE CELULAR
1 Preparar una suspensión de glóbulos rojos en estudio al 5% en solución salina al 0.9%
2 Colocar una gota de anti A en un tubo limpio y rotulado “A”
3 Colocar una gota de Anti B en un tubo limpio y rotulado “B”
4 Agregar una gota de la suspensión al 5 % de glóbulos rojos en estudio a cada tubo
5 Mezclar con suavidad y centrifugar por 15 segundos A 3,400 RPM o por un minuto a
1000 rpm
6 Resuspenda con suavidad las células y/o examinar macroscópicamente en busca de
aglutinación con la ayuda del aglutinoscopio.
7 Leer ,interpretar y registrar los resultados
FASE SERICA
8 Rotular 2 tubos como A1 y B (Si se usan células A2 se rotula un tubo adicional)
9 Agregar 2 gotas de suero o plasma en estudio a cada tubo
10 Agregar 1 gota de células A1 al tubo rotulado como A1
11 Agregar una gota de Células B al tubo rotulado como B
12 Agregar una gota de células A2 al tubo rotulado como A2 , si correspondiera
13 Mezclar con suavidad las células y centrifugar por 15 segundos a 3,400 rpm o por 1
minuto a 1,000 rpm.
14 Resuspenda con suavidad las células y examine macroscópicamente en busca de
aglutinación y/o hemolisis con ayuda del aglutinoscopio.
15 Leer, interpretar y registrar los resultados
16 Comparar los resultados de la prueba con los obtenidos en la fase celular.
INTERPRETACION.
 La aglutinación de los glóbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos
 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
  La interpretación de la tipificación ABO celular y sérico se ilustra en la tabla.
 Todas las discrepancias en los resultados globular y sérico deben resolverse antes
de registrar la interpretación del tipo ABO del paciente o donante.

En la fase ABO y Rh, las reacciones positivas suelen mostrar

OBSERVACIONES aglutinación 3+ a 4 + las reacciones en fase sérica son más débiles. Los
Glóbulos rojos A2. Se utilizaran si se encuentra un subtipo A que
pueda desarrollar anticuerpos A1.

ADJUNTO/ TABLA
TIPIFICACION ABO

PRUEBA CELULAR PRUEBA SERICA

GLOBULOS ROJOS DESCONOCIDOS SUERO DESCONOCIDO INTERPRETACIÓN
Anti A1 Anti B Anti A1B A1 B O
0 0 0 + + 0 O
+ 0 + 0 + 0 A1
0 + + + 0 0 B
+ + + 0 0 0 A 1B

REFERENCIAS Manual Técnico de la Asociación Americana de los Bancos de Sangre

13ava Edición.

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Lic. T.M. Maritza Marchena Avila
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Centro de Hemoterapia Tipo I Dr. Berly Manrique Orrillo 05/06/2017
AUTORIZACION
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Dirección Medica Dr. Walter Carpio Montenegro 15/06/2017
 Nº DE POE 02
DETERMINACIÓN DE
CENTRO DE ANTÍGENO D PAGINA 1 de 3
HEMOTERAPIA TIPO I Y D DÉBIL

La expresión del antígeno D en el grupo de los D débiles, esta disminuido

OBJETIVO en número de copias de antígeno D, por lo que su presencia tiene que
ser demostrado mediante la técnica de la antiglobulinica. El objetivo de
esta Técnica es demostrar la presencia del antígeno D.
ALCANCE Tecnólogo Medico del Centro de Hemoterapia
MUESTRA a) Sangre con anticoagulante: EDTA (3 cc)
b) Suspensión de glóbulos rojos en suero nativo, plasma o solución salina
Suero anti D monoclonal, suero control Rh o albumina al 22%
Reactivo: Suero de Coombs poliespecífico IgG C3d,
MATERIALES Y Células control de coombs
EQUIPOS Todos los reactivos deben utilizarse de acuerdo a las instrucciones del
fabricante
EQUIPOS. Centrifuga de Inmunohematología, aglutinoscopio, tubos de
12x75
Pipetas

PROCEDIMIENTO
1 Si la prueba directa con anti-D se realizó en tubo, podría emplearse el mismo tubo, si
las instrucciones así lo señalan. En este caso si el resultado original es negativo se
procede a partir del paso 4
2 Colocar una gota de suero Anti-D en un tubo de ensayo limpio y rotulado
3 Colocar una gota de reactivo de control en otro tubo de ensayo limpio y rotulado
4 Agregar una gota de suspenden de G.R. en estudio al 5% en solución salina a cada
tubo. Puede efectuarse una prueba Antiglobulinica directa de control pero se prefiere
la indirecta con reactivo Rh porque garantiza la presencia de todos los componentes
que podrían causar resultado falsos positivos
5 Mezclar e incubar los tubos de acuerdo con las instrucciones, en general a 37 °C
durante 15 a 30 min
6 Para la lectura después de la fase de incubación a 37°C, centrifugar de acuerdo con las
instrucciones, en general 15 a 45 segundos a 900-1000 x g
7 Resuspender las células con suavidad y examinar en busca de aglutinación. Si los
glóbulos rojos se aglutinan en el tubo con Anti-D pero no en el de control, consignar la
muestra como D Positivo y no proseguir a la fase antiglobulinica
8 Si los glóbulos rojos no se aglutinan o los resultados son dudosos, lavar las células 3 ó
4 veces con gran cantidad de solución salina
9 Después del lavado final, extraer la solución salina, secar los bordes de los tubos y
agregar 1 ó 2 gotas de reactivo antiglobulinica
10 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones, en general 15 á
30 segundos a 900-1000 x g
11 Resuspenda las células con suavidad, examinar en busca de aglutinación, graduar y
 registrar el resultado
12 Si el resultado de la prueba es negativo, agregar glóbulos rojos sensibilizados con Ig
G, repetir la centrifugación y observar la eventual aglutinación. La aglutinación en
este punto confirma la presencia de reactivo antiglobulinica activo en la mezcla en
estudio
Definición: Algunos glóbulos rojos expresan los antígenos D en forma tan débil
que muchos de los reactivos Anti-D no lo detectan por lo que es necesario evidenciarlo
mediante la prueba Antiglobulina indirecta después de incubar los glóbulos rojos con anti-
D y posterior incubación con anti-IgG humana en fase celular
Interpretación:
1. La evaluación de los antígenos D débil debe acompañarse de un diluyente de
control o una prueba Antiglobulinica directa. La presencia de aglutinación en el
tubo con anti -D pero NO en el de Control, constituye un resultado Positivo. La
sangre debe clasificarse como D Positivo. Es incorrecto considerar que estos
glóbulos rojos son "D negativos", "D positivo débil" o " D
2. La ausencia de aglutinación en el tubo con suero anti-D constituye un resultado
negativo e Indica que las células no expresan D y deben clasificarse como D
negativo.
3. Las causas de pruebas Antiglobulinica falsas positivas y falsas negativas deben
discutirse.
Nota:
Algunas instituciones podrían efectuar una lectura adicional después de la incubación a
37°C antes de completar la fase antiglobulinica con la interpretación correspondiente.

ADJUNTO / TABLA

Rh NEGATIVO TIPICO
D CONTROL Rh INTERPRETACION
Lectura inmediata 0 0 Continuar
Lectura Incubación 0 0 Continuar
Lectura Suero de Coombs 0 0 Continuar
Control de Coombs 1+/2+ 1+/2+ Negativo

Rh POSITIVO DEBIL
D CONTROL Rh INTERPRETACION
Lectura inmediata 0 0 Continuar
Lectura Incubación 0 0 Continuar
Lectura Suero de Coombs 1+ 0 Positivo
Control de Coombs 1+/2+ Positivo

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 REDACCION
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Centro de Hemoterapia Tipo I Dr. Berly Manrique Orrillo 10/07/2014
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Dirección Medica Dr. Walter Carpio Montenegro 05.12.13
 Nº DE POE 03
PRUEBA DE
CENTRO DE COMPATIBILIDAD PAGINA 1 de 2
HEMOTERAPIA TIPO I SANGUÍNEA

La acción de un anticuerpo del plasma del receptor contra un antígeno

OBJETIVO presente en los glóbulos rojos del donante se traduce en la visualización
de hemólisis y/o aglutinación. Usado en Inmunohematología para
atender solicitudes de transfusión sanguínea
ALCANCE Tecnólogo médico del Centro de Hemoterapia
MUESTRA a) Sangre del receptor.
b) Suspensión al 5% de GR lavados del donante que sólo debe
conservarse por 48 horas a 4° C.
Solución salina al 0.9%
Albúmina bovina al 22%
MATERIALES Y Suero anti-inmunoglobulina humana poliespecífico
EQUIPOS Células control de Coombs
Centrifuga de Inmunohematología
Baño María
Aglutinoscopio

PROCEDIMIENTO
PRIMERA FASE: SALINA/PROTEICA
1 En un tubo de 12 x 75 mm previamente rotulado, agregar 2 gotas de suero del
receptor y una gota de la suspensión de GR al 5% del donante
2 Centrifugar de acuerdo a las especificaciones, en general 30. a 45 segundos a 900-
1000 x g
3 Observar el sobrenadante para detectar hemólisis
4 Desprender suavemente el botón celular del fondo del tubo para observar si hay
aglutinación y anotar los resultados
5 Agregar albúmina bovina al 22%
6 Centrifugar de acuerdo a las especificaciones, en general 30 a 45 segundos a 900-
1000 x g
7 Resuspender suavemente las células en busca de aglutinación y anotar los resultados
SEGUNDA FASE: TÉRMICA
8 Colocar el tubo en Baño María a 37°C por 25 minutos
9 Centrifugar como en la primera fase
10 Leer desprendiendo suavemente el botón de células del fondo del tubo para observar
si hay aglutinación y anotar los resultados
TERCERA FASE: COOMBS
11 Lavar 3 veces con solución salina centrifugando a 2500 rpm por 1 minutos llenando el
tubo hasta 1 cm antes de la boca del tubo. En el último lavado secar el tubo con papel
absorbente
12 Agregar 2 gotas de Anti IgG poliespecífico
13 Centrifugar de acuerdo a las especificaciones, en general 30 a 45 segundos a 900-
 1000 x g
14 Resuspender suavemente las células y anotar los resultados
15 Agregar una gota de células control de Coombs si la prueba es negativa
16 Centrifugar, leer y anotar los resultados. Esta prueba debe ser positiva de lo contrario
los resultados no serán válidos y el procedimiento completo deberá repetirse
INTERPRETACIÓN
1. Se considera que existe compatibilidad si no se visualiza hemólisis o aglutinación en
ninguno de los pasos de la Prueba de compatibilidad.
2. Se considera incompatible, si se visualiza hemólisis o aglutinación.

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Lic. T.M. Maritza Marchena Avila
REVISIONES
AREA AREA AREA
Centro de Hemoterapia Tipo I Centro de Hemoterapia Tipo I Centro de
Hemoterapia Tipo I
AUTORIZACION
AREA AREA AREA
Dirección Medica Dirección Medica Dirección Medica
 ANTIGLOBULINA Nº DE POE 04
HUMANA DIRECTA.
CENTRO DE PRUEBA DE PAGINA 1 de 2
HEMOTERAPIA TIPO I COOMBS DIRECTO

La prueba de la Antiglobulina humana permite detectar e identificar

OBJETIVO inmunoglobulinas y/o componentes del complemento unidos a
hematíes, ya que, añadido a hematíes sensibilizados producirá su
aglutinación a condición de que dichos hematíes hayan sido lavados a
fondo con suero salino fisiológico para eliminar las proteínas
plasmáticas que no estén unidas específicamente a los mismos.
ALCANCE Tecnólogo Medico del Centro de Hemoterapia
MUESTRA Sangre del paciente anticoagulada con EDTA
Solución salina al 0.9 %
Tubos de ensayo 12 x 75 mm
MATERIALES Y Centrífuga
EQUIPOS Pipetas automáticas de 50 y 100 uL
Anti globulina humana : Suero de Coombs poliespecífico

PROCEDIMIENTO
1 Colocar 2 gota(100 ul) de hematíes en un tubo 12x75
2 Lavar con solución salina al 9% 3 veces
3 Decantar el sobrenadante y hacer una suspensión al 5%, tomar 50 ul
4 Agregar 2 gotas del suero poliespecífico
5 Centrifugar por 30 a 45 segundos a 900-1000 x g
6 Resuspender suavemente las células y anotar los resultados
7 Agregar una gota de células control de Coombs si la prueba es negativa
8 Centrifugar, leer y anotar los resultados. Esta prueba debe ser positiva de lo contrario
los resultados no serán válidos y el procedimiento completo deberá repetirse
9
INTERPRETACIÓN

 La aglutinación de los glóbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos.

 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo.
 Los resultados negativos deben ser comprobados con las células control de
coombs.
 Si el resultado es negativo la prueba es “no valida” y deberá repetirse.
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REGISTROS

REDACCION
Lic. T.M. Maritza Marchena Avila
REVISIONES
Lic. T.M. Maritza Marchena Avila Lic. T.M. Maritza Marchena Lic. T.M. Maritza
Avila Marchena Avila
REVISIONES REVISIONES REVISIONES
AREA
Centro de Hemoterapia Tipo I Centro de Hemoterapia Tipo I Centro de
Hemoterapia Tipo I
AUTORIZACION AUTORIZACION AUTORIZACION
 ANTIGLOBULINA Nº DE POE 05
HUMANA INDIRECTA.
CENTRO DE PRUEBA DE PAGINA 1 de 2
HEMOTERAPIA TIPO I COOMBS INDIRECTO
Detecta los anticuerpos o los componentes del complemento fijados in
vitro a los hematíes durante un tiempo de incubación en el
laboratorio. Tiene aplicación en el estudio de anticuerpos en un suero
OBJETIVO problema a través de hematíes de composición antigénica conocida
(hematíes de escrutinio, paneles de hematíes, etc.), determinación de
antígenos eritrocitarios a través de antisueros específicos y, por
último, en las pruebas de compatibilidad pretransfusional .
ALCANCE Tecnólogo Medico del Centro de Hemoterapia
MUESTRA Suero 5ml. Conservación a 4ºC.(No usar plasma)
Suero Antiglobulina humana poliespecífico
Centrifuga
MATERIALES Y Micropipetas y puntas
EQUIPOS Solución salina al 0.9%
Baño María
Pool de glóbulos rojos de 5 personas

PROCEDIMIENTO
1 Obtener sangre venosa del paciente con técnica aséptica, y luego obtener suero
2 Preparar un pool de hematíes grupo “O” Rh Positivo de por lo menos 5 personas
sanas (ejemplo : donantes de sangre)
3 Lavar el pool 3 veces con solución salina y preparar una suspensión al 5%
4 Rotular 2 tubos 12 x 75 mm como “A” (autocontrol) y “P” (prueba del paciente)
5 Medir 50 ul de la suspensión al 5% del pool en cada tubo (A y P)
6 Medir 100 uL de suero del paciente a cada tubo (A y P)
7 Incubar en Baño María a 37ºC durante 30 a 45 minutos
8 Lavar 3 veces con solución salina al 0.9 %
9 Decantar y secar
10 Agregar 2 gotas de Antiglobulina humana a cada tubo
11 Centrifugar 30 segundos en serofuge
12 Observar aglutinación
13 Si es positivo hacer diluciones, se ejecutara de la siguiente manera.

Tabla 1

Dilución 1 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024
Reacción
Score

La reacción se tiene que graduar de acuerdo al grado de aglutinación y/ hemólisis en

4+, 3+, 2+, 1+, 0. El título es la inversa de la dilución más alta de suero que exhibe una
reacción 1+ (es decir dilución 1/128; título = 128).
El Score se realiza a la siguiente leyenda:
4+ 3+ 2+ 1+ ½+ 0
PUNTUACION 10 PUNTOS 8 6 4 3 0
PUNTOS PUNTOS PUNTOS PUNTOS

Así el score es la suma de los puntos dada a cada reacción, hasta donde el suero exhibe
una reacción de 1+ y a partir de la dilución 1/2

Ejemplo:

Dilución 1 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024
Reacción 4+ 3+ 2+ 2+ 1+ 1+ ½+ 0 0 0
Score 10 08 06 06 04 04 - - - -

Por lo tanto: Título: 128 dils

Score: 38

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 PROCEDIMIENTOS

DE

CONTROL DE CALIDAD
 RECEPCION DE Nº DE POE 01
HEMODERIVADOS Y
CENTRO DE TRANSPORTE PAGINA 1 de 1
HEMOTERAPIA TIPO I
Mantener el stock adecuado en cantidad y calidad en el Centro de
OBJETIVO Hemoterapia Tipo I.
ALCANCE Tecnólogo Medico del Centro de Hemoterapia Tipo I
MUESTRA Unidades provenientes del Centro de Hemoterapia Tipo II
Registro de unidades
Registro de características de las Unidades
MATERIALES Y Hoja de Transferencia
EQUIPOS Cooler , adaptado para mantener la cadena en frio (1 UNIDAD
REFRIGERANTA,CADA 2 UNIDADES)

PROCEDIMIENTO
1 Revisar el registro que identifica a la Unidad procedente del Tipo II.
2 Verificar si se realizaron las pruebas de Tamizaje.
3 Controlar el aspecto de la unidad, fecha de extracción y fecha de vencimiento,
verificar que tenga el sello de Garantía de Calidad, entregado por PRONAHEBAS.
4 Llenar el libro de Unidades Recibidas, identificación de la persona que lo recibe,
número del sello Nacional de Calidad y la hora de recepción.
5 Adjuntar la hoja de Transferencia con datos de la Unidad.
6 El personal que recibe la sangre verificará los datos de la solicitud, datos del paciente
y del componente solicitado
7 Controlar el aspecto de la unidad antes de entregarla, así como la fecha de
vencimiento y la hora de entrega
8 Firmar el registro de recepción de unidades.
9 Conservar las unidades en la temperatura optima de 4°C a 6°C
10 Al transportar. Leer temperatura después de 3 o 4 minutos. Registrar lecturas
11 Verificar la fecha de caducidad para retornarlas al Tipo II en caso de fecha próxima al
vencimiento.(10 DIAS ANTES DEL VENCIMIENTO)

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 CLINICA Nº DE POE 02
SUÁREZ DETERMINACION DE LA
CENTRO DE AVIDEZ PAGINA 1 de 1
HEMOTERAPIA TIPO I
Determinar la velocidad de fijación de un antígeno con su anticuerpo
OBJETIVO
ALCANCE Tecnólogo Medico del Centro de Hemoterapia Tipo I

Antisueros, Anti A, Anti B, Anti A-B y Lectina A1

Hematíes O al 45 %
MATERIALES Y Hematíes B al 45 %
EQUIPOS Hematíes A1 al 45 %
Pipetas automáticas 50 ul y 100 ul
Lamina escavada
PROCEDIMIENTO

1 Colocar en la lámina de escavada una gota del reactivo a evaluar

2 Colocar 50 ul de hematíes específicos a aproximadamente 100 ul del reactivo.
3 Mezclar determinando un círculo de no más de 2 cm. De diámetro. Accionando en
forma simultánea el cronometro.
4 Continuar la mezcla por balanceo de la lámina hasta ver aglutinación.
5 Anotar el tiempo de inicio de aglutinación.

INTERPRETACION Tiempo óptimo de reacción 9 a 12 segundos

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 Nº DE POE 03
DETERMINACION DE LA
CENTRO DE ESPECIFICIDAD PAGINA 1 de 1
HEMOTERAPIA TIPO I
Determinar la capacidad de reacción de un anticuerpo frente a sus
OBJETIVO correspondientes determinantes antigénicos.
ALCANCE Tecnólogo Medico del Centro de Hemoterapia Tipo I

Antisueros Anti A, Anti B, Anti A-B y Anti D

Glóbulos rojos A1 ,B y O Positivos
MATERIALES Y Tubos 12 x 75 mm
EQUIPOS Pipetas automáticas 50 ul, y 100 ul, aglutinoscopio,
Baño maría
Aglutinoscopio
PROCEDIMIENTO

1 Rotular 3 series de tubos cada uno como A, B y D

2 Añadir una gota del Anti A a los tubos rotulados “A” y 50 ul de hematíes A1
3 Añadir una gota de anti B a los tubos rotulados “B” y 50 ul de hematíes B
4 Añadir una gota de Anti D a los tubos rotulados “D” y 50 ul de hematíes O
5 Centrifugar a 3500 rpm por 15 seg.
6 Leer

INTERPRETACION Aglutinación por reacción del anticuerpo con su antígeno especifico

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 CLINICA Nº DE POE 04
SUÁREZ TITULACION DE
CENTRO DE ANTISUEROS PAGINA 1 de 2
HEMOTERAPIA TIPO I
Mide la máxima dilución del antisuero a la cual es capaz de reaccionar
OBJETIVO con sus respectivas celulas
ALCANCE Tecnólogo Medico del Centro de Hemoterapia Tipo I
MUESTRA Eritrocitos A , B y O
10 tubos 13 x 100
40 tubos de 12 x 75
MATERIALES Y Pipetas 50 ul y 100 ul
EQUIPOS Antisueros Anti A, Anti B, Anti D, Lectina,

PROCEDIMIENTO

ANTISUERO A BO / ANTI H LECTINA

1 Hacer una suspensión al 5% de solución salina isotónica de células A y B
2 Colocar en una gradilla 11 tubos por cada reactivo a probar
3 Marcar los tubos como P, 2, 4, 8, 16, 32, 64, 128, 256, 512, 1024
4 Agregar a cada uno de ellos excepto al P, 0.1 ml de S.S.I.
5 Agregar 0.1 ml del antisuero a probar al tubo 2 y únicamente al P.
6 Mezclar perfectamente al tubo 2 y transferir 0.1 ml al tubo siguiente, repetir este
procedimiento hasta el último tubo
7 Desechar 0.1 ml del último tubo
8 Agregar 0.1 ml de células conocidas a todos los tubos
9 Mezclar y centrifugar 25 segundos a 3500 rpm
10 Leer y anotar los resultados

ANTISUERO D
1 Preparar una suspensión de eritrocitos Rh + al 5 % con albumina bovina
2 Preparar una serie de 8 tubos de 12 x 75 marcados como P, 2, 4, 8, 16, 32, 64 y 128
respectivamente
3 Agregar a cada uno de ellos excepto al tubo P, 0.1 ml de albumina bovina
4 Proceder como se indica desde el paso 5 de la técnica para ABO
5 Centrifugar 60 segundos a 3500 rpm
6 Leer y anotar resultados

INTERPRETACION El resultado se expresa como el reciproco de la máxima dilución que

de una aglutinación de 1+ ante un volumen constante de eritrocitos
al 5% de células A1, A2, B, D células sensibilizadas y no sensibilizadas.
Se anota la lectura por grado de aglutinación de 1+ a 4+ .
 VALORES DE REFERENCIA

ANTISUERO CELULAS TIEMPO PROMEDIO TITULO MINIMO

DE REACCION
A1 15 Segundos 1: 256

A2 20 Segundos 1: 128
ANTI A

A1B 15 Segundos 1: 128

A2B 30 Segundos 1: 64

ANTI - H A2 60 Segundos 1: 8

LECTINA

COOMBS CELULAS SENSIBILIZADAS 60 Segundos 1: 32

ANTI A1 A1 30 Segundos

LECTINA

B 15 Segundos 1: 256

ANTI B
A1B 15 Segundos 1: 256

A2B 15 Segundos 1: 256

A1 15 Segundos 1: 256

A2 20 Segundos

B 15 Segundos
ANTI AB
A1B 30 Segundos

A2B 45 Segundos

ANTI D 30 Segundos 1; 64

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