ANALISIS DATA PERCOBAAN III ENZIM GLUKOAMILASE

A. Pembuatan Kurva Standar

λmaksimaum = 620 nm

konsentrasi (mg/mL) absorbansi

0 0
0,02 0,154
0,04 0,248
0,06 0,346
0,08 0,462
0,1 0,564

Kurva standar hubungan konsentrasi dengan

absorbansi
0.6
0.5
0.4
absorbansi

0.3 y = 5,488x + 0,021

R² = 0,994
0.2
0.1
0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12
[glukosa] mg/mL
 B. Pengaruh konsentrasi substrat tepung beras terhadap enzim glukoamilase
 Data Absorbansi sampel setelah aplikasi dengan enzim pada berbagai konsentrasi

absorbansi sampel pada konsentrasi

substrart : enzim
2,5 % 5% 10% 20% 40%
1:1 0,352 0,364 0,408 0,352 0,355
1:2 0,363 0,392 0,37 0,347 0,346
1:3 0,378 0,432 0,436 0,379 0,376

Dari kurva standar maka pers regresi yang dihasilkan = y = 5,488 x + 0,021

Maka dapat diperoleh konsentrasi sampel (x) yaitu :

Untuk konsentrasi 2,5 % dengan perbandingan 1:1

y = 5,488 x + 0,021

0,352 = 5,488 x + 0,021

0,353 − 0,021
X = = 0,0603134
5,488

Konsentrasi sesungguhnya = konsentrasi sampel x 10

= 0,0603134 x 10

= 0,603134 mg/mL

Bobot glukosa = [sampel] x 100 mL

= 0,603134 mg/mL x 100 mL

= 60,31341
𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑔𝑙𝑢𝑘𝑜𝑠𝑎
% glukosa = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
x 100 %

60,31341
= 0.00025
𝑥 100 % = 241253,6

𝑚𝑔 𝑔𝑙𝑢𝑘𝑜𝑠𝑎 𝑥 1000
Aktivitas Enzim = 𝑚𝑟 𝑔𝑙𝑢𝑘𝑜𝑠𝑎 𝑥 𝑤𝑎𝑘𝑡𝑢 𝑖𝑛𝑘𝑢𝑏𝑎𝑠𝑖

 untuk konsentrasi selanjutnya dapat dilihat dari table berikut ini :

substrart absorbansi sampel pada konsentrasi konsentrasi sampel

: enzim 2,5 % 5% 10% 20% 40% 2,5% 5% 10% 20% 40%
1:01 0,352 0,364 0,408 0,352 0,355 0,060313 0,0625 0,070517 0,060313 0,06086
1:02 0,363 0,392 0,37 0,347 0,346 0,062318 0,067602 0,063593 0,059402 0,05922
 1:03 0,378 0,432 0,436 0,379 0,376 0,065051 0,074891 0,07562 0,065233 0,064687

konsentrasi sesungguhnya
bobot glukosa

2,5 % 5% 10% 20% 40% 2,5% 5% 10% 20% 40%

0,603134 0,625 0,705175 0,603134 0,608601 60,31341 62,5 70,51749 60,31341 60,86006
0,623178 0,67602 0,635933 0,594023 0,592201 62,31778 67,60204 63,59329 59,40233 59,22012
0,65051 0,748907 0,756195 0,652332 0,646866 65,05102 74,89067 75,61953 65,23324 64,68659

% glukosa AKTIFITAS ENZIM

2,5 % 5% 10% 20% 40% 2,5% 5% 10% 20% 40%
241253,6 125000 70517,49 30156,71 15215,01 22,3383 23,14815 26,11759 22,3383 22,54076
249271,1 135204,1 63593,29 29701,17 14805,03 23,08066 25,03779 23,55307 22,00086 21,93338
260204,1 149781,3 75619,53 32616,62 16171,65 24,09297 27,73729 28,00723 24,16046 23,958

C. pengaruh T (suhu) terhadap aktivitas enzim Glukoamilase

 data absorbansi sampel pada berbagai suhu

Substrat : enzim absorbansi sampel pada berbagai t setelah aplikasi dengan enzim
20o C 40o C 60o C
1:1 0,335 0,369 0,389
1:2 0,326 0,426 0,434
1:3 0,359 0,364 0,437

Dengan cara yang sama maka kadar glukosa serta AE yang dihasilkan terlihat pada tabel berikut ini :

konsentrasi sampel konsentrasi sesungguhnya bobot glukosa

o
20 C 40oC 60o C o
20 C o
40 C o
60 C o
20 C 40oC 60o C
0,057216 0,063411 0,067055 0,572157 0,634111 0,670554 57,21574 63,41108 67,05539
0,055576 0,073797 0,075255 0,555758 0,737974 0,752551 55,5758 73,79738 75,2551
0,061589 0,0625 0,075802 0,615889 0,625 0,758017 61,58892 62,5 75,80175

% glukosa Aktivitas enzim

o o o o
20 C 40 C 60 C 20 C 40oC 60o C
57215,74 63411,08 67055,39 21,19102 23,48558 24,83533
55575,8 73797,38 75255,1 20,58363 27,33236 27,87226
61588,92 62500 75801,75 22,81071 23,14815 28,07472

Kurva hubungan antara T dengan AE

Substrat 1 : 1
 Kurva Hubungan Suhu dengan AE
25.5
25
aktivitas enzim (AE)

24.5
24
23.5
23
22.5
22
21.5
21
0 10 20 30 40 50 60 70
suhu

Substrat 1 :2

Kurva Hubungan Suhu dengan AE

30

25
aktivitas enzim (AE)

20

15

10

0
0 10 20 30 40 50 60 70
suhu

Sustrat 1 : 3
 Kurva Hubungan Suhu dengan AE
aktivitas enzim (AE) 30
25
20
15
10
5
0
0 10 20 30 40 50 60 70
suhu

D. pengaruh pH terhadap Aktivitas enzim

Absorbansi sampel pada pH

Substrat : enzim
4,5 10
1:1 0,573 0,155
1:2 0,168 0,232
1:3 0,322 0,472

konsentrasi sampel konsentrasi bobot glukosa aksitivitas enzim

% glukosa
sesunguhnya
4,5 10 4,5 10 4,5 10 4,5 10 4,5 10
0,100583 0,024417 1,005831 0,244169 100,5831 24,41691 100583,1 24416,91 37,253 9,0433
0,026786 0,038448 0,267857 0,384475 26,78571 38,44752 26785,71 38447,52 9,920635 14,23982
0,054847 0,082179 0,548469 0,821793 54,84694 82,1793 54846,94 82179,3 20,31368 30,43678

Kurva hubungan pH dan AE

Substrat 1 : 2
 grafik Hubungan pH dan AE
16
14
12
10
AE

8
6
4
2
0
0 2 4 6 8 10 12
pH

Substart 1 :3

Grafik Hubungan pH dam AE

35
30
25
20
AE

15
10
5
0
0 5 10 15 20 25
pH

Perhitungan kinetika reaksi

a. Untuk substrat : enzim 1:1

Konsentrasi substrat [S] Kecepatan reaksi

0,25.10-6 22,3383
0,5.10-6 23,14815
1,0.10-6 26,11759
2,0.10-6 22,3383
4,0.10-6 22,54076

1/[s] 1/v
 4 0,044766
2 0,0432
1 0,038288
0,5 0,044766
0,25 0,044364

0.046
0.045
0.044
0.043
0.042
1/Vo

y = 0.0004x + 0.0425
0.041
R² = 0.0405
0.04
0.039
0.038
0.037
0 1 2 3 4 5
1/[S]

Keterangan :

Pada penentuan Km dan Vmax silakan masukkan nilai persamaan regresi dari grafik diatas.
(Jika mengcopy analisis data pada perhitungan kinetika enzim, maka anda dapat memahami
apa yang saya maksud).

b. Untuk substrat : enzim 1 :2

Konsentrasi substrat [S] Kecepatan reaksi

0,25.10-6 23,08066
0,5.10-6 25,03779
1,0.10-6 23,55307
2,0.10-6 22,00086
4,0.10-6 21,93338
 1/[S] 1/Vo
4 0,043326
2 0,03994
1 0,042457
0,5 0,045453
0,25 0,045593

0.046
0.045
0.044
0.043
0.042
1/Vo

y = 0.0004x + 0.0425
0.041
R² = 0.0405
0.04
0.039
0.038
0.037
0 1 2 3 4 5
1/[S]

Keterangan :

Pada penentuan Km dan Vmax silakan masukkan nilai persamaan regresi dari grafik diatas.
(Jika mengcopy analisis data pada perhitungan kinetika enzim, maka anda dapat memahami
apa yang saya maksud).

c. Untuk substrat : enzim 1:3

Konsentrasi substrat [S] Kecepatan reaksi

0,25.10-6 24,09297
0,5.10-6 27,73729
1,0.10-6 28,00723
2,0.10-6 24,16046
4,0.10-6 23,958

1/[S] 1/Vo
4 0,041506
 2 0,036053
1 0,035705
0,5 0,04139
0,25 0,04174

0.047
0.046
0.045
0.044
1/Vo

0.043
0.042
0.041
y = -0.0007x + 0.0444
0.04
R² = 0.1904
0.039
0 1 2 3 4 5
1/[S]

Keterangan :

Pada penentuan Km dan Vmax silakan masukkan nilai persamaan regresi dari grafik diatas.
(Jika mengcopy analisis data pada perhitungan kinetika enzim, maka anda dapat memahami
apa yang saya maksud).