Bases moleculares de la

Mutación y del proceso de

Reparación

Por: Roxana Juárez Bueno

• Mutación: alteración en
la secuencia del DNA
salvaje, silvestre, “wild”
• DNA mutado, estable
para ser heredable
Incorporación de nucleótidos erróneos
durante la replicación
Clasificación de las Mutaciones según el tipo de
Célula
• Germinales: • Somáticas:
Heredable No heredable
Sujeta a selección natural Tasa 10-10 por pb y división
Esporádica, minoritaria, Son mayoritarias
infrecuente Mosaisismo trisomia 21
Tasa 10-6 por locus y división Características normales y
Espermatogénesis 100 por patológicas
replicación: 1 por cada 33 Compatibilidad con ciclo
Mb celular
Recesivas o letales, bajo efecto
patológico
Mosaisismo
Cambios en la secuencia
del DNA
Cambios en la secuencia de DNA por Sustitución
 Mutaciones Silenciosas
• Sense mutations: sintomáticas, con sentido,
sinonimas o neutrales.
Leucina: CUA Arginina: AGA
UUA CGA
CUG AGG
UUG CGG
 Tipo de Causa Posible
Mutación
Sustitución Deleción Inserción
Silenciosa √
No silenciosa √ √ √
Sentido alterado “missense” √
Conservadoras
No conservadoras
Desplazamiento del marco √ √
Sin desplazar el marco √ (triple) √ (triple)
Terminación prematura √ √ √
“nonsense”
Terminación retrasada √ √ √
Mutación silenciosa
Mutación no silenciosa
“missense mutation”
Sustitución Conservadora
Sustitución No conservadora
Anemia Falsiforme

DNA wild DNA mutado

GAG GTG
CTC CAC

mRNA
GAG GUG

Proteína

6Glu 6Val
Desplazamiento en el marco de lectura
Desplazamiento del marco de lectura
Desplazamiento del marco de lectura
Enfermedad de Tay Sach

• retina the ganglion cells

form a single cell layer
except in the macula where
they are present in 8-10
layers. Because of this
special histological feature
of the macular region
Fibrosis quística deleción tripe
Terminación prematura
“Nonsense mutations”
Terminación prematura de una proteína
Neurofibromatosis tipo 1 (NF1) mutación
cromosoma 17q sustitución C por T en
hebra no transcrita,
mRNA UGA
Mecanismos básicos de las
Mutaciones
 Mutaciones Endógenas
• Incorporación de nucleótidos erróneos
durante la replicación
• Sustituciones por desaminación oxidativa
• Pérdida por inestabilidad química del enlace
N-Glicosídico
• Modificación de bases por mutágenos
endógenos
DNA normal forma ceto
Formas tautoméricas
Desaminación oxidativa
Pérdida de bases por inestabilidad química del
enlace N-glicosídico
Daño oxidativo
Mutaciones inducidas
exógenamente
“Mutagénesis”
Efecto de la 2-aminopurina (2AP) como
mutágeno
• El análogo de adenina 2-
aminopurina (2AP),
normalmente hace un par
de bases con la timina
• Pero a veces forma un par
de bases desordenado con
la citosina
• Por lo tanto el 2AP también
genera transición A·T  G·C
y G·C  A·T.
Efecto del ácido nítrico como mutágeno

• Desamina
oxidativamente las
aminas primarias
aromáticas:
• Citosina en Uracilo
• Adenina en Hipoxantina
 Efecto de la hipoxantina
como mutágeno

Transiciones A·T  G·C y G·C  A·T

 Representación de la acción de las
Hidroxilamina.

La hidroxilamina (NH2OH) también induce la transición

G·C  A·T.
Reacciona con citosina convirtiéndola en un compuesto
que hace par de bases con la adenina.
 AGENTES INTERCALANTES
Nitrógeno Mostaza y etilnitrosourea

Distorsión helicoidal
Desplazamiento
marco de lectura
Entrecruzamiento
de bases
Transversiones.
Agentes intercalantes
Agentes Alquilantes en la formación de
O6-metilguanina y sus consecuencias
mG
C

mG G
T C

mG A G G
T T C C
Efecto del 5-bromouracilo (5BU) como
mutágeno
• El 5BU se incorpora en
el ADN en lugar de una
timina
• Se induce una
transición A·T  G·C.
• En alguna ocasiones,
5BU puede remplazar
una citosina lo que a su
vez genera una
transición G·C  A·T.
Mutagénesis exógena
 Lesiones inducidas por agentes físicos
Formación de dímeros de Timinas y fotoproductos
REPARACION
DEL
DNA
Tipo de Sistemas Tipo de lesión
reparación enzimáticos reparada

Detoxificación Superóxido Oxidativa

dismutasa
Reversión directa Fotoliasa Fotodímeros
Alquiltransferasa Deriv. Alquilo
NER Escinucleasa… Distorción doble
hélice
BER N-glicosilasas del Bases
DNA desaminadas
Mal
apareamiento de
bases
Superoxido dismutasa

SOD

O2- . O2

H2 O2
Catalasa

H2O + O2
Fototiolasa: Reparación de fotodímeros
• Mecanismo general de
reparación por
escisión de
nucleótidos
“nucleótide excisión
repair” NER
• Reparación por escisión
de Nucleótidos:
– Fase de escisión:
escinucleasa, helicasa
– Fase de Síntesis de
reparación: DNA pol
y , fact. PCNA, RFC
– Fase de sellado:
DNA ligasa
Subunidad Nro cadenas Función
XPA 1 Reconocer lesión
Posee un dedo de
zinc C4
RPA 3 Reconoce lesion
TF II H 7 Actividad helicasa:
XPB, ZPD, p62,
p44
Actividad kinasa:
p41, p38, p34
XPC + HHR23B 2 Estabilizar?
XPG 1 Endonucleasa 3’
XPF + ERCC1 2 Endonucleasa 5’
Base Excision repair BER
• Fase de Escisión: Sitio
AP es removido por una
enzima endonucleasa
AP
• Fase de reparación:
ADN pol
• Fase de sellado:DNA
ligasa
BER
Missmatch reparations
MLH1, MSH2, MSH6
Cambios evolutivos