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VICERRECTORADO ACADÉMICO
CITOLOGÍA
TEMA:
CURSO: TERCERO
PARALELO: “B”
PERIODO ACADEMICO
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PRÁCTICA N° 4
OBJETIVOS:
OBJETIVO GENERAL:
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
MATERIALES
TÉCNICA DE MONTAJE
El montaje es una técnica que se aplica sobre el espécimen luego de que este haya
sido teñido. Existen razones básicas para realizar la técnica de montaje el montaje.
Señalización de campos
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Archivo de la muestra
Bioseguridad
Los medios más usados son los acuosos. Para de alguna manera corregir la deshidratación
que se provoca con el alcohol y xilol.
Actualmente las casas comerciales brindan excelentes medios de montaje que son
refringentes y de secado rápido como por ejemplo el permount y el entellan.
Si se examina al microscopio óptico, un preparado teñido sin montar, es más difícil percibir
detalles celulares, debido a que existe una gran diferencia de refracción de la luz entre el
portaobjeto, las células, sus eventuales agrupaciones y el aire. La dispersión de la luz a través
de estos elementos es distinta. La transparencia y la visibilidad no son lo mismo y presentan
una relación inversa. Cuanto más transparentes son las células, menos visibles son. Esta regla
se aplica fundamentalmente a las células sin teñir. A su vez, los elementos teñidos son más
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visibles, pudiéndoselos distinguir por sus colores, las diferentes tonalidades de sus estructuras
y morfología. (2)
Este procedimiento consiste en colocar encima del corte coloreado o un extendido una gota
de una sustancia adherente, diluida, generalmente en xilol (resina natural como el bálsamo de
Canadá o resinas sintéticas, cuyos índices de refracción son similares a los del vidrio) y
encima de ellos, una laminilla cubreobjetos, cuidando que no queden burbujas de aire entre la
resina.
A continuación, se deja que el xilol se evapore, y la resina adquiera solidez suficiente; para
ello las láminas se colocan en una platina caliente (45° 50° C) durante 24 a 48 horas y estarán
listas para ser observadas.
MEDIOS DE MONTAJE
Resinas naturales
Resinas sintéticas
Resinas acuosa
Medios hidrosolubles:
Gelatina de Kaiser
Gelatina
Medios no hidrosolubles:
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Tener un índice de refracción similar al del vidrio (1.518)
El cubreobjetos tiene que estar limpio y hay que manipularlo cogiéndolo por los bordes.
Además, no deben quedar burbujas de aire durante el montaje y hay que tener cuidado con la
cantidad de medio de montaje a utilizar: si es poco podría no cubrir toda la sección cuando se
evapore el xileno. Si se añade un exceso de medio de montaje se generará una capa tan gruesa
que no se podrán utilizar objetivos de gran aumento, como el de 100x. Estos objetivos tienen
una distancia focal muy corta, es decir, las lentes de estos objetivos deben estar muy
próximas a la muestra para poder enfocarla. y el aumento del espesor normal del medio de
montaje se lo impedirá. Del mismo modo, debe usarse un medio de montaje lo más parecido
a cómo se obtuvo de la casa comercial puesto que con el tiempo los medios de montaje
suelen perder el disolvente y se vuelven más viscosos. Esto hace que sea más difícil
conseguir una capa delgada y por tanto estamos en el mismo problema mencionado
anteriormente.
Para el análisis microscópico, las secciones de tejido teñido, las preparaciones citológicas
ginecológicas, las muestras bacteriológicas o los frotis de sangre hematológica se montan
generalmente con medios de montaje acuosos o no acuosos y se cubren con un vidrio de
cobertura si es necesario almacenarlos durante un período prolongado. Esto permite una
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conservación estable y un almacenamiento virtualmente permanente de la muestra. También
garantiza el cumplimiento de las directrices internacionales, que requieren que las muestras
clínicas preparadas para el diagnóstico se almacenen durante 10 años. La elección del medio
de montaje depende del protocolo y debe contener solvente o agua, que se aplica a la muestra
antes del montaje. (3)
2. Tomar por el extremo de la laminilla, ponemos sobre el papel absorbente para quitar el
exceso del neoclear.
3. Revisar con buena luz de qué lado de la lámina está el extendido (punto crítico) y revisar
que esté seca la parte posterior de la muestra, antes de iniciar el montaje.
4. Aplicar tres gotas de entellan sobre el portaobjetos ni tan cerca ni tal alejadas.
5. Colocar sobre éste el cubreobjetos de una manera muy lenta para evitar producir las
burbujas.
7. Colocarla sobre una bandeja para su secado por 1 hora y están listas para ser observadas
PROCEDIMIENTO DE MONTAJE
2. Tomar por el extremo de la laminilla, ponemos sobre el papel absorbente para quitar el
exceso del neoclear.
3. Revisar con buena luz de qué lado de la lámina está el extendido (punto crítico) y revisar
que esté seca la parte posterior de la muestra, antes de iniciar el montaje.
4. Aplicar tres gotas de entellan sobre el portaobjetos ni tan cerca ni tal alejadas.
5. Colocar sobre éste el cubreobjetos de una manera muy lenta para evitar producir las
burbujas.
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7. Colocarla sobre una bandeja para su secado por 1 hora y están listas para ser observadas
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Foto5: dejamos que se disperse por si Foto6: la muestra está lista para
sola la resina, sobre una superficie plana. observar en el microscopio
Foto7: Resultados
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PROCEDIMIENTO DE REPARACION DE PLACA
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Foto3: empezamos a reparar la placa Foto4: placa reparada
RESULTADOS:
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CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
CONCLUSIONES
RECOMENDACIÓNES:
BIBLIOGRAFIA
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