ESPECTROFOTOMETRÍA ULTRAVIOLETA Y PH DE MUESTRA DE VAINILLINA

1
Eduardo Rodríguez: 20152150024, 2Sandra Milena Hurtado Bocarejo 20152150031, 3Yuly Andrea
Pirazan 4Jonnathan Valbuena Diaz 20161150016
3
Giovanna Granados.
Universidad Distrital Francisco José de Caldas
1,2
Estudiante Análisis Químico Instrumental, 3Profesora

RESUMEN: Se realizó el siguiente informe con el objetivo de cuantificar una muestra de

vainillina por medio de espectrofotometría UV y analizar el efecto del pH por medio del
espectro de absorción de una muestra de vainillina. En el cual se logró identificar que
PALABRAS CLAVES: pH, Absorción, Espectrofotometría UV.

ABSTRACT: He was the next report in order to quantify a sample of vanillin by UV

spectrophotometry and analyze the effect of pH by means of the absorption spectrum of a
sample of vanillin. This became a calibration curve of the vanillin allowing reflect their
maximum points that would help perform various analyses. You were identified during that
practice from the facts that were taken regarding found maximum where is a curve of ringbom
which tells us the lesser photoelectric error range. Finally identifies the change in pH can cause
different effects on the curves.

KEYWORDS: pH, Absorption, UV Spectrophotometry.

INTRODUCCIÓN:
1.1ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA
La espectroscopía UV-Vis está basada en el
proceso de absorción de la radiación
ultravioleta-visible (radiación con longitud
de onda comprendida entre los 160 y 780
nm) por una molécula. La absorción de esta
radiación causa la promoción de un electrón
a un estado excitado. Los electrones que se
excitan al absorber radiación de esta
frecuencia son los electrones de enlace de
las moléculas, por lo que los picos de
absorción se pueden correlacionar con los
distintos tipos de enlace
presentes en el compuesto. Debido a ello, la
espectroscopía UV-Vis se utiliza para la
identificación de los grupos funcionales
presentes en una molécula. Las bandas que
aparecen en un espectro UV-Vis son anchas
debido a la superposición de transiciones
vibracionales y electrónicas.
Instrumentación utilizada en la
espectrofotometría ultravioleta y visible
Los instrumentos utilizados en la
espectrofotometría uv – visible son los
fotómetros y espectrofotómetros, los cuales
están formados por distintos componentes a
saber: Una fuente de radiación (fuente
fotónica), un sistema óptico de lentes y
espejos para la colimación y dirección del
haz luminoso, un dispositivo seleccionador
de la longitud de la onda (monocromador),
un porta muestra (celda), el detector de la
radiación (detector fotónico) y procesador de
la señal. Finalmente, la señal procesada se
puede presentar de manera digital en una
pantalla o display (Rubinson, y Rubinson,
2000). En la siguiente figura se muestra un
esquema general de un sistema
espectrofotométrico
Figura #1: Esquema general de un sistema
espectrofotométrico.
1.1.1 Ley de Beer-Lambert
Dependiendo del tipo de enlace que
consideremos como cromóforo la excitación
electrónica que puede observarse es:
Absorbancia = ε·l·c
Dónde: ε = Coeficiente de extinción molar,
es una constante relacionada con el área de
incidencia del cromóforo y la probabilidad
de que produzca la absorción.
l = recorrido en cm de la radiación a través
de la muestra
c = concentración de la muestra en
moles/litro
Consideraremos que cuando ε es inferior a
10000 esa absorción se debe a una transición
electrónica prohibida por las reglas de
selección.
Cuando la radiación incide sobre una
sustancia no toda ella se ve afectada por la
misma; al átomo o conjunto de átomos que
absorben radiación se le denominaba
cromóforo. En las moléculas existen
también átomos o grupos de átomos que no
absorben radiación, pero hacen que se
modifique alguna de las características de la
absorción del cromóforo, se denominaban a
tales grupos auxocromos.
En este caso es utilizado el espectrómetro
Shimadzu UV 1800
LONGITUD DE ONDA: 190 nm-1100 nm
ABSORBANCIA: -4.0- 4.0
SISTEMA ÓPTICO: Doble haz con ancho
de banda de 1 nm.
 Tabla #1: Diluciones de la vainilla stock en diferentes
medios, blancos (muestras que no tengan analito).

Posteriormente se procedió a tomar el

espectro UV mediante el equipo Shimadzu
UV 1800, para poder registrar los datos y
determinar las longitudes de onda máximas
para cada espectro.

Imagen 2. Espectrofotómetro Shimadzu UV 1800

RESULTADOS Y ANALISIS DE
En las tomas de absorción de las muestras RESULTADOS
que se analizan hay una gran cantidad de
factores que originan variaciones en los
Máximo de Longitud
valores de λmax y εM, entre los que se Medio
absorbancia de onda
incluye el pH, la polaridad del solvente o
moléculas vecinas y la orientación de los Metanol 3.3203 2.23
Blanco 0.7949
cromóforos vecinos; y cada uno afecta de
Metanol/NaOH 3.5731 2.15
forma particular. Por ejemplo, variaciones
Blanco/NaOH 2.0675
originadas por cambios de pH son debidas al Metanol/HCl 3.3787 2.21
efecto de éste sobre la ionización del Blanco/HCl 0.29493
compuesto. Tabla #2: Máximos de absorbancia.

METODOLOGIA: Barrido espectral de la vainilla en

diferentes solventes
A partir de una solución stock de vainillina
se prepararon las siguientes diluciones:

Gráfico 1: Barrido espectral de la vainilla.

 soluto para ser solvente es decir, el método
no permite una transmitancia efectiva.

Espectro de la solución patrón (monitor)

Como bien puede observarse en el gráfico,

en el compendio de los 300-350nm de
longitud de onda, se pueden ver de manera
ampliada los picos de absorbancia de la
vainillina.

Comparación y análisis con los espectros

teóricos y experimentales

VAINILLINA (4-HYDROXY-3- Gráfico 3. Espectro de solución patrón.

METHOXYBENZALDEHYDE)
Debido al ruido que se presenta en esta señal
Molecular Formula: C8H8O3 se procede a realizar un suavizado de datos,
Molecular Weight: 152.149 g/mol el cual se puede describir como un conjunto
de técnicas aplicadas al procesamiento de
señales, utilizado para eliminar el ruido de
una señal contaminada, esto contribuye a
revelar características y debido a que este
puede ocultar características importantes
como picos o anchura de los picos, además
este puede hacer que sea difícil calcular las
características de la señal, como laderas,
área y anchuras de los picos.
Este suavizado del espectro se realiza en un
rango de longitud de onda de 220-257nm.
Gráfico 2. Espectro de vainillina en metanol según teoría

Según la literatura se presenta una

absorbancia máxima a 345 nm cuando la
vainillina se encuentra en un solvente como
el metanol.
Esto se da, debido a que a concentraciones
bajas la concentración no se puede
diferenciar de otra más baja, y en
concentraciones altas, el soluto deja de ser
 Gráfico 6. Barrido espectral de la muestra de NaOH

Gráfico 4. Barrido espectral de metanol

Para la muestra de metanol anteriormente

mostrada se realiza el suavizado y se obtiene
que como se puede observar, sin la presencia
de ruido, el espectro tiene el pico más alto
para la muestra de metanol en 222nm y con
un valor de absorbancia de 3.3203

Gráfico 7. Espectro teórico de Vainillina en metanol

reportado

Con respecto a la gráfica de la Vainillina en

Metanol que es el espectro teórico, se logró
observar un desplazamiento hipercrómico ya
que el valor de la “A” aumenta hasta 3,5 y
un desplazamiento batocrómico ya que se
evidencia un aumento en la longitud de onda
Gráfico 5. Barrido espectral de metanol suavizado.
que se va desplazando hacia el color rojo.

Espectro de vainilla con HCl

Espectro de vainillina con NaOH

Para el espectro que se tomó en este caso

como solvente al NaOH, se realizó una
comparación de este resultado, respecto a la
espectro teórico de la vainilla en metanol,
gráficamente se pudo observar que:

Gráfico 8. Espectro experimental de HCl
Gráfico 9. Espectro teórico
BIBLIOGRAFÍA
Para realizar este análisis se tuvieron en
cuenta parámetros como poder comparar en
los rangos de lambda (λ) que efecto puede
existir en estos puntos, lo cual dio como
resultado que: se ve un desplazamiento
hipsocrómico ya que disminuye la
absorbancia máxima con respecto a la
gráfica teórica de la Vainillina en metanol,
pero se logra evidenciar un ligero
desplazamiento batocrómico.
Sabemos que la relación de equilibrio entre
las formas protonada y no protonada de una
molécula se define como una función del
pH. Dado que las absorciones de diferentes
especies en solución son aditivas, podemos
combinar todas estas ecuaciones para darnos
una expresión de la absorción total de una
especie ionizante en función del pH, pKa y
los coeficientes de extinción de las formas
protonadas y no protonada
CONCLUSIONES:
 De la práctica se puede concluir que
para los blancos, específicamente de
fosfatos (de la solución buffer) la
interferencia es menor, y son las
sales que menos absorben en 220-
280nm.
 Para la muestra de metanol no se
describe ningún cambio ya que el
pH de la solución patrón no es
alterado en gran medida ya que el
solvente es el mismo metanol que
mantiene el pH de la solución.
 Mediante la adición del metanol y el
HCl, se observa que al disminuir el
pH de la vainillina, hay un
desplazamiento hipercrómico en el
espectro de absorción. Varios
investigadores han interpretado estas
variaciones como resultado como
resultado de cambios en la relación
ion-molécula
● Universidad de Alicante.
Espectroscopia ultravioleta visible.
https://sstti.ua.es/es/instrumentacion
-cientifica/unidad-de-rayos-x-de-
monocristal-y-espectroscopias-
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ultravioleta-visible.html (accessed
May 2018).
● Millán, F. Libro de espectroscopia
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● Cornard, J. P., & Merlin, J. C.
(2005). Molecular structure and
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nitrocatechol at different pH: UV–
visible, Raman, DFT and TD-DFT
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● CARNERO, C., HERNANDEZ, M.,
& MARQUEZ, J.
DETERMINACIÓN CONJUNTA
DE VAINILLINA Y
SIRINGALDEHIDO EN RON
MEDIANTE EL MODELO
GRAFICO. V jornadas
universitarias de viticultura y
enología en jerez, 239.