UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
ÁREA BÁSICA BIOQUÍMICA

TRANSPORTE A TRAVÉS DE
LA MEMBRANA

GRUPO 8
NOMBRE CARNÉ
Kimberly Mishel Escobar García 201219926
Thania Cristina Hernández Castillo 201314999
Rocio Alejandra Veras Vallejo 201315217
Marlen Judith Pérez Lara 201317759
Andrea Lissette Cruz Gomez 201317828

FECHA DE LABORATORIO: 15/02/2016

FECHA DE ENTREGA: 18/02/2016

 INTRODUCCIÓN
Todos los organismos vivos están conformados por unidades básicas denominadas “células” que gracias a su
membrana plasmática conformada por una doble capa de fosfolípidos, proteínas y carbohidratos; forman
una barrera para conservar un ambiente interno adecuado y llevar a cabo reacciones químicas necesarias
manteniendo así, la vida y la regulación del organismo6. La célula necesita expulsar de su interior los
desechos del metabolismo y adquirir nutrientes del medio extracelular esto lo hace la membrana
selectivamente por medio de dos vías de transporte, tomando en cuenta el gradiente de concentración, tipo
y tamaño de partículas2: a) transporte pasivo o difusión, que es el paso de moléculas desde un lugar de
mayor concentración a otro de menor concentración, por lo tanto no hay gasto de energía aportado por la
célula; se divide a su vez en difusión simple, si son iones de bajo peso molecular y pueden atravesar
fácilmente la bicapa fosfolipídica; difusión facilitada si la molécula es más grande y necesita la presencia de
una proteína integral y osmosis proceso mediante el cual atraviesa agua o molécula solvente en la
membrana. b) transporte activo, así al paso de moléculas de un lugar de mayor a menor concentración, por
lo que implica un gasto energético celular proveniente del ATP; se necesitan proteínas transportadoras para
llevar a cabo el paso de sustancias, siendo éstas de 3 tipos: Uniporte, si transportan una molécula en un
mismo sentido; Antiporte, si transportan dos moléculas a la vez en diferente sentido; y simporte, si
transportan dos sustancias en el mismo sentido5.

En el año 2000, el doctor Peter Agre y otros equipos de investigación reportaron la estructura tridimensional
de la acuaporina, ya que Agre en años anteriores, la identificó en una glucoproteína de reconocimiento en
los eritrocitos; describieron como aminoácidos específicos en su interior, permiten que miles de millones de
moléculas de agua se desplacen por el canal en una solo fila cada segundo, mientras repelen otros iones o
moléculas2.

Durante la práctica de laboratorio se lleva a cabo un experimento que consiste en realizar una célula
artificial para comprobar si, ¿ocurre o no y en qué dirección, el transporte de agua (osmosis) o sustancia
diluida (diálisis) pasa a través de una membrana?

La práctica tiene por objetivo general conocer la importancia de que cada célula eucariota posea una
membrana celular, específicamente si el papel colodión cumple con las características, funciones,
mecanismos de transporte e intercambio de sustancias para comprobar la selectividad de la membrana
celular.

En conclusión, se realiza un tipo de transporte que no necesite energía ya que el papel colodión no posee
poros suficientemente grandes para permitir el paso a moléculas de glucosa, almidón o albúmina de un
medio a otro; sino de moléculas pequeñas como el cloro.
 RESUMEN
Las moléculas atraviesan la membrana celular por medio de transporte activo y pasivo. La membrana celular
es selectivamente permeable por lo que algunas moléculas logran atravesarla. En esta práctica de
laboratorio realizamos una célula con papel celuloide a base de células vegetales en estado deshidratado,
que fue sumergida en agua dura (caracterizada por su alta presencia de carbonato de calcio) logrando la
hidratación del celuloide. Utilizamos una solución de glucosa y almidón para simular el líquido intracelular,
así como se utilizó una solución de cloruro de sodio y albúmina para el líquido extracelular. Luego de haber
formado una célula artificial con el papel celuloide y haber dejado reposar durante 20 minutos en el líquido
extracelular. Se rotulan 8 tubos de ensayo, 4 con solución interna y 4 con solución externa; vertimos en
cuatro tubos el líquido intracelular y en otros 4 tubos el líquido extracelular y agregamos a cada uno de ellos
los reactivos Lugol, Benedict, Biuret y Nitrato de plata para obtener las diferentes reacciones y así identificar
el paso de moléculas según los tubos control, por medio de resultados positivos o negativos que serán
descritos más adelante en este reporte.

RESULTADOS
Cuadro No.1 Resultados de la Práctica de Laboratorio de bioquímica

TUBO SOLUCIÓN REACTIVO RESULTADO

1 Glucosa Benedict Verde/Amarrillo
CONTROL

2 Almidón Lugol Azul/Violeta

3 NaCl AgNO3 Precipitado morado
4 Albúmina Biuret Lila
1 Benedict Negativo
2 NaCl y Lugol Negativo
LEC

3 Albúmina AgNO3 Positivo

4 Biuret Positivo
1 Benedict Positivo
2 Glucosa y Lugol Positivo
LIC

3 Almidón AgNO3 Positivo

4 Biuret Negativo
Creado por alumnas de la facultad de Odontología, Segundo año 2016.
 DISCUSIÓN DE RESULTADOS

TUBOS DE ENSAYO

Tubos #1 Reacción del Benedict con el medio Intracelular y Extracelular

El tubo que contiene líquido extracelular al agregar Benedict presenta como resultado, negativo
debido a que el reactivo identifica azúcares reductores que contienen un OH libre, en el LEC. Esto
nos indica que no hubo transporte de glucosa al presentarse de color celeste. Y el tubo que
contiene líquido intracelular proporciona un resultado positivo ya que el reactivo al encontrar un
OH libre en un azúcar reductor; éste marca como positivo al extraer el ión cúprico del benedict por
efecto del grupo aldehído CHO de la glucosa formando como producto óxido cuproso que da el
aspecto ligeramente amarillento al calentar la sustancia por convección térmica (en baño de
maría) por 3minutos. 1

Tubos #2 Reacción de Lugol con el medio Intracelular y Extracelular

Al agregar el Lugol a los tubos de solución interna y externa pudimos notar que en el tubo con
solución intracelular el cual contenía almidón hubo un cambio de color, tornándola en una
solución de color morado oscuro, esto se debe a que en esta reacción el yodo entra a la estructura
helicoidal del almidón, es decir, que los átomos de yodo se introduce entre las espirales
provocando la absorción o fijación de yodo en las moléculas del almidón (amilasa). 9

La prueba de Lugol (yodo yoduro) sirve para identificar la presencia de polisacáridos como lo es el
almidón en soluciones. El Lugol al reaccionar con presencia de polisacáridos cambia su coloración
a morado oscuro o negro lo cual indica que en la solución hay presencia de moléculas de
polisacáridos. En la solución extracelular nos dio una coloración anaranjada, debido a que la
albumina no es un polisacárido que se produce la reacción con el yodo. Es importante mencionar
que el Lugol no reacciona con azúcares simples como la glucosa o la fructuosa 1.

Y al analizar ambos resultados logramos deducir que el almidón no pudo traspasar del interior de
la membrana hacia el exterior, esto debido a que es una molécula de gran tamaño por lo que
necesita un transporte activo de moléculas el cual no provee el papel.7

Tubos #3 Reacción del Nitrato de Plata con el medio Intracelular y Extracelular

El AgNO3 es una sal inorgánica soluble en agua que analiza la presencia de cloruros. Los cationes
de plata se separan de los aniones del nitrato y los cationes de sodio se separan de los aniones del
cloruro por disociación al disolverse todos los compuestos iónicos en agua. Una vez que los iones
se separan, son libres y se mueven independientemente, si tiene la oportunidad reaccionan con
otros iones. El resultado de mezclar nitrato de plata con cloruro de sodio es la formación
inmediata de un sólido blanco AgCl como precipitado.
Al los tubos que contenía uno liquido intracelular y otro liquido extracelular, se les agregó de
AgNO3, obteniendo un resultado positivo en ambos el cual indica que hay presencia de AgCl el
cual es el precipitado formado como producto en una reacción de doble sustitución, lo cual nos
indica y de muestra que la membrana representada es permeable a dichas moléculas. 10

AgNO3 + NaNO3  AgCl + NaNO3

Tubos #4 Reacción del Biuret con el medio Intracelular y Extracelular

El tubo que contenía líquido intracelular demuestra resultado negativo y el tubo que contenía
líquido extracelular dio como resultado positivo debido a que la albúmina es una molécula de
gran tamaño ya que consiste en una cadena polipeptídica de 585 aminoácidos con 17 enlaces
disulfuros; la cual la membrana no le permite el paso al medio intracelular por difusión facilitada
necesitando así ayuda de otras proteínas y energía o de mecanismos especiales para transportarse
al medio intracelular. 5
 CONCLUSIONES
* La membrana es selectivamente permeable por lo que hubo transporte pasivo de moléculas
únicamente pequeñas debido a la falta de energía que presenta el papel celofán por ser artificial.

* El almidón al ponerse en contacto con el Lugol presenta una coloración violeta, esto se debe a
que cuando el Lugol reacciona con las dos estructuras que forman el almidón , con la amilasa
proporciona un color azul y cuando reacciona la amilopectina con Lugol proporciona un color rojo
y la combinación de estos dos colores nos proporciona el color violeta característico del almidón.

* Las reacción de Benedict y Lugol reaccionaron negativamente con las soluciones de glucosa y de
almidón en el líquido extracelular, debido que no hubo presencia de carbohidratos compuestos ni
de monosacáridos quedándose únicamente en la parte interna.

*El experimento no representa una osmosis ya que no se observa el transporte de agua y tampoco
presenta una diálisis porque no hubo paso de una sustancia diluida a través de la membrana.
Transportandose únicamente el cloro.

*En el líquido intracelular de la reacción Biuret no hubo presencia de proteínas por lo cual la
solución fue incolora, debido a que la albumina no pudo atravesar la membrana artificial ya que
necesita mecanismos especiales que el papel celofán no provee.
 REFERENCIAS
Revistas:

1. Lienhard. G.E., Solt, J. W,. et al (1992) Absorción celular de la Glucosa, Investigación

Científica. 22-27 pp.

2. Juan C.Gomez Fernandez; Felix M. Goni.(1983). Fluidez de las Membranas

Celulares.Scientific America.
3. Mark S. Bretscher.(1985). Moleculas de la membrana Celular.Scientific America
4. Nigel Unwin; Richard Henderson. (1984). Proteinas de Membrana. Scientific America

Libros:

5. Lehninger, A.L. (1972), Bioquímica las bases moleculares de la estructura y función celular,
transporte activo a través de membranas, Trad: Calvet Prats, F. 5ta edición. Edit. Omega
S.A. pp. 643-664.
6. Ira Fox, S. (2011), Fisiología Humana, difusión a través de la membrana. 12va edición. Edit.
Mc Graw Hill. Pp. 129-135.
7. Herrera, R. Carlos; Bolaños V. Nuria y Lutz C., Guiselle. (2003). Química de los alimentos;
Manual de Laboratorio. San José, Costa Rica. 1era edición. Editorial de la Universidad de
Costa Rica/143 paginas.

Páginas de Internet:

8. Donald Voet,Judith G. Voet. (2007) Fundamentos de Bioquímica: La vida a nivel molecular.

Ed. Medica panamericana. Consultado el 20/2/15. Disponible en: books.google.com.gt ,pg
147.
9. AsaldeVidaurre, J.M (2014) Reactivos en química: lugol. Consultado el 20/2/15. Disponible
en: es.scribd.com/doc /56079718/Lugol#scribd
10. Méndez, A. (2010) Reacciones de precipitación. Consultado el 20/2/15. Disponible en
quimica.laguia2000.com/reacciones-quimicas/reacciones-de-precipitacion
 ANEXOS
Fotografías tomadas en laboratorio:

“Tubos de Ensayo “Resultados Tubos#1”.

“Célula Artificial”
Control” Tubo a la der. amarillo, control;
en el centro LEC e Izq. LIC.

“Resultados Tubos#2” “Resultados Tubos#4”

“Resultados Tubos#3”
Tubo a la der. Precipitado
blanco, LEC; en el centro LIC e
izq. Control.
 PREGUNTAS
1. Investigue los siguientes términos e identifique ¿Cuáles son las diferencias entre ellos?

a. Diálisis: es una forma de filtración molecular, es un proceso que separa a las moléculas
según su tamaño mediante el uso de membranas semipermeables con poros de
dimensiones menores que las macromoléculas. Estos poros permiten que las moléculas
pequeñas como solventes, sales y metabolitos de tamaño reducido, se difundan a través
de la membrana, al tiempo que bloquean el paso de moléculas mayores.
b. Osmosis: al paso de solvente de una solución de menor concentración de soluto a uno de
mayor concentración. Es un proceso que no requiere energía y que en condiciones de
laboratorio se lleva a cabo hasta que las concentraciones de ambos lados de la membrana
se igualen.
c. Difusión: es el paso de una sustancia (soluto), a través de una membrana semipermeable,
de una solución muy concentrada a una de menor concentración, es un transporte que
ocurre gracias a un gradiente de concentración es decir “va cuesta abajo”. Esta
característica hace que la difusión no necesite energía adicional para ocurrir más que la
proporcionada por el gradiente, por lo que pertenece a lo que se conoce como transporte
pasivo. En la naturaleza también existe un tipo de transporte conocido como transporte
activo o facilitado que requiere la participación de una proteína transmembrana que
permite el paso de moléculas que difícilmente atravesarían la membrana por difusión
simple o pasiva. El transporte activo tiene la característica de ir en contra del gradiente de
concentración, por lo que utiliza energía de ATP para ocurrir.

Diferencias entre los tres mecanismos:

 Difusión es el proceso irreversible por el cual un grupo de partículas se distribuye de manera

uniforme en un medio ya sea vacío o formado por otro grupo de partículas, a favor del gradiente de
concentración.
 La ósmosis está relacionada con el comportamiento de un sólido como soluto de una solución ante
una membrana semipermeable para el solvente pero no para los solutos.
 Diálisis es el fenómeno en que la membrana será atravesada por el propio disolvente y partículas
pequeñas de bajo peso molecular en un movimiento de mayor concentración a la menor
concentración.
 2. Investigue los grupos funcionales que posee en su fórmula molecular y tipo de substancias
que identifican los siguientes reactivos.
a. Biuret:

Fórmula molecular: C2H5N3O2

Contiene dos amidas primarias Contiene una amina primaria

 La reacción de Biuret es un método que se puede utilizar para determinar la cantidad

de proteínas o polipéptidos solubles en una solución, mientras más cantidad de
proteínas estén presentes en la solución más oscuro será su color.

b. Lugol: es una disolución de yodo molecular I2 y yoduro potásico KI en agua destilada.

 Sirve para identificar polisacáridos como los almidones, glucógeno y ciertas dextrinas.
El Lugol no reacciona con azúcares simples como la glucosa o la fructosa.

c. Benedict:
 Sulfato cúprico;
 Citrato de sodio;
 Carbonato Anhidro de Sodio.
 Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

Se utiliza para detectar azúcares reductoras (lactosa, glucosa, maltosa y celobiosa).

3. ¿Qué tipos de membranas existen y cuáles son sus características?

Las membranas pueden ser permeables, impermeables y semipermeables. Las membranas permeables
permiten el paso del soluto y del disolvente, las impermeables impiden el paso de ambos y las
semipermeables permiten pasar el disolvente pero impiden el paso de determinados solutos. Esto último
puede ser debido a diferentes causas. Por ejemplo, muchas membranas tienen pequeños poros que
permiten el paso de las pequeñas moléculas y no de las que son mayores; otras, debido a su composición,
permiten el paso de las sustancias hidrófilas y no de las lipófilas, o a la inversa.

4. ¿Qué es una reacción de precipitación?, Escriba diez ecuaciones de este tipo.

Las reacciones de precipitación, consisten en la formación de un compuesto no soluble, llamado precipitado,

producido al mezclar dos disoluciones diferentes, cada una de las cuales aportará un ion a dicho precipitado,
es decir, una reacción de precipitación tiene lugar cuando uno o más reactivos, combinándose llegan a
generar un producto insoluble.

1. Ca10(PO4 )6 (OH)2 (s) ⇌ 10 Ca2+ (aq) + 6 PO4 3- (aq) + 2 OH- (aq)PbI2 (s) ⇌ Pb2+ (aq) + 2 I- (aq)
2. Pb(NO3)2(aq) + K2CrO4(aq) ⇌ PbCrO4(s) + 2KNO3(aq)
3. AgCl(s) ⇌ Ag + Cl (ac)
4. Fe(OH)3 (s) ⇌ Fe+3 (ac) + 3OH (ac)
5. BaCl2(aq) + Na2SO4(aq) → 2NaCl(aq) + BaSO4 ↓
6. 2AgNO3(aq) + K2CrO4(aq) → Ag2CrO4 ↓ + 2KNO3(aq)
7. AgNO3(aq) + NaCl(aq) → AgCl↓ + NaNO3(aq)
8. Na2SO4(aq) + BaCl2(aq) → 2NaCl(aq) + BaSO4↓
9. Pb(NO3)2(aq) + 2KI(aq) → PbI2↓ + 2 KNO3(aq)
10. AgNO3 + NaCl→AgCl↓ + NaNO3

5. Defina los siguientes términos

a. Floculación es un proceso químico mediante el cual, con la adición de sustancias floculantes, se

aglutinan las sustancias coloidales presentes en el agua, facilitando de esta forma su decantación y
posterior filtrado. Los flóculos más grandes que tienden a depositarse en el fondo de los recipientes
construidos para este fin, denominados sedimentadores.
b. Gravimetría es un método clásico de análisis basado en la aplicación de una reacción química, para
llevar a cabo una gravimetría lo más frecuente es que se produzca en el laboratorio una reacción
química de precipitación de un compuesto puro que contenga el analíto que se quiere determinar.
c. Plasmólisis es el fenómeno que se produce cuando las condiciones del medio extracelular son
hipertónicas, es decir, que tienen una concentración mayor que la que existe en el interior celular.
Debido a esto, el agua que hay dentro de la vacuola sale al medio hipertónico (ósmosis) y la célula se
deshidrata, ya que pierde el agua que la llenaba, reduciendo así su tamaño.
d. Crenación es la contracción de las células dentro de los animales, particularmente los Eritrocitos en
una solución hipertónica, debido a la perdida de agua a través de osmosis. Este encogimiento además
provoca el detenimiento de las funciones propias de la célula.

6. ¿Cuál es el principio físico de la centrifugación?

Centrifugación es un método por el cual se pueden separar sólidos de líquidos de diferente densidad por
medio de una fuerza giratoria. La fuerza centrífuga es provista por una máquina llamada centrifugadora, la
cual imprime a la mezcla un movimiento de rotación que origina una fuerza que produce la sedimentación
de los sólidos o de las partículas de mayor densidad.
El objetivo de la centrifugación es separar sólidos insolubles de partículas pequeñas difíciles de sedimentar
de un líquido. Para ello, se aplica un fuerte campo centrífugo, con lo cual las partículas tenderán a
desplazarse a través del medio en el que se encuentren con la aceleración.
7. En un vaso de precipitación hay una muestra desconocida que puede estar constituida por los
siguientes compuestos: carbohidratos y proteínas. Escriba una marca para identificar estos
dos compuestos.

Para poder identificar un carbohidrato utilizamos dos reactivo, uno para monosacáridos (Lugol) y otro
para polisacáridos (Benedict).Para identificar proteínas utilizamos un reactivo conocido como Biuret.

8. Indica con un X qué mecanismos empleará cada una de las siguientes sustancias para
atravesar la membrana plasmática.

Difusión Difusión Transporte Transporte mediado

Simple Facilitada activo por vesiculas.

Oxígeno a favor de
X
gradiente

Glucosa en contra
de gradiente x x
Ion sodio a favor
x
del gradiente

Insulina a la sangre x x
Microbio atrapado
por globulos X
blancos

9. Analice cada uno de los siguientes casos que se presentan a continuación. Determine el
tipo de transporte que llevó a la situación descrita e identifique el sentido del transporte
(hacia adentro o hacia afuera). Justifique su respuesta en cada caso.

a. La concentración de x es la misma a ambos lados de la membrana. X es una partícula pequeña (un

ion), insoluble en lípidos.
Los iones a pesar de ser insolubles en lípidos pueden atravesar la membrana, ya sea por canales
dispuestos para estos iones como por difusión simple, si bien la concentración es igual a ambos
lados no quiere decir que no habrá cambio de un medio a otro porque la membrana es una
estructura dinámica que mantiene una actividad constante.
b. La concentración de sodio (Na +) extracelular es mucho mayor que la concentración intracelular.
El sodio se moverá por diferencia de concentraciones hacia el medio interno, ya sea por difusión
simple o por transporte activo.
c. Z es una molécula pequeña soluble en lípidos cuya concentración es mayor en el medio extracelular
que en el medio intracelular.
Las moléculas pequeñas y solubles en la membrana pasan por difusión simple, así que tendrá
tendencia a ingresar a la célula.
 d. Un soluto que no atraviesa la membrana se halla más concentrado en la solución acuosa del
citoplasma que en el medio extracelular.
El soluto atravesará la membrana por difusión facilitada o exocitosis debido a que la membrana no
tiene capacidad de transportarla por una difusión simple.

10. Escriba un ejemplo donde se explique qué es presión oncótica.

La presión oncótica, o la presión osmótica coloidal, es una forma de la presión osmótica ejercida por las
proteínas en el plasma de un vaso sanguíneo que por lo general tiende a tirar de agua en el sistema
circulatorio. Es la fuerza que se opone a la presión hidrostática.
Esto puede verse en los capilares que están presentes en los riñones, o más específicamente en los
glomérulos renales. En esta región, los glomérulos son impermeables a las moléculas de proteínas más
grandes y así, estas moléculas de proteína tienden a acumularse en los capilares, debido a que hay un
aumento en la presión oncótica. De los diferentes tipos de proteínas, casi el 70% de la presión es ejercida
por la albúmina que tiene un papel importante en el mantenimiento de la presión osmótica coloidal.