INSTITUTO TECNOLÓGICO DE

TUXTLA GUTIÉRREZ
TRABAJO:

“CONOCIMIENTO Y MANEJO DEL ESPECTROMETRO Y CUERVA

DE CALIBRACIÓN”

ASIGNATURA:
ANALISIS INSTRUMENTAL

PRESENTA:
• BENITEZ SAN JUAN EDGAR ALBERTO
• GARCIA DE LOS SANTOS JOSE IGNACIO
• GOMEZ HERNANDEZ ANA LOURDES
• MOLINA TRUJILLO DARWIN DE JESUS

CATEDRÁTICO:
MARTINEZ JOSE FRANCISCO

SEMESTRE:
Q4V

TUXTLA GUTIÉRREZ, CHIAPAS. 19 DE FEBRERO DEL 2019

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ING QUIMICA

INDICE

CONTENIDO PAGINA

OBJETIVO ……………………………………………………………………3

INTRODUCCIÓN …………………………………………………………… 4

PROCEDIMIENTO …………………………………………………………7

RESULTADOS………………………………………………………………. 8

CONCLUSIÓN ……………………………………………………………... 10

CUESTIONARIO ……………………………………………………………11

BIBLIOGRAFIA ……………………………………………………………13

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OBJETIVO

• Aprender el manejo del espectrómetro para familiarizarse con él, y utilizarlo en la

identificación y cuantificación de diversas sustancias.
• Calcular variables estadísticas asociadas a errores analíticos.

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INTRODUCCIÓN

Espectroscopia

Es una técnica instrumental ampliamente utilizada por los físicos

y químicos para poder determinar la composición cualitativa y
cuantitativa de una muestra, mediante la utilización de patrones o
espectros conocidos de otras muestras. El análisis espectral
permite detectar la absorción o emisión de radiación
electromagnética de ciertas energías, y relacionar estas energías
con los niveles de energía implicados en una transición cuántica.

Espectrómetro

El espectrómetro es un instrumento de medición que analiza el tipo de espectro que emite

una fuente o que es absorbida por una sustancia que se encuentra en el camino de la luz que
emite una fuente. Estos espectros de emisión o de absorción son como una huella digital de
las sustancias que forman a nuestra naturaleza. El funcionamiento del espectrómetro está
basado en la descomposición de la luz en las diferentes longitudes de onda que la componen
a partir del fenómeno de refracción que sucede en un prisma o a partir del fenómeno de
difracción de la luz que se produce en una red
difracción. Además, este instrumento mide los ángulos
en los cuales se presentan los máximos del patrón de
difracción. Estos ángulos son diferentes y característica
de la naturaleza de la fuente que emite la luz. Las
componentes básicas de un espectrómetro es un
conjunto de lentes, un colimador, una rejilla de
difracción y un ocular, anteriormente detectar el
espectro se hacía a simple vista, pero hoy en día se
pueden usar sensores de luz que marcan los máximos y
mínimos o también se pueden fotografiar los espectros.

Espectrógrafo

El espectrógrafo (el sufijo grafo se deriva del griego y significa escribir) es un instrumento
óptico de medición que fue creado con el fin de separar, grabar y registrar el espectro de
una señal luminosa, registrar fotográficamente, o mediante detectores fotosensibles. La
estructura del espectrógrafo es muy parecida a la del espectroscopio, pero con la diferencia
de que en vez de tener un ocular tiene un detector o una placa fotográfica.

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El espectrógrafo es un aparato que mide la luz. Cuando observamos luz reflejada por un
objeto suele aparecer en un color en específico, por ejemplo: la luz que refleja el sodio es
naranja y la nieve es blanca, ya sea en banda continua o en banda angosta los objetos suelen
emitir muchos colores de luz al mismo tiempo. Cuando se trata de analizar profundamente,
el espectrógrafo ayuda a tener un conocimiento más amplio con lo que tiene que ver con la
temperatura, la composición química, campo eléctrico y magnético de un objeto.

Curva de calibración

Una curva de calibración es una función de

transferencia que relaciona la entrada con la
salida. El método se basa en la relación
proporcional entre la concentración y una
determinada señal analítica (propiedad).

Es un método de química analítica

empleado para medir la concentración de una sustancia en una muestra por comparación
con una serie de elementos de concentración conocida. Se basa en la existencia de una
relación en principio lineal entre un carácter medible (por ejemplo, la absorbancia en los
enfoques de espectrofotometría) y la variable a determinar (concentración). Para ello, se
efectúan diluciones de unas muestras de contenido conocido y se produce su lectura y el
consiguiente establecimiento de una función matemática que relacione ambas; después, se
lee el mismo carácter en la muestra problema y, mediante la sustitución de la variable
dependiente de esa función, se obtiene la concentración de esta. Se dice pues que la respuesta
de la muestra puede cuantificarse y, empleando la curva de calibración, se puede interpolar
el dato de la muestra problema hasta encontrar la concentración del analito. Las curvas de
calibración suelen poseer al menos una fase de respuesta lineal sobre la que se realiza una
prueba estadística de regresión para evaluar su fiabilidad.

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MATERIALES Y REACTIVOS

Material y equipo Reactivos

10 tubos de ensaye (13x100 mm) Solución colorante verde vegetal

1 gradilla Agua destilada

1 pipeta de 5 Ml

1 pipeta de 1 ml

Caja de celdas para espectrómetro 20

1 matraz aforado de 100 ml

Espectrofotómetro

4 vaso de precipitado 100 ml

1 pizeta con agua destilada

Pañuelos desechables

Gradilla

6 frascos de 100 ml

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PROCEDIMIENTO

1._ Colocar en posición de encendido el espectrómetro y esperar 20 min para el

calentamiento de todo el equipo y obtener un haz de luz constante.

2._ Seleccionar la longitud de onda que se quiera observar en la perilla

3._ Con la porta cubetas vacío y con la perilla ajustar a cero de transmitancia.

4._ En la porta cubetas se introduce una celda con agua destilada, observando que la marca
contenida en la celda coincida con la marca del aparato para evitar errores de medición

5._ Ajustar la perilla a 100% de transmitancia

6._ Preparar la solución con el colorante vegetal

7._ Agregar a cada tubo 3 Ml de agua destilada con ayuda de la pipeta de 5 Ml.

8._ Luego adicionar 0.02 Ml de colorante vegetal al 2%

9._ Agitar cuidadosamente cada tubo para obtener una solución de concentración
homogénea. Realizar la agitación de un tubo a la vez.

10._ Determinar las lecturas de absorbancia de cada una de las soluciones, en un

espectrofotómetro a una longitud de onda de 405 nm.

11._ Obtener la concentración de la solución madre del colorante vegetal

12._ Colocar 0.2 ml de la solución madre a un frasco de 100 ml y aforar a 50 ml

13._ Repetir el paso anterior con 0.6, 0.8, 1.0 y 1.2 ml y aforar a 50 ml respectivamente

14._ Medir el pH y la conductividad de cada analito obtenido en el paso (13) para obtener la
concentración de colorante vegetal de cada uno de ellos

15._ Analizar los datos obtenidos y realizar los calculo correspondiente de los coeficientes
de variación.

16._ Al finalizar la lectura de absorbancia retirar y lavar cuidadosamente las celdas con
abundante agua para que no quede residuos de las muestras analizadas

17._ Dejar que las celdas escurran boca abajo (no secar las celdas). Apagar el aparato y
desconectarlo.

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RESULTADOS

N. de Absorbancia Transmitancia (xi - Ẋ) (xi - Ẋ)2

muestras (xi)
1 0.03 93 -0.036 0.001296
2 0.03 93 -0.036 0.001296
3 0.03 93 -0.036 0.001296
4 0.04 91 -0.026 0.000676
5 0.35 92 0.284 0.080656
6 0.03 93 -0.036 0.001296
7 0.04 91 -0.026 0.000676
8 0.04 91 -0.026 0.000676
9 0.04 91 -0.026 0.000676
10 0.03 93 -0.036 0.001296
Media de las 0.066 Suma de 0.08984
absorbancias las dif. Al
cuadrado
desviación 0.008984
estándar

GRÁFICO ABSORBANCIA Y TRASMITANCIA

absorbancia trasmitancia

100 93 93 93 91 92 93 91 91 91 93
90
80
70
60
50
40
30
20
10 0,03 0,03 0,03 0,04 0,035 0,03 0,04 0,04 0,04 0,03
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

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N. de Cantidad pH Voltímetro concentración concentración

muestras de (ec) (vol.) (mg/ml) (pH) (mg/ml)
(ml) solución
Solución 0.04 g 7.2 0.8 0.4 0.4
madre
1 02 ml 7.2 0 .016 0.4
2 4 ml 7.2 0 .032 0.4
3 6 ml 7.2 0.1 0.048 0.4
4 8 ml 7.3 0.1 0.064 0.40555556
5 10 ml 7.3 0.2 0.08 0.40555556
6 12 ml 7.3 0.2 0.096 0.40555556

GRÁFICO DE CONCENTRACIONES
concentracion(vol) concentracion (pH)

0,45 0,4 0,4 0,4 0,405555556 0,405555556 0,405555556

0,4
0,35
0,3
0,25
0,2
0,15 0,096
0,08
0,1 0,064
0,048
0,032
0,05 0,016
0
1 2 3 4 5 6

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CONCLUSION

Se elaboro una curva de calibración relacionando la concentración del colorante vegetal con
la absorbancia y la transmitancia y se pudo concluir la existencia de linealidad y exactitud en
el método que se empleó.

Al analizar los coeficientes de correlación observamos que los valores obtenidos son muy
cercanos a cero y esto hace que los valores sean constantes en cualquier volumen que se
tenga.

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CUESTIONARIO

1.- ¿Cuál es el fundamento de la espectroscopia óptica?

El objetivo de un espectroscopio es la dispersión de la luz en sus diferentes longitudes de

onda para que pueda ser analizada. No es de extrañar, por tanto, que la pieza fundamental de
un espectroscopio sea su elemento dispersor. Existen dos principios ópticos fundamentales
que permiten dispersar la luz, la refracción diferencial y la interferencia. El primero da lugar
a los espectroscopios de prisma y el segundo a los basados en redes de difracción. Existen
también elementos dispersores híbridos, que suelen ser la combinación de un elemento de
cada.

Independientemente del diseño del espectroscopio y de su elemento dispersor, su

característica fundamental es la resolución espectral (R). Este parámetro indica la capacidad
del espectroscopio para separar dos líneas muy próximas:

l es la longitud de onda en la que estamos trabajando y dl es la pureza espectral, la

anchura que tendría una línea monocromática al observarse con el espectroscopio.

2.-Indique y explique las partes más importantes que componen un espectrofotómetro.

Fuente de luz
La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones:
estabilidad, direccionalidad, distribución de energía espectral continua y larga vida.
Las fuentes empleadas son: lámpara de wolframio (también llamado tungsteno
lampara de arco de xenón y lámpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios
atómicos. Utiliza las propiedades de la luz y su interacción con otras sustancias, para
determinar la naturaleza de estas. En general, la luz de una lámpara de características
especiales es guiada a través de un dispositivo que selecciona y separa luz de una
determinada longitud de onda y la hace pasar por una muestra. La intensidad de la
luz que sale de la muestra es captada y comparada con la intensidad de la luz que
incidió en la muestra y a partir de esto se calcula la transmitancia de la muestra, que
depende de factores como la concentración de la sustancia.

Monocromador

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El monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se
reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática.
Está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de
dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que
lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma
el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige
hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.
Compartimiento de Muestra
Es donde tiene lugar la interacción con la materia (debe producirse donde no haya
absorción ni dispersión de las longitudes de onda). Es importante destacar, que,
durante este proceso, se aplica la Ley de Lambert-Beer en su máxima expresión, con
base en sus leyes de absorción, en lo que concierne al paso de la molécula
de fundamental-excitado.
Detector
El detector, es quien detecta una radiación y a su vez lo deja en evidencia, para
posterior estudio. Hay de dos tipos:

a) los que responden a fotones;

b) los que responden al calor.

Fotodetectores
En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para
percibir la señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro
visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes móviles del equipo.
Colimador
El colimador es un lente que lleva el haz de luz entrante con una determinada longitud
de onda hacia un prisma, el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz
logrando que se redireccione hacia la rendija de salida.

Registrador
Convierte el fenómeno físico en números proporcionales al analito en cuestión.

3.-Mencione el fundamento de los espectros de emisión y absorción.

• En la de emisión podemos resaltar la excitación de la llama, esto significa que los,
átomos son excitados por el calor de una llama para así emitir luz.
• Respecto a los espectros de absorción una materia, muestra la fracción de la radiación
electromagnética incidente que un material absorbe dentro de un rango de
frecuencias.

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BIBLIOGRAFIA

http://depa.fquim.unam.mx/jesusht/fe_refraccion.pdf

https://www.uv.es/qflab/2018_19/descargas/cuadernillos/qf1/castellano/Teoria/Abs
orbancia.pdf

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