ANTIGENOS

LEUCOCITARIOS Y
PLAQUETARIOS
Laura Asencio
Carla Bastidas
Catalina Grandón
Victor Trafián

Hema 295 – Noviembre 2018

SISTEMA DE ANTIGENOS
LEUCOCITARIOS
• También llamado HLA o CMH-humano.
• Función: Diferenciar entre lo propio y lo
extraño.
• Sistema poligénico ubicado en cromosoma
6p: >200 genes: 21 codifican proteínas del
sistema inmunológico.
• Altamente polimórfico.
• Población: Existen múltiples alelos para
cada gen.
• Naturaleza: Glicoproteína
• Existen 3 clases: I, II, III.
HLA Clase I

• Codificada por locus HLA-A,

HLA-B y HLA-C
• Dos cadenas glucoproteicas:
pesada y liviana
• Ubicación: células
nucleadas
• Función: presentación de
antígenos péptidos a células
T citotóxicas (CD8+)
HLA Clase II

• Codificada por genes en locus DR,

DQ, DP.
• Dos cadenas glucoproteicas α y β.
• Presente en células presentadoras
de Ags (Linfocitos B, macrófagos,
células dendríticas, etc.), el
epitelio del timo y los linfocitos T
activados.
• Función: presentación de péptidos
antigénicos procesados a células T
helper (CD4+).
HLA Clase III

• Ubicado entre las regiones de

los genes de HLA case I y clase II.
• Son genes con importancia en la
respuesta inmune, pero no
relacionados al CMH.
• Codifica proteínas con funciones
inmunitarias, tales como
componentes del sistema de
complemento (C2, C3, factor B),
moléculas relacionadas con la
inflamación (TNF) y proteínas de
choque térmico (HSP70).
Anticuerpos Sistema
HLA
Se producen por Aloinmunización: Anticuerpos anti-
HLA
• Transfusiones o trasplantes
• Por estimulación de Antígenos del donante
• Mujeres aloinmunizadas por leucocitos fetales que
pasan vía transplacentaria
Anticuerpos tipo IgG con propiedades citotóxicas y
leucoaglutinantes.
 Aloinmunización
y refractariedad
plaquetaria

Los antígenos y anticuerpos del

sistema HLA desempeñan un papel
destacado en muchos eventos
transfusionales.
Enfermedades Reacciones
HLA y
del Injerto Febriles No
Medicina
Son muy inmunogénicos: las contra Huésped Hemolíticas
transfusional
(EICH). (RFNH)
personas tienden más a desarrollar
anticuerpos contra los antígenos
HLA que contra cualquier otro
sistema antigénico, en respuesta a
los embarazos, transfusiones o
trasplantes.
Lesión Pulmonar
Aguda por
Transfusiones
(TRALI)
 Anticuerpos Anti-HLA específicos de plaquetas y granulocitos

Más frecuentes en politransfundidos y mujeres multíparas.

Reacciones
Febriles No Provocada por la liberación de pirógenos endógenos (citocinas-interleucinas) por los
leucocitos cuando son expuestos a complejos antígeno-anticuerpo, causando fiebre
Hemolíticas
(RFNH) Entre Ags del Donante y los Anticuerpos del Receptor.

Aumento de la temperatura ≥ 1°C, escalofríos y, a veces, cefaleas y dorsalgias. Son

frecuentes los síntomas simultáneos de una reacción alérgica.
Lesión
Pulmonar Patogenia: La presencia

Aguda por de anticuerpos anti-HLA

en la sangre del donante,
reaccionan y fijan
Llevando a extravasación
capilar grave y edema
pulmonar.
complemento a antígenos
Transfusiones tisulares del receptor

(LPAT o TRALI)
Frecuencia: 1/5000 transfusiones.
Tratamiento: Los casos leves
pueden tratarse con medidas
convencionales de oxigenoterapia
y los casos más graves requieren
intubación endotraqueal y
ventilación mecánica.
Desempeña un papel
preponderante la infusión La liberación posterior de
pasiva de anticuerpos del citoquinas y quimioquinas
donante, que reaccionan sería la que provoca el
directamente con los reclutamiento y la
correspondientes activación de los
antígenos presentes en neutrófilos en los
los leucocitos del pulmones.
receptor.
Enfermedad del injerto contra huésped

Factores relacionados:
• La inmunidad del receptor. Los linfocitos injertan y
Transfusión de linfocitos T
• La viabilidad de los linfocitos del proliferan atacando diversos
viables a receptores con una
componente transfundido. órganos y tejidos del
inmunodepresión intensa.
• El grado de compatibilidad HLA receptor.
entre el donador y el receptor.
 Prueba de Microlinfotoxicidad: Reacción Antígeno-
Anticuerpo con fijación del complemento, observándose
la reacción por medio de un colorante.

ELISA: Consiste en la detección de anticuerpos presentes

en un suero que son capaces de reconocer antígenos HLA
Métodos de humanos purificados adheridos a un soporte sólido. La
visualización de esta unión se realiza mediante el uso de
detección un conjugado marcado con enzima.

Citometría de flujo: Es una metodología que utiliza

antígenos HLA purificados, tiene una mayor sensibilidad
que otras metodologías utilizadas en la determinación de
los anticuerpos anti HLA.
 • Uso muy poco frecuente
• Preparados por procedimientos de aféresis o
centrifugación.
• Contiene granulocitos y cantidades variables de linfocitos,
plaquetas y GR, suspendidos en 200 a 300 mL de plasma
Concentrados • Requisitos:

de 1.
2.
Neutropenia
Fiebre de 24 a 48 h que no responde a los antibióticos
Granulocitos 3.
apropiados
Sepsis bacteriana que no responde a los antibióticos
apropiados u otros tratamientos.
4. Médula ósea con hipoplasia mieloide y posibilidades
razonables de recuperación de la médula ósea.
Antígenos
plaquetarios
 Tipos de
Antígenos
plaquetarios

• Categoría I: Antígenos no específicos, expresados en plaquetas y

otros tipos celulares: antígenos compartidos con glóbulos rojos y
antígenos de histocompatibilidad (HLA-I).
• Categoría II: Antígenos específicos, presentes sólo en las
plaquetas o Antígenos plaquetarios específicos (HPA “Human
platelet antigen”).
Antígenos no
específicos

1 2 3

Antígenos ABH: Antígenos Lewis, I, P: Antígenos HLA clase I:

Forman parte de la Adsorbidos íntegramente Codificados por genes
porción glucídica de GP del plasma. del CMH, cromosoma 6.
IIa, IIIa y Ib. Presentes sólo en Gran significancia clínica.
Expresión variable y en pequeñas cantidades.
ocasiones muy débil, por Nula significación clínica
lo tanto su importancia transfusional.
transfusional es variada.
Antígenos
específicos

Expresión única en plaquetas.

HPA: Human Platelets Antigens
Determinados por variaciones en
genes que codifican las GP de
membrana.
Se designan cronológicamente:
HPA1, HPA2, HPA3…
 Principales sistemas antigénicos plaquetarios
Sistema Símbolo Antígenos Localización Anticuerpos
HPA-1 Zw HPA-1a (Zwa) y HPA-1b (Zwb) GP IIIa, cr17 Ac anti-Zwa y anti Zwb
HPA-2 Ko HPA-2a (Kob) y HPA-2b (Koa) GP Ib
HPA-3 Bak HPA-3a (Baka) y HPA-3b (Bakb) GP IIb, cr17 Ac anti-Bak

HPA-4 Yuk-Pen HPA-4a (Yukb, Pena) y HPA-4b GP IIIa Ac anti-Pena

(Yuka, Penb)
HPA-5 Br HPA-5a (Brb) y HPA-5b (Bra) GP Ia Ac anti-Bra
Frecuencia de Antígenos HPA en diferentes
grupos étnicos
Antígenos HPA-1a (Zwa) HPA-1b (Zwb)
Caucásicos 97% 26%
Coreanos 100% 11,2%
Población caucásica: Japoneses 100% 3,7%
HPA-2a (Kob) → > 99%
HPA-2b (Koa) → 15% Antígenos HPA-3a HPA-3b
Caucásicos 85-90% 62-66%
Japoneses 78,9% 70,7%
Coreanos 87,3% -
Población alemana:
Etnia Mapuche 89,3% -
HPA-5a (Brb) → 99%
HPA-5b (Bra) → 20% Antígenos HPA-4a HPA-4b
Caucásicos 100% -
Japoneses >99% 1-2%
Coreanos >99% 1-2%
Etnia Mapuche >99% 1-2%
Criptoantígenos

• Ocultos cuando la plaqueta se encuentra

en su forma natural
• La expresión de estos antígenos se
produce por activación, fragmentación o
envejecimiento de las plaquetas.
• Se alojan en GPIIb/IIIa.
• Los más importantes son detectados por
anticuerpos EDTA dependientes
 CUADROS CLINICOS ASOCIADOS A LA
TRANSFUSION PLAQUETARIA

1 2 3 4

Trombocitopenia Trombocitopenia Trombocitopenia Refractariedad

feto-neonatal Aloinmune Pasiva plaquetaria
Post-
aloinmune
transfusional
 Incompatibilidad de grupo plaquetario entre la madre y el
niño, debido al paso de anticuerpos maternos de tipo IgG
a través de la placenta.
• La etiología se asemeja con la de EHRN.
• Ag responsables HPA-1a (75-85%), poco frecuente Ag
HLA.
Trombocitopenia • 50% en primera gestación, 90% 2° o más gestaciones.
feto-neonatal • Complicaciones: Hemorragia intracraneana.
• Tratamiento:
aloinmune 1. Transfusión de plaquetas
2. Ex- sanguíneo transfusión
3. La transfusión plaquetas de la madre (plaquetoferesis)
4. IgG intravenosa durante el período prenatal o el uso
de esteroides.
 Infrecuente.

Trombocitopenia aguda, tras una semana

transfundido.

Trombocitopenia Probable Aloinmunizacion con antigenos HPA-1.

post- Mujeres 60-70 años o con antecedentes
transfusional gestacionales.

Tratamiento:

• Igs intravenosas.
• Esteroides
• Plasmaferesis.
 Trombocitopenia aloinmune pasiva

Se caracteriza por la
aparición brusca de Aloanticuerpos dirigidos Los complejos antígenos
trombocitopenia pocas Aloanticuerpo en el contra antígenos anticuerpos son eliminados
horas después de la componente transfundido. plaquetarios específicos por el sistema retículo
transfusión de un autólogos. endotelial.
componente sanguíneo.
Refractariedad
plaquetaria
• 60% de receptores politransfundidos y mujeres multíparas..
• Aloinmunización HLA se genera contra antígenos clase I,
provocada por leucocitos residuales presentes en
hemocomponentes celulares transfundidos.
• Dosis de inmunización: 5x106 leucocitos.
• Se produce en receptores con Ac anti-HLA o Ac anti-HPA, por
transfusiones o embarazos previos. Estos anticuerpos
producen la destrucción de las plaquetas que contengan el
antígeno correspondiente, manifestándose generalmente
como un mínimo incremento del recuento plaquetario
inmediatamente después de la transfusión de plaquetas y
una pobre respuesta terapéutica.
• Tratamiento: transfusión con unidades de concentrados
plaquetarios obtenidas por aféresis de un donante HLA
compatible.
• Refractariedad plaquetaria no inmunológica: Falta de
rendimiento numérico en ausencia de Ac antiplaquetarios.
Causas: sepsis, esplenomegalia, antibióticos, sangrado en
mucosas.
Métodos de detección
• ELISA
Se basa en la detección de un antígeno inmovilizado
sobre una fase sólida mediante anticuerpos que
producen una reacción cuyo producto puede ser
medido espectrofotométricamente.
Detecta anticuerpos anti HLA y anticuerpos
antiplaquetarios.

• Citometría de flujo
Se usan anticuerpos monoclonales capaces de
identificar glicoproteínas plaquetarias, tales como
CD42 (gp Ib) o CD41 (gpIIb/IIIa).
La detección de Ac asociados a plaquetas nos
permite identificar la existencia de anticuerpos
antiplaquetarios.
• MAIPA
Monoclonal antibody-specific immobilization of
platelets. Consiste en la inmovilización de antígenos
plaquetarios con el empleo de anticuerpos
monoclonales.
Permite definir simultáneamente la especificidad del Ac
detectado y la glicoproteína en la cual se localiza el Ag.
Determinar si las inmunoglobulinas están dirigidas
contra antígenos HLA u otros específicos de plaquetas.

• Aglutinación en fase sólida

Las plaquetas son fijadas a la superficie de pocillos. Tras
la adición del plasma o suero se incuba la mezcla y se
muestra la reacción utilizando IgG ligada a hematíes.
Permite detectar anticuerpos anti plaquetarios, se usa
en pruebas de compatibilidad plaquetaria, estudios de
madres HPA1 negativas.
• PIFT
Prueba de inmunofluorescencia especifica para
plaquetas. Detecta Aloanticuerpos en el suero del
paciente, fijándolos a la membrana de plaquetas
control mediante una antiglobulina humana
fluorescente.
Detecta: Anticuerpos antiplaquetarios (anti HPA) y
antileucocitarios (anti- HLA).

*LCT
Prueba de linfocitoxicidad. Detecta Ac que se unen
y lisan los linfocitos del donante en presencia de
complemento. La lisis de los linfocitos se visualiza
con un colorante eosina.
Solo se detectan Ac citotóxicos (Ac anti HLA y
autoanticuerpos). Ac anti HPA no fijan
complemento y nos son identificados por LCT.
Bibliografía
• Rodríguez, M. ; Fallas, M. 1997 junio. Antígenos plaquetarios. Acta médica Costarricense. 39(1): 4-8.
(Disponible en:
http://www.binasss.sa.cr/revistas/amc/v39n1/art2.pdf Consultado el: 2 de noviembre de 2018)
• Diez, S., Marcarian, G., y col. Trombocitopenia aloinmune feto/neonatal (TAFN) Refractariedad plaquetaria.
Hospital de Pediatría SAMIC. Argentina.
(Disponible en: http://www.hemobaires.org.ar/pdfs/TAFNyRplaqt1Parte.pdf Consultado el: 28 de octubre de
2018)
• Capsos, R., Margineda, S. Inmunohematología plaquetaria. Unidad de Estudios Inmunohematologicos.
Instituto de Hemoterapia de la Pcia. de Bs.As. Argentina.
http://www.hemobaires.org.ar/pdfs/2-Inmunoh-Plaquetaria.pdf
• Soto, V. Guía Medicina Transfusional (Actualización – 2012). Hospital del Niño Roberto del Rio. Santiago,
Chile.
http://www.hrrio.cl/transparencia/terceros/GUIA-MEDICINA-TRANSFUSIONAL-ACTUALIZACION-2012.pdf
• Guerrero, L.F.; F. Espinoza; J.J Sobalvarro. 2015. Medicina transfusional; Sistema HLA y medicina
transfusional. Tesis. Licen. Managua, Nicaragua, Instituto politécnico de la salud Luis Felipe Moncada. 47p.
http://repositorio.unan.edu.ni/1015/1/54662.pdf
 ANTIGENOS
LEUCOCITARIOS Y
PLAQUETARIOS
Laura Asencio
Carla Bastidas
Catalina Grandón
Victor Trafián

Hema 295 – Noviembre 2018