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Três amostras foram coletadas individualmente utilizando uma alça de platina previamente
flambada, onde foi colhido uma alíquota da colônia e colocada sobre a lâmina com uma gota
de solução salina formando o esfregaço, e então foram fixadas por calor com o auxílio de um
bico de Bunsen.
Por fim coloração de Gram fora realizada. Incialmente o esfregaço fora coberto com violeta de
metila, deixando agir por aproximadamente 60 segundos, com posterior lavagem com um
filete fino de água corrente e cobertura da superfície da lâmina com o lugol deixando agir
também por um minuto, sendo escorrido após o tempo decorrido e lavada a lâmina também
com um filete fino de água corrente, seguindo a adição de álcool etílico sobre a lâmina,
descorando-a, até não haver desprendimento de corante, prosseguindo com outra lavagem.
Por fim a lâmina foi coberta com a safranina deixando o corante agir por aproximadamente 30
segundo, lavando e deixando-a secar em temperatura ambiente.
Para a leitura das lâminas foi usado óleo de imersão e realizando a leitura em microscópio
óptica na objetiva de 100x.