9/18/2017

PENDAHULUAN
• Obat/makanan yg dipasarkan  memenuhi syarat
keamanan (lolos uji toksikologi)
• Asas umum :
UJI TOKSIKOLOGI 1. Konsep penelitian
2. Takrif dan makna
Nova Hasani Furdiyanti, S.Farm., M.Sc., Apt. 3. Sistem uji toksikologi
4. Penentu keshahihan uji
5. Jenis uji
6. Evaluasi keamanan

Konsep Penelitian Takrif dan Makna

Objek uji (tujuan) • Uji Toksikologi : suatu tata cara untuk
mendeteksi dan mengevaluasi kondisi,
Subjek uji (hewan uji)
mekanisme, wujud, dan sifat zat kimia pada
Proses uji (sesuai standar)
hewan uji tertentu untuk menentukan batas
amannya
Data (diolah, evaluasi) • Objek uji : kondisi, mekanisme, wujud, sifat
• Tujuan : untuk menentukan batas aman zat
Hasil
uji
Manfaat

Sistem Uji Toksikologi Penentu Keshahihan Uji Toksikologi

• Objek uji  kondisi, mekanisme, wujud, sifat • Keshahihan : behubungan dg validitas uji yg
• Subjek uji  hewan uji dilakukan, dipengaruhi oleh banyak faktor :
• Proses uji  data tolok ukur kuantitatif dan - Bahan uji
kualitatif  hasil informasi ketoksikan bahan - Subjek uji
uji evaluasi batas aman - Teknik atau tata cara
• Subjek uji dipejani bahan uji  serangkaian - Pengamatan
proses uji  data  hasil - Analisis dan evaluasi

1
 9/18/2017

Bahan Uji Subjek Uji

Meliputi spesifikasi dan sifat fisika kimia : • Hewan uji  yg memiliki fungsi
• Kemurnian bahan uji  menentukan hasil fisiologis organ mirip manusia. Why?
• Kelarutan bahan uji  menentukan proses
uji, proses pemejanan terhadap hewan uji
• Faktor lain  biaya dan masalah
• Stabilitas  degradasi bahan uji yg bisa
penanganan
terjadi saat kita melakukan uji; stok bisa • Kondisi fisiologis dan patologi hewan uji
dipakai selama penelitan/harus buat baru
• Keterbatasan penanganan
• Kondisi  harus disimpan pada suhu dingin,
wadah gelap, dll

Teknik atau Tata Cara Pengamatan

• Penyiapan sediaan uji  tergantung kondisi
bahan uji, jalur pemejanan • Secara kualitatif  gejala
• Penentuan dosis  minimal 3 peringkat • Kuantitatif  jumlah mati, dll
dosis (0% - hampir 100% efek toksik)
• Jalur pemejanan
Analisis dan Evaluasi
• Volume pemejanan  ½ vol max
• Proses benar, analisis salah  salah
• Frekuensi pemejanan  tgt jenis uji
• Stok sediaan  tgt stabilitas • Gunakan teknik analisis yg sudah baku
(ANOVA, Uji Tuckey, Analisis Phi, dll)
• Pengambilan cuplikan hayati  ada standar
prosedur

UJI TOKSIKOLOGI

• Uji Ketoksikan tak khas : uji toksikologi
yg dirancang untuk mengevaluasi
keseluruhan atau spektrum efek toksik
suatu senyawa pada aneka ragam jenis
hewan uji
• Uji ketoksikan akut, kronis, dan
subkronis
• Uji Ketoksikan khas : uji toksikologi yg
dirancang untuk mengevaluasi secara rinci
efek yg khas suatu senyawa pada aneka
ragam jenis hewan uji
• Uji potensiasi, uji kekarsinogenikan, uji
kemutagenikan, keteratogenikan, uji
reproduksi, kulit dan mata, dan perilaku

2

UJI KETOKSIKAN TAK KHAS
• Sasaran uji :
- Wujud efek toksik
- Potensi ketoksikan akut
- mekanisme kematian hewan uji
- angka kematian  LD50
3. Pemejanan dosis sediaan uji
- Minimal 4 peringkat dosis (dosis tertinggi
yg tdk/hampir tdk mematikan – dosis
terendah yg mematikan seluruh/hampir
seluruh hewan uji)
- Kisaran dosis yg diperkirakan
menyebabkan 10-90% kematian hewan
pada masa akhir uji
- 0 – 100% kematian
9/18/2017
UJI KETOKSIKAN AKUT
• Dirancang untuk menentukan efek toksik
suatu senyawa yg akan terjadi dalam waktu
yg singkat setelah pemejanan atau
pemberiannya dg takaran tertentu
• Tujuan : - mempelajari potensi ketoksikan
- mempelajari gejala2 klinik/toksik yg
timbul
- mempelajari mekanisme kematian subjek
uji
Tata Cara Pelaksanaan
1. Pemilihan Hewan Uji
- Sekurang-kurangnya 2 jenis hewan uji
(roden dan niroden)
- Hewan uji sebaiknya 1 galur, dewasa,
sehat, beratnya seragam (variasi 10%)
2. Pengelompokkan hewan uji
- Dibagi sesuai peringkat dosis ditambah
kontrol negatif
- 1 kelompok terdiri 4-5 ekor
4. Pengamatan
- Lama pengamatan 24 jam, kec pada kasus
tertentu misal tidak ada kematian, dapat
dilanjutkan sampai 7-14 hari (2 minggu)
- Gejala2 klinis, perubahan BB, jml hewan
yg mati tiap kelompok, data histopatologi
3
 9/18/2017

5. Analisis dan Evaluasi Hasil
- 3 metode analisis untuk menghitung LD50
: Metode Grafik Lithfield&Wilcoxon;
Metode Kertas Grafik Probit logaritma
Miller&Tainter; Metode rata-rata bergerak
Thomson-Weill
- Metode perhitungan LD50 didasarkan
pada kekerabatan antara peringkat dosis
dan %respon
• Evaluasi hasil  data gejala klinis secara
kualitatif untuk mengevaluasi mekanisme
penyebab kematian
• Data dari hasil pemeriksaan histopatologi 
evaluasi spektrum efek toksik
• Jml hewan yg mati  menghitung LD50 
menentukan potensi ketoksikan akut
senyawa uji

Manfaat uji ketoksikan akut Harga LD50 dan TD50 dapat diperoleh
secara statistika. Metode yang paling
• Harga LD50 dapat digunakan untuk
bisa digunakan untuk menghitung
menentukan peringkat (mengkategorikan)
harga LD50 atau TD50 adalah :
potensi ketoksikan akut, tapi bukan mrp
ukuran batas aman
• Potensi ketoksikan (LD50) bersama 1. Metode grafik Lietchifield dan wilcoxon (1949)
keefektifannya (ED50) dapat digunakan
untuk mengevaluasi batas aman senyawa
• Pengetahuan tentang potensi ketoksikan 2. Metode grafik logaritmik miller dan Tainter
akut  untuk merancang uji ketoksikan (1944)
subkronis/kronis atau dosis awal atau dosis
terapi penelitian yg lain
3. Tata cara menemukan kisaran dari Weill (1952)
22

Metode Grafik
Pada penentuan LD50 perlu dipilih dosis mematikan sekitar
50%, lebih dari 50% (90%) dan kurang dari 50% (sekitar 10%).

Pada penentuan dosis dapat menggunakan dosis lazim

penggunaan zat sebagai terapi dikalikan faktor tertentu (5x, 10x
atau 20x dan seterusnya hingga diperoleh dosis yang mematikan
10 dan 90% hewan coba

Dua atau 3 dosis diantaranya dapat dihitung berdasar :

Log N/n = k log a/n

N = dosis yang mematikan sekitar 90% hewan uji

n = dosis yang mematikan sekitar 10 % hewan uji
k = jumlah kelompok tanpa kontrol
a = dosis setelah n
23 24

4
 9/18/2017

CARA PROBIT CARA FARMAKOPE INDONESIA III

Syarat :
1. Mempunyai tabel probit 1. Menggunakan seri dosis atau konsentrasi yang berkelipatan
2. Menentukan nilai probit dari % kematian tiap kelompok tetap
uji 2. Jumlah hewan percobaan tiap kelompok harus sama
3. Dosis harus diatur sedemikian rupa supaya memberikan efek
3. Menentukan log dosis tiap-tiap kelompok
dari 0-100% dan hitungan dibatasi di rentang tersebut
4. Menentukan persamaan garis lurus hubungan antara
nilai probit dengan log dosis Rumus perhitungan LD50 adalah
5. Masukkan nilai 5 (probit dari 50% kematian hewan m = a-b (∑pi – 0,5)
m = log LD50
coba) pada persamaan garis lurus pada nilai Y. Nilai
LD50 atau LC50 dihitung dari nilai antilog X pada saat a = logaritma dosis terendah yang masih menyebabkan jumlah kematian 100%
tiap kelompok
Y=5 b = beda log dosis yang berurutan
pi = jumlah yang mati menerima dosis i dibagi jumlah hewan seluruhnya yang
menerima dosis i

25 26

Pada Kurva hubungan dosis-respon

• Bentuk bagian awal kurva lebih relevan dikaji daripada bentuk kurva keseluruhan
• Hal ini berkaitan dengan ambang pemejanan racun, yakni takaran pemejanan dimana individu tidak
menunjukan respon atau efek toksik yang terukur/teramati
CARA WEIL

Batas aman ketoksikan racun yang lazim disebut kadar efek toksik tak
Log m = log D + d (f + 1) teramati (KETT) atau “no observed effect level”

Dimana :
KETT merupakan takaran pemejanan tertinggi yang tidak menyebabkan
m = nilai LD50 timbulnya efek toksik atau kematian pada diri subjek uji, yakni titik
D = dosis terkecil yang digunakan potong kurva awal dengan absis (sumbu x)
d = log dari kelipatan dosis Jadi dari kasus pemejanan tunggal/akut kekerabatan dosis-
f = suatu nilai dalam tabel Weil, karena angka respon dapat diperoleh informasi penting yakni :
kematian tertentu (r)
Harga LD50/TD50 Tolok ukur kuantitatif utama ketoksikan
racun
27 KETT 28

% respon Tabel 1. Kriteria ketoksikan xenobiotika (Loomis, 1978)

A Kriteria LD50 (mg/kg)

B
1. Luar biasa toksik Kurang dari 1 (< 1)
2. Sangat toksik 1 – 50
3. Cukup toksik 50 – 500
4. Sedikit toksik 500 – 5000
5. Praktis tidak toksik 5000 – 15000
6. Relatif kurang berbahaya > 15000
KETT
Dosis (skala linier)

Gambar 3. Perbandingan kekerabatan dosis-respon racun A (tampa KETT) dan B (dengan

KETT)
LD50/TD50 tidak menggambarkan batas keamanan racun
Harga LD50/TD50 Batas keamanan racun digambarkan oleh KETT, artinya :
Semakin kecil harga LD50/TD50 maka semakin besar potensi toksik Misalnya meskipun harga LD50 racun A lebih besar dari pada LD50 racun
atau ketoksikan akut racun B atau potensi ketoksikan akut racun A lebih rendah daripada racun B,
tidak berarti racun A pasti lebih aman daripada racun B. Batas aman
kriterianya dapat dilihat pada tabel berikut :
29 suatu racun haruslah dilihat dari harga KETT nya

5
 9/18/2017

Hal ini dapat dilihat pada gambar berikut :

UJI KETOKSIKAN SUBKRONIS
Respon toksik
Batas aman racun B lebih
B besar dari pada racun A,
A meskipun ketoksikan akut
B relatif lebih tinggi
• Adalah uji ketoksikan suatu senyawa yg
50
daripada A diberikan dg dosis berulang pada hewan uji
Hal ini terjadi terutama
bila kurva kekerabatan tertentu selama kurang dari 3 bulan
dosis-respon yang
KETT A KETT B LD50 B LD50 A dosis diperbandingkan tidak • Tujuan :
sejajar, misalnya
Respon toksik
mekanisme aksi atau wujud - Mengetahui spektrum efek toksik suatu
efek toksik racun A dan
A B Berbeda senyawa uji
50
Tetapi bila kurva yang
diperbandingkan sejajar
- Mengetahui apakah spektrum efek suatu
(gambar disamping) senyawa berhubungan dg takaran dosis
mungkin perbedaan
potensi ketoksikan akut
berbading lurus dengan
KETT A KETT B LD50 A LD50 B dosis batas keamanan (KETT)
18/09/2017 h_baroroh@yahoo.co.id
racun

Tata Cara Pelaksanaan

- Mengetahui harga NOEL (No Observe 1. Pemilihan Hewan Uji

Adverse Effect Level)/dosis tertinggi yg tdk - Roden dan nirroden
menimbulkan efek toksik
- Mengetahui reversibilitas spektrum efek - Hewan uji dipilih yg peka dan memiliki
toksik yg terjadi pola metabolisme terhadap senyawa uji yg
• Sasaran uji  histopatologi organ (organ2 yg semirip mungkin dg manusia
terkena efek toksik), gejala toksik, wujud - 1 jenis hewan uji, dewasa, sehat
efek toksik, sifat efek toksik, batas keamanan - 10 ekor dalam 1 kelompok
toksikologi terutama KETT

2. Pengelompokkan Hewan Uji

- Minimal 4 kelompok (3 kelompok dosis + 1 4. Pengamatan
kontrol negatif) krn regresi minimal 3 data
- Wujud efek toksik atau spektrumnya
3. Takaran dosis - Semua jenis perubahan diamati :
- dari dosis yg sama sekali tdk menimbulkan efek Perub.Biokimia : data darah dan urin
toksik sampai dosis yg betul2 menimbulkan efek Perub.Struktural : histopatologi
toksik yg nyata
Perub.Fungsional : gejala toksik
- Minimal 3 peringkat dosis  dosis tertinggi - Jml makanan&minuman, perub BB
sebisa mungkin tidak mematikan hewan uji tapi
- Sifat efek toksik  pengamatan 2 bulan
memberi wujud efek toksik yg jelas (nyata) kedepan setelah senyawa dihentikan
- Dosis terendah setingkat dg ED50nya

6

Analisis dan Evaluasi Hasil
• Data BB, asupan makanan&minuman, gejala2 
evaluasi status kesehatan dan perkembangan
patologi hewan uji akibat sediaan uji
• Hematologi darah&Urin  evaluasi perubahan
biokimia
• ANOVA
Manfaat : menentukan NOEL yg menggambarkan
batas keamanan scr subkronis
UJI KETOKSIKAN KHAS
Tata Cara Pelaksanaan
• Prinsipnya sama dg ketoksikan akut
• Bedanya pada pengelompokkan hewan uji
• Pengelompokkan terdiri dari lebih 1
senyawa. Misal kombinasi senyawa A dan B
 masing2 diuji ketoksikan akut, kmd diuji
potensi ketoksikan gabungan
• Hasil : potensi ketoksikan akut masing2 dan
potensi ketoksikan gabungan
9/18/2017
UJI KETOKSIKAN KRONIS
• Mirip dg ketoksikan subkronis
• Lama pemejanan takaran senyawa uji
• Pengamatan selama masa hidup hewan uji,
shg untuk penelitian dipilih hewan uji yg
umurnya pendek
• Manfaat : evaluasi kemungkinan potensi
terjadinya tumor/kanker pada hewan uji,
kalau kanker  uji karsinogenik
UJI POTENSIASI
• Tujuan : untuk meneliti kemungkinan
terjadinya peningkatan efek toksik suatu
senyawa dg hadirnya senyawa lain, dimana
terdapat kemungkinan akan menaikkan
ketoksikan dari salah satunya
• Sasaran Uji : menentukan potensi ketoksikan
akut (LD50)  tapi mrp potensi ketoksikan
gabungan
• Lalu, LD50 gabungan dibandingkan dg LD50
tunggal
• Potensi : LD50 gabungan<LD50 tunggal
• Manfaat : untuk evaluasi senyawa kombinasi
• Banyak obat dalam bentuk senyawa
kombinasi di pasaran, dokter meresepkan
kombinasi
7

UJI KETERATOGENIKAN
• Tujuan : untuk mengetahui kemungkinan
munculnya cacat bawaan pada janin yg
dikandung oleh induk yg sedang bunting
akibat pemberian suatu senyawa tertentu
• Sasaran : wujud efek toksik yg berupa
- Cacat makroskopis (sumbing, cacat celah
langit, kelengkapan tangan dan kaki)
- Cacat mikroskopis
- Cacat rangka/skeletal/tulang
• Pengelompokkan
- Min 3 kelompok perlakuan + 1 kontrol
negatif
• Perlakuan
- Dipejankan pada masa organogenesis
- Pengawinan sore hari (antara jam 5-6) krn
saat itu hewan pada masa his (mudah
terangsang)
Pengamatan
• Dimulai dari akhir masa bunting (12-24 jam
sebelum kelahiran normal)  cesar
• Yg diamati :
- Biometrika janin (resorpsi awal, resorpsi akhir,
angka cacat, BB janin, panjang janin
- Cacat makroskopis (cacat badan)
- Cacat mikroskopis (histopatologi  utk melihat
cacat seluler)
- Cacat rangka/skelet (dg pewarnaan alizarin 
janin direndam dl dg basa/asam kuat untuk
menghilangkan ototnya, baru tulang2nya diwarnai
agar terlihat jelas
9/18/2017
Tata Cara Pelaksanaan
Ciri hewan uji yg bisa digunakan :
• Hewan betina yg punya daur estrus teratur krn
kemungkinan terjadinya kehamilan bila dibuahi
>90%
• Hewan yg anaknya banyak  untuk analisis
• Masih perawan  untuk menghindari cacat
spontan yg mudah timbul pada hewan yg pernah
melahirkan
• Sehat
• Penetapan Masa Bunting
- Dg melihat sperma di vagina betina (apus vagina)
 dilakukan tdk terlalu lama sejak kawin, max
keesokan paginya krn keburu hilang
• Dosis/Takaran
- Minimal 3 peringkat dosis +1 kontrol negatif
- dosis tertinggi tdk boleh berpengaruh negatif ke
induk, misal sedasi atau perubahan perlakuan
- Dosis teratogen diperkirakan dari LD50  ¼ - 1/3
LD50 induk
Analisis dan Evaluasi Hasil
• Dari data makroskopis dan mikroskopis
 adanya cacat badaniah, aborsi, cacat
seluler, kelainan rangka pada janin
• Manfaat  memberi label pada produk
obat bahwa obat tsb boleh/tdk
dikonsumsi oleh wanita hamil terutama
pada trimester pertama
8

UJI KEMUTAGENIKAN
• Tujuan : melihat pengaruh suatu senyawa tertentu
terhadap kode genetik shg bila berpengaruh akan
menimbulkan mutasi yg sifatnya menurun
• Sasaran : 2 jenis mutasi
- Mutasi tempat  berkaitan dg perubahan
susunan basa, asam amino, atau terjadi dalam
pasangan nukleotida tunggal dlm molekul DNA
- Mutasi struktur  perubahan pada kromosom
• In vivo : ada 3 metode
- Metode penetapan letal dominan
(dominant lethal assay)
- Metode Penetapan Inang Penengah
(host mediated assay)
- Sitogenetika in vivo (in vivo
cytogenetics)
Metode Penetapan Inang Penengah
• Metode ini membutuhkan bakteri tertentu sbg
indikator kerusakan/perubahan genetik pada
mamalia
• Cara : subjek uji dipejani ip dg bakteri tertentu
(mis. Salmonella)  bbrp waktu kmd diambil
cuplikan hayati dari rongga perutnya  hitung
frekuensi munculnya mutasi dari bakteri
• Uji ini terutama untuk mengevaluasi terjadinya
mutasi tempat
9/18/2017
Tata Cara Pelaksanaan
• In vitro  menggunakan bakteri krn mpy sel
tunggal shg mudah diidentifikasi (mudah
menganalisis secara rinci komponen
genetiknya)
• Bakteri diletakkan dalam cawan petri 
dipejani senyawa uji  periksa perubahan
genetiknya
Metode Penetapan Letal Dominan
• Untuk mengetahui adanya mutasi struktur, dg
subjek uji berupa hewan jantan
• Cara : subjek uji dipejani dg senyawa uji dg takaran
subtoksik  kmd dikawinkan dg hewan betina
perawan yg tdk diberi senyawa uji  hari ke-14
dibedah cesar lalu diperiksa dan dihitung (korpora
lutea, resorpsi awal, resorpsi akhir, jml tempat
implantasi)  hitung indeks mutasi
• Indeks mutasi = resorpsi awal x 100%
implantasi total
UJI SITOGENETIKA
• Tata Cara : Senyawa uji dipejankan pada organ
tertentu pada hewan uji  kmd diperiksa
jaringan/sel dari organ yg dipejani tsb
• Organ yg umum diuji :
- Sumsum tulang (utk mengetahui efek mutagen
terhadap mitosis)
- Limfosit (utk melihat pengaruh mutagen
terhadap kerusakan yg terjadi sebelum sintesis
DNA)
9

- Fibroblas (utk mengetahui efek mutagenik
jangka panjang)
- Gametosit (utk mengetahui efek mutagen
terhadap meiosis)
- Kultur sel amniotic (utk mengetahui
kerusakan pada perkembangan keturunan)
Manfaat  untuk mengevaluasi apakah
senyawa yg dipakai oleh manusia itu akan
berefek yg menurun terhadap keturunannya
atau tidak
2 jenis tumor
• Tumor jinak  struktur identik dg jaringan
normalnya, pertumbuhannya bersifat
terbatas pada daerah tempat tumbuh dan
tdk menerjang ke jaringan tetangganya
• Tumor ganas  pertumbuhan cenderung
menerjang/invasi ke jaringan tetangganya
Uji jangka panjang
• Yg paling penting adl memilih hewan uji yg
memungkinkan untuk pengamatan kanker
krn biasanya kanker tdk serta merta muncul
tapi dalam jangka waktu lama  shg hewan
uji dipejani sepanjang hidupnya
• Maka biasanya digunakan hewan yg
umurnya tdk panjang, misal tikus (2th),
mencit (18 bln), kelinci (4-5 th)
9/18/2017
UJI KEKARSINOGENIKAN
• Tujuan : utk melihat potensi suatu
senyawa dalam menimbulkan
tumor/kanker bila digunakan oleh
manusia
• Tumor : massa abnormal dari suatu
sel/jaringan yg tumbuh berlebihan dan
tidak terkoordinasi dg jaringan
normalnya
• Sasaran : melihat adanya tumor/kanker
• Tata Cara Pelaksanaan : Uji jangka pendek
dan uji jangka panjang
• Uji jangka pendek : Pada dasarnya
menggunakan uji in vitro yg sama dg uji
kemutagenikan  krn pada dasarnya sudah
diketahui bahwa 80% senyawa mutagen
bersifat karsinogen..tapi tdk sebaliknya
• Dosis  diperkirakan dari uji ketoksikan
subkronis yg menimbulkan efek tumor tetapi
tdk mematikan. Berkisar antara 1/3 – 1/5
dari LD50 nya
• Pengamatan  diamati selama kurun waktu
tertentu terhadap munculnya tumor/tdk
(sepanjang masa hidup)  mati : dibedah
(pemeriksaan mikroskopis)
10

• Analisis dan Evaluasi Hasil  dilihat ada
tdknya tumor baik mikroskopis maupun
makroskopis, jinak atau ganas
• Manfaat  untuk memprediksi
kemungkinan munculnya tumor pada
diri manusia bila mengkonsumsi
senyawa tsb
• Sasaran : ada tidaknya pengaruh senyawa
terhadap cacat bawaan hewan
sebelum/setelah dilahirkan, dan juga
fertilitasnya
• Tata Cara Pelaksanaan : dibagi 3 segmen
- Uji fertilitas dan kinerja reproduksi
- Uji keteratogenikan/ketoksikan
embrio/keguguran
- Uji perinatal dan pasca lahir
Pengamatan pd masing2 generasi :
1. Indeks fertilitas
2. Lama bunting
3. Angka kelahiran hidup
4. Angka kelahiran mati
5. Angka kelahiran hidup sampai umur sapih
6. Rasio jantan dan betina
7. Berat badan
8. Cacat yg timbul
9. Uji histopatologi tiap generasi
9/18/2017
UJI REPRODUKSI
• Dilakukan selama 2-3 generasi pada hewan
uji  jd jangan yg berumur panjang,
biasanya tikus
• Tujuan : untuk menentukan pengaruh suatu
senyawa terhadap kapasitas reproduksi
suatu hewan uji (ovulasi, konsepsi,
implantasi, kehamilan, pertumbuhan
embrio, partus, laktasi, pertumbuhan pasca
lahir
• Pada dasarnya hewan uji yg dipakai adl hewan
kecil
• Senyawa uji diberikan dg dosis tertentu pada
jantan dan betina sebelum dikawinkan selama 6
hari  dikawinkan  selama bunting dan
menyusui hewan betina diberi perlakuan 
keturunannya diberi perlakuan sejak masa sapih
sampai dewasa  dikawinkan  bunting,
beranak, laktasi, sapih, dst
• Manfaat : memastikan dan mengevaluasi
suatu senyawa bisa mengganggu kapasitas
reproduksi pada wanita/pria bila digunakan
pada manusia.
11
 9/18/2017

UJI KULIT DAN MATA 1. Uji Iritasi Primer Kulit

• Tujuan : mengevaluasi keungkinan pengaruh • Hewan uji : kelinci, marmot, mencit

suatu senyawa terhadap kulit dan mata
• Prinsip : senyawa uji dioleskan ke kulit
• Sasaran : wujud efek toksik terutama yg yg bulunya sudah dicukur  catat
berkaitan dg timbulnya iritasi
interval waktu tertentu timbulnya
eritema (kulit kemerahan) atau edema

2. Uji Sensitisasi Kutan 3. Uji Fototoksik dan Fotoalergi

• Hewan uji : marmot jantan • Hewan uji : marmot

• Prinsip : senyawa uji dioles pada kulit yg • Prinsip : senyawa uji dioles pada kulit
bulunya sudah dicukur  1 hari kemudian tercukur  disinari dg cahaya UV 
rambut pada daerah janggut dihilangkan dg
amati adanya eritema dan edema
Barium sulfida dan diamati adanya eritema
dan edema

4. Uji Iritasi Mata

• Hewan uji : kelinci

• Prinsip : senyawa uji diteteskan/dioles
pada konjungtiva mata kiri, dan mata SEKIAN
kanan sbg kontrol  amati perubahan
pada mata dan daerah sekitarnya
selama 24-72 jam

12