123 PDF

UNIVERSITAS INDONESIA
PENGARUH NATRIUM HIALURONAT TERHADAP

PENETRASI KOFEIN SEBAGAI ANTISELULIT DALAM
SEDIAAN HIDROGEL, HIDROALKOHOLIK GEL DAN
EMULSI GEL SECARA IN VITRO MENGGUNAKAN SEL
DIFUSI FRANZ
SKRIPSI
ZURAIDA SYAFARA DZUHRO

0706265106
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

PROGRAM S1 REGULER FARMASI
DEPOK
JULI 2011
Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

UNIVERSITAS INDONESIA
PENGARUH NATRIUM HIALURONAT TERHADAP

PENETRASI KOFEIN SEBAGAI ANTISELULIT DALAM
SEDIAAN HIDROGEL, HIDROALKOHOLIK GEL DAN
EMULSI GEL SECARA IN VITRO MENGGUNAKAN SEL
DIFUSI FRANZ
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi
ZURAIDA SYAFARA DZUHRO

0706265106
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

PROGRAM S1 REGULER FARMASI
DEPOK
JULI 2011
ii Universitas Indonesia

iii Universitas Indonesia

iv Universitas Indonesia

KATA PENGANTAR
Puji syukur saya panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa karena atas
berkat dan rahmat-Nya, saya dapat menyelesaikan skripsi ini. Penulisan skripsi ini
dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana
Farnasi pada Departemen Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam Universitas Indonesia.
Saya menyadari bahwa, tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak,
dari masa perkuliahan sampai pada masa penyusunan skripsi, sangatlah sulit bagi
saya untuk menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, saya mengucapkan terima
kasih kepada:
1) Pharm. Dr. Joshita djajadisastra, M.S, selaku dosen pembimbing I dan Sutriyo,
M.Si., Apt, selaku dosen pembimbing II yang telah menyediakan waktu,
tenaga, dan pikiran untuk mengarahkan saya dalam penyusunan skripsi ini;
2) Dr. Harmita, Apt, selaku pembimbing akademis yang selama ini telah
membimbing saya selama kuliah;
3) Prof. Dr. Yahdiana Harahap, MS., Apt, selaku ketua Departemen Farmasi UI;
4) dosen pengajar dan staf beserta karyawan Departemen Farmasi UI yang telah
membantu saya dalam menempuh pendidikan di Departemen Farmasi UI;
5) PT. Dwipar, PT. Pharmacore, PT. Brataco yang telah banyak membantu
dalam usaha memperoleh bahan dan data yang saya harapkan;
6) PT. Indonesia Power yang selama ini telah memberikan beasiswa selama
kuliah;
7) orang tua dan keluarga saya yang telah memberikan bantuan dukungan
material dan moral;
8) Kak Rezi, Kak Pietra, Kak Radit, Kak Nia, dan Kak Engkom, selaku kakak
kelas saya yang turut memberikan ide serta masukan yang positif;
9) sahabat yang telah banyak membantu saya dalam menyelesaikan skripsi ini,
terutama Mutia, Ninin, Yenny, Desy, Erni, Adel, Fika, Offi, Iftah, Jati, Hanif,
Lucky, Koko, Khai, Purwinda, Cecil, Agatha, dan Sonya;
10) Kak Devfanny, Pak Imi, Pak Surya, dan Pak Rustam selaku laboran yang
selama ini telah membantu saya dalam melaksanakan penelitian.
Akhir kata, saya berharap Tuhan Yang maha Esa berkenan membalas segala
kebaikan semua pihak yang telah membantu. Semoga skripsi ini membawa
manfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan.
Penulis
2011
v Universitas Indonesia

vi Universitas Indonesia

ABSTRAK
Nama : Zuraida Syafara Dzuhro

Program Studi : Farmasi
Judul : Pengaruh Natrium Hialuronat Terhadap Penetrasi Kofein sebagai
Antiselulit dalam Sediaan Hidrogel, Hidroalkoholik Gel dan
Emulsi Gel Secara In Vitro Menggunakan Sel Difusi Franz
Sediaan gel antiselulit topikal dengan zat aktif kofein memerlukan agen untuk
meningkatkan penetrasi mencapai lapisan subkutan. Natrium hialuronat (NaHA),
bentuk garam asam hialuronat, merupakan polimer hidrofilik derivat polisakarida.
NaHA memiliki kemampuan meningkatkan penetrasi perkutan dengan mengubah
susunan sel-sel stratum korneum yang tersusun rapat menjadi lebih renggang.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh NaHA terhadap penetrasi
kofein sebagai zat aktif antiselulit dalam sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan
emulsi gel. Masing-masing sediaan mengandung kofein 1,5% dan terbagi atas 3
formula. Formula 1 mengandung basis gel HPMC 2%; formula 2 mengandung
basis gel HPMC 2% dan NaHA 0,5%; formula 3 mengandung NaHA 2% sebagai
basis gel. Uji penetrasi dilakukan secara in vitro menggunakan sel difusi Franz
dengan kulit tikus sebagai membran selama 8 jam. Persentase kofein terpenetrasi
sediaan hidrogel formula 1, 2, 3 secara berturut-turut adalah 9,41 ± 0,01%; 11,74
± 0,13%; 16,32 ± 0,03%. Persentase kofein terpenetrasi sediaan hidroalkoholik
gel formula 1, 2, 3 secara berturut-turut adalah 19,54 ± 0,02%; 22,99 ± 0,23%;
7,42 ± 0,08%. Persentase kofein terpenetrasi sediaan emulgel formula 1, 2, 3
secara berturut-turut adalah 10,47 ± 0,19%; 13,41 ± 0,12%; 18,42 ± 0,06%. Hasil
menunjukkan NaHA meningkatkan penetrasi kofein perkutan berbagai sediaan
gel, kecuali hidroalkoholik gel formula 3.
Kata Kunci : emulsi gel, hidroalkoholik gel, hidrogel, kofein, natrium

hialuronat, peningkat penetrasi perkutan, sel difusi Franz
xvii + 172 halaman : 31 gambar, 15 tabel, 48 lampiran
Daftar Pustaka : 83 (1969 - 2011)
vii Universitas Indonesia

ABSTRACT
Name : Zuraida Syafara Dzuhro

Program Study: Pharmacy
Title : The Effect of Sodium hyaluronate on Caffeine Percutaneous
Penetration as an Anticellulite in Hydrogel, Hydroalcoholic Gel
and Gel Emulsion by In Vitro Test Using Franz Diffusion Cell
Anticellulite topical gel preparation with caffeine as active ingredient needs a

penetration enhancer to reach subcutaneous layer. Sodium hyaluronate (NaHA),
the sodium salt of hyaluronic acid, is a hydrophilic polysaccharide derivative
polymer. It has ability to enhance percutaneous penetration by loosening the dense
of the compact substance stratum corneum. The aim of this research was to
observe the effects of NaHA on caffeine penetration as anticellulite active agent in
three types of gel preparation: hydrogel, hydroalcoholic gel, and gel emulsion.
Each gel type contained caffeine 1,5% and was varied into three formulas.
Formula 1 contained HPMC 2% as gel basis; formula 2 contained HPMC 2% and
NaHA 0,5%; formula 3 contained NaHA 2% as gel basis. Caffeine penetration
properties were analyzed by Franz diffusion cell in vitro test using rat skin as
membrane. Percent caffeine penetration of hydrogel formula 1, 2, 3 were 9,41 ±
0,01%; 11,74 ± 0,13%; 16,32 ± 0,03%, respectively. Percent caffeine penetration
of hydroalcoholic gel formula 1, 2, 3 were 19,54 ± 0,02%; 22,99 ± 0,23%; 7,42 ±
0,08%, respectively. Percent caffeine penetration of gel emulsion formula 1, 2, 3
were 10,47 ± 0,19%; 13,41 ± 0,12%; 18,42 ± 0,06%, respectively. The result
showed that NaHA enhanced the caffeine percutaneous penetration properties in
various gel preparations, except hidroalkoholic gel formula 3.
Keywords : caffeine, Franz diffusion cell, gel emulsion, hydroalcoholic gel,

hydrogel, skin penetration enhancer, sodium hyaluronate
xvii + 172 pages : 31 figures, 15 tables, 48 appendixes
Bibliography : 83 (1969 - 2011)
viii Universitas Indonesia

DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL ................................................................................... i
HALAMAN JUDUL ....................................................................................... ii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS .......................................... iii
HALAMAN PENGESAHAN......................................................................... iv
KATA PENGANTAR..................................................................................... v
HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH ................ vi
ABSTRAK ....................................................................................................... vii
ABSTRACT..................................................................................................... viii
DAFTAR ISI ................................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR....................................................................................... xi
DAFTAR TABEL ........................................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN................................................................................... xvii
BAB 1 PENDAHULUAN ............................................................................. 1
1.1 Latar Belakang.............................................................................. 1
1.2 Tujuan ........................................................................................... 3
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 4
2.1 Kulit .............................................................................................. 4
2.1.1 Epidermis ............................................................................. 5
2.1.2 Dermis.................................................................................. 6
2.1.3 Subkutan .............................................................................. 7
2.2 Penetrasi Obat Melalui Kulit ........................................................ 7
2.2.1 Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Penetrasi Perkutan ...... 9
2.2.2 Peningkat Penetrasi Perkutan............................................... 10
2.2.2.1 Hidrasi..................................................................... 13
2.2.2.2 Disrupsi Lipid atau Fluidisasi ................................. 13
2.2.2.3 Interaksi dengan Keratin......................................... 14
2.2.2.4 Peningkatan Partisi dan Kelarutan Obat dalam
Stratum Korneum Hidrasi....................................... 14
2.3 Uji Penetrasi secara in vitro Menggunakan Sel Difusi Franz ....... 14
2.4 Selulit ............................................................................................ 16
2.4.1 Penyebab Selulit................................................................... 17
2.4.2 Gejala Klinis Visual dan Fisik Selulit .................................. 19
2.4.3 Tahapan Pembentukan Selulit.............................................. 20
2.4.4 Zat Aktif pada Sediaan Antiselulit Topikal.......................... 21
2.5 Gel ................................................................................................. 22
2.5.1 Hidrogel................................................................................ 22
2.5.2 Hidroalkoholik Gel............................................................... 23
2.5.3 Emulsi Gel............................................................................ 23
2.6 Bahan-Bahan yang Digunakan dalam Formulasi Gel ................... 24
2.6.1 Kofein (Zat Aktif) ................................................................ 24
2.6.2 Natrium Hialuronat (Peningkat Penetrasi Perkutan) ............ 26
2.6.3 Hidroksi Propil Metil Selulosa (Agen Pembentuk Gel)....... 28
2.6.4 Propilen Glikol (Humektan)................................................. 29
ix Universitas Indonesia

2.6.5 Parafin Cair (Minyak Mineral)............................................. 30
2.6.6 Tween 20 (Emulgator Hidrofilik) ........................................ 30
2.6.7 Span 60 (Emulgator Lipofilik) ............................................. 31
2.6.8 Butil Hidroksi Toluen (BHT)............................................... 31
2.6.9 Metil Paraben (Pengawet) .................................................... 32
2.6.10 Propil Paraben (Pengawet) ................................................. 32
2.6.11 Asam Sitrat Monohidrat (Pengatur pH) ............................. 33
2.6.12 Natrium Sitrat Dihidrat (Pengatur pH)............................... 33
2.6.13 Etil Alkohol (Pelarut) ......................................................... 34
2.6.14 Aqua Destilata (Pelarut) ..................................................... 34
BAB 3 METODE PENELITIAN.................................................................. 35
3.1 Lokasi dan Waktu.......................................................................... 35
3.2 Alat ................................................................................................ 35
3.3 Bahan............................................................................................. 36
3.4 Cara Kerja ..................................................................................... 36
3.4.1 Formulasi.............................................................................. 36
3.4.2 Pembuatan Sediaan Gel Topikal Antiselulit ........................ 37
3.4.2.1 Pembuatan Hidrogel (A1, A2, dan A3) .................. 37
3.4.2.2 Pembuatan Hidroalkoholik Gel (B1, B2, dan B3) .. 38
3.4.2.3 Pembuatan Emulsi Gel (C1, C2, dan C3) ............... 39
3.4.3 Evaluasi Sediaan Gel Topikal .............................................. 39
3.4.3.1 Pengamatan Organoleptis ....................................... 40
3.4.3.2 Pemeriksaan Homogenitas...................................... 40
3.4.2.3 Pengukuran pH ....................................................... 40
3.4.3.4 Pengukuran Diameter Globul Rata-Rata ................ 40
3.4.3.5 Penentuan Viskositas dan Sifat Alir ....................... 41
3.4.3.6 Pemeriksaan Konsistensi ........................................ 41
3.4.3.7 Uji Mekanik (Sentrifugasi) ..................................... 42
3.4.3.8 Uji Enam Siklus (Cycling Test) .............................. 42
3.5 Uji Penetrasi Secara In Vitro......................................................... 42
3.5.1 Pembuatan Dapar Fosfat ...................................................... 42
3.5.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kofein ..................................... 43
3.5.3 Uji Perolehan Kembali Kadar Kofein dalam Sediaan.......... 43
3.5.4 Uji Penetrasi Kofein ............................................................. 43
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN.......................................................... 45
4.1 Pembuatan Sediaan Gel Antiselulit Kofein................................... 45
4.1.1 Hidrogel (A) ......................................................................... 46
4.1.2 Hidroalkoholik Gel (B) ........................................................ 49
4.1.3 Emulsi Gel (C) ..................................................................... 49
4.2 Uji Evaluasi dan Stabilitas Fisik Sediaan Gel Antiselulit Kofein . 50
4.2.1 Pengamatan Organoleptis..................................................... 51
4.2.1.1 Stabilitas Fisik Berbagai Sediaan Gel Berdasarkan
Pengamatan Organoleptis pada Penyimpanan
Suhu Kamar (28o ± 2o C) ........................................ 51
Suhu Rendah (5o ± 2o C)......................................... 52
x Universitas Indonesia

Suhu Tinggi (40o ± 2o C) ........................................ 54
4.2.2 Pemeriksaan Homogenitas ................................................... 55
Pemeriksaan Homogenitas pada Penyimpanan
Suhu Kamar (28o ± 2o C) ........................................ 56
Suhu Rendah (5o ± 2o C)......................................... 56
Suhu Tinggi (40o ± 2o C) ........................................ 58
4.2.3 Pengukuran pH..................................................................... 58
Pengukuran pH pada Penyimpanan Suhu Kamar
(28o ± 2o C) ............................................................. 58
Pengukuran pH pada Penyimpanan Suhu Rendah
(5o ± 2o C) ............................................................... 60
Pengukuran pH pada Penyimpanan Suhu Tinggi
(40o ± 2o C) ............................................................. 62
4.2.4 Pengukuran Diameter Globul Rata-Rata.............................. 65
4.2.5 Penentuan Viskositas dan Sifat Aliran (Rheologi)............... 67
4.2.6 Uji Konsistensi ..................................................................... 73
4.2.7 Uji Mekanik (Sentrifugasi)................................................... 75
4.2.8 Uji Enam Siklus (Cycling Test)............................................ 78
4.3 Uji Penetrasi Secara In Vitro......................................................... 80
4.3.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kofein ..................................... 82
4.3.2 Perhitungan LOD dan LOQ ................................................. 84
4.3.3 Uji Prolehan Kembali Kofein............................................... 85
4.3.4 Uji Penetrasi Kofein ............................................................. 86
4.3.4.1 Sediaan Hidrogel (A) .............................................. 94
4.3.4.2 Sediaan Hidroalkoholik Gel (B) ............................. 97
4.3.4.3 Sediaan Emulsi Gel (C) .......................................... 101
4.3.4.4 Pengaruh Natrium Hialuronat (NaHA) terhadap
Penetrasi Kofein dalam Berbagai Bentuk Sediaan
Gel Antiselulit......................................................... 103
BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN......................................................... 105
5.1 Kesimpulan.................................................................................... 105
5.2 Saran.............................................................................................. 105
DAFTAR ACUAN .......................................................................................... 106
xi Universitas Indonesia

DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Struktur kulit manusia (telah diolah kembali) .......................... 5
Gambar 2.2 Jalur penetrasi obat melalui barier kulit (telah diolah
kembali) .................................................................................... 8
Gambar 2.3 Jalur penetrasi obat melalui stratum korneum: rute transeluler
dan rute interseluler (telah diolah kembali) .............................. 8
Gambar 2.4 Aktivitas peningkat penetrasi (telah diolah kembali) ............... 12
Gambar 2.5 Sel Difusi Franz ........................................................................ 15
Gambar 2.6 Kondisi kulit yang berselulit dan normal (telah diolah
kembali) .................................................................................... 17
Gambar 2.7 Modifikasi sel adiposit (telah diolah kembali) ......................... 18
Gambar 2.8 Struktur anatomi kulit yang berselulit (telah diolah kembali) .. 19
Gambar 2.9 Rumus struktur kofein (telah diolah kembali) .......................... 24
Gambar 2.10 Mekanisme kerja kofein dalam menghambat enzim
fosfodiesterase dan meningkatkan lipolisis (telah diolah
kembali...................................................................................... 25
Gambar 2.11 Rumus struktur NaHA (telah diolah kembali) .......................... 26
Gambar 2.12 Rumus struktur HPMC (telah diolah kembali) ......................... 29
Gambar 2.13 Rumus struktur propilen glikol (telah diolah kembali)............. 29
Gambar 2.14 Rumus struktur polioksi etilen sorbitan monolaurat atau
tween 20 (telah diolah kembali)................................................ 30
Gambar 2.15 Rumus struktur sorbitan monostearat atau span 60 (telah
diolah kembali........................................................................... 31
Gambar 2.16 Rumus struktur BHT (telah diolah kembali) ............................ 32
Gambar 2.17 Rumus struktur metil paraben atau nipagin (telah diolah
kembali) .................................................................................... 32
Gambar 2.18 Rumus struktur propil paraben atau nipasol (telah diolah
kembali) .................................................................................... 33
Gambar 2.19 Rumus struktur asam sitrat monohidrat (telah diolah kembali) 33
Gambar 2.20 Rumus struktur natrium sitrat dihidrat (telah diolah kembali) . 34
Gambar 2.21 Rumus struktur etil alkohol (telah diolah kembali) .................. 34
Gambar 4.1 Grafik hubungan antara waktu penyimpanan dengan pH
sediaan hidrogel formula A1 (a), formula A2 (b), dan formula
A3 (c) pada berbagai suhu ........................................................ 64
sediaan hidroalkoholik gel formula B1 (a), formula B2 (b),
dan formula B3 (c) pada berbagai suhu .................................... 64
sediaan emulgel formula C1 (a), formula C2 (b), dan formula
C3 (c) pada berbagai suhu ........................................................ 65
Gambar 4.4 Grafik rheologi sediaan hidrogel (A1) pada minggu ke-0 (a)
dan minggu ke-8 (b).................................................................. 70
dan minggu ke-8 (b).................................................................. 70
xii Universitas Indonesia

dan minggu ke-8 (b).................................................................. 70
Gambar 4.7 Grafik rheologi sediaan hidroalkoholik gel (B1) pada minggu
ke-0 (a) dan minggu ke-8 (b) .................................................... 71
Gambar 4.10 Grafik rheologi sediaan emulgel (C1) pada minggu ke-0 (a)
dan minggu ke-8 (b).................................................................. 72
dan minggu ke-8 (b).................................................................. 72
dan minggu ke-8 (b).................................................................. 72
Gambar 4.13 Foto hasil pengamatan organoleptis berbagai sediaan
hidrogel sebelum (kiri) dan sesudah (kanan) uji mekanik: A1
(kofein + HPMC); A2 (kofein + HPMC + NaHA); A3
(kofein + NaHA ........................................................................ 76
Gambar 4.14 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidroalkoholik
gel sebelum (kiri) dan sesudah (kanan) uji mekanik: B1
(kofein + HPMC); B2 (kofein + HPMC + NaHA); B3 (kofein
+ NaHA) ................................................................................... 77
Gambar 4.15 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan emulgel sebelum
(kiri) dan sesudah (kanan) uji mekanik: C1 (kofein +
HPMC); C2 (kofein + HPMC + NaHA); C3 (kofein + NaHA) 77
Gambar 4.16 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidrogel sebelum
(atas) dan sesudah (bawah) uji siklus (cycling test): A1
(kofein + HPMC); A2 (kofein + HPMC + NaHA); A3
(kofein + NaHA)....................................................................... 79
Gambar 4.17 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidroalkoholik
gel sebelum (atas) dan sesudah (bawah) uji siklus (cycling
test): B1 (kofein + HPMC); B2 (kofein + HPMC + NaHA);
B3 (kofein + NaHA) ................................................................. 79
Gambar 4.18 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan emulgel sebelum
(atas) dan sesudah (bawah) uji siklus cycling test: C1 (kofein
+ HPMC); C2 (kofein + HPMC + NaHA); C3 (kofein +
NaHA)....................................................................................... 80
Gambar 4.19 Spektrum serapan kofein 10 ppm dalam dapar fosfat pH 7,4
pada panjang gelombang (λ= 273,5 nm) .................................. 83
Gambar 4.20 Grafik kurva kalibrasi kofein dalam pelarut dapar fosfat pH
7,4 ............................................................................................. 84
Gambar 4.21 Kurva spektrum serapan kofein, nipagin, nipasol, dan BHT
pada panjang gelombang (λ= 273,5 nm) .................................. 87
Gambar 4.22 Profil jumlah kumulatif yang terpenetrasi pada sediaan
hidrogel A1 (a), hidrogel A2 (b), hidrogel A3 (c),
hidroalkoholik gel B1 (d), hidroalkoholik gel B2 (e),
hidroalkoholik gel B3 (f), emulgel C1 (g), emulgel C2 (h),
emulgel C3 (i) ........................................................................... 92
xiii Universitas Indonesia

Gambar 4.23 Diagram batang jumlah kumulatif (kiri) dan persentase
kofein yang terpenetrasi (kanan) pada berbagai sediaan gel .... 93
Gambar 4.24 Profil jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi (kiri) dan
persentase kofein yang terpenetrasi (kanan) pada sediaan
hidrogel selama 8 jam ............................................................... 95
Gambar 4.25 Profil jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi pada sediaan
hidrogel A1 (kiri) dan A2 (kanan) ............................................ 96
Gambar 4.26 Profil kecepatan penetrasi kofein (fluks) tiap jam pada
berbagai sediaan hidrogel ......................................................... 97
hidroalkoholik gel selama 8 jam ............................................... 98
hidroalkoholik gel B3 ............................................................... 99
Gambar 4.29 Profil kecepatan penetrasi kofein (fluks) tiap jam pada
berbagai sediaan hidroalkoholik gel ......................................... 100
emulgel selama 8 jam ............................................................... 101
hidroalkoholik gel B3 ............................................................... 102
xiv Universitas Indonesia

DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 3.1 Formula berbagai sediaan gel topikal antiselulit ............................ 37
Tabel 3.2 Penampilan fisik sediaan semisolid berdasarkan ukuran globul .... 41
Tabel 4.1 Data hasil pengamatan pH berbagai sediaan gel pada
penyimpanan suhu kamar (28o C ± 2o C) selama 8 minggu............ 59
penyimpanan suhu rendah (5o C ± 2o C) selama 8 minggu............. 61
penyimpanan suhu tinggi (40o C ± 2o C) selama 8 minggu ............ 62
Tabel 4.4 Data hasil pengukuran diameter globul rata-rata berbagai sediaan
gel pada penyimpanan suhu yang berbeda ..................................... 66
Tabel 4.5 Data hasil pengukuran viskositas dan sifat alir berbagai sediaan
gel minggu ke-0 dan minggu ke-8 pada kecepatan 2 rpm .............. 67
Tabel 4.6 Data hasil pengamatan uji penetrasi menggunakan penetrometer
berbagai sediaan gel pada minggu ke-0 dan ke-8 ........................... 73
Tabel 4.7 Data hasil pengukuran viskositas, penetrasi, dan yield value
berbagai sediaan gel pada suhu kamar (28o C ± 2o C) minggu ke-
0 dan ke-8........................................................................................ 75
Tabel 4.8 Data hasil pengamatan uji sentrifugasi berbagai sediaan gel pada
kecepatan 3750 rpm ........................................................................ 75
Tabel 4.9 Data kurva kalibrasi kofein dalam pelarut dapar fosfat pH 7,4
pada λ=273,5 nm............................................................................. 83
Tabel 4.10 Data perhitungan LOD dan LOQ kofein dalam pelarut dapar
fosfat pH 7,4 pada λ=273,5 nm....................................................... 84
Tabel 4.11 Data hasil perhitungan uji perolehan kembali (UPK) kofein pada
berbagai sediaan gel........................................................................ 85
Tabel 4.12 Data hasil perhitungan jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi
dalam dapar fosfat pH 7,4 pada berbagai sediaan gel..................... 88
Tabel 4.13 Data hasil perhitungan persentase (%) kofein yang terpenetrasi
Tabel 4.14 Data hasil perhitungan fluks atau kecepatan penetrasi kofein
Tabel 4.15 Hasil evaluasi berbagai sediaan gel pada minggu ke-0 dan hasil
uji penetrasi kofein secara in vitro.................................................. 93
xv Universitas Indonesia

DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Foto Alat ................................................................................... 114
Lampiran 2 Foto berbagai sediaan gel pada minggu ke-0............................ 116
Lampiran 3 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidrogel pada
suhu kamar (28o ± 2o C) selama 8 minggu................................ 117
Lampiran 4 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidroalkoholik
gel pada suhu kamar (28o ± 2o C) selama 8 minggu ................. 118
Lampiran 5 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan Emulgel pada
suhu kamar (28o ± 2o C) selama 8 minggu................................ 119
suhu rendah (5o ± 2o C) selama 8 minggu................................. 120
gel pada suhu rendah (5o ± 2o C) selama 8 minggu .................. 121
Lampiran 8 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan emulgel pada
suhu rendah (5o ± 2o C) selama 8 minggu................................. 122
suhu tinggi (40o ± 2o C) selama 8 minggu ................................ 123
gel pada suhu tinggi (40o ± 2o C) selama 8 minggu .................. 124
Lampiran 11 Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan emulgel pada
suhu tinggi (40o ± 2o C) selama 8 minggu ................................ 125
Lampiran 12 Foto ukuran diameter globul sediaan emulgel (C1) pada suhu
kamar (28o C ± 2o C)................................................................. 126
rendah (5o C ± 2o C) .................................................................. 127
tinggi (40o C ± 2o C).................................................................. 128
kamar (28o C ± 2o C)................................................................. 129
rendah (5o C ± 2o C) .................................................................. 130
tinggi (28o C ± 2o C).................................................................. 131
kamar (28o C ± 2o C)................................................................. 132
rendah (5o C ± 2o C) .................................................................. 133
tinggi (40o C ± 2o C).................................................................. 134
Lampiran 21 Tabel data hasil pengamatan organoleptis dan homogenitas
berbagai sediaan gel pada suhu kamar (28o C± 2o C) selama 8
minggu ...................................................................................... 135
xvi Universitas Indonesia

berbagai sediaan gel pada suhu rendah (5o C ± 2o C) selama 8
minggu ...................................................................................... 136
berbagai sediaan gel pada suhu tinggi (40o C ± 2o C) selama 8
minggu ...................................................................................... 137
Lampiran 24 Tabel data hasil pengukuran viskositas berbagai sediaan gel
pada penyimpanan suhu kamar (28o C ± 2o C) minggu ke-0 .... 138
Lampiran 25 Tabel data hasil pengukuran viskositas berbagai sediaan gel
pada penyimpanan suhu kamar (28o C ± 2o C) minggu ke-8 .... 141
Lampiran 26 Tabel data hasil pengamatan organoleptis setelah uji siklus
(cycling test) pada berbagai sediaan gel selama 6 siklus .......... 144
Lampiran 27 Tabel data hasil analisis kofein secara spektrofotometri pada
sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan emulsi gel ............... 145
Lampiran 28 Tabel data hasil evaluasi berbagai sediaan gel pada minggu
ke-0 dan hasil uji penetrasi kofein secara in vitro .................... 150
Lampiran 29 Perhitungan HLB emulsi pada sediaan emulgel ....................... 151
Lampiran 30 Contoh perhitungan diameter globul rata-rata sediaan
emulgel formula C1 pada suhu kamar minggu ke-0................. 152
Lampiran 31 Contoh perhitungan yield value dari pengukuran konsistensi
sediaan hidrogel formula A1..................................................... 153
Lampiran 32 Perhitungan LOD dan LOQ dari serapan kofein ...................... 154
Lampiran 33 Contoh perhitungan uji perolehan kembali (UPK) kofein
dalam sediaan hidrogel formula A1.......................................... 155
Lampiran 34 Contoh perhitungan jumlah kumulatif kofein yang
terpenetrasi dari sediaan hidrogel formula A1 pada menit ke-
60 .............................................................................................. 156
Lampiran 35 Contoh perhitungan persen jumlah kofein yang terpenetrasi
dari sediaan hidrogel formula A1 pada menit ke-60................. 158
Lampiran 36 Contoh perhitungan fluks atau laju penetrasi kofein dari
sediaan hidrogel formula A1 pada menit ke- 60....................... 160
Lampiran 37 Sertifikat analisis kofein anhidrat ............................................. 161
Lampiran 38 Sertifikat analisis sodium hialuronat......................................... 162
Lampiran 39 Sertifikat analisis HPMC .......................................................... 163
Lampiran 40 Sertifikat analisis propilen glikol.............................................. 164
Lampiran 41 Sertifikat analisis span 60 ......................................................... 165
Lampiran 42 Sertifikat analisis parafin cair ................................................... 166
Lampiran 43 Sertifikat analisis BHT.............................................................. 167
Lampiran 44 Sertifikat analisis alkohol 96% ................................................. 168
Lampiran 45 Sertifikat analisis nipagin.......................................................... 169
Lampiran 46 Sertifikat analisis nipasol .......................................................... 170
Lampiran 47 Sertifikat analisis NaOH ........................................................... 171
Lampiran 48 Sertifikat analisis tikus putih .................................................... 172
xvii Universitas Indonesia

1
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang

Dewasa ini, selulit merupakan salah satu masalah estetika yang umumnya
dihadapi oleh wanita, terutama yang memiliki kelebihan berat badan. Selulit
adalah suatu kondisi terlokalisasinya jaringan lemak subkutan dan jaringan
penghubung sehingga menyebabkan parutan kulit yang tidak rata atau dikenal
sebagai penampilan seperti kulit jeruk. (Barel, 2001; Hexsel, Prado, & Goldman,
2010; Lueder, Morel, Tiedtke, & Marks, 2011). Penampilan seperti kulit jeruk
yang ditemukan pada paha, lengan dan bagian terbuka lainnya akan
mengakibatkan kulit menjadi tidak indah. Hal ini akan membuat penderita merasa
malu dan tidak percaya diri sehingga berusaha untuk mengatasinya.
Selulit tidak dapat dihilangkan, namun terdapat cara untuk
menguranginya. Pertama, dengan menginhibisi lipogenesis sehingga dapat
mencegah penyimpanan lemak pada jaringan adiposa. Cara ini dapat dilakukan
dengan berolahraga dan diet. Kedua, melalui lipolisis dengan cara menggunakan
zat aktif yang dapat merusak jaringan lemak bawah kulit. Hal ini dapat dilakukan
dengan menggunakan produk kosmetik topikal yang mengandung zat aktif
antiselulit dengan atau tanpa pemijatan. Kombinasi diet, olahraga dan penggunaan
produk kosmetik topikal akan lebih efisien dalam mengatasi selulit (Barel, 2001;
Lueder, Morel, Tiedtke, & Marks, 2011).
Beberapa zat aktif antiselulit yang sering digunakan pada sediaan kosmetik
topikal, antara lain: turunan metilxantin (kofein, teofilin, aminofilin, teobromin),
senyawa penstimulasi kolagen (askorbat dan triterpen), senyawa peningkat
vaskularitas area selulit (minoksidil, nikotinat, escin, ivy, dan metil salisilat), dan
agonis adenilat siklase atau antifosfodiesterase (flanon dimerik) (Ghisalberti,
2005). Derivat metilxantin sebagai antiselulit bekerja dengan cara menghambat
lipogenesis dan meningkatkan lipolisis melalui penghambatan aktivitas
antilipolisis dari adenosin (inhibitor fosfodiesterase). Senyawa derivat metilxantin
yang paling berguna dan aman adalah kofein, umumnya digunakan pada
1 Universitas Indonesia

2
konsentrasi 1-2% (Cho, Richardson, Burger, Brinker, & Rerek, 1997; Hexsel,
Prado, & Goldman, 2010).
Terdapat berbagai jenis sediaan kosmetik topikal antiselulit yang populer
di pasaran, antara lain: krim, losion, gel, serum, dan sebagainya (Begoun, 2006).
Penggunaan sediaan topikal memberikan beberapa keuntungan, seperti
meningkatkan kepatuhan dan kenyamanan pasien serta akses menembus membran
kulit yang lebih mudah. Selain itu, dengan mengaplikasikan obat secara langsung
pada tempat pemberian diharapkan efek samping yang berkaitan dengan toksisitas
sistemik dapat diminimalisir (Brown & Jones, 2005).
Stratum korneum merupakan barier atau penghalang penetrasi zat aktif
antiselulit dalam mencapai lapisan subkutan. Oleh karena itu, dibutuhkan suatu
pembawa obat atau peningkat penetrasi (skin enhancer) yang dapat mengubah
struktur barier tersebut sehingga zat aktif dapat lebih mudah melewatinya. Salah
satu senyawa peningkat penetrasi perkutan yang akhir-akhir ini sering diteliti
adalah natrium hialuronat. Senyawa ini tergolong aman dan dapat didegradasi
oleh tubuh (Brown & Jones, 2005; Hexsel, Prado, & Goldman, 2010).
Natrium hialuronat (HA), bentuk garam dari asam hialuronat (HA),
menunjukkan penghantaran yang baik dan menarik bagi zat aktif yang digunakan
secara topikal dan dapat berpenetrasi hingga ke lapisan dermis. NaHA merupakan
polimer hidrofilik derivat polisakarida yang memiliki kemampuan mengikat air
sehingga dapat menghidrasi lapisan stratum korneum dan melembabkannya.
Hidrasi oleh NaHA akan mengubah susunan sel-sel stratum kornem yang tersusun
rapat menjadi lebih renggang. Dengan demikian, permeabilitas kulit terhadap
molekul-molekul obat meningkat sehingga penetrasi obat juga meningkat (Bissett,
2006; Brown & Jones, 2005; Hoekstra, 2011).
Terdapat penelitian yang menunjukkan bahwa NaHA pada formulasi obat
dengan zat aktif diklofenak dapat membantu penetrasi obat melintasi barier terluar
kulit. (Brown & Jones, 2005). Penelitian lainnya menunjukkan bahwa penetrasi
zat aktif antiselulit, contohnya golongan metilxantin (kofein dan teofilin) pada
bentuk sediaan gel lebih baik dibanding bentuk sediaan krim dan salep
(Anggraeni, 2008; Hadyanti, 2008; Novitasari, 2008). Oleh karena itu, perlu
dilakukan penelitian untuk mengetahui pengaruh NaHA terhadap penetrasi kofein
Universitas Indonesia

3
sebagai zat aktif antiselulit pada berbagai jenis sediaan gel. Tersedia 3 tipe gel
yang akan diteliti oleh peneliti, yaitu:
a. Hidrogel: gel dengan komponen air yang lebih banyak
b. Hidroalkoholik gel: gel dengan komponen alkohol 40-60%
c. Emulgel: pencampuran bentuk emulsi dan gel dengan perbandingan (1:1)
Ketiga sediaan gel tersebut memiliki mekanisme yang berbeda dalam
menghantarkan kofein menuju lapisan subkutan. Sediaan hidrogel memiliki
kandungan air terbanyak dibandingkan sediaan hidroalkoholik gel dan emulgel
sehingga dapat membantu penetrasi perkutan dengan cara menghidrasi kulit.
Sediaan hidroalkoholik gel yang mengandung etanol sebanyak 40% membantu
penetrasi perkutan dengan cara mengekstraksi lemak atau fluidisasi lipid. Sediaan
emulgel memiliki keuntungan yang dimiliki oleh emulsi dan gel. Adanya fase air
dapat membantu meningkatkan penetrasi dengan cara menghidrasi kulit dan
adanya fase minyak dapat mencegah terjadinya penguapan pada kulit sehingga
proses hidrasi menjadi lebih optimal.
Pengujian penetrasi kofein sebagai zat aktif antiselulit ke dalam jaringan
subkutan dilakukan secara in vitro menggunakan sel difusi Franz. Metode ini
dapat menggambarkan absorbsi in vivo karena dosis donor tepat dan dapat
dibandingkan dengan konsentrasi persentisetimeter persegi dalam penggunaan
klinis. Selain itu, bagian donor membran tidak perlu dibasahi (Hanson, Schuber,
& Moller, 1991).
1.2 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh natrium
hialuronat terhadap penetrasi kofein dalam sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel,
dan emulsi gel.

4
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Kulit
Kulit merupakan suatu organ besar yang berlapis-lapis. Pada orang
dewasa, beratnya sekitar 8 pon tidak termasuk lemak. Kulit menutupi permukaan
dengan luas lebih dari 20.000 cm2 dan memiliki bermacam fungsi serta kegunaan.
Kulit berfungsi sebagai pembatas terhadap serangan fisika dan kimia. Kulit juga
berfungsi sebagai termostat dalam mempertahankan suhu tubuh, melindungi tubuh
dari serangan mikroorganisme dan serangan ultraviolet, serta berperan dalam
mengatur tekanan darah (Bernard Idson, 2008).
Kulit adalah organ terbesar tubuh dengan berat sekitar 10% total massa
tubuh. Sebagai bagian terluar tubuh, kulit memiliki 2 fungsi utama, yakni fungsi
proteksi dan komunikasi. Fungsi komunikasi didasarkan pada neuroreseptor,
transmisi sinyal biokimia, serta pigmentasi, sedangkan fungsi protektif adalah
mencegah hilangnya substansi tubuh dan penetrasi senyawa asing ke dalam tubuh.
Kulit juga melindungi tubuh dari kondisi lingkungan seperti kondisi fisik (radiasi,
abrasi), biologis (mikroorganisme) atau faktor kimiawi (senyawa toksik). Selain
itu, kulit dengan kelenjar sebasea dan keringat, folikel rambut, dan sirkulasi
sistemik memungkinkan termoregulasi untuk memastikan fungsi normal
biokimiawi tubuh (Grams & Bouwstra, 2005).
Kulit terbagi atas 2 lapisan utama, yaitu:
a) Epidermis (kulit ari), sebagai lapisan kulit paling luar
b) Dermis (korium, kutis, kulit jangat)
Di bawah dermis terdapat subkutis atau jaringan lemak bawah kulit (Tranggono &
Latifah, 2007).

5
Kulit Manusia
Rambut
Stratum korneum
Lapisan Sel granular
Lapisan sel spina
Lapisan sel basal
Kelenjar minyak
Otot penggerak rambut
Kelenjar minyak
Saraf
K
Folikel rambut
Kolagen dan Serat elastin
Arteri
Vena
Jaringan lemak (adiposa)
(1) Epidermis, (2) Dermis, (3) Lapisan subkutan
[Sumber: Melbourne Dermatology, 2009]
Gambar 2.1. Struktur kulit manusia (telah diolah kembali)
2.1.1 Epidermis (Tranggono & Latifah, 2007)

Epidermis merupakan bagian kulit yang menjadi fokus karena kosmetik
digunakan pada lapisan epidermis. Walaupun ada beberapa kosmetik yang
digunakan sampai ke dermis, penampilan epidermis tetap menjadi tujuan utama.
Ketebalan epidermis berbeda-beda pada berbagai bagian tubuh, yang paling tebal
berukuran 1 mm, seperti pada telapak kaki dan tangan. Lapisan yang tipis
berukuran 0,1 mm terdapat pada kelopak mata, pipi, dahi, dan perut.
Sel-sel epidermis disebut keratinosit. Struktur kimia dari sel-sel epidermis
manusia memiliki komposisi sebagai berikut:
a) Protein 27%
b) Lemak 2%
c) Garam mineral 0,5%
d) Air dan bahan-bahan larut air 70,5%
Para ahli histologis membagi epidermis menjadi 5 lapisan, yaitu:
a) Lapisan tanduk (stratum korneum)
Merupakan lapisan sel yang pipih, mati, tidak memiliki inti, tidak mengalami
proses metabolisme, tidak berwarna, dan sangat sedikit mengandung air.
Lapisan ini sebagian besar terdiri atas keratin, suatu protein yang tidak larut

6
dalam air dan sangat resisten terhadap bahan-bahan kimia. Permukaan stratum
korneum dilapisi oleh suatu lapisan pelindung lembap tipis yang bersifat asam,
disebut mantel asam kulit.
b) Lapisan jernih (stratum lusidum)
Lapisan yang tipis dan terletak di bawah stratum korneum. Lapisan ini jernih,
mengandung eleidin serta tampak jelas pada telapak tangan dan telapak kaki.
Antara stratum lusidum dan stratum granulosum terdapat lapisan keratin tipis
yang disebut barier Rein yang tidak dapat ditembus.
c) Lapisan berbutir-butir (stratum granulosum)
Lapisan ini tersusun oleh sel-sel keratinosit yang berbentuk poligonal, berbutir
kasar, berinti mengkerut. Stoughton menemukan bahwa di dalam butir
keratohialin terdapat bahan logam, khususnya tembaga yang menjadi
katalisator proses pertandukan kulit.
d) Lapisan malphigi (stratum spinosum)
Lapisan ini memiliki sel yang berbentuk kubus dan seperti berduri. Intinya
besar dan oval. Setiap sel berisi filamen-filamen kecil yang terdiri atas
serabut-serabut protein.
e) Lapisan basal (stratum germinativum)
Lapisan ini merupakan lapisan terbawah epidermis. Di dalam stratum
germinativum juga terdapat sel-sel melanosit, yaitu sel yang tidak mengalami
keratinasi dan fungsinya hanya membentuk pigmen melanin dan
memberikannya kepada sel-sel keratinosit melalui dendrit-dendritnya
2.1.2 Dermis (Tranggono & Latifah, 2007)

Berbeda dengan epidermis yang tersusun oleh sel-sel dalam berbagai
bentuk dan keadaan, dermis terdiri atas serabut kolagen dan elastin, yang berada
dalam substansi yang bersifat koloid dan terbuat dari gelatin mukopolisakarida.
Serabut kolagen dapat mencapai 72% dari keseluruhan berat kulit manusia tanpa
lemak. Di dalam dermis terdapat adneksa-adneksa kulit, seperti folikel rambut,
papila rambut, kelenjar keringat, saluran keringat, kelenjar sebasea, otot penegak
rambut, ujung pembuluh darah, ujung syaraf, dan juga sebagian serabut lemak
yang terdapat pada lapisan lemak bawah kulit (subkutis).

7
2.1.3 Subkutan (Grams & Bouwstra, 2005)

Jaringan subkutan berada di bawah dermis. Jaringan ini merupakan
kumpulan dari sel lemak yang dihubungkan oleh suatu serat kolagen sehingga
berfungsi sebagai barier termal, penyimpanan energi, serta pelindung mekanik
untuk tubuh.
2.2 Penetrasi Obat Melalui Kulit

Penetrasi obat melalui kulit dapat secara difusi melalui 3 jalur potensial
(Ansel, 1989; Benson, 2005; Pittermann, 2007), yaitu:
a) Melintasi stratum korneum (transepidermal): rute transeluler (menyebrangi
sel) dan rute interseluler (antarsel)
b) Melalui folikel rambut dengan kelenjar minyak
c) Melalui kelenjar keringat
Belum ada model eksperimental yang cocok untuk menggambarkan
kepentingan relatif tiap jalur tersebut secara terpisah. Percobaan in vitro
cenderung menggunakan kulit yang dihidrasi atau membran epidermis sehingga
jalur appendagealnya tertutup melalui pembengkakan terkait dengan proses
hidrasi. Appendageal memiliki fraksi permeasi sekitar 0,1% sehingga
kontribusinya kecil terhadap fluks obat. Asumsi ini menyebabkan teknik
peningkat penetrasi difokuskan untuk meningkatkan sistem transportasi melintasi
stratum korneum dan bukan appendageal (Benson, 2005).
Zat aktif yang bersifat hidrofilik biasanya berpenetrasi melalui rute
transeluler, sedangkan zat aktif yang bersifat lipofilik menembus stratum korneum
melalui rute interseluler. Bentuk molekul lebih banyak menembus stratum
korneum melalui kedua rute tersebut. Jalur interseluler merupakan jalur utama
penetrasi zat aktif melalui kulit (Benson, 2005).

8
(b) (a) (c)
Keterangan:
(a) Melintasi stratum korneum (transepidermal)
(b) Melalui folikel rambut dengan kelenjar sebasea
(c) Melewati kelenjar keringat
[Sumber: Pittermann, 2007]
Gambar 2.2. Jalur penetrasi obat melalui barier kulit (telah diolah kembali)
Rute transeluler Rute interseluler
Sel tanduk Matriks lemak
[Sumber: Pittermann, 2007]
Gambar 2.3. Jalur penetrasi obat melalui stratum korneum: rute transeluler dan
rute interseluler (telah diolah kembali)
2.2.1 Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Penetrasi Perkutan

Faktor yang mempengaruhi penetrasi atau absorpsi obat perkutan, antara
lain (Ansel, 1989; Barret, 1969):
a) Perbedaan spesies
Kulit manusia kurang permeabel dibandingkan kulit tikus, babi, kelinci, atau
hewan lainnya

9
b) Perbedaan usia dan jenis kulit

Kulit bayi lebih permeabel dibandingkan manusia dewasa. Jenis kulit yang
tebal seperti telapak tangan atau telapak kaki akan memperlambat absorpsi.
c) Temperatur kulit dan sirkulasi perifer
Laju penetrasi obat bergantung pada kondisi temperatur lingkungannya.
Kondisi sirkulasi perifer cukup mempengaruhi laju absorpsi obat.
Vasokonstriksi lokal akan memperlambat obat hilang dari kulit.
d) Kondisi kulit
Kulit yang telah rusak atau pecah memungkinkan obat dan bahan asing
lainnya langsung masuk ke jaringan subkutan.
e) Tempat pemberian, kontak waktu dengan sediaan, frekuensi pemberian
Penetrasi perkutan lebih besar apabila obat dipakai pada kulit dengan lapisan
tanduk yang tipis. Tempat pemberian berkaitan dengan derajat absorpsi. Pada
umumnya, semakin lama waktu pemakaian obat menempel pada kulit,
semakin banyak kemungkinan obat diabsorpsi. Namun, perubahan hidrasi
kulit atau penjenuhan kulit oleh obat akan menghambat absorpsi.
f) Derajat hidrasi kulit
Hidrasi kulit merupakan fakta yang paling penting dalam absorpsi perkutan.
Hidrasi stratum korneum meningkatkan derajat lintas semua obat yang
mempenetrasi kulit. Peningkatan absorpsi disebabkan melunaknya jaringan
dan pengaruh “bunga karang” dengan penambahan ukuran pori-pori yang
mempercepat bahan dapat melaluinya.
g) Perlakuan kulit
Pada umumnya, menggosokkan atau mengoleskan saat pemakaian pada kulit
akan meningkatkan jumlah obat yang diabsorpsi dan semakin lama
mengoleskan dengan digosok-gosok, semakin banyak pula obat yang
diabsorpsi.
h) Karakteristik fisik dari zat yang berpenetrasi
Beberapa derajat kelarutan obat baik dalam minyak dan air dipandang penting
untuk efektivitas penetrasi perkutan. Zat terlarut dengan berat molekul di
bawah 800 sampai 100 dengan kelarutan yang sesuai dalam minyak mineral
dan air (> 1 mg/ml) dapat meresap ke dalam kulit.

10
i) Hubungan antara pembawa dengan zat yang berpenetrasi

Obat yang dicampurkan dalam pembawa tertentu harus bersatu dengan
permukaan kulit dalam konsentrasi yang cukup. Konsentrasi obat umumnya
merupakan faktor yang penting. Jumlah obat yang terpenetrasi perunit luas
permukaan setiap periode waktu, bertambah sebanding dengan bertambahnya
konsentrasi obat dalam suatu pembawa. Obat yang diserap akan semakin
banyak apabila dipakai pada permukaan yang luas. Bahan obat harus
mempunyai suatu daya tarik fisiologis yang lebih besar pada kulit
dibandingkan pembawanya, supaya obat dapat meninggalkan pembawa
menuju kulit.
2.2.2 Peningkat Penetrasi Perkutan

Untuk mencapai lapisan kulit terdalam, maka sediaan topikal
membutuhkan suatu peningkat penetrasi perkutan untuk melintasi stratum
korneum, yang dikenal sebagai skin penetration enhancer. Peningkat penetrasi
perkutan tersebut diharapkan memiliki karakteristik sebagai berikut (Williams &
Barry, 2007):
a) Tidak memberikan farmakologi pada tubuh, baik secara lokal maupun
sistemik
b) Tidak mengiritasi atau menimbulkan reaksi alergi
c) Bekerja dengan cepat mencapai onset
d) Bekerja secara reversibel pada membran kulit
e) Membantu penetrasi obat ke dalam kulit, namun mencegah keluarnya senyawa
endogen
f) Memiliki kompatibilitas yang baik dengan obat dan eksipien lain dalam
formula
g) Memberikan kenyamanan pada kulit, tidak berbau atau berwarna
Teknik yang digunakan untuk meningkatkan penetrasi obat pada kulit
terbagi menjadi 2 cara (Benson, 2005; Williams & Barry, 2007), yaitu:
a) Modifikasi formulasi (berdasarkan pembawa atau obat), misalnya: pemilihan
obat, interaksi antar obat dan pembawa, pembentukan kompleks, liposom,
vesikel dan partikel.

11
b) Modifikasi stratum korneum, misalnya: hidrasi, fluidisasi lipid, interaksi

dengan keratin, dan peningkatan partisi obat.
Peningkat penetrasi yang berkerja di stratum korneum memiliki
kemungkinan mekanisme sebagai berikut (Williams & Barry, 2007):
a) Memodifikasi domain lipid interseluler untuk mengurangi resistensi barier
lipid bilayer. Perusakan lipid bilayer dapat bersifat homogen, yakni saat
peningkat penetrasi terdistribusi secara merata dalam lipid bilayer. Namun,
perusakannya dapat juga bersifat heterogen, yakni terkonsentrasi dalam
domain lipid bilayer tertentu. Contoh senyawa peningkat penetrasi yang
bekerja mempengaruhi lipid adalah asam oleat, terpen, azon, dimetilsulfoksida
(DMSO). Fenomena yang terjadi dapat berupa fluidisasi, perubahan polaritas,
pemisahan fase atau ekstraksi lipid.
b) Mengubah sifat kelarutan stratum korneum, ataupun memodifikasi partisi
obat, sebagai koenhancer ataupun kosolven dalam jaringan. Beberapa
peningkat penetrasi merupakan pelarut yang baik sehingga mungkin
meningkatkan jumlah permean dalam kulit.
c) Mempengaruhi desmosom yang menjaga kohesi antara korneosit dan struktur
protein lainnya, mengarahkan pada pemisahan sel stratum korneum.
d) Berkerja pada keratin intraseluler stratum korneum, mendenaturasi, ataupun
memodifikasi konformasinya yang menyebabkan pembengkakan, hidrasi dan
vakuolisasi tambahan.

12
Peningkat
(a) penetrasi
Peningkat penetrasi
bersifat lipid
bersifat polar
Fluidisasi
Kepala polar
Ekstraksi Lipid Fluidisasi

Pool air Ekor
lipid
Lipid bilayer
interseluler
Gangguan
Pemisahan fase polaritas
Perubahan
Misel
Pemisahan fase
Susunan rapat
(b) stratum korneum (c) Denaturasi
keratin
Fiber keratin
Retakan
Vakuola
Susunan renggang
stratum korneum
Keterangan:
(a) Berkerja pada lipid intraseluler
(b) Kerja pada desmosom dan struktur protein
(c) Kerja pada korneosit
[Sumber: Williams & Barry, 2007]
Gambar 2.4. Aktivitas peningkat penetrasi (telah diolah kembali)

13
2.2.2.1 Hidrasi (Benson, 2005; Forster, Bolzinger, Fessi, & Briancon, 2009)
Peningkat penetrasi dengan mekanisme hidrasi banyak digunakan sebagai
metode peningkat penetrasi yang paling aman, baik untuk senyawa hidrofilik
maupun lipofilik. Kandungan air stratum korneum adalah sekitar 15 - 20 % bobot
kering, namun dapat bervariasi bergantung kelembaban lingkungan. Penambahan
air dalam stratum korneum dapat mengubah kelarutan zat yang akan dipermeasi
(permean) sehingga mengubah sifat partisi dari pembawanya ke dalam membran.
Selain itu, peningkatan hidrasi pada kulit dapat membengkakkan dan membuka
struktur stratum korneum yang menghasilkan peningkatan penetrasi walaupun hal
tersebut belum dapat dibuktikan secara eksperimental. Scheuplein dan Blank
menunjukkan bahwa koefisien difusi alkohol pada kulit terhidrasi adalah sekitar
10 kali lipat dibandingkan yang teramati pada kulit kering. Hidrasi dapat
ditingkatkan melalui suatu oklusi dengan pelapisan plastik, parafin, minyak dan
wax sebagai komponen dari salep dan emulsi w/o yang mencegah hilangnya air
transepidermal; serta emulsi o/w yang memberikan air.
2.2.2.2 Disrupsi Lipid atau Fluidisasi (Benson, 2005; Forster, Bolzinger, Fessi, &
Briancon, 2009)
Beberapa peningkat penetrasi seperti azon, DMSO, alkohol, asam lemak,
dan terpen menunjukkan mekanisme merusak atau memfluidisasi struktur lipid
stratum korneum. Koefisien difusi obat akan meningkat ketika molekul-molekul
peningkat penetrasi membentuk rongga-rongga mikro dalam lipid bilayer
sehingga meningkatkan fraksi volume bebas. Pada beberapa kasus, peningkat
penetrasi berpenetrasi dan bercampur secara homogen dengan lipid.
Beberapa pelarut seperti DMSO dan alkohol dapat mengekstraksi lemak
sehingga membentuk saluran air dalam stratum korneum yang akan meningkatkan
permeabilitas. Tetapi, beberapa peningkat penetrasi yang bekerja pada lipid
bilayer juga dapat menyebabkan iritasi kulit sehingga membatasi penggunaannya
secara klinis.

14
2.2.2.3 Interaksi dengan Keratin (Benson, 2005)

Selain merusak susunan lemak pada stratum korneum, senyawa kimia
seperti DMSO, urea, dan surfaktan juga berinteraksi dengan keratin di dalam
korneosit. Penetrasi surfaktan ke dalam matriks intraseluler stratum korneum
diikuti oleh interaksi dan ikatan filamen keratin. Hal ini mengakibatkan terjadinya
kerusakan di dalam korneosit sehingga koefisien difusi meningkat dan
permeabilitas juga meningkat. Molekul tersebut juga dapat memodifikasi peptida
atau protein dalam domain lipid bilayer sehingga meningkatkan permeabilitasnya.
2.2.2.4 Peningkatan Partisi dan Kelarutan Obat dalam Stratum Korneum (Benson,
2005)
Beberapa solven (contoh: etanol, propilenglikol, N-metilpirolidon)
meningkatkan partisi dan kelarutan permean (zat aktif) dalam stratum korneum.
Etanol merupakan kosolven sekaligus senyawa peningkat penetrasi pertama yang
dikenal pada sistem transdermal. Kemampuan solven dalam mengubah parameter
kelarutan akan meningkatkan solubilitas permean dalam stratum korneum serta
kecepatan penetrasinya.
2.3 Uji Penetrasi secara In Vitro Menggunakan Sel Difusi Franz

Dewasa ini, penghantaran obat melalui kulit semakin diminati, baik untuk
tujuan efek lokal untuk kulit yang berpenyakit (penghantaran topikal) dan juga
untuk penghantaran sistemik (penghantaran transdermal). Permeasi zat kimia
melalui kulit dapat diukur melalui teknik in vivo maupun in vitro. Teknik in vitro
sering digunakan karena kesederhanaan kondisi eksperimen. Terdapat dua
pendekatan dasar untuk mengukur permeasi kulit secara in vitro, yaitu sel-sel
statik atau tidak bergerak dan sel yang melalui aliran. Salah satu desain uji
permeasi in vitro statik adalah sel difusi Franz. (Bosman, Lawant, Avegaart,
Ensing, & Zeeuw, 1996)
Teknik in vitro ini dilakukan untuk mengkaji penetrasi kulit, meliputi
penggunaan beberapa macam sel difusi dengan kulit binatang atau manusia yang
terikat pada suatu tempat, dan senyawa-senyawa yang lewat dari permukaan

15
epidermis ke tempat cairan diukur. Banyaknya penetrasi zat kimia dalam

konsentrasi tertentu dapat ditentukan dengan menggunakan satu atau lebih teknik
analisis kimia atau fisika (Bernard Idson, 2008).
Sel Franz secara teori dikembangkan untuk mensimulasikan absorbsi in
vivo karena dosis donor tepat dan dapat dibandingkan dengan konsentrasi
persentisetimeter persegi dalam penggunaan klinis. Selain itu, bagian donor
membran tidak perlu dibasahi (Hanson, Schuber, & Moller, 1991).
air keluar
air masuk
Keterangan:
A: Kompartemen donor
B: Kompartemen reseptor
C: Membran
D: Cincin O
E: Pelapis air
F: Batang pengaduk
G:Tempat pengambilan sampel
[Sumber: Bosman, Lawant, Avegaart, Ensing, & Zeeuw, 1996]
Gambar 2.5. Sel difusi Franz
Sel difusi Franz (Gambar 2.8) terdiri atas kompartemen donor (A) dan
kompartemen reseptor (B). Membran (C) diletakkan di antara kompartemen donor
dan reseptor. Cincin O (D) digunakan untuk menahan atau memposisikan
membrane. Kompartemen reseptor diisi dengan dapar dan dijaga suhunya pada
37oC dengan mengalirkan air melalui suatu pelapis air eksternal (E). Setelah 30
menit, membran dengan larutan reseptor berada dalam kesetimbangan, sejumlah

16
larutan obat diletakkan pada kompartemen donor menggunakan pipet. Lalu,

kompartemen donor ditutup dengan parafilm atau suatu penutup untuk
menghindari penguapan dari pelarut. Larutan reseptor diaduk secara
berkesinambungan menggunakan batang magnet (F) yang berputar pada
kecepatan tertentu. Sejumlah larutan sampel pada reseptor diambil melalui suatu
tempat pengambilan sampel (G) pada berbagai interval waktu. Sel-sel diisi
kembali dengan larutan reseptor untuk menjaga volume larutan reseptor tetap
konstan selama melakukan percobaan. Percobaan dilakukan selama kurang lebih
24-25 jam (Bosman, Lawant, Avegaart, Ensing, & Zeeuw, 1996).
2.4 Selulit
Dewasa ini, selulit merupakan salah satu masalah estetika yang
mengakibatkan kulit menjadi tidak indah. Selulit adalah kondisi terlokalisasinya
jaringan lemak dan jaringan penghubung dengan penampakan seperti kulit jeruk.
Pada kulit yang berselulit, kedua jaringan tersebut mengalami perubahan pada
saluran limfatik dan darah. Selulit lebih banyak mempengaruhi wanita
dibandingkan pria karena struktur jaringan lemak pada wanita lebih besar dan
mengkotak. Umumnya, selulit mulai teramati pada usia remaja ataupun dewasa
dan semakin diperparah dengan pertambahan usia. Secara klinis, selulit ditandai
oleh perubahan pada permukaan kulit, terutama pada paha dan bokong sehingga
memberikan penampakan seperti kulit jeruk atau matras. Selain itu, selulit juga
dapat ditemukan pada bagian lengan atas, lutut, leher bagian belakang, dan kaki
bagian bawah (Barel, 2001).

17
a b
(a) (b)
Keterangan : a = Kondisi kulit yang berselulit

b = Kondisi kulit yang normal
[Sumber: Park Avenue Aesthetics, 2011 dan Atlas, 2008]
Gambar 2.6. Kondisi kulit yang berselulit dan normal (telah diolah kembali)
2.4.1 Penyebab Selulit (Hexsel, Prado, & Goldman, 2010)

Selulit dapat disebabkan oleh berbagai faktor, salah satunya adalah
lipodistropi lemak. Beberapa hipotesis yang berkaitan dengan hal ini, antara lain:
a) Diferensiasi seksual dalam distribusi histologis lobul-lobul lemak di daerah
subkutan, baik pada wanita maupun pria. Perbedaan antara kedua jenis
kelamin tersebut terletak pada struktur jaringan lemaknya. Lobul-lobul lemak
pada wanita lebih besar dan berbentuk kotak, sedangkan pada pria lobul-lobul
lemaknya lebih kecil dan berbentuk diagonal.
b) Perubahan pada jaringan mikrovaskular, terutama sirkulasi darah vena pada
jaringan lemak sehingga mengakibatkan penebalan vena.
c) Pengeluaran cairan plasma pada jaringan penghubung subkutan yang
mengakibatkan edema non inflamasi.
d) Perubahan jaringan retikular fibrilar di sekitar pembuluh darah dan adiposa
yang menyebabkan fibrosklerosis atau terjadinya pengerasan dan pengurangan
mobilitas serat.

18
e) Perubahan senyawa dan reaksi metabolik pada penyusun matriks interstisial

(proteoglikan). Contohnya seperti peningkatan keasaman jaringan, perubahan
mekanisme reduksi-oksidasi, penurunan aliran darah arteri, pengurangan serat
kolagen, dan kerusakan sistem akson-limfosit sistem saraf fibroblas-adiposit.
f) Modifikasi dan hipertropi adiposa. Hipertropi jaringan lemak umumnya
berkaitan dengan timbulnya selulit, walaupun selulit tidak selalu berhubungan
dengan obesitas (orang kurus juga dapat menunjukkan gejala selulit).
(a) (b) (c)
Keterangan: (a) Pre-adiposit

(b) Adiposit dewasa
(c) Hipertropi adiposit
[Sumber: Espace Beaute, 2009]
Gambar 2.7. Modifikasi sel adiposit (telah diolah kembali)
Gabungan dari perubahan dan hipertropi adiposa, perubahan pada jaringan

penghubung fibrilar, serta pada jaringan vena mikrovaskular dapat memicu
terjadinya selulit. Selain lipodistropi lemak, terdapat faktor-faktor lain yang
berkaitan dengan terjadinya selulit, antara lain:
a) Meningkatnya penguapan air dan berkurangnya asam hialuronat, proteoglikan,
dan glikosaminoglikan sehingga semua fungsi matriks ekstraseluler
berkurang.
b) Perubahan struktur penghubung dan sistem kolagen, perkembangan patologi
lipedema.
c) Kerusakan sistem lipolisis.
d) Hipoksia pada bagian permukaan kulit.

19
Epidermis
Dermis
Lapisan lemak
Subkutan
Pria Wanita
Epidermis
Dermis
Hipodermis
Lapisan lemak subkutan
Lapisan lemak
cadangan
Lapisan lemak normal Lapisan lemak tidak normal
[Sumber: Espace Beaute, 2009]
Gambar 2.8. Struktur anatomi kulit yang berselulit (telah diolah kembali)
2.4.2 Gejala Klinis Visual dan Fisik Selulit (Hexsel, Prado, & Goldman, 2010)
Gejala-gejala lipodistropi yang terlihat saat melakukan pemeriksaan klinis
selulit adalah:
a) Penampakan kulit jeruk dengan pengamatan visual biasa atau setelah mencubit
kulit.
b) Palpasi mendalam pada kulit menunjukkan perbedaan jaringan lemak, seperti
adanya nodula-nodula mikro dan makro, serta fibrosklerosis.
c) Suhu permukaan kulit yang tidak umum (adanya titik-titik dingin).
d) Kadang terdapat nodula-nodula subkutan yang dapat menyebabkan sakit
melalui palpasi mendalam.
e) Pada umumnya, sulit untuk mendeteksi selulit dengan pemeriksaan visual
serta palpasi pada tahap pertama. Kulit jeruk tidak timbul secara permanen
dan hanya terdapat setelah mencubit kulit. Gejala klinis yang lebih jelas akan
muncul pada tahap-tahap selanjutnya. Contohnya seperti kulit jeruk yang
permanen, area kulit yang terasa dingin, perbedaan mobilitas jaringan lemak,
dan peningkatan sensibilitas kulit. Oleh karena itu, diperlukan adanya metode
yang lebih sensitif dan aman untuk mendeteksi dan mengevaluasi selulit pada

20
tahap awal, serta untuk mengevaluasi berbagai perawatan kosmetik yang

objektif.
2.4.3 Tahapan Pembentukan Selulit (Smith, 1996)

Selulit terbentuk melalui tiga tahap, antara lain:
a) Tahap Pertama
Pembuluh darah pada daerah berselulit berdilatasi dan mengalami kebocoran.
Pada tahap ini, pengaruhnya kecil terhadap permukaan kulit. Pengobatan yang
lebih efektif adalah dengan memperbaiki integritas pembuluh darah dan untuk
mengurangi kelebihan cairan.
b) Tahap Kedua
Metabolisme sel-sel lemak umumnya dipengaruhi oleh peningkatan jumlah
dan ukuran sel-sel lemak yang berlebih. Sel-sel lemak yang berlebih tersebut
bergabung membentuk globul-globul lemak. Lalu, integritas pembuluh
terganggu, gangguan pada dermis dan epidermis akan semakin terlihat.
Contoh gangguan tersebut adalah menipisnya epidermis, vaskularisasi dermis
yang buruk, permukaan kulit menjadi kasar dan keabu-abuan karena sirkulasi
mikro yang buruk serta terjadi heterogenisitas permukaan. Gangguan tersebut
akan menyebabkan terjadinya parutan tidak rata.
c) Tahap Ketiga
Pada tahap ketiga mulai terlihat adanya pemecahan pembuluh darah mikro
yang disertai oleh akumulasi cairan, peningkatan sintesis lemak, dan
penurunan laju metabolisme lemak. Sel-sel lemak akan bergabung dan
dikelilingi kolagen yang menjadi abnormal yang disebut nodul. Nodul yang
jelas ini memiliki diameter beberapa sentimeter (cm) dan terlihat agak jelas
pada permukaan serta mungkin terasa sakit. Nodul lemak yang diselubungi
kolagen tersebut akan mengalihkan jalur jaringan kapiler serta
memperlihatkan suatu daerah dengan aliran darah yang kurang. Daerah lemak
subkutan menjadi kurang teratur, teramati dari retensi cairan, keberadaan
nodul lemak dan efek gravitasi. Akibatnya, parutan menjadi terlihat jelas dan
permukaan yang heterogen menjadi lebih nyata. Epidermis dan dermis
menipis, kurang kenyal serta tidak teratur. Abnormalitas dapat terdeteksi

21
secara cepat melalui pengamatan visual pada permukaan kulit sehingga dapat
membuat penderita yang memiliki selulit menjadi kurang percaya diri.
2.4.4 Zat Aktif pada Sediaan Antiselulit Topikal (Hexsel, Prado, & Goldman,
2010)
Zat aktif pada sediaan antiselulit topikal dapat digolongkan menjadi 4
kelompok utama berdasarkan mekanisme kerjanya:
a) Agen peningkat laju mikrovaskular
Agen ini mencakup zat yang meningkatkan laju mikrovaskular dan drainase
limfatik yang diduga berperan penting dalam patogenesis selulit. Contoh: ivy,
Ginkgo biloba, rutin, anggur merah (Vitis vinifera), pepaya (Carica papaya),
nanas (Ananas sativus, Ananas comosus).
b) Agen yang mengurangi lipogenesis dan meningkatkan lipolisis
Bertujuan untuk mengurangi ukuran dan volume adiposit, mengurangi tekanan
pada jaringan penghubung di sekitarnya dan diduga dapat mengurangi
penampilan klinis dari bagian kulit yang tidak merata (puckering). Contoh:
metilxantin (teobromin, kofein, aminofilin, teofilin), agonis beta adrenergik
(isoproterenol, adrenalin), antagonis alfa-adrenergik (johimbin, piperoksan,
fentolamin, dihidroergotamin).
c) Agen yang mengembalikan struktur normal dari jaringan dermis dan subkutan
Penampakan selulit dapat berkurang dengan menebalkan dermis atau
menghambat perpindahan lemak ke jaringan di atasnya. Contoh: retinol
(vitamin A), asam askorbat (vitamin C).
d) Agen yang menghambat atau menghancurkan pembentukan radikal bebas
Diketahui bahwa radikal bebas mengubah asam lemak bebas melalui
mekanisme peroksidasi yang akan menghasilkan lipid sebagai pembentuk
selulit. Radikal bebas dapat merusak elemen-elemen mikrosirkulasi sehingga
lebih meningkatkan perkembangan selulit. Contoh: alfa tokoferol (vitamin E),
asam askorbat (vitamin C), Ginkgo biloba, anggur merah (Vitis vinifera).

22
2.5 Gel
Gel, kadang-kadang disebut jeli, merupakan sistem semipadat terdiri dari
suspensi yang dibuat dari partikel anorganik yang kecil atau molekul organik yang
besar, terpenetrasi oleh suatu cairan (Farmakope Indonesia, 1979). Pada
umumnya, gel dibentuk melalui agregasi partikel sol koloidal, sistem solid atau
semisolid yang terbentuk menjadi terpenetrasi oleh suatu cairan. Partikel-partikel
terhubungkan bersama melalui suatu jaringan sehingga memberikan kekakuan
struktur. Terkadang hanya sedikit saja fase terdispersi dibutuhkan untuk
menghasilkan kekakuan, contohnya: 1% agar dalam air sudah menghasilkan gel
yang kuat. Gel yang kaya akan cairan dapat disebut jeli, sedangkan gel yang
cairannya dibuang (hanya terdapat pembentuk gel saja) dinamakan xerogel
(Ansel, 1989).
Pada formulasi gel, biasanya mengandung pembawa alkoholik ataupun
(air) dan agen pembentuk gel. Contoh agen pembentuk gel adalah pati, turunan
selulosa, karbomer, magnesium-aluminum silikat, gom xanthan, silika koloidal,
aluminum atau sabun seng. Agen pembentuk gel ini berfungsi untuk memberikan
kekakuan pada dispersi, larutan atau koloidal pada penggunaan kulit bagian luar
(Buhse, et al., 2005).
2.5.1 Hidrogel
Hidrogel adalah gel yang memiliki elemen air dan substansi polimerik
yang hidrofilik, namun tidak larut air. Ketika terpapar air, polimer kering akan
mengembang dan menyerap cairan tersebut. Kemudian, rantai polimer akan
terhubung secara kimiawi ataupun dengan bantuan gaya fisik (Zatz & Kushia,
1996). Hidrogel memiliki karakteristik mudah menghilang dan tidak menyisakan
bekas yang berminyak atau licin. Pembawa hidrogel telah menunjukkan
peningkatan hidrasi dan kelembapan pada kulit tidak seperti formulasi gel
berbasis alkohol yang dapat menyebabkan pengeringan pada kulit (Leon H.
Kircik, 2009).

23
2.5.2 Hidroalkoholik Gel

Hidroalkoholik gel mengandung air sekitar 25-50% dari total berat sediaan
produk (Sala, 2007). Umumnya digunakan etanol sebagai sistem pelarut pada
hidroalkoholik gel. Alkohol, terutama etanol, dikenal sebagai peningkat permeasi
obat-obat topikal. Peningkatan laju absorbsi obat menyebabkan onset yang lebih
cepat dan peningkatan khasiat (Valencia, Calapini, & Dee, 2009). Dari penelitian
sebelumnya, jumlah etanol yang digunakan dalam sediaan hidroalkoholik gel
dapat bervariasi, yakni 40-60%. Selain itu, pada sediaan ini umumnya
ditambahkan cairan non volatil, contohnya propilen glikol sebagai bahan pilihan
untuk meningkatkan kapasitas penyebaran dan estetika gel sehingga dapat
meminimalisir penumpukan atau penggumpalan ataupun pengeringan gel saat
digosokkan ke kulit (Gemborys & Wisniewski, 1992).
Penggunaan bentuk sediaan hidroalkoholik gel diketahui menguntungkan
karena dapat melarutkan zat aktif yang hidrofilik dan lipofilik (Sala, 2007).
Selain itu, bentuk sediaan tersebut memberikan komposisi yang stabil dan
distribusi zat aktif yang seragam (Foxx & Klein, 1983). Etanol dapat
meningkatkan permeasi obat pada kulit dengan merusak struktur barier yang rapat
pada kulit atau dengan meningkatkan kelarutan dan partisi obat obat dalam
stratum korneum. Etanol juga menurunkan viskositas gel sehingga meningkatkan
pelepasan obat dan permeasi dari gel (El-Megrab, El-Nahas, & F.Balata, 2006).
2.5.3 Emulsi Gel

Selain hidrogel dan hidroalkoholik gel, terdapat juga emulsi gel atau
emulgel yang memiliki karakter penggabungan antara bentuk hidrogel dan emulsi.
Mirip dengan hidrogel klasik, emulgel mengembang dalam air, dan derajat
kesetimbangan pengembangan akan berkurang jika fraksi volume minyak
meningkat. Bentuk sediaan ini telah dikembangkan untuk menggabungkan tetes-
tetes minyak dalam suatu fase hidrogel yang kaya akan air dan menunjukkan
profil pelepasan obat lipofilik yang menarik. Selain itu, hidrogel yang
mengandung emulsi tersebut dapat meningkatan resistensi mekanik untuk
penanganan yang lebih mudah dan peluang sebagai penghantar obat hidrofilik

24
dalam kompartemen hidrogel (Shingel, Roberge, Zabeida, Robert, & Klemberg-

Sapieha, 2008).
Emulgel merupakan emulsi, baik minyak dalam air (m/a) maupun air
dalam minyak (a/m), yang dicampurkan bersama agen pembentuk gel sehingga
membentuk emulgel. Bentuk sediaan emulgel lebih disukai oleh pasien karena
memiliki keuntungan sifat emulsi dan gel. Oleh karena itu, emulgel digunakan
sebagai pembawa berbagai macam obat pada kulit (Mohamed, 2004).
2.6 Bahan-Bahan yang Digunakan dalam Formulasi Gel

2.6.1 Kofein (Zat Aktif)
Kofein merupakan serbuk atau jarum yang mengkilat, berwarna putih,
biasanya menggumpal, tidak berbau, dan berasa pahit. Larutan kofein bersifat
netral terhadap kertas lakmus. Kelarutan kofein adalah 1: 46 dalam air (agak sukar
larut dalam air, 1:5,5 dalam air 80o C, 1:1,5 dalam air mendidih, 1:66 dalam
alkohol, 1:22 dalam alkohol 66o C (Farmakope Indonesia, 1995). Kelarutan dalam
air dapat meningkat dengan penambahan alkali benzoate, sinamat, sitrat atau
salisilat. Ketika dikristalkan dengan air, kofein mengandung 1 molekul kristal air.
kofein akan berbentuk ketika terjadi kristalisasi dari etanol, kloroform, atau eter.
Kristal tersebut akan terurai dengan adanya larutan alkali yang kuat (Moffat,
Osselton, & Widdop, 2005).
CH3
N O
N
N
N
CH3
H3C
O
[Sumber: Rodwell, 2003]
Gambar 2.9. Rumus struktur kofein (telah diolah kembali)

25
Kofein (trimetilxantin) bersama golongan metilxantin lainnya (teobromin,

aminofilin, teofilin) merupakan obat yang memiliki efek lipolisis pada jaringan
adiposa. Senyawa tersebut menginhibisi fosfodiesterase dan merupakan zat aktif
yang paling sering digunakan sediaan antiselulit topikal komersial. Metilxantin
yang paling berguna dan paling aman adalah kofein. Umumnya digunakan sebagai
zat aktif pada konsentrasi 1-2%. Kofein memiliki penetrasi kulit yang baik
sehingga penyerapan dan aksinya cepat.
Membran
KOFEIN TEOBROMIN
Ekstraselular
Membran Selular
Adiposit
FOSFODIEDTERASE
Sitoplasma
LIPASE
Trigliserida Asam lemak + Gliserol
[Sumber: Cosmoproject S.r.l., 2011]
Gambar 2.10. Mekanisme kerja kofein dalam menghambat enzim fosfodiesterase

dan meningkatkan lipolisis (telah diolah kembali)
Kofein bekerja langsung pada adiposit, meningkatkan lipolisis melalui

inhibisi fosfodiesterase dengan augmentasi siklik adenosine monofosfat (cAMP).
Kofein meningkatkan konsentrasi cAMP intrasel dan berefek langsung pada
metabolisme lemak pada jaringan adiposa (Leibaschoff & Steiner, 2006).
Metilxantin mengaktifkan enzim lipase trigliserida yang mengubah trigliserida
menjadi asam lemak bebas dan gliserol. Selain itu juga memiliki efek stimulasi
pada mikrosirkulasi kutan (Hexsel, Prado, & Goldman, 2010).

26
2.6.2 Natrium Hialuronat (Peningkat Penetrasi Perkutan)

Natrium Hialuronat (NaHA) atau sodium hialuronat adalah bentuk garam
dari asam hialuronat. NaHA merupakan biopolisakarida yang terdiri dari ribuan
gula (karbohidrat) rantai panjang. Struktur NaHA tersusun atas asam-D-
glukoronat dan N-asetil-D-glukosamin. Pada beberapa literatur, terminologi asam
hialuronat dan natrium hialuronat dapat saling menggantikan (Krause, Bellomo, &
Colby, 2001; Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
COONa CH2OH
H O H O
H H
O OH O H O
OH
H H
H OH H NHCOCH3
asam-D-glukoronat N-Asetil-D-glukosamin
[Sumber: Rowe, Sheskey, & Owen, 2009]
Gambar 2.11. Rumus struktur NaHA (telah diolah kembali)
NaHA berupa serbuk yang berwarna putih atau hampir putih dan sangat
higroskopis (Krause, Bellomo, & Colby, 2001; Prehm, 1983). NaHA larut atau
larut sebagian dalam air, praktis tidak larut dalam etanol dan aseton. Larutan 0,5%
dalam air memiliki pH 5 - 8,5 (Sweetman, 2009). Ketika tidak mengikat molekul
lain, NaHA mengikat air dan membentuk karakter viskositas yang kaku seperti
jeli (Necas, Bartosikova, Brauner, & Kolar, 2008). Larutan 2% natrium hialuronat
akan mengikat sisa 98% air dengan sangat kuat dan membentuk gel (Loden,
2001).
Pada dasarnya, NaHA terbagi menjadi 2 jenis berdasarkan berat
molekulnya (BM) dengan satuan Dalton (Da), yaitu: NaHA dengan BM besar (6 x
106 Da) dan NaHA dengan BM kecil (0,5-3,6 x 106 Da) (Kamonwan Bongkotphet,
2009). Berat molekul NaHA bergantung pada sumber, metode pembuatan dan
determinasinya (Loden, 2001). Pada umumnya, jenis yang digunakan dalam
pembuatan kosmetik di pasaran adalah NaHA dengan BM yang lebih kecil. BM
NaHA tidak hanya mempengaruhi sifat fisikokimia dan elastisitasnya, tetapi juga
mempengaruhi kemampuannya meretensi air, memfilter makromolekul, berikatan

27
dengan permukaan sel reseptor serta molekul matriks lainnya (Tammi, Säämänen,
Maibach, & Tammi, 1991). (Dermaxime, 2011).
Semakin besar ukuran molekul NaHA, maka semakin tinggi kemampuan
molekul tersebut untuk beragregasi dan menjerap air. Hal ini menyebabkan
semakin banyak lapisan tipis viskoelastis dari NaHA yang berikatan dengan
permukaan kulit. Namun, NaHA dengan BM besar tidak dapat berpenetrasi lebih
dalam daripada celah yang ditimbulkan oleh pengelupasan sel kulit (deskuamasi)
(Loden, 2001). Sebaliknya, NaHA dengan BM kecil dapat berpenetrasi lebih
mudah dan cepat dari permukaan kulit ke dalam dermis sehingga memungkinkan
obat terbawa ke dalam lapisan dermis dengan konsentrasi relatif tinggi (Brown,
Alcorn, & Fraser, 1999).
Berat molekul NaHA berkaitan dengan laju disolusi, viskositas, dan sifat
alirnya. NaHA dengan BM besar memiliki laju disolusi yang lebih lama
dibandingkan NaHA dengan BM kecil walaupun proses tersebut dapat dipercepat
dengan pengocokan. Semakin tinggi berat molekul dan konsentrasi NaHA,
viskositas yang dimiliki larutan menjadi semakin tinggi. Hal ini dapat
mempengaruhi karakteristik dari sifat alirnya, misalnya dari Newtonian menjadi
Non-Newtonian. (Brown & Jones, 2005).
Viskoelastisitas NaHA dalam larutan dipengaruhi oleh pH dan kekuatan
ion lingkungannya. Perubahan pH mempengaruhi banyaknya ionisasi pada rantai
NaHA. Perubahan ionisasi akan menyebabkan interaksi intermolekuler antara
molekul NaHA yang mengubah karakter sifat alir senyawa (Brown & Jones,
2005).
NaHA telah banyak digunakan dalam berbagai sediaan kosmetik, topikal,
parenteral, dan opthalmik karena tidak toksik, tidak mengiritasi, memiliki
viskoelastisitas serta biokompatibilitas yang baik. Penggunaan produk kosmetik
yang mengandung NaHA diketahui dapat melembabkan kulit, memperbaiki
elastisitas kulit, mengencangkan kulit, menghilangkan penampakan garis-garis
halus pada kulit, dan membantu dalam perbaikan jaringan kulit (Bissett, 2006;
Brown & Jones, 2005; Brandt & Cazzaniga, 2010 Reynolds, 1982; Rosso, 2006;
Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).

28
NaHA dapat digunakan sebagai senyawa peningkat penetrasi perkutan

dalam formulasi. Hal ini disebabkan oleh kemampuan mengikat air yang tinggi
sehingga dapat menghidrasi dan melembabkan kulit. Hidrasi oleh NaHA akan
mengubah susunan sel-sel stratum kornem yang tersusun rapat menjadi lebih
renggang. Dengan demikian, permeabilitas kulit terhadap molekul-molekul obat
meningkat sehingga penetrasi obat juga meningkat (Bissett, 2006; Brown &
Jones, 2005).
NaHA mempenetrasi dan melintasi epidermis secara cepat ketika
diaplikasikan ke kulit. Kemudian, NaHA akan berakumulasi di dermis dalam
waktu yang singkat sebelum didegradasi melalui jalur metaboliknya. Kemampuan
NaHA menembus epidermis tidak hanya bergantung pada difusi pasif, tetapi juga
difasilitasi oleh transport aktif. Walaupun sedikit fraksi NaHA yang memasuki
lapisan kulit manusia yang lebih dalam, fraksi itu tetap dapat meningkatkan
konsentrasi lokal dari obat yang dibawanya dan aktivitas terapetiknya di dalam
kulit. Oleh karena itu, NaHA disukai dalam menghantarkan obat-obat topikal.
(Tracey J. Brown, 1999)
2.6.3 Hidroksi Propil Metil Selulosa (Agen Pembentuk Gel)

Hidroksi Propil Metil Selulosa (HPMC) dapat digunakan sebagai agen
pembentuk gel, pengemulsi, pensuspensi, pengental dan penstabil pada sediaan
topikal. HPMC merupakam serbuk berwarna putih atau putih-krem tidak berbau
dan tidak berasa. Larut dalam air dingin; praktis tidak larut dalam kloroform,
etanol, dan eter, tetapi larut dalam campuran alkohol dan air. HPMC adalah basis
nonionik sehingga tidak akan membentuk kompleks dengan garam-garam logam
atau ion-ion organik serta tidak akan menimbulkan endapan yang tidak larut.
Selain itu, HPMC dapat mencegah terjadinya koalesen atau aglomerasi sehingga
mencegah terbentuknya sedimen. Dibandingkan dengan metilselulosa, HPMC
memberikan warna yang lebih jernih pada sediaan. HPMC memerlukan air
sebanyak 20-30% dan pengadukan yang kencang serta suhu 80o-90o C untuk
membuatnya menjadi bentuk sediaan. HPMC aman digunakan karena tidak toksik
dan mengiritasi (Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).

29
CH2OR OR
O
O OR
OR
O
O
OR CH2OR
n
Keterangan : R adalah H, CH3, atau CH3CH(OH)CH2
[Sumber : Rowe, Sheskey, & Quinn, 2009]
Gambar 2.12. Rumus struktur HPMC (telah diolah kembali)
2.6.4 Propilen Glikol (Humektan)

Propilen glikol dapat berfungsi sebagai humektan untuk menjaga
kelembaban kulit pada konsentrasi ~15%. Selain itu, propilen glikol juga
berfungsi sebagai pelarut dan pengawet antimikroba (antiseptik) yang mirip
dengan etanol dan melawan jamur seperti gliserin, namun kurang efektif
dibandingkan etanol pada konsentrasi 15-30%. Penggunaannya tergolong aman
secara topikal karena tidak toksik dan sangat kecil kemungkinan terjadi iritasi.
Propilen glikol merupakan cairan jernih, tidak berwarna, kental, praktis tidak
berbau, dan berasa manis. Propilenglikol bercampur dengan air, aseton,
kloroform, gliserin, eter, dan etanol, namun tidak bercampur dengan minyak
mineral. Sebagai pelarut yang bercampur air, propilen glikol secara umum lebih
baik dari pada gliserin dan dapat melarutkan senyawa-senyawa alkaloid pada
konsentrasi 5-80%. (Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
H H H
H C C C OH
H OH H
Gambar 2.13. Rumus struktur propilen glikol (telah diolah kembali)

30
2.6.5 Parafin Cair (Fase Minyak)

Parafin cair (minyak mineral) dapat berfungsi sebagai emolien, pelarut dan
digunakan sebagai fase minyak pada sediaan emulsi minyak dalam air. Parafin
cair tergolong aman sehingga digunakan secara luas pada berbagai sediaan topikal
Minyak mineral ini bersifat transparan, tidak berasa, tidak berbau saat dingin dan
berbau petroleum ketika dipanaskan. Parafin cair praktis tidak larut dalam etanol
95%, gliserin, dan air. Tetapi, larut dalam aseton, benzen, kloroform, eter dan
petroleum eter. Konsentrasi yang biasa digunakan untuk sediaan topikal adalah 1-
32%. (Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
2.6.6 Tween 20 (Emulgator Hidrofilik)

Tween 20 atau polioksi etilen sorbitan monolaurat dapat berfungsi sebagai
agen pengemulsi (emulgator), surfaktan nonionik hidrofilik, agen pelarut, dan
agen penghidrasi. Zat ini merupakan cairan berminyak, jernih, berwarna kuning,
berbau spesifik, dan berasa pahit. Tween 20 larut dalam air, alkohol, dioksan, etil
asetat, metil alkohol, toluene (1:200), tidak larut dalam parafin cair. HLB tween
20 adalah 16,7 (Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
O O R
HO O
y
z
O
O O
HO
X
O
HO
w
Gambar 2.14. Rumus struktur polioksi etilen sorbitan monolaurat atau tween 20
(telah diolah kembali)

31
2.6.7 Span 60 (Emulgator Lipofilik)

Span 60 atau sorbitan monostearat dapat berfungsi sebagai agen
pengemulsi (emulgator), surfaktan nonionik lipofilik, agen pelarut, dan agen
penghidrasi. Senyawa ini berupa cairan berminyak dan kental, berbau lemak,
rasanya khas. Span 60 praktis tidak larut dalam air, dapat bercampur dengan
alkohol, larut dalam parafin cair, mudah larut dalam eter, tidak larut dalam aseton
dan propilen glikol. HLB span 60 adalah 4,7 (Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
H 2 C O O C (C 17 H 35 )
H C O H
O H
O H
[Sumber: Wade & Weller, 1994]
Gambar 2.15. Rumus struktur sorbitan monostearat atau span 60 (telah diolah
kembali)
2.6.8 Butil Hidroksi Toluen (Antioksidan)

Butil Hidroksi Toluen (BHT) digunakan sebagai antioksidan dalam
sediaan semisolid. BHT berupa padatan atau serbuk kristal berwarna putih atau
kuning pucat. Kelarutan BHT adalah mudah larut dalam aseton, benzen, etanol
(95%), dan minyak mineral (parafin cair). Akan tetapi tidak larut dalam air,
gliserin, propilenglikol dan larutan alkali hidroksid. Konsentrasi yang biasa
digunakan pada formulasi topikal adalah 0,0075 – 0,1% (Rowe, Sheskey, &
Owen, 2009)

32
OH
(H3C) 3C C(CH3) 3
CH3
Gambar 2.16. Rumus struktur BHT (telah diolah kembali)
2.6.9 Metil Paraben (Pengawet)

Metil paraben (nipagin) digunakan sebagai pengawet antimikroba pada
produk kosmetik. Pengawet ini dapat digunakan sendiri atau dikombinasikan
dengan paraben atau antimikroba lainnya. Paraben memiliki spektrum aktivitas
antimikroba yang luas dan efektif pada pH yang luas walaupun pengawet ini lebih
efektif menyerang kapang dan jamur. Pencampuran paraben satu dan lainnya
sering digunakan untuk menghasilkan pengawet yang lebih efektif. Nipagin
berupa kristal putih dan tidak berbau. Kelarutan nipagin adalah sukar larut dalam
air, larut dalam air panas, mudah larut dalam alkohol, aseton, dan propilen glikol.
Konsentrasi yang digunakan pada sediaan topikal adalah 0,02-0,3% (Rowe,
Sheskey, & Owen, 2009).
O OCH3
OH
Gambar 2.17. Rumus struktur metil paraben atau nipagin (telah diolah kembali)
2.6.10 Propil Paraben (Pengawet)

Propil paraben dan metil paraben digunakan sebagai pengawet. Kombinasi
dari dua bahan pengawet ini memberikan penghambatan pada pertumbuhan

33
mikroba. Propil paraben berupa kristal putih, tidak berbau, dan tidak berasa.
Kelarutannya adalah sukar larut dalam air, mudah larut dalam alkohol, eter, dan
propilen glikol. Konsentrasi yang digunakan sebagai pengawet adalah 0,01-0,6%
(Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
CH3
O
HO
Gambar 2.18. Rumus struktur propil paraben atau nipasol (telah diolah kembali)
2.6.11 Asam Sitrat Monohidrat (Pengatur pH)

Asam sitrat dapat berfungsi sebagai pengatur pH asam sediaan dan juga
sebagai agen pengkhelat. Asam sitrat berbentuk kristal transparan, tidak berwarna,
tidak berbau, dan beraroma asam kuat. Senyawa ini larut dalam etanol 95%
(1;1,5) dan mudah larut dalam air. Konsentrasi yang biasa digunakan untuk
pengatur pH adalah 0,1-2% (Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
HO O
.H 2 O
HO OH OH
O O
Gambar 2.19. Rumus struktur asam sitrat monohidrat (telah diolah kembali)
2.6.12 Natrium Sitrat Dihidrat (Pengatur pH)

Natrium sitrat dapat berfungsi sebagai pengatur pH basa sediaan dan juga
sebagai agen pengkhelat. Natrium sitrat berbentuk serbuk kristal putih atau tidak
berwarna, tidak berbau, dan berasa asin. Senyawa mudah larut dalam air (1:1,5),

34
dalam air panas (1:0,6), tidak larut dalam etanol (95%). Konsentrasi yang biasa
digunakan untuk pengatur pH adalah 0,3-2% (Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
NaO O
.2H2O
NaO ONa
O O
Gambar 2.20. Rumus struktur natrium sitrat dihidrat (telah diolah kembali)
2.6.13 Etil Alkohol (Pelarut)

Etil alkohol (etanol) dapat berfungsi sebagai pelarut, pengawet
antimikroba, disinfektan, dan pembantu penetrasi kulit. Konsentrasi yang
digunakan sebagai pelarut adalah sampai 85%. Etanol merupakan campuran etil
alkohol dan air, mengandung tidak kurang dari 94,7% v/v atau 92,0% dan tidak
lebih dari 95,2% v/v atau 92,7% C2H6O. Etanol merupakan cairan tidak berwarna,
jernih, mudah menguap dan mudah bergerak, bau khas, rasa panas. Etanol sangat
mudah larut dalam air, kloroform, dan dalam eter. (Farmakope Indonesia, 1979;
Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
H 3C OH
[Sumber: Wade & Weller, 1994]
Gambar 2.21. Rumus struktur etil alkohol (telah diolah kembali)
2.6.14 Aqua Destilata (Pelarut)

Aqua destilata atau air suling berfungsi sebagai pelarut. Aqua destilata
merupakan air yang dibuat dengan menyuling air minum dan dapat diminum.
Aqua destilata berupa cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau, dan tidak
mempunyai rasa (Farmakope Indonesia, 1979).

35
BAB 3
METODE PENELITIAN
3.1 Lokasi dan Waktu

Penelitian dilakukan pada bulan Februari sampai dengan Mei 2011.
Adapun lokasi penelitian untuk pembuatan sediaan gel adalah di Laboratorium
Farmasetika Departemen Farmasi, FMIPA UI. Uji evaluasi fisik dan penetrasi
sediaan gel secara in vitro menggunakan sel difusi Franz dilakukan di
Laboratorium Farmasi Fisika Departemen Farmasi, FMIPA UI. Uji pengukuran
diameter globul secara mikroskopik dilakukan di Laboratorium Farmakognosi
Departemen Farmasi, FMIPA UI. Uji analisis kuantitatif kofein dilakukan di
Laboratorium Kimia Farmasi Analisis Kuantitatif Departemen farmasi, FMIPA
UI. Proses pengambilan kulit tikus betina strain Sprague Dawley dilakukan di
Laboratorium Farmakologi Departemen farmasi, FMIPA UI.
3.2 Alat
Sel difusi Franz dengan luas area difusi 1,76625 cm2 dan volume
kompartemen 13 ml (Bengkel Gelas ITB, Indonesia), spektrofotometer (Shimadzu
UV 1601, Jepang), homogenizer Multimix CKL (Omni-Multimix Inc., Malaysia),
pH meter Eutech 510 (Eutech Instrument, Singapura), viscometer Brookfield tipe
HAT dan spindel tipe HA (Brookfield Engineering Laboratories Inc., Amerika),
timbangan analitik Adam AFA 210-LC (Adam, Amerika Serikat), Penetrometer
Herz 009 (Humboldt Mfg Co., Jerman), mikroskop Optik Nikon Eclipse E-200
(Nikon Instrument Inc., Amerika Serikat), termostat (Polyscience, USA), alat
sentrifugasi Kubota 5100 (Kubota corp, Jepang), pengaduk magnetik (USA), oven
(Memmert, Jerman), desikator, syringe 1 ml (Terumo corp, Philipina), penangas
air, lemari pendingin (Toshiba, Jepang), kamera digital (LUMIX DMC-FS62
Panasonic), gunting bedah (Gold Cross, Jepang), silet Gillet Goal (The Gillete
Company, Jerman), alat-alat gelas (Schott Duran, Jerman).

36
3.3 Bahan
Kofein anhidrat (Brataco, Indonesia), natrium hialuronat (Nikkol, Japan),
HPMC tipe Methocel J12MS (The Dow Chemical Company, Jerman), tween 20
(Brataco, Indonesia), span 60 (TCI, Japan), propilen glikol (Brataco, Indonesia),
parafin cair (Brataco, Indonesia), BHT (Brataco, Indonesia), metil paraben
(Brataco, Indonesia), propil paraben (Brataco, Indonesia), etanol 96% (Brataco,
Indonesia), asam sitrat (Brataco, Indonesia), natrium sitrat (Brataco, Indonesia),
kalium dihidrogen fosfat (Merck, Jerman), NaOH (Merck, Jerman), aqua destilata
(Brataco, Indonesia), tikus putih betina Rattus norvegicus strain Sprague Dawley
usia 2-3 bulan dengan berat + 200 gram sebanyak 30 ekor (Institut Pertanian
Bogor, Indonesia).
3.4 Cara Kerja

3.4.1 Formulasi
Pada penelitian ini, terdapat 3 jenis sediaan gel yang akan diteliti, yaitu:
hidrogel yang diberi simbol A, hidroalkoholik gel yang diberi simbol B, dan
emulsi gel (emulgel) yang diberi simbol C. Perbedaan ketiga sediaan tersebut
adalah hidrogel memiliki kandungan air lebih besar dibandingkan hidroalkoholik
gel dan emulgel; hidroalkoholik gel mengandung alkohol 40%, dan pada emulgel
terdapat pencampuran bentuk emulsi dan gel (1:1).
Masing-masing sediaan ini terdiri atas 3 formulasi yang berbeda sehingga
total formulasi sediaan yang dibuat adalah 9 formulasi ditandai dengan angka 1, 2,
dan 3. Formula A1, B1, dan C1 mengandung kofein 1,5% dan HPMC 2% sebagai
basis gel. Formula A2, B2, dan C2 mengandung kofein 1,5%, basis gel HPMC
2%, dan NaHA 0,5%. Formula A3, B3, dan C3 mengandung kofein 1,5% tanpa
adanya basis gel HPMC, tetapi konsentrasi NaHA diperbesar menjadi 2%
sehingga dapat dimanfaatkan sebagai basis gel. Komposisi dari masing-masing
formula dapat dilihat pada Tabel 3.1.

37
Tabel 3.1 Formula berbagai sediaan gel topikal antiselulit
Konsentrasi (%)
Bahan Hidrogel (A) Hidroalkoholik gel (B) Emulsi Gel (C)
A1 A2 A3 B1 B2 B3 C1 C2 C3
Kofein 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5
Na-
- 0,5 2 - 0,5 2 - 0,5 2
Hialuronat
HPMC 2 2 - 2 2 - 2 2 -
Parafin Cair - - - - - - 5 5 5
Etanol 96% - - - 40 40 40 - - -
Propilen
10 10 10 10 10 10 10 10 10
Glikol
Tween 20 - - - - - - 1,5 1,5 1,5
Span 60 - - - - - - 1 1 1
Metil
0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
Paraben
Propil
0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
Paraben
BHT - - - - - - 0,1 0,1 0,1
Natrium
0,2 - - 0,2 - - 0,2 - -
Sitrat
Asam Sitrat - - - - 0,2 0,2 - 0,2 0,2
Aquadest 86 85,7 86,2 46 45,5 46 78,4 77,9 78,4
Keterangan:
A1, B1, C1: Kofein 1,5%, HPMC 2%
A2, B2, C2: Kofein 1,5%, HPMC 2%, Na-Hialuronat 0,5%
A3, B3, C3: Kofein 1,5%, Na-Hialuronat 2% (Na-Hialuronat menggantikan basis HPMC)
3.4.2 Pembuatan Sediaan Gel Topikal Antiselulit

3.4.2.1 Pembuatan Hidrogel (A1, A2, dan A3)
Berikut ini cara pembuatan hidrogel:
a) HPMC dikembangkan dalam aquadest yang telah dipanaskan (80oC) sejumlah
20 kali beratnya selama setengah jam, kemudian diaduk menggunakan alat
homogenizer (gambar pada Lampiran 1) dengan kecepatan 3000 rpm sehingga
terdispersi sempurna dan terbentuk basis gel.

38
b) NaHA dilarutkan dalam propilen glikol, lalu ditambahkan aquadest yang telah
dipanaskan (55oC) dan dihomogenkan dengan homogenizer berkecepatan
3000 rpm. Setelah itu dimasukkan ke dalam basis gel.
c) Metil paraben dan propil paraben dilarutkan dalam propilen glikol, lalu
dimasukkan ke dalam basis gel.
d) Kofein dan natrium sitrat dilarutkan dengan air panas, lalu dimasukkan ke
dalam basis gel.
e) Massa dihomogenkan dengan homogenizer berkecepatan 3000 rpm dan
dibiarkan mendingin pada suhu kamar sampai terbentuk sediaan hidrogel.
f) Pada pembuatan formula A1: langkah b tidak dilakukan, pada formula A2:
semua langkah dilakukan, kecuali penambahan natrium sitrat, pada formula
A3: langkah a dan penambahan natrium sitrat tidak dilakukan.
3.4.2.2 Pembuatan Hidroalkoholik Gel (B1, B2, dan B3)

a) Berikut ini cara pembuatan hidroalkoholik gel:
b) HPMC dikembangkan dalam aquadest yang telah dipanaskan (80 oC) sejumlah
20 kali beratnya selama setengah jam, kemudian diaduk menggunakan alat
homogenizer (gambar pada Lampiran 1) dengan kecepatan 3000 rpm sehingga
terdispersi sempurna dan terbentuk basis gel.
c) NaHA dilarutkan dalam propilen glikol, lalu ditambahkan aquadest yang telah
dipanaskan (55oC) dan dihomogenkan dengan homogenizer berkecepatan
3000 rpm. Setelah itu dimasukkan ke dalam basis gel.
d) Metil paraben dan propil paraben dilarutkan dalam propilen glikol, lalu
e) Kofein dan natrium sitrat dilarutkan dalam air bercampur alkohol, lalu
f) Massa dihomogenkan dengan homogenizer berkecepatan 500 rpm sampai
terbentuk sediaan hidroalkoholik gel.
g) Pada pembuatan formula B1: langkah b tidak dilakukan, pada formula B2:
semua langkah dilakukan kecuali penambahan natrium sitrat diganti dengan
asam sitrat, pada formula B3: langkah a tidak dilakukan dan penambahan
natrium sitrat diganti menjadi asam sitrat.

39
3.4.2.3 Pembuatan Emulsi Gel (C1, C2, dan C3)

Berikut ini cara pembuatan emulsi gel:
a) HPMC dikembangkan dalam aquadest yang dipanaskan (80oC) sejumlah 20
kali beratnya, kemudian diaduk menggunakan alat homogenizer (gambar pada
Lampiran 1) dengan kecepatan 3000 rpm sehingga terdispersi sempurna dan
terbentuk basis gel.
b) NaHA dilarutkan dalam propilen glikol, lalu ditambahkan aquadest yang telah
dipanaskan (55oC) dan dihomogenkan dengan homogenizer 3000 rpm. Setelah
itu dimasukkan ke dalam basis gel dan dihomogenkan dengan homogenizer
berkecepatan 3000 rpm.
c) Fase minyak disiapkan: span 60 dilarutkan dalam parafin cair. Lalu,
dipanaskan dalam cawan penguap di atas penangas air 70-80o C (gambar pada
Lampiran 1).
d) BHT dicampurkan ke dalam fase minyak
e) Fase air disiapkan: tween 20 dilarutkan dalam sisa aquadest dan dipanaskan
dalam cawan penguap di atas penangas air 70-80o C (gambar pada Lampiran
1).
f) Metil paraben dan propil paraben dilarutkan dalam propilen glikol, sedangkan
kofein dan natrium sitrat dilarutkan dalam air panas. Lalu, semuanya dicampur
ke dalam fase air dan dihomogenkan.
g) Fase minyak dimasukkan ke dalam fase air dan diaduk menggunakan
homogenizer berkecepatan 300 rpm sampai terbentuk emulsi dengan baik.
h) Emulsi yang didapat dimasukkan ke dalam massa gel dengan rasio 1:1 dan
diaduk dengan homogenizer berkecepatan 500 rpm sampai terbentuk emulgel
i) Pada pembuatan formula C1: langkah b tidak dilakukan, pada formula C2:
semua langkah dikerjakan, pada formula C3: langkah a tidak dilakukan.
3.4.3 Evaluasi Sediaan Gel Topikal

Evaluasi terhadap sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan emulgel
dilakukan pada suhu penyimpanan yang berbeda, yaitu pada suhu kamar (28° C ±
2° C) yang disimpan di dalam desikator (Lampiran 1), suhu rendah (5° C ± 2° C)
yang disimpan di dalam lemari pendingin (Lampiran 1), dan suhu tinggi (40° C ±

40
2° C) yang disimpan dalam oven (gambar pada Lampiran 1). Evaluasi sediaan
yang diuji pada suhu penyimpanan yang berbeda meliputi organoleptis,
homogenitas, pH, dan ukuran diameter globul rata-rata. Pengujian ini dilakukan
setiap 2 minggu selama 8 minggu. Selain itu, dilakukan juga uji lainnya, seperti
viskositas dan sifat alir, uji konsistensi, uji mekanik, dan uji enam siklus (cycling
test). Uji viskositas dan sifat alir serta konsistensi dilakukan pada minggu ke-0
dan ke-8 pada suhu kamar, sedangkan uji mekanik dan uji enam siklus (cycling
test) dilakukan hanya pada minggu ke-0.
3.4.3.1 Pengamatan Organoleptis

Sediaan diamati untuk mengatahui terjadinya sineresis atau tidak, bau,
serta perubahan warna selama 8 minggu. Pemeriksaan dilakukan setiap 2 minggu
pada semua bentuk sediaan.
3.4.3.2 Pemeriksaan Homogenitas (Iswandana, 2009)

Sediaan diletakkan di antara dua kaca objek lalu diperhatikan adanya
partikel-partikel kasar atau ketidakhomogenan di bawah cahaya selama 8 minggu.
Pemeriksaan dilakukan setiap 2 minggu pada semua bentuk sediaan.
3.4.3.3 Pengukuran pH (Harry, 2000 dan Iswandana, 2009)

Uji pH dilakukan selama 8 minggu menggunakan alat pH meter (gambar
pada Lampiran 1). Sebelum digunakan, mula-mula elektroda dikalibrasi dengan
dapar standar pH 4 dan pH 7. Kemudian elektroda dicelupkan ke dalam sediaan,
catat nilai pH yang muncul di layar. Pengukuran dilakukan pada suhu ruang dan
dilakukan setiap 2 minggu pada semua bentuk sediaan.
3.4.3.4 Pengukuran Diameter Globul Rata-Rata

Sediaan diletakkan di atas kaca objek dan ditutup dengan gelas penutup,
kemudian diamati menggunakan mikroskop (gambar pada Lampiran 1) dengan
perbesaran 100 kali yang dilengkapi lensa okuler mikrometer yang telah
dikalibrasi. Diameter partikel rata-rata dihitung dan dikalikan dengan faktor
kalibrasi. Kenaikan viskositas akan meningkatkan stabilitas sediaan. Semakin

41
tinggi viskositas, semakin kecil ukuran globul dan semakin besar volume ratio
(Djajadisastra, 2004). Pengukuran dilakukan pada minggu ke-0, ke-2, ke-4, ke-6
dan ke-8 hanya pada sediaan emulgel.
Tabel 3.2 Penampilan fisik sediaan semisolid berdasarkan ukuran globul
Ukuran globul (µm) Penampilan

0,005 Translusen (transparan)
0,005-0,1 Semi transparan, abu-abu
0,1-1 Emulsi putih-kebiruan
0,1 Emulsi putih susu
3.4.3.5 Penentuan Viskositas dan Sifat Alir (Sittar, 2009)

Pengukuran viskositas dilakukan pada dengan menggunakan alat
viskometer Brookfield (gambar pada Lampiran 1) dan spindel tipe HA. Sediaan
disimpan dalam wadah, lalu spindel diturunkan ke dalam sediaan hingga batas
yang ditentukan. Pengukuran dilakukan dengan viskometer Brookfield dengan
kecepatan diatur mulai dari 0,5; 1; 2; 2,5; 3; 5; 10; dan 20 rpm, lalu dibalik dari
20; 10; 5; 3; 2,5; 2; 1; 0,5 rpm. Dari masing-masing pengukuran dengan
perbedaan rpm dibaca skalanya ketika jarum merah yang bergerak telah stabil.
Nilai viskositasnya lalu dihitung berdasarkan angka dial reading dikalikan dengan
faktor yang tertera pada brosur alat tersebut. Kenaikan viskositas akan
meningkatkan stabilitas sediaan. Semakin tinggi viskositas, semakin kecil ukuran
globul dan semakin besar volume ratio (Djajadisastra, 2004). Pengukuran
dilakukan pada minggu ke-0 dan ke-8 pada semua bentuk sediaan dengan
penyimpanan suhu kamar.
3.4.3.6 Pemeriksaan Konsistensi (Iswandana, 2009)

Sediaan yang akan diperiksa dimasukkan ke dalam wadah khusus dan
diletakkan pada meja penetrometer (gambar pada Lampiran 1). Peralatan diatur
hingga ujung kerucut menyentuh bayang permukaan krim yang dapat diperjelas
dengan menghidupkan lampu. Batang pendorong dilepas dengan mendorong

42
tombol start. Angka penetrasi dibaca lima detik setelah kerucut menembus
sediaan. Pemeriksaan konsistensi dilakukan pada minggu ke-0 dan minggu ke-8
pada semua bentuk sediaan dengan penyimpanan suhu kamar. Dari pengukuran
konsistensi dengan penetrometer akan diperoleh yield value melalui persamaan:
. .
= (3.1)
Keterangan:
So = Yield value (dyne/cm2)
m = Massa kerucut
g = Gravitasi (cm/df2)
p = Dalamnya penetrasi (cm)
n = Konstanta, yaitu 2
k1 = 1/π cos2 α cos α
α = Sudut kerucut terhadap bidang datar, yaitu 37o
3.4.3.7 Uji Mekanik (Sentrifugasi)

Sediaan disentrifugasi dengan kecepatan putaran 3800 rpm selama 5 jam
karena hasilnya ekivalen dengan efek gravitasi selama 1 tahun. Setelah
disentrifugasi, diamati apakah terjadi pemisahan atau tidak antara fase air dengan
fase minyak. Pengujian hanya dilakukan pada minggu ke-0.
3.4.3.8 Uji Enam Siklus (Cycling Test)

Sediaan disimpan pada suhu 5 oC ± 2o C selama 24 jam lalu dikeluarkan
dan ditempatkan pada suhu 40 oC ± 2oC selama 24 jam. Perlakuan ini adalah satu
siklus. Percobaan diulang sebanyak 6 siklus. Kondisi fisik sediaan dibandingkan
selama percobaan dengan sediaan sebelumnya. Pengujian hanya dilakukan pada
minggu ke-0.
3.5 Uji Penetrasi Secara In Vitro

3.5.1 Pembuatan Dapar Fosfat (Farmakope Indonesia, 1979)
Kalium dihidrogenfosfat 0,2 M sebanyak 50,0 mL dicampur dengan 39,1
mL NaOH 0,2 N dan diencerkan dengan air bebas CO2 secukupnya hingga 200,0
mL.

43
3.5.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kofein (Harmita, 2006 dan Departemen

Kesehatan Republik Indonesia, 1979)
Kofein ditimbang seksama sebanyak + 100,0 mg, kemudian dilarutkan dengan
dapar fosfat pH 7,4 dalam labu ukur ad 100,0 mL. Didapatkan larutan dengan
konsentrasi 1000 ppm. Dari larutan tersebut dipipet 10,0 mL, kemudian dilarutkan
dengan dapar fosfat pH 7,4 dalam labu ukur ad 100,0 mL. Didapatkan larutan
induk dengan konsentrasi 100 ppm. Dari larutan induk, dipipet dan diencerkan
dengan dapar fosfat pH 7,4 hingga didapat konsentrasi 5, 6, 7, 10, 12, 15, dan 16
ppm. Serapan diukur pada panjang gelombang (λ) maksimum dengan
spektrofotometer UV-VIS (gambar pada Lampiran 1). Panjang gelombang
maksimum kofein dalam dapar fosfat pH 7,4 ditentukan dengan melakukan
scanning pada panjang gelombang antara 200-400 nm. Panjang gelombang kofein
yang didapat dalam dapar fosfat pH 7,4 adalah 273,5 nm. Kemudian dibuat kurva
kalibrasi dan persamaan regresinya pada panjang gelombang tersebut.
3.5.3 Uji Perolehan Kembali Kadar Kofein dalam Sediaan (Harmita, 2006)
Sediaan gel kofein ditimbang secara seksama sebanyak ± 1,0 gram,
kemudian dilarutkan dengan dapar fosfat dalam labu ukur 25,0 ml. Lalu disaring
menggunakan kertas saring secara kuantitatif. Larutan tersebut kemudian dipipet
sebanyak 0,5 ml, dimasukkan ke dalam labu ukur 25,0 ml dan dicukupkan
volumenya dengan dapar fosfat pH 9,3. Setelah itu larutan uji tersebut dianalisis
dengan spektrofotometer UV-VIS (gambar pada Lampiran 1).
3.5.4 Uji Penetrasi Kofein (Anggraeni, 2008 dan Mortazavi & Aboofazeli, 2003,
Thakker & Chern, 2003, dan J. Aukunuru, 2007)
Membran yang digunakan adalah kulit tikus. Pertama-tama tikus dibius
dengan eter hingga mati. Kemudian, bulu tikus dicukur dengan hati-hati. Setelah
itu kulit tikus disayat pada bagian perut dengan ketebalan 0,6 + 0,1 mm. Lalu,
kulit direndam dalam dapar fosfat pH 7,4 selama 30 menit setelah itu dan
disimpan dalam suhu 5oC. Kulit yang dapat digunakan dalam rentang waktu 24
jam. Uji penetrasi dilakukan menggunakan sel difusi Franz dengan luas area difusi
1.389 cm2 dan volume kompartemen 13 mL. Kompartemen reseptor diisi dengan

44
dapar fosfat pH 7,4 dan dijaga suhunya 37 + 0,5 oC, serta diaduk dengan stirer
berkecepatan 500 rpm. Kemudian, kulit abdomen diletakkan di antara
kompartemen donor dan kompartemen reseptor dengan posisi stratum korneum
menghadap ke atas. Sampel 1 g diaplikasikan pada permukaan kulit. Kemudian,
pada menit ke-10, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 420, dan 480 sampel
diambil sebanyak 0,5 mL dari kompartemen reseptor menggunakan syringe dan
segera digantikan dengan dapar fosfat pH 7,4 sejumlah volume yang sama.
Setelah itu, sampel dimasukkan ke dalam labu ukur 10,0 ml. Lalu, diadkan dengan
dapar fosfat. Sampel diukur serapannya pada panjang gelombang maksimum
dengan spektrometer UV-VIS. Percobaan diulang sebanyak tiga kali.
Jumlah kumulatif Kofein yang terpenetrasi per luas area difusi (µg/cm2)
dihitung dengan rumus (Thakker & Chern, 2003):
[ . ∑ . ]
= (3.2)
Keterangan:
Q = jumlah kumulatif Kofein yang terpenetrasi per luas area difusi (µg/cm2)
Cn = konsentrasi kofein (µg/ml) pada sampling menit ke-n
V = volume sel difusi Franz (13,0 ml)
∑ = jumlah konsentrasi kofein (µg/ml) pada sampling pertama (menit ke-10) hingga
sebelum menit ke-n
S = volume sampling (0,5 ml)
A = luas area membran (1,76625 cm2)
Kecepatan penetrasi kofein dapat dihitung dengan menggunakan rumus

hukum Fick pertama (Bernard Idson, 2008), yaitu:
= (3.3)
.
Keterangan:
J = Kecepatan penetrasi kofein, Fluks (µg cm-2 jam-1)
M = Jumlah kumulatif obat yang melalui membran (µg)
S = Luas area difusi (cm2)
t = Waktu (jam) zat yang mengalir melalui satu satuan penampang melintang, S, dari suatu
pembatas dalam satu satuan waktu, t, dikenal sebagai aliran dengan symbol, J.

45
BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Pembuatan Sediaan Gel Antiselulit Kofein

Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa penetrasi kofein dalam
sediaan gel antiselulit berbasis HPMC lebih baik penetrasinya dibandingkan
sediaan krim dan salep. Untuk meningkatkan penetrasi perkutan dari kofein tentu
membutuhkan suatu peningkat penetrasi (skin enhancer) yang aman dan dapat
didegradasi oleh tubuh. Salah satu peningkat penetrasi yang memiliki kriteria
tersebut adalah natrium hialuronat (NaHA), bentuk garam dari asam hialuronat.
NaHA dikenal sebagai polimer hidrofilik derivat polisakarida yang memiliki
kemampuan sebagai peningkat penetrasi perkutan dengan cara mengubah susunan
sel-sel stratum kornem yang tersusun rapat menjadi lebih renggang sehingga
permeabilitas kulit meningkat. Oleh karena itu, sangat menarik untuk dilakukan
penelitian mengenai pengaruh NaHA terhadap penetrasi kofein sebagai zat aktif
antiselulit pada berbagai sediaan gel, yaitu: hidrogel, hidroalkoholik gel, dan
emulsi gel (emulgel).
Sediaan hidrogel memiliki kandungan air terbanyak dibandingkan sediaan
hidroalkoholik gel dan emulgel sehingga memiliki keuntungan sebagai bentuk
sediaan yang dapat membantu penetrasi perkutan dengan cara menghidrasi
permukaan kulit. Sediaan hidroalkoholik gel mengandung etanol sebanyak 40%
sehingga memiliki keuntungan sebagai bentuk sediaan yang dapat membantu
penetrasi perkutan dengan cara mengekstraksi lemak atau memfluidisasi lemak.
Namun, adanya etanol dalam jumlah banyak mengurangi komposisi air pada
sediaan. Selain itu, etanol tersebut dapat membuat kulit menjadi kering karena
menarik sejumlah air pada kulit. Sediaan emulsi gel (emulgel) merupakan
penggabungan antara gel dan emulsi sehingga memiliki keuntungan yang dimiliki
keduanya. Jenis emulsi yang digunakan adalah emulsi minyak dalam air. Adanya
fase air dapat membantu meningkatkan penetrasi perkutan dengan cara
menghidrasi kulit dan adanya fase minyak dapat mencegah terjadinya penguapan
penguapan pada kulit sehingga proses hidrasi menjadi lebih optimal.
45

46
Masing-masing sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan emulgel

mengandung kofein 1,5% sebagai zat aktif dan terbagi atas 3 formula. Formula 1
mengandung basis gel HPMC 2%, formula 2 mengandung basis gel HPMC 2%
dan NaHA 0,5%, dan formula 3 mengandung NaHA 2% sebagai pengganti basis
gel HPMC. Sediaan hidrogel formula 1 diberi simbol A1, formula 2 diberi simbol
A2, dan formula 3 diberi simbol A3. Sediaan hidroalkoholik gel formula 1 diberi
simbol B1, formula 2 diberi simbol B2, dan formula 3 diberi simbol B3. Sediaan
emulgel formula 1 diberi simbol C1, formula 2 diberi simbol C2, dan formula 3
diberi simbol C3. Formulasi sediaan dapat dilihat pada Tabel 3.1. Tahapan yang
dilakukan pada kesembilan formula tersebut adalah pembuatan, evaluasi, dan uji
penetrasi sediaan. Selain itu, terdapat 9 formula lain sebagai kontrol negatif.
Formula tersebut tidak mengandung kofein. Kontrol negatif ini digunakan sebagai
faktor koreksi pada uji penetrasi in vitro menggunakan sel difusi Franz.
4.1.1 Hidrogel (A)

Sediaan hidrogel terdiri atas 3 formula, yaitu A1, A2, dan A3. Pada
formula A1, digunakan basis HPMC karena larut dalam air sehingga cocok
dijadikan sebagai basis hidrogel. Selain itu, basis tersebut sesuai dengan sifat
kofein yang lebih hidrofil dibandingkan lipofil. HPMC juga telah diteliti
sebelumnya sebagai basis sediaan gel antiselulit dengan zat aktif kofein
(Hadyanti, 2008; Novitasari, 2008). Konsentrasi HPMC yang digunakan adalah
2% karena pada konsentrasi ini sudah dapat membentuk gel dengan baik.
Pada formula A2 digunakan basis HPMC dengan konsentrasi 2%, sama
dengan formula A1. Perbedaannya adalah terdapat NaHA sebagai senyawa
peningkat penetrasi sebanyak 0,5%. Menurut penelitian sebelumnya, konsentrasi
NaHA yang biasa digunakan pada sediaan kosmetik adalah 0,05 - 5% (Balazs,
Pkwy, & Y, 1981). Konsentrasi 0,5% cukup untuk meningkatkan penetrasi
perkutan (Brown, Alcorn, & Fraser, 1999). Pada formula A3, HPMC digantikan
dengan NaHA 2% sebagai basis gel. Selain berfungsi sebagai senyawa peningkat
penetrasi perkutan, NaHA dengan konsentrasi tinggi dapat membentuk gel.
Bahan-bahan tambahan lain yang digunakan pada ketiga formulasi
umumnya sama. Komposisi dan jumlah pengawet yang digunakan pada ketiga

47
formula adalah metil paraben 0,2% dan propil paraben 0,1%. Pencampuran
keduanya akan menghasilkan aktivitas antimikroba yang lebih efektif. Pengawet
ini dibutuhkan pada sediaan hidrogel karena kandungan air dalam sediaan ini
tinggi sehingga memungkinkan terjadinya pertumbuhan mikroba. Mikroba dalam
sediaan gel dapat menurunkan viskositas sehingga gel menjadi tidak stabil.
Zat tambahan lainnya yang digunakan pada ketiga formula adalah propilen
glikol. Selain sebagai humektan, zat ini juga berfungsi sebagai pelarut dari metil
paraben dan propil paraben serta sebagai campuran pelarut senyawa alkaloid
(kofein) dengan air. Pada formula A2 dan A3, propilen glikol dapat digunakan
sebagai pelarut NaHA bersama dengan air.
Pengatur pH yang ditambahkan ke dalam sediaan ini adalah natrium sitrat
untuk meningkatkan kebasaan dan asam sitrat untuk meningkatkan keasaman.
Pada formulasi A1 ditambahkan natrium sitrat 0,2% karena pH yang didapat
terlalu asam atau kurang dari 4,5. pH ini tidak sesuai dengan pH kulit yang
berkisar antara 4,5-6,5. Natrium sitrat juga dapat meningkatkan kelarutan dari
kofein. Pada formula A2 dan A3 tidak ditambahkan natrium sitrat karena
keduanya telah memenuhi persyaratan pH kulit.
Pada pembuatan formula A1, pertama kali yang dilakukan adalah
pembentukan basis gel dari HPMC dengan cara mendispersikan HPMC dalam
aquadest. Suhu yang diperlukan untuk membuat basis gel ini adalah 80O - 90O C
dengan pengadukan menggunakan homogenizer berkecepatan 3000 rpm selama
20 menit. Massa gel akan terbentuk seiring dengan perubahan suhu dari panas
menjadi dingin. Kemudian, metil paraben dan propil paraben yang telah
dilarutkan dalam propilen glikol dimasukkan ke dalam basis gel tersebut.
Sementara itu, kofein dan natrium sitrat dilarutkan dalam air panas 80 o C hingga
larut sempurna. Semua komponen dicampur ke dalam massa gel dan diaduk
dengan pengadukan berkecepatan 3000 rpm selama 20 menit. Massa hidrogel
yang terbentuk disimpan dalam wadah yang tertutup rapat pada suhu kamar.
Sediaan ini didiamkan selama 1 malam untuk menghilangkan gelembung udara
yang terperangkap sebelum dilakukan uji evaluasi dan penetrasi. Udara yang
terperangkap ini dapat mengganggu proses evaluasi sehingga harus dihilangkan.

48
Foto sediaan hidrogel formula A1 pada minggu ke-0 dapat dilihat pada Lampiran
2.
Proses pembuatan formula A2 hampir sama dengan formula A1, tetapi
konsentrasi HPMC yang digunakan adalah 2% dan terdapat penambahan NaHA
sebanyak 0,5%. Propilen glikol yang digunakan untuk melarutkan metil paraben
dan propil paraben selanjutnya digunakan untuk melarutkan NaHA. NaHA lebih
mudah dilarutkan terlebih dahulu dalam propilen glikol dibandingkan dengan air.
Setelah larut dalam propilen glikol, air ditambahkan sedikit demi sedikit untuk
meningkatkan kelarutan NaHA tersebut. Kemudian, NaHA yang telah larut
dicampurkan ke dalam basis gel dan sisanya dibilas dengan air. Kofein dilarutkan
dalam air panas lalu dimasukkan ke dalam basis gel dan ditambahkan dengan air
yang tersisa. Semua bahan dicampur dan diaduk dengan homogenizer
berkecepatan 3000 rpm selama 20 menit. Massa gel yang sudah jadi disimpan
dalam wadah tertutup rapat pada suhu kamar dan didiamkan selama 24 jam
sebelum dilakukan uji evaluasi dan penetrasi untuk menghilangkan gelembung
udara yang terperangkap. Foto sediaan hidrogel formula A2 pada minggu ke-0
dapat dilihat pada Lampiran 2.
Pada pembuatan formula A3, HPMC sebagai basis gel diganti dengan
NaHA 2%. Selain berfungsi sebagai zat peningkat penetrasi, NaHA dengan
konsentrasi 2% juga dapat dijadikan basis gel. Hal ini disebabkan oleh struktur
NaHA yang berbentuk polimer sehingga semakin tinggi konsentrasi yang
digunakan, maka akan semakin tinggi viskositas sediaan tersebut. Proses
pembentukan basis gel dari NaHA 2% lebih sulit dibandingkan HPMC 2% karena
berat molekul NaHA lebih besar. Oleh karena itu, jumlah air yang diperlukan
untuk melarutkan NaHA pada formula A3 lebih besar dibandingkan A2. Untuk
mempermudah proses kelarutan NaHA, maka sebagian NaHA dilarutkan dalam
propilen glikol dan sebagian yang lain dilarutkan dalam air. Kemudian, keduanya
dicampur dan diaduk dengan kecepatan yang lebih tinggi (5000 rpm) selama 20
menit hingga terbentuk basis gel. Metil dan propil paraben dilarutkan dalam
propilen glikol, sedangkan kofein dilarutkan dalam air panas. Semua bahan
dicampur ke dalam basis gel dan dihomogenkan dengan homogenizer
berkecepatan 3000 rpm. Sediaan yang telah jadi disimpan dalam wadah tertutup

49
rapat pada suhu kamar selama 24 jam untuk menghilangkan gelembung udara
sebelum dilakukan uji evaluasi dan penetrasi. Foto sediaan hidrogel formula A3
pada minggu ke-0 dapat dilihat pada Lampiran 2
4.1.2 Hidroalkoholik Gel (B)

Sediaan hidroalkoholik gel terdiri atas 3 formula, yaitu B1, B2, dan B3.
Komposisi sediaan hidroalkoholik gel ini hampir sama dengan sediaan hidrogel.
Perbedaannya adalah sediaan hidroalkoholik gel ini mengandung etanol (alkohol
96%) dengan konsentrasi 40% pada masing-masing sediaan. Alkohol tersebut
selain berfungsi untuk meningkatkan penetrasi perkutan, juga dapat berfungsi
sebagai pengawet dan kosolven yang bercampur dengan air. Proses pengerjaannya
kurang lebih sama dengan pembuatan hidrogel. Setelah terbentuk basis gel,
ditambahkan metil dan propil paraben yang telah dilarutkan dalam propilen glikol.
Kemudian kofein dan natrium sitrat atau asam sitrat dilarutkan dengan air
bercampur alkohol. Semua komponen dicampur ke dalam basis gel dan
dihomogenkan dengan homogenizer berkecepatan rendah (500 rpm) selama 30
menit untuk mencegah penguapan etanol. Sediaan yang sudah jadi dimasukkan ke
dalam wadah tertutup rapat dan disimpan pada suhu kamar selama 24 jam untuk
menghilangkan gelembung udara yang terperangkap sebelum dilakukan uji
evaluasi dan penetrasi. Foto Sediaan hidroalkoholik gel formula B1, B2, dan B3
pada minggu ke-0 dapat dilihat pada Lampiran 2.
4.1.3 Emulgel (C)

Emulgel merupakan bentuk pencampuran sediaan emulsi dan gel. Pada
proses pembuatan emulgel, terlebih dahulu dibuat komponen gel dan emulsi (1:1)
sebelum keduanya dicampur. Sediaan ini mengandung bahan-bahan tambahan lain
yang tidak digunakan pada saat pembuatan hidrogel dan hidroalkoholik gel.
Bahan-bahan tambahan tersebut antara lain: parafin cair atau minyak mineral
sebagai fase minyak, span 60 sebagai emulgator lipofilik dan BHT sebagai
antioksidan yang bersifat lipofilik untuk mencegah terjadinya reaksi oksidasi pada
fase minyak. Pada fase air terdapat kofein sebagai zat aktif, natrium sitrat sebagai
pengatur kebasaan, dan tween 20 sebagai emulgator hidrofilik. Jumlah tween 20

50
dan span 60 yang dipakai dihitung berdasarkan nilai HLB yang dibutuhkan.
Kombinasi Emulgator yang mempunyai nilai HLB 11-13 akan memberikan hasil
emulsi yang baik (Anief, 1997). Perhitungan HLB terdapat pada Lampiran 29.
Pada pembuatan emulsi, fase minyak (parafin cair) dicampur dengan
emulgator yang bersifat lipofilik (span 60), kemudian dipanaskan di atas penangas
air dengan suhu 70o - 80o C. Selanjutnya, BHT dimasukkan ke dalam fase minyak
tersebut. Sementara itu, emulgator yang bersifat hidrofilik (tween 20) dilarutkan
dalam fase air (aquadest). Setelah itu, kofein dan natrium sitrat dimasukkan ke
dalam larutan tersebut dan diaduk hingga larut. Tujuan tween 20 disini selain
digunakan sebagai emulgator hidrofilik juga sebagai surfaktan nonionik. Oleh
karena itu, surfaktan tersebut dapat menurunkan tegangan permukaan antara
kofein dengan air sehingga kelarutan kofein meningkat walaupun air yang
digunakan untuk melarutkan kofein tersebut jumlahnya sedikit. Pembuatan emulsi
ini dilakukan dengan pengadukan rendah 300 rpm selama 20 menit untuk
menghindari terbentuknya busa.
Setelah massa gel dan emulsi terbentuk, maka emulsi dimasukkan ke
dalam massa gel sedikit demi sedikit dengan pengadukan berkecepatan rendah
500 rpm selama 30 menit sampai terbentuk emulgel. Selanjutnya, massa emulgel
terbentuk disimpan dalam wadah tertutup rapat pada suhu kamar dan dibiarkan
selama 24 jam untuk menghilangkan udara yang terperangkap sebelum dilakukan
uji evaluasi dan penetrasi. Foto sediaan emulgel formula C1, C2, dan C3 pada
minggu ke-0 dapat dilihat pada Lampiran 2.
4.2 Uji Evaluasi dan Stabilitas Fisik Sediaan Gel Antiselulit Kofein
Setelah semua sediaan didiamkan selama 24 jam untuk menghilangkan
gelembung-gelembung udara yang terperangkap, sediaan tersebut lalu diuji
evaluasi dan stabilitas fisik selama 8 minggu. Uji tersebut meliputi organoleptis,
homogenitas, pH, dan ukuran diameter globul (hanya pada sediaan emulgel). Uji
stabilitas fisik ini dilakukan setiap 2 minggu pada penyimpanan tiga suhu yang
berbeda, yaitu suhu kamar (28o ± 2o C), suhu rendah (5o ± 2o C), dan suhu tinggi
(40o ± 2o C). Selain itu, dilakukan juga uji viskositas dan konsistensi sediaan pada

51
minggu ke-0 dan minggu ke-8 pada penyimpanan suhu kamar serta uji mekanik
dan uji enam siklus (cycling test) pada minggu ke-0.
4.2.1 Pengamatan Organoleptis

Pengamatan organoleptis dilakukan untuk mengetahui adanya perubahan
warna, bau, atau terjadinya sineresis pada sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel,
dan emulgel selama 8 minggu pada penyimpanan suhu yang berbeda
4.2.1.1 Stabilitas Fisik Berbagai Sediaan Gel Berdasarkan Pengamatan

Organoleptis pada Penyimpanan Suhu Kamar (28o ± 2o C)
Pada minggu ke-0 atau awal pembuatan, sediaan hidrogel A1, A2, dan A3
menghasilkan gel yang berwarna transparan, tidak berbau, dan tidak terjadi
sineresis. Sediaan ini bersifat transparan karena semua komponennya dalam
keadaan terlarut. Pada minggu ke-2 hingga ke-8 tidak terjadi perubahan
organoleptis yang signifikan, seperti perubahan warna, bau, atau terjadinya
sineresis. Dengan demikian, sediaan hidrogel secara organoleptis stabil pada
penyimpanan suhu kamar. Foto pengamatan organoleptis dari sediaan hidrogel
A1, A2, dan A3 selama 8 minggu pada penyimpanan suhu kamar dapat dilihat
pada Lampiran 3.
Pada sediaan hidroalkoholik gel B1 dan B2 minggu ke-0 dihasilkan warna
gel yang transparan, berbau alkohol, dan tidak terjadi sineresis, sedangkan pada
formula B3 dihasilkan warna yang agak keruh atau tidak transparan, berbau
alkohol, dan tidak terjadi sineresis. Kekeruhan ini dapat terjadi salah satunya
disebabkan oleh faktor kelarutan NaHA dalam air dan etanol. NaHA larut
sebagian dalam air, namun praktis tidak larut dalam etanol. Sementara itu, pada
formula B3 dihasilkan warna gel yang agak keruh karena jumlah NaHA lebih
banyak dan jumlah air yang ada tidak cukup untuk melarutkan NaHA.
Keberadaan etanol mengurangi jumlah air sehingga kelarutan NaHA berkurang.
Penyimpanan selama 8 minggu tidak menunjukkan adanya perubahan
organoleptis yang signifikan pada sediaan hidroalkoholik gel. Oleh karena itu,
sediaan hidroalkoholik gel secara organoleptis stabil pada penyimpanan suhu
kamar. Foto pengamatan organoleptis sediaan hidroalkoholik gel formula B1, B2,

52
dan B3 selama 8 minggu pada penyimpanan suhu kamar dapat dilihat pada
Lampiran 4.
Sediaan emulgel C1 menghasilkan warna putih susu, berbau emulsi, dan
tidak terjadi sineresis; formula C2 menghasilkan warna putih susu yang lebih
putih dibandingkan formula C1, berbau emulsi, dan tidak terjadi sineresis;
formula C3 menghasilkan warna putih susu yang lebih putih dibandingkan
formula C2, berbau emulsi, dan tidak terjadi sineresis. Warna putih susu ini
muncul karena terdapat emulsi di dalamnya. Perbedaan warna putih pada emulgel
ini disebabkan oleh perbedaan warna serbuk antara HPMC dan NaHA. Warna
serbuk HPMC lebih kekuningan, sedangkan warna serbuk NaHA lebih putih.
Formula C3 lebih putih dari pada C2 karena mengandung NaHA lebih banyak,
sedangkan warna formula C1 kurang putih karena tidak ada NaHA di dalamnya.
Pada penyimpanan suhu kamar selama 8 minggu, sediaan emulgel C1, C2, dan C3
secara organoleptis stabil karena tidak mengalami perubahan warna, bau, ataupun
terjadinya sineresis. Foto pengamatan organoleptis sediaan emulgel selama 8
minggu pada penyimpanan suhu kamar dapat dilihat pada Lampiran 5.
Pada penyimpanan suhu kamar, sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan
emulgel stabil. Data hasil pengamatan organoleptis sediaan pada penyimpanan
suhu kamar dapat dilihat pada Lampiran 21.

Organoleptis pada Penyimpanan Suhu Rendah (5o ± 2o C)
Sediaan hidrogel A1, A2, dan A3 pada minggu ke-0 menghasilkan warna
gel yang transparan, tidak berbau, dan tidak terjadi sineresis. Pada formula A1
minggu ke-2 hingga ke-8, terjadi perubahan warna dari transparan menjadi putih,
namun tidak terjadi perubahan bau ataupun sineresis. Formula A2 mengalami
perubahan warna menjadi putih seperti formula A1 mulai minggu ke-4 hingga ke-
8, tetapi tidak terjadi perubahan bau ataupun sineresis. Formula A3 mulai terjadi
perubahan warna menjadi putih pada minggu ke-6 hingga ke-8. Perubahan warna
dari transparan menjadi putih pada masing-masing formula ini akibat
terbentuknya benang-benang atau jarum-jarum kristal kofein. Hal ini dapat terjadi
karena kofein dilarutkan dalam air panas. Ketika suhu berubah menjadi dingin,

53
terjadi kondisi lewat jenuh dari pelarutnya sehingga kofein mengalami

rekristalisasi. Dengan demikian, sediaan hidrogel A1, A2, dan A3 secara
organoleptis tidak stabil pada penyimpanan suhu rendah. Foto pengamatan
organoleptis sediaan hidrogel selama 8 minggu pada penyimpanan suhu rendah
Sediaan hiroalkoholikgel B1 pada minggu ke-0 berwarna transparan,
berbau alkohol, dan tidak terjadi sineresis. Pada minggu ke-2 hingga ke-6 tidak
terjadi perubahan, baik warna, bau, maupun sineresis. Namun, pada minggu ke-8
mulai terjadi perubahan warna dari transparan menjadi putih karena terjadi
rekristalisasi kofein seperti yang telah dijelaskan sebelumnya. Formula B1
tersebut tidak mengalami perubahan bau maupun sineresis. Pada formula B2
minggu ke-0 hingga minggu ke-8 tidak terjadi perubahan yang signifikan secara
organoleptis, gel yang dihasilkan tetap berwarna transparan, berbau alkohol, dan
tidak terjadi sineresis. Gel yang dihasilkan formula B3 minggu ke-0 berwarna
agak keruh, berbau alkohol, dan tidak terjadi sineresis. Keadaan ini tidak berubah
secara signifikan selama penyimpanan 8 minggu. Secara umum, sediaan
hidroalkoholik gel lebih stabil dibandingkan sediaan hidrogel pada penyimpanan
suhu rendah karena hanya 1 formula yang mengalami rekristalisasi pada minggu
ke-8, yaitu formula B1. Hal ini disebabkan oleh adanya campuran pelarut air dan
alkohol yang berfungsi sebagai kosolven dalam meningkatkan kelarutan kofein.
Foto pengamatan organoleptis dari sediaan hidroalkoholik gel formula B1, B2,
dan B3 selama 8 minggu pada penyimpanan suhu rendah dapat dilihat pada
Lampiran 7.
Sediaan emulgel C1 minggu ke-0 menghasilkan warna putih susu, berbau
emulsi, dan tidak terjadi sineresis. Pada minggu ke-2 hingga ke-4, gel tidak
mengalami perubahan yang signifikan secara organoleptis. Mulai minggu ke-6
hingga ke-8 muncul jarum-jarum kristal kofein, tetapi tidak mengubah warna, bau,
ataupun terjadinya sineresis. Formula C2 minggu ke-0 menghasilkan warna putih
susu yang lebih putih dibandingkan formula C1 seperti yang telah dijelaskan
sebelumnya, berbau emulsi, dan tidak terjadi sineresis. Penyimpanan selama 4
minggu tidak menunjukkan adanya perubahan secara organoleptis. Namun, mulai
muncul jarum-jarum kofein pada minggu ke-6 hingga ke-8. Akan tetapi,

54
munculnya jarum-jarum tersebut tidak mengubah warna, bau, ataupun terjadinya

sineresis. Formula C3 minggu ke-0 menghasilkan warna putih susu yang lebih
putih dibandingkan formula emulgel lainnya, berbau emulsi dan tidak terjadi
sineresis. Keadaan ini tidak berubah selama penyimpanan 8 minggu. Dengan
demikian, formula C3 stabil secara organoleptis. Foto pengamatan organoleptis
dari sediaan emulgel formula C1, C2, dan C3 selama 8 minggu pada penyimpanan
suhu rendah dapat dilihat pada Lampiran 8.
Pada penyimpanan suhu rendah, sediaan emulgel secara organoleptis lebih
stabil dibandingkan sediaan hidrogel dan hidroalkoholik gel. Data hasil
pengamatan organoleptis sediaan pada penyimpanan suhu rendah dapat dilihat
pada Lampiran 22.

Organoleptis pada Penyimpanan Suhu Tinggi (40o ± 2o C)
Pada penyimpanan suhu tinggi, sediaan hidrogel A1, A2, dan A3 pada
minggu ke-0 menghasilkan warna gel yang transparan, tidak berbau, dan tidak
terjadi sineresis. Keadaan ini tidak berubah selama penyimpanan 8 minggu
sehingga sediaan hidrogel stabil secara organoleptis. Foto pengamatan
organoleptis dari sediaan hidrogel formula A1, A2, dan A3 selama 8 minggu pada
penyimpanan suhu tinggi dapat dilihat pada Lampiran 9.
Sediaan hidroalkoholik gel formula B1 dan B2 pada minggu ke-0 sampai
minggu ke-6 menghasilkan warna gel yang transparan, berbau alkohol, dan tidak
terjadi sineresis. Pada minggu ke-8, bau alkohol mulai menghilang karena terjadi
penguapan, namun tidak mengalami perubahan warna ataupun terjadi sineresis.
Formula B3 pada minggu ke-0 menghasilkan warna gel yang agak keruh, berbau
alkohol, dan tidak terjadi sineresis. Keadaan ini tetap stabil selama 6 minggu,
namun pada minggu ke-8 bau alkohol mulai menghilang tanpa mempengaruhi
warna dan terjadinya sineresis. Dengan demikian, sediaan hidroalkoholik gel
secara organoleptis tidak stabil selama penyimpanan 8 minggu pada suhu tinggi.
Foto pengamatan organoleptis sediaan hidroalkoholik gel B1, B2, dan B3 selama
8 minggu pada penyimpanan suhu tinggi dapat dilihat pada Lampiran 10.

55
Sediaan emulgel C1 minggu ke-0 menghasilkan warna putih susu, berbau

emulsi, dan tidak terjadi sineresis. Pada minggu ke-2 hingga ke-8 mulai terjadi
sineresis karena matriks gel tidak mampu mempertahankan pelarut di dalamnya
akibat kontraksi gel tersebut, namun tidak terjadi perubahan warna atau bau.
Sineresis dapat terjadi karena viskositas dari gel yang menurun akibat pengaruh
kenaikan temperatur. Pada formula C2 minggu ke-0 dihasilkan gel berwarna putih
susu yang lebih putih dibandingkan formula C2, berbau emulsi, dan tidak terjadi
sineresis. Pada minggu ke-4 mulai terjadi sineresis tanpa disertai perubahan warna
atau bau. Formula C3 minggu ke-0 menghasilkan warna putih susu yang lebih
putih dibandingkan formula C2, berbau emulsi, dan tidak terjadi sineresis.
Namun, pada minggu ke-6 mulai terjadi sineresis tanpa disertai perubahan warna
dan bau. Formula C1 lebih dahulu mengalami sineresis karena viskositasnya lebih
kecil dibandingkan formula C2 dan C3. Formula C3 lebih mampu mencegah
terjadinya sineresis sampai minggu ke 6 karena viskositasnya paling tinggi di
antara formula lainnya. Sineresis pada sediaan emulgel ini dapat dilihat dari
adanya fase emulsi di atas permukaan gel. Dengan demikian, sediaan emulgel
tidak stabil pada penyimpanan suhu tinggi. Foto pengamatan organoleptis dari
sediaan emulgel C1, C2, dan C3 selama 8 minggu pada penyimpanan suhu tinggi
Pada penyimpanan suhu tinggi, sediaan hiroalkoholik gel dan emulgel
tidak stabil karena terjadi perubahan organoleptis, sedangkan sediaan hidrogel
stabil secara organoleptis karena tidak berubah secara signifikan. Data hasil
pengamatan organoleptis sediaan pada penyimpanan suhu tinggi dapat dilihat
pada Lampiran 23.
4.2.2 Pemeriksaan Homogenitas

Uji homogenitas dilakukan untuk mengetahui adanya partikel-partikel
kasar atau rekristalisasi dari kofein pada sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan
emulgel selama 8 minggu pada penyimpanan suhu yang berbeda. Sediaan
dioleskan di atas gelas objek, lalu diamati di bawah cahaya lampu dengan bantuan
karton hitam.

56
4.2.2.1 Stabilitas Fisik Berbagai Sediaan Gel Berdasarkan Pemeriksaan

Homogenitas pada Penyimpanan Suhu Kamar (28o ± 2o C)
Pada sediaan hidrogel A1, A2, dan A3 minggu ke-0, gel yang dihasilkan
bersifat homogen, tidak terdapat partikel-partikel kasar atau rekristalisasi kofein.
Selama penyimpanan 8 minggu, sediaan hidrogel tidak menunjukkan perubahan
yang signifikan. Dengan demikian, sediaan hidrogel secara homogenitas stabil
pada penyimpanan suhu kamar selama 8 minggu.
Pada sediaan hidroalkoholik gel B1, B2, dan B3, selama penyimpanan
suhu kamar 8 minggu, juga tidak menunjukkan perubahan yang signifikan dari
kondisi awalnya. Sediaan hidroalkoholik gel ini tetap homogen, tidak terdapat
partikel-partikel kasar di dalamnya ataupun kristal kofein. Dengan demikian,
sediaan hidroalkoholik gel secara homogenitas stabil pada penyimpanan suhu
kamar selama 8 minggu.
Begitu juga dengan sediaan emulgel C1, C2, dan C3, sejak awal
pembuatan hingga penyimpanan selama 8 minggu pada suhu kamar, tidak
menunjukkan adanya perubahan secara homogenitas. Dengan demikian, sediaan
emulgel stabil secara homogenitas selama penyimpanan 8 minggu pada suhu
kamar.
Berdasarkan data pengamatan homogenitas pada Lampiran 21, semua
sediaan (hidrogel, hidroalkoholik gel, dan emulgel) stabil secara homogenitas
pada penyimpanan suhu kamar selama 8 minggu karena tidak terdapat adanya
partikel-partikel kasar ataupun kristal lainnya.

Homogenitas pada Penyimpanan Suhu Rendah (5o ± 2o C)
Pada sediaan hidrogel A1, A2, dan A3 di minggu ke-0 tidak menunjukkan
adanya ketidakhomogenan pada sediaan. Namun, pada formula A1 mulai minggu
ke-2 sampai minggu ke-8 terdapat adanya kristal kofein berbentuk jarum.
Ketidakhomogenan ini juga terjadi pada formula A2 mulai minggu ke-4 sampai
minggu ke-8 dan formula A3 mulai minggu ke-8. Hal ini disebabkan oleh kondisi
lewat jenuh (over saturated) dari kofein. Kelarutan kofein dalam air panas adalah
1:5, sedangkan pada suhu kamar menurun menjadi 1:50. Dengan demikian,

57
sediaan hidrogel secara homogenitas tidak stabil pada penyimpanan suhu rendah
selama 8 minggu.
Pada sediaan hidroalkoholik gel B1, B2, dan B3 minggu ke-0 tidak
menunjukkan adanya ketidakhomogenan pada sediaan. Namun, mulai minggu ke-
8, pada pada formula B1 terjadi ketidakhomogenan yang ditandai oleh
terbentuknya jarum-jarum kofein seperti yang telah dibahas sebelumnya. Akan
tetapi, pada formula B2 dan B3 tetap homogen selama 8 minggu pada
penyimpanan suhu rendah. Hal ini diduga karena adanya NaHA pada sediaan
yang membantu mencegah terjadinya rekristalisasi.
Pada sediaan emulgel C1, C2, dan C3 minggu ke-0 menghasilkan sediaan
yang homogen. Akan tetapi, kondisi ini mulai berubah menjadi tidak homogen
akibat terbentuknya jarum-jarum kristal kofein pada formula C1 di minggu ke-6
hingga minggu ke-8. Begitu juga dengan formula C2, mulai terbentuk kristal pada
minggu ke-6 hingga ke-8. Namun, ketidakhomogenan ini tidak terjadi pada
formula C3. Hal ini diduga oleh adanya pengaruh NaHA yang mampu mencegah
terjadinya rekristalisasi.
Pada sediaan hidrogel, terbentuk lebih banyak kristal dibandingkan
sediaan hidroalkoholik gel dan emulgel. Hal ini diduga akibat kurangnya jumlah
pelarut untuk melarutkan kofein tersebut. Kofein dilarutkan di dalam air panas
sehingga dalam suhu rendah jumlah air yang tersedia tidak cukup untuk
mempertahankan kondisi jenuh dari kofein sehingga terjadi rekristalisasi. Di sisi
lain, sediaan hidroalkoholik gel lebih stabil dari pada sediaan hidrogel karena
terdapat kosolven alkohol bercampur air di dalamnya. Kosolven akan
meningkatkan kelarutan dari zat yang kelarutannya kecil di dalam air (Boylan,
2008). Sediaan emulgel lebih stabil dibandingkan hidrogel karena terdapat
surfaktan (tween 20) yang dapat meningkatkan solubilitas kofein, namun tidak
lebih stabil dibandingkan dengan hidroalkoholik gel karena di dalam emulgel
terdapat minyak yang dapat menurunkan kelarutan kofein.
Berdasarkan data pengamatan homogenitas pada Lampiran 22, pada
umumnya sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan emulgel secara homogenitas
tidak stabil pada penyimpanan suhu rendah selama 8 minggu, kecuali pada
formula B2, B3, dan C3.

58

Homogenitas pada Penyimpanan Suhu Tinggi (40o ± 2o C)
Pada sediaan hidogel A1, A2, dan A3, tidak menunjukkan adanya
perubahan secara homogenitas pada penyimpanan suhu tinggi selama 8 minggu.
kondisi ini tetap homogen sejak awal pembuatan atau minggu ke-0. Begitu juga
dengan sediaan hidroalkoholik gel B1, B2, dan B3 serta sediaan emulgel C1, C2,
dan C3. Dengan demikian, dari hasil uji dapat diambil kesimpulan semua sediaan
stabil secara homogenitas pada penyimpanan suhu tinggi selama 8 minggu. Data
hasil pengamatan homogenitas pada penyimpanan suhu tinggi selama 8 minggu
4.2.3 Pengukuran pH
Pengukuran pH dilakukan selama 8 minggu dengan menggunakan pH
meter pada suhu 25o C. Sebelum digunakan untuk mengukur pH sediaan, pH
meter terlebih dahulu dikalibrasi menggunakan dapar 4 dan dapar 7. Untuk dapat
menembus barier stratum korneum tanpa menimbulkan iritasi, sediaan harus
memiliki pH sesuai dengan pH fisiologis kulit, yaitu 4,5 - 6,5. Semakin jauh beda
antara pH sediaan dengan pH fisiologis kulit, maka akan semakin hebat sediaan
tersebut menimbulkan reaksi negatif pada kulit (Tranggono & Latifah, 2007).
4.2.3.1 Stabilitas Fisik Berbagai Sediaan Gel Berdasarkan Pengukuran pH pada

Penyimpanan Suhu Kamar (28o ± 2o C)
Berdasarkan data pengamatan pH sediaan hidrogel pada Tabel 4.1,
formula A1 mengalami penurunan pH dari 6,12 pada minggu ke-0 menjadi 5,93
pada minggu ke-8. Formula A2 mengalami peningkatan pH dari 5,93 pada
minggu ke-0 hingga 5,99 pada minggu ke-8. Begitu juga dengan formula A3
mengalami peningkatan pH dari 5,47 pada minggu ke-0 hingga 5,73 pada minggu
ke-8. Meskipun mengalami perubahan pH, sediaan hidrogel formula A1, A2, dan
A3 masih berada dalam rentang pH yang sesuai dengan pH kulit. Grafik hubungan
antara waktu penyimpanan dengan pH sediaan hidrogel dapat dilihat pada Gambar
4.1.

59
Tabel 4.1. Data hasil pengamatan pH berbagai sediaan gel pada penyimpanan
suhu kamar (28o C ± 2o C) selama 8 minggu
pH pada minggu ke-

Formula
0 2 4 6 8
A1 6,12 6,06 6,00 5,93 5,93
A2 5,93 5,94 5,95 5,97 5,99
A3 5,47 5,60 5,62 5,68 5,73
B1 6,00 5,98 5,73 5,49 5,01
B2 5,64 5,90 6,10 6,27 6,37
B3 6,23 6,34 6,56 6,68 6,91
C1 5,36 5,32 5,23 5,22 5,18
C2 4,71 4,81 5,00 5,19 5,35
C3 5,14 5,31 5,48 5,50 5,63
Keterangan:
A= Hidrogel; B = Hidroalkoholik gel; C= Emulgel
1= HPMC 2%; 2 = HPMC 2% + NaHA 0,5%; 3 = NaHA 2%
pH Sediaan hidroalkoholik gel selama penyimpanan 8 minggu pada suhu

kamar dapat dilihat pada Tabel 4.1. Berdasarkan data tersebut, formula B1
mengalami penurunan pH dari 6,00 pada minggu ke-0 menjadi 5,01 pada minggu
ke-8. Formula B2 mengalami peningkatan pH dari 5,64 pada minggu ke-0 hingga
6,37 pada minggu ke-8. Begitu juga dengan formula B3 mengalami peningkatan
pH dari 6,23 pada minggu ke-0 hingga 6,91 pada minggu ke-8. Dengan demikian,
formula B1 dan B2 masih berada dalam rentang pH yang sesuai dengan pH
fisiologis kulit, sedangkan formula B3 berada di luar rentang kulit karena terlalu
basa. Formula B3 memang sudah memiliki pH basa pada awal pembuatan, jumlah
asam sitrat yang digunakan untuk menurunkan pH sediaan tidak dapat
mempertahankan kondisi tersebut selama penyimpanan 8 minggu sehingga
dibutuhkan larutan pendapar yang cocok untuk dapat mempertahankan pH. Grafik
hubungan antara waktu penyimpanan dengan pH sediaan hidroalkoholik gel dapat
dilihat pada Gambar 4.2.
Pada sediaan emulgel, berdasarkan Tabel 4.1, formula C1 mengalami
penurunan pH dari 5,36 menjadi 5,18. Formula C2 mengalami peningkatan pH
dari 4,71 pada minggu ke-0 hingga 5,35 pada minggu ke-8. Begitu juga dengan
formula B3 mengalami peningkatan pH dari 5,14 pada minggu ke-0 hingga 5,63
pada minggu ke-8. Dengan demikian, semua sediaan emulgel berada dalam
rentang pH yang sesuai dengan pH fisiologis kulit selama 8 minggu. Grafik

60
hubungan antara waktu penyimpanan dengan pH sediaan emulgel dapat dilihat

pada Gambar 4.3.
Formula A1, B1, dan C1 terus mengalami penurunan pH dari minggu ke-0
hingga minggu ke-8. Hal ini disebabkan oleh pengaruh CO2 yang bereaksi dengan
air atau H2O di dalam fase gel sehingga membentuk asam bikarbonat (H2CO3).
Adanya asam akan menurunkan pH sediaan, semakin banyak CO2 yang berikatan
dengan air, maka akan semakin banyak asam yang terbentuk sehingga pH sediaan
terus menurun. Selain itu, formula A2, A3, B2, B3, C2, dan C3 mengalami
peningkatan pH. Hal ini disebabkan oleh adanya NaHA yang akan mengalami
ionisasi dalam air. Ion Na+ dari natrium hialuronat akan terlepas dan berikatan
dengan OH- dari air sehingga membuat pH sediaan meningkat dan lebih basa.
Hialuronat memiliki sifat yang higroskopis dan cenderung suka menarik air dari
lingkungannya. Semakin banyak jumlah air yang ada, maka semakin banyak
NaHA yang terion dan semakin meningkatkan pH sediaan.

Penyimpanan Suhu Rendah (4o ± 2o C)
ke-8. pH sediaan hidrogel formula A1, A2, dan A3 masih berada dalam rentang
pH yang sesuai dengan pH mantel asam kulit. Grafik hubungan antara waktu
penyimpanan dengan pH sediaan hidrogel dapat dilihat pada Gambar 4.1.

61
suhu rendah (5o C ± 2o C) selama 8 minggu
pH pada minggu ke-

Formula
0 2 4 6 8
A1 6,12 5,96 5,53 5,36 5,33
A2 5,93 5,94 6.00 6,07 6.07
A3 5,47 5,86 6,25 6,30 6.35
B1 6,00 5,99 5,96 5,94 5,91
B2 5,64 6,29 6,35 6,37 6,38
B3 6,23 6,46 6,72 6,76 6,79
C1 5,36 5,35 5,33 5,30 5,30
C2 4,71 4,72 4,80 4,85 4,85
C3 5,14 5,39 5,41 5,43 5,47
Keterangan:
Pada sediaan hidroalkoholik gel berdasarkan Tabel 4.2, formula B1

pH dari 6,23 pada minggu ke-0 hingga 6,79 pada minggu ke-8. pH sediaan
hidroalkoholik gel formula B1 dan B2 masih berada dalam rentang pH yang
sesuai dengan pH fisiologis kulit, sedangkan pH formula B3 berda di luar rentang
pH kulit. Grafik hubungan antara waktu penyimpanan dengan pH sediaan
hidroalkoholik gel dapat dilihat pada Gambar 4.2.
Berdasarkan data pengamatan pH sediaan emulgel pada Tabel 4.2, formula
C1 mengalami penurunan pH dari 5,36 pada minggu ke-0 menjadi 5,30 pada
minggu ke-8. Formula C2 mengalami peningkatan pH dari 4,71 pada minggu ke-0
hingga 4,85 pada minggu ke-8. Begitu juga dengan formula C3 mengalami
peningkatan pH dari 5,14 pada minggu ke-0 hingga 5,47 pada minggu ke-8.
Dengan demikian, sediaan emulgel formula C1, C2, dan C3 masih berada dalam
rentang pH yang sesuai dengan pH fisiologis kulit. Grafik hubungan antara waktu
penyimpanan dengan pH sediaan emulgel dapat dilihat pada Gambar 4.3.
Seperti penyimpanan pada suhu kamar, formula A1, B1, dan C1 yang
disimpan pada suhu rendah terus mengalami penurunan pH dari minggu ke-0
hingga minggu ke-8. Di sisi lain, formula A2, A3, B2, B3, C2, dan C3 terus

62
mengalami peningkatan pH dari minggu ke-0 hingga minggu ke-8 seperti yang
telah dijelaskan sebelumnya.

Penyimpanan Suhu Tinggi (40o ± 2o C)
ke-8. Formula A1 dan A2 masih berada dalam rentang pH yang sesuai dengan pH
fisiologis kulit, sedangkan, formula A3 berada di luar rentang pH fisiologis kulit.
Grafik hubungan antara waktu penyimpanan dengan pH sediaan hidrogel dapat
dilihat pada Gambar 4.1.
suhu tinggi (40o C ± 2o C) selama 8 minggu
Formula pH pada minggu ke-

0 2 4 6 8
A1 6,12 5,93 5,69 5,44 5,14
A2 5,93 5,94 6,05 6,23 6,49
A3 5,47 6,14 6,53 6,60 6,61
B1 6,00 5,93 5,76 5,69 5,59
B2 5,64 6,00 6,04 6,06 6,10
B3 6,23 6,58 6,88 7,55 7,62
C1 5,36 5,30 5,25 5,20 5,05
C2 4,71 4,79 4,86 4,90 4,96
C3 5,14 5,42 5,45 5,48 5,50
Keterangan:
pH sediaan hidroalkoholik gel selama penyimpanan 8 minggu pada suhu

tinggi dapat dilihat pada Tabel 4.3. Berdasarkan data tersebut, formula B1

63
pH dari 6,23 pada minggu ke-0 hingga 7,62 pada minggu ke-8. Dengan demikian,
formula B1 dan B2 masih berada dalam rentang pH yang sesuai dengan pH
fisiologis kulit, sedangkan formula B3 berada di luar rentang kulit karena terlalu
basa. Grafik hubungan antara waktu penyimpanan dengan pH sediaan
hidroalkoholik gel dapat dilihat pada Gambar 4.2.
Pada sediaan emulgel, berdasarkan Tabel 4.3, formula C1 mengalami
penurunan pH dari 5,36 menjadi 5,05. Formula C2 mengalami peningkatan pH
dari 4,71 pada minggu ke-0 hingga 4,96 pada minggu ke-8. Begitu juga dengan
formula B3 mengalami peningkatan pH dari 5,14 pada minggu ke-0 hingga 5,50
pada minggu ke-8. Dengan demikian, semua sediaan emulgel berada dalam
rentang pH yang sesuai dengan pH fisiologis kulit selama 8 minggu. Grafik
hubungan antara waktu penyimpanan dengan pH sediaan emulgel dapat dilihat
pada Gambar 4.3.
Pengukuran pH sediaan pada suhu tinggi selama 8 minggu berdasarkan
Gambar 4.1 - 4.3 menunjukkan adanya perbedaan pH yang cukup signifikan
dibandingkan penyimpanan pada suhu kamar maupun suhu rendah. Formula A1,
B1, dan C1 mengalami penurunan pH seiring bertambahnya waktu, sedangkan
formula A2, A3, B2, B3, C2, dan C3 mengalami peningkatan pH seperti yang
telah dijelaskan sebelumnya.
Berdasarkan data pada Tabel 4.3, dapat dilihat bahwa sediaan lebih stabil
disimpan pada suhu kamar atau suhu rendah dibandingkan pada suhu tinggi.
Namun, sediaan akan lebih stabil disimpan pada suhu kamar karena sediaan dapat
mengalami rekristalisasi pada suhu rendah akibat kondisi lewat jenuh dari pelarut
sediaan.

64
6,5 7,0
6,0 6,5
5,5
5,0 6,0
4,5 5,5
(a) (b)
7,0
6,5
06,0
5,5
5,0
(c)
Gambar 4.1. Grafik hubungan antara waktu penyimpanan dengan pH sediaan

hidrogel A1 (a), A2 (b), dan A3 (c) pada berbagai suhu
6,5 6,5
6,0
6,0
5,5
5,0
5,5
(a) (b)
8,0
7,5
7,0
6,5
6,0
5,5
(c)

hidroalkoholik gel B1 (a), B2 (b), dan B3 (c) pada berbagai suhu

65
5,5 5,5
5,0 5,0
4,5 4,5
(a) (b)
6,0
5,5
5,0
(c)

emulgel C1 (a), C2 (b), dan C3 (c) pada berbagai suhu
4.2.4 Pengukuran Diameter Globul Rata-Rata

Pengukuran diameter globul rata-rata ini hanya dilakukan pada sediaan
emulgel karena sediaan ini memiliki globul emulsi minyak dalam air, sedangkan
pada sediaan hidrogel dan hidroalkoholik gel tidak memiliki globul. Berdasarkan
data pengamatan yang diperoleh pada Tabel 4.4, diameter globul rata-rata sediaan
emulgel formula C1 pada penyimpanan suhu kamar selama 8 minggu berkisar
antara 0,1110 – 0,1930, pada penyimpanan suhu rendah berkisar antara 0,1110 –
0,1324, pada penyimpanan suhu tinggi berkisar antara 0,1110 – 0,1989. Sediaan
emulgel formula C2 pada penyimpanan suhu kamar selama 8 minggu berkisar
antara 0,0876 – 0,1854, pada penyimpanan suhu rendah selama 8 minggu berkisar
antara 0,0876 – 0,1175, pada penyimpanan suhu tinggi selama 8 minggu berkisar
antara 0,0876 – 0,1904. Sediaan emulgel formula C3 pada penyimpanan suhu
kamar selama 8 minggu berkisar antara 0,0868 – 0,1490, pada penyimpanan
rendah selama 8 minggu berkisar antara 0,0868 – 0,0993, pada penyimpanan suhu
tinggi berkisar antara 0,0868 – 0,1724. Foto ukuran diameter globul sediaan
emulgel formula C1, C2, dan C3 pada berbagai suhu dapat dilihat pada Lampiran

66
12 – Lampiran 20 dan contoh perhitungan diameter globul rata-rata dapat dilihat

pada Lampiran 30.
Tabel 4.4. Data hasil pengukuran diameter globul rata-rata berbagai sediaan gel
pada penyimpanan suhu yang berbeda
Ukuran Diameter Globul Rata-rata (µm)

Sediaan Suhu Minggu ke- Minggu ke- Minggu Minggu Minggu
0 2 ke-4 ke-6 ke-8
Kamar 0,1110 0.1179 0.1407 0.1605 0,1930
C1 Rendah 0,1110 0.1125 0,1200 0.1276 0,1324
Tinggi 0,1110 0.1254 0.1419 0,1695 0.1989
Kamar 0.0876 0.1158 0,1340 0.1502 0.1854
C2 Rendah 0.0876 0,0903 0,1008 0.1030 0.1175
Tinggi 0.0876 0.1197 0.1391 0.1532 0,1904
Kamar 0.0868 0.0954 0.1038 0.1451 0.1490
C3 Rendah 0.0868 0.0764 0,0907 0.0929 0.0993
Tinggi 0.0868 0.1177 0,1200 0.1469 0.1724
Keterangan:
Jika dikelompokkan berdasarkan suhu penyimpanan, maka sediaan

emulgel yang disimpan pada suhu kamar berkisar antara 0,0868 – 0,1930, pada
suhu rendah berkisar antara 0,0868 – 0,1324, dan pada suhu tinggi berkisar antara
0,0868 – 0,1989. Hal ini sesuai dengan warna sediaan emulgel yang berwarna
putih hingga putih susu (Djajadisastra, 2004). Sediaan emulgel tersebut tergolong
ke dalam dispersi koloid karena memiliki ukuran diameter globul berkisar antara
0,5 µm – 1,0 nm. Artinya, globul-globul tersebut tidak dapat dilihat oleh
mikroskop biasa, tetapi dapat dengan mikroskop elektron dan tergolong ke dalam
emulsi halus. Ukuran diameter globul pada sediaan emulgel lebih kecil
dibandingkan sediaan emulsi biasa karena di dalam emulgel terdapat basis gel
atau polimer yang mempengaruhi ukuran globul (Martin, Swarbrick, &
Cammarata, 1993).
Ukuran diameter globul terbesar terdapat pada sediaan yang disimpan pada
suhu tinggi dan yang terkecil terdapat pada sediaan yang disimpan suhu rendah.
Suhu yang tinggi dapat mempengaruhi kestabilan dari emulsi karena fase air dan
fase minyak akan semakin cepat memisah. Hal ini sesuai dengan persamaan
kinetika kimia Arhenius yang menyatakan bahwa semakin tinggi temperatur,

67
maka kemampuan untuk memindahkan suatu molekul dari cairan tersebut

semakin besar sehingga globul fase air dan fase minyak akan berusaha untuk
bergabung dengan fase sejenis. Penggabungan 2 atau lebih globul dari fase
terdispersi (minyak) disebut juga flokulasi. Sesuai hukum Stokes, semakin besar
ukuran globul maka akan semakin cepat laju sedimentasinya sehingga akan
menurunkan viskositas. Ukuran globul ini merupakan indikator utama untuk
kecenderungan terjadinya pemisahan 2 emulsi (creaming) atau pemisahan dua
fase tersendiri (breaking) (Djajadisastra, 2004; Martin, Swarbrick, & Cammarata,
2008).
4.2.5 Penentuan Viskositas dan Sifat Aliran (Rheologi)

Pemeriksaan viskositas terhadap semua sediaan dilakukan pada minggu
ke-0 dan minggu ke-8 pada penyimpanan suhu kamar menggunakan alat
viskometer Brookfield dengan kecepatan 2 rpm. Dari nilai viskositas dapat
diketahui sifat aliran sediaan tersebut. Data hasil pengukuran viskositas pada
minggu ke-0 dapat dilihat pada Lampiran 24 dan viskositas pada minggu ke-8
dapat dilihat pada Lampiran 25, sedangkan perbandingan antara keduanya pada
kecepatan 2 rpm dapat dilihat pada Tabel 4.5.
Tabel 4.5. Data perbandingan viskositas dan sifat alir berbagai sediaan gel antara
minggu ke-0 dan minggu ke-8 pada kecepatan 2 rpm
Viskositas (Cps) Sifat Alir

Sediaan
Minggu ke-0 Minggu ke-8 Minggu ke-0 Minggu ke-8
A1 14300 16000 Pseudoplastis Pseudoplastis
B1 12000 12300 Pseudoplastis Pseudoplastis
C1 20500 21200 Pseudoplastis Pseudoplastis
Keterangan:
A = Hidrogel; B = Hidroalkoholik gel; C = Emulgel
1 = HPMC 2%; 2 = HPMC 2% + NaHA 0,5%; 3 = NaHA 2%
Berdasarkan perbandingan data viskositas pada pada Tabel 4.5, dapat

diketahui bahwa sediaan hidrogel lebih rendah viskositasnya dibandingkan

68
sediaan emulgel, namun lebih tinggi dibandingkan sediaan hidroalkoholik gel,

baik pada minggu ke-0 maupun minggu ke-8. Sediaan hidroalkoholik gel lebih
rendah viskositasnya karena mengandung etanol (alkohol 96%) sebanyak 40%.
Adanya etanol dapat menyebabkan pengenceran pada sediaan sehingga
menurunkan viskositasnya. Sebaliknya, sediaan emulgel memiliki viskositas
tertinggi karena di dalamnya mengandung globul emulsi minyak dalam air.
Adanya globul emulsi ini memberikan peranan yang cukup signifikan dalam
meningkatkan viskositas sediaan emulgel karena meningkatkan volume sediaan.
Berdasarkan hukum stokes, ukuran diameter partikel (globul) berbanding terbalik
dengan viskositas mediumnya. Semakin kecil ukuran partikel, maka semakin
tinggi viskositasnya. Semakin tinggi viskositas, maka semakin rendah laju
sedimentasinya, artinya semakin stabil sediaan tersebut. Hal ini menunjukkan
sediaan emulgel formula C3 lebih stabil dibandingkan C2 dan C1.
Berdasarkan data yang diperoleh pada Tabel 4.5, dapat diamati bahwa
bahwa viskositas sediaan hidrogel A1, hidroalkoholik gel B1, dan emulgel C1
meningkat dari minggu ke-0 hingga minggu ke-8. Sebaliknya, viskositas sediaan
hidrogel A2 dan A3, sediaan hidroalkoholik gel B2 dan B3, serta emulgel C2 dan
C3 menurun dari minggu ke-0 hingga minggu ke-8. Sediaan yang mengalami
peningkatan viskositas adalah sediaan yang mengandung HPMC sebagai basis gel
tanpa NaHA. Hal ini disebabkan oleh sifat HPMC yang pada pendiaman rantai-
rantai polimer akan bertahan dalam bentuk gulungan yang tidak beraturan dan
menjerat sejumlah besar pelarut sehingga viskositas meningkat. Peningkatan
viskositas ini dapat juga dipengaruhi oleh penguapan pelarut. Sebaliknya, sediaan
yang mengalami penurunan viskositas adalah sediaan yang mengandung NaHA.
Berbeda dengan HPMC yang merupakan derivat selulosa, NaHA adalah derivat
polisakarida yang sangat higroskopis sehingga cenderung menarik air dan
membuat sediaan mengalami pengenceran seiring bertambahnya waktu (Prehm,
1983; Rowe, Sheskey, & Owen, 2009). Hialuronat juga cenderung bersifat tidak
stabil karena memiliki struktur polimer yang fleksibel dan sangat sensitif terhadap
air serta kation lingkungan (Sheehan & Almond, 2001).
Hal lain yang dapat diamati adalah terdapat hubungan antara peningkatan
pH sediaan dengan viskositas. Berdasarkan data pada Tabel 4.1 - 4.3, sediaan

69
yang mengandung NaHA (formula A2, A3, B2, B3, C2, dan C3) mengalami
peningkatan pH. Peningkatan pH tersebut menyebabkan ukuran polimer NaHA
menjadi lebih kecil yang berkaitan dengan ikatan hidrogen intramolekuler.
Hilangnya ikatan hidrogen akan meningkatkan fleksibilitas rantai polimer NaHA.
Diketahui bahwa semakin tinggi pH, mobilitas partikel dan permeabilitas NaHA
meningkat. Hal tersebut secara tidak langsung menurunkan viskositas sediaan
(Hardingham, 2004).
Semua sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan emulgel, baik yang
berbasis HPMC maupun NaHA pada minggu ke-0 memiliki sifat aliran
pseudoplastis (Lang, Mark, Miller, Miller, & Wik, 2011; Martin, Swarbrick, &
Cammarata, 1993). Walaupun nilai dari viskositas sediaan tersebut berubah
selama penyimpanan 8 minggu, perubahan viskositas ini tidak mempengaruhi
sifat aliran atau rheologi dari sediaan tersebut. Dengan kata lain, semua sediaan
memiliki sifat aliran yang sama, yaitu pseudoplastis. Gambar kurva aliran
sediaan-sediaan tersebut dapat dilihat pada Gambar 4.4 - Gambar 4.12.
Sifat aliran pseudoplastis didapatkan dari kurva rheologinya. Kurva
tersebut menuju rate of shear (kecepatan geser) yang rendah atau hampir
mendekati titik nol dan tidak memotong shearing stress (tekanan geser).
Akibatnya, berlawanan dengan Bingham bodies, tidak ada yield value. Viskositas
zat pseudoplastis berkurang dengan meningkatnya kecepatan geser. Hal ini
disebabkan oleh pemakaian polimer (HPMC dan NaHA) sebagai basis gel yang
mempunyai sifat aliran pseudoplastis. Dengan meningkatnya tekanan geser,
molekul-molekul pada rantai polimer yang tergulung secara acak mulai menyusun
sumbu yang lebih panjang dan lurus sehingga mengurangi tahanan (viskositas)
dari bahan tersebut dan mengakibatkan kecepatan geser yang lebih besar pada
setiap tekanan geser berikutnya. Oleh karena itu, gel dapat disebarkan dengan
mudah. (Hoekstra, 2011; Martin, Swarbrick, & Cammarata, 2008).

70
Gambar 4.4. Grafik rheologi sediaan hidrogel (A1) pada minggu ke-0 (kiri) dan
minggu ke-8 (kanan)
minggu ke-8 (kanan)
minggu ke-8 (kanan)

71
Gambar 4.7. Grafik rheologi sediaan hidroalkoholik gel (B1) pada minggu ke-0
(kiri) dan minggu ke-8 (kanan)

72
Gambar 4.10. Grafik rheologi sediaan emulgel (C1) pada minggu ke-0 (kiri) dan
minggu ke-8 (kanan)
minggu ke-8 (kanan)
minggu ke-8 (kanan)

73
4.2.6 Uji Konsistensi

Uji konsistensi ini diukur menggunakan alat penetrometer untuk
mengetahui apakah sediaan yang diuji memiliki daya sebar yang baik atau tidak
berdasarkan nilai yield value yang diperoleh. Sediaan yang baik memiliki yield
value antara 100 - 1000 dyne/cm2 (Zatz & Kushia, 1996). Semakin rendah nilai
yield value, maka akan semakin mudah sediaan tersebut disebar ke kulit,
sebaliknya semakin tinggi sediaan yield value maka semakin sulit sediaan tersebut
disebar ke kulit. Angka yield value pada masing-masing sediaan pada minggu ke-
0 dan ke-8 dapat dilihat pada Tabel 4.6. Perhitungan angka yield value dapat
dilihat pada Lampiran 31. Angka yang terukur pada skala menunjukkan
kedalaman penetrasi dari sediaan tersebut.
Tabel 4.6. Data Hasil Pengamatan Uji Penetrasi Menggunakan Penetrometer

Berbagai Sediaan Gel Pada Minggu ke-0 dan ke-8
Penetrasi Yield Value

(1/10 mm) (dyne/cm2)
Formula
Minggu Minggu Minggu Minggu ke-
ke-0 ke-8 ke-0 8
A1 515 502 1391,85 1464,88
A2 390 400 2427,05 2307,22
A3 370 390 2696,53 2427,05
B1 555 530 1198,46 1314,19
B2 400 435 2307,22 1950,88
B3 375 392 2625,10 2402,35
C1 510 500 1419,28 1476,62
C2 370 380 2696,53 2556,47
C3 350 360 3013,51 2848,41
Keterangan:
1= Kofein + HPMC 2%; 2 = Kofein + HPMC 2% + NaHA 0,5%; 3 = Kofein + NaHA 2%
Berdasarkan Tabel 4.6, sediaan hidrogel memiliki angka penetrasi lebih

tinggi dibandingkan sediaan emulgel, tetapi lebih rendah dibandingkan sediaan
hidroalkoholik gel. Angka penetrasi berbanding terbalik dengan yield value,
semakin tinggi angka penetrasi maka akan semakin rendah angka yield value.
Yield value memiliki satuan dyne/cm2, sama seperti tekanan geser (shearing
stress). Nilai yield value yang tinggi menunjukkan konsistensi sediaan yang

74
tinggi. Secara umum, semua sediaan tidak memenuhi persyaratan karena memiliki
nilai yield value yang tinggi. Dengan demikian, sediaan tersebut tidak mudah
disebar ke kulit.
Pada sediaan hidrogel A1 mengalami penurunan angka kedalaman
penetrasi dari minggu ke-0 hingga minggu ke-8, sedangkan pada formula A2 dan
A3 mengalami peningkatan angka kedalaman penetrasi dari minggu ke-0 hingga
minggu ke-8. Selama 8 minggu, sediaan hidroalkoholik gel B1 mengalami
penurunan angka kedalaman penetrasi, sedangkan formula B2 dan B3 mengalami
peningkatan angka penetrasi. Begitu juga dengan sediaan emulgel, selama 8
minggu formula C1 mengalami penurunan angka kedalaman penetrasi, sedangkan
formula C2 dan C3 mengalami peningkatan angka kedalaman penetrasi.
Terdapat kesamaan antara formula A1, B1, dan C1 yang mengalami
penurunan angka kedalaman penetrasi. Ketiga formula yang mengandung basis
HPMC tanpa NaHA. Hal ini menunjukkan bahwa HPMC selama waktu simpan
meningkatkan nilai konsistensi atau yield value sediaan sehingga kedalaman
penetrasi menurun. Begitu juga dengan formula A2, A3, B2, B3, C2, dan C3,
terdapat kesamaan diantaranya yaitu mengalami peningkatan angka kedalaman
penetrasi. Hal ini menunjukkan bahwa NaHA selama waktu simpan menurunkan
konsistensi atau yield value sediaan. Keadaan ini sesuai dengan sifat NaHA yang
sangat higroskopis sehingga keberadaan air dapat menurunkan konsistensi dari
keenam formula tersebut (Chen & Abatangelo, 1999; Prehm, 1983; Rowe,
Sheskey, & Owen, 2009).
Berdasarkan data pengamatan pada Tabel 4.7, terdapat korelasi antara
viskositas, kedalaman angka penetrasi dan konsistensi (yield value). Peningkatan
viskositas sediaan akan meningkatkan konsistensi sediaan sehingga menurunkan
angka kedalaman penetrasinya. Sebaliknya, penurunan viskositas sediaan akan
menurunkan konsistensi sediaan dan meningkatkan angka kedalaman
penetrasinya.

75
Tabel 4.7. Data hasil pengukuran viskositas, penetrasi, dan yield value berbagai
sediaan gel pada suhu kamar (28o C ± 2o C) minggu ke-0 dan ke-8
Viskositas (Cps) Pada Penetrasi Yield Value

Kecepatan 2 rpm (1/10 mm) (dyne/cm2)
Formula
Minggu ke- Minggu Minggu Minggu Minggu Minggu
0 ke-8 ke-0 ke-8 ke-0 ke-8
A1 14300 16000 515 502 1391,85 1464,88
A2 64000 59200 390 400 2427,05 2307,22
A3 130000 94000 370 390 2696,53 2427,05
B1 12000 12300 555 530 1198,46 1314,19
B2 58000 48000 400 435 2307,22 1950,88
B3 124000 72000 375 392 2625,10 2402,35
C1 20500 21200 510 500 1419,28 1476,62
C2 78000 66000 370 380 2696,53 2556,47
C3 144000 114000 350 360 3013,51 2848,41
Keterangan:
4.2.7 Uji Mekanik (Sentrifugasi)

Uji mekanik melalui proses sentrifugasi dengan kecepatan 3750 rpm
dalam suatu radius sentrifugasi selama 5 jam dilakukan untuk mengetahui
kestabilan dari suatu sediaan terkait dengan pemisahan fase, khususnya emulgel.
Menurut Bechner, uji ini setara dengan efek gravitasi untuk kira-kira satu tahun
(Rieger, 2008). Foto hasil pengamatan uji mekanik dapat dilihat pada Gambar
4.13 – 4.15 dan data hasil pengamatan uji mekanik dapat dilihat pada Tabel 4.8.
Tabel 4.8. Data hasil pengamatan uji sentrifugasi berbagai sediaan gel pada
kecepatan 3750 rpm
Formula Sebelum Uji Mekanik Sesudah Uji Mekanik

A1 Stabil Tidak Terjadi Pemisahan Fase
B1 Stabil Tidak Terjadi Pemisahan Fase
C1 Stabil Terjadi Pemisahan Fase dan sineresis
C2 Stabil Terjadi Pemisahan Fase di Dasar Wadah
C3 Stabil Terjadi Pemisahan Fase di Dasar Wadah
Keterangan:

76
Berdasarkan Tabel. 4.8, dapat dilihat bahwa sediaan hidrogel formula A1,
A2, dan A3 dan sediaan hidroalkoholik gel formula B1, B2, dan B3 menunjukkan
sifat yang stabil karena tidak mengalami pemisahan fase. Hal ini menunjukkan
bahwa konsentrasi basis gel yang digunakan sangat baik untuk menahan
pelarutnya agar tidak keluar dari matriks polimer. Foto pengamatan sediaan
hidrogel dan hidroalkoholik gel sebelum dan sesudah uji mekanik dapat dilihat
pada Gambar 4.13 dan Gambar 4.14 pada daftar gambar. Sebaliknya, sediaan
emulgel formula C1, C2, dan C3 tidak stabil karena mengalami pemisahan fase,
terutama pada formula C1. Hal ini disebabkan oleh kurangnya konsentrasi basis
gel yang digunakan. Foto pengamatan sediaan emulgel sebelum dan sesudah uji
mekanik dapat dilihat pada Gambar 4.15.
A1 A2 A3 A1 A2 A3
Gambar 4.13. Foto hasil pengamatan organoleptis berbagai sediaan hidrogel

sebelum (kiri) dan sesudah (kanan) uji mekanik: A1 (HPMC 2%); A2 (HPMC 2%
+ NaHA 0,5%); A3 (NaHA 2%)

77
B1 B2 B3 B1 B2 B3
Gambar 4.14. Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidroalkoholik gel

sebelum (kiri) dan sesudah (kanan) uji mekanik: B1 (HPMC 2%); B2 (HPMC 2%
+ NaHA 0,5%); B3 (NaHA 2%)
C1 C2 C3 C1 C2 C3
3 1 2 3
Gambar 4.15. Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan emulgel sebelum (kiri)
dan sesudah (kanan) uji mekanik: C1 (HPMC 2%); C2 (HPMC 2% + NaHA
0,5%); C3 (NaHA 2%)
Berdasarkan Gambar 4.15, formula C1 mengalami pemisahan fase antara

emulsi dan gel. Pemisahan emulsi ini juga mengakibatkan terjadinya sineresis atau

78
keluarnya pelarut dari matriks gel. Lapisan minyak berada di atas, sedangkan
lapisan air berada di bawahnya tertahan oleh matriks gel. Hal ini disebabkan oleh
massa jenis minyak lebih kecil dibandingkan massa jenis air. Formula C2 dan C3
terlihat lebih stabil dibandingkan formula C1. Terlihat dari gambar tersebut bahwa
pemisahan fase hanya terjadi sedikit di bagian dasar wadah. Lapisan emulsi
memisah pada bagian bawah, namun pada lapisan atas emulgel tetap stabil dan
tidak terjadi sineresis. Pemisahan pada formula C3 lebih sedikit dibandingkan C2
sehingga formula C3 lebih stabil dibandingkan formula C2.
4.2.8 Uji Enam Siklus (Cycling Test)

Uji ini dilakukan selama 6 siklus. Sediaan disimpan pada suhu rendah
selama 24, lalu disimpan pada suhu tinggi selama 24 jam berikutnya. Data hasil
pengamatan uji enam siklus (cycling test) dapat dilihat pada Lampiran 26. Semua
sediaan menunjukkan sifat yang stabil secara organoleptis dan homogenenitas,
kecuali pada sediaan emulgel formula C1. Pada formula ini terjadi sineresis yakni
terjadinya perpisahan pelarut dari pembawanya. Hal ini menunjukkan bahwa
konsentrasi HPMC yang digunakan sebagai basis gel tidak cukup menahan
penjerapan emulsi dalam matriksnya. Foto sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel,
dan emulgel sebelum serta sesudah cycling test dapat dilihat pada Gambar 4.16 –
4.18.

79
A1 A2 A3
A1 A2 A3
Keterangan: A1 (HPMC 2%); A2 (HPMC 2% + NaHA 0,5%); A3 (NaHA 2%)
Gambar 4.16. Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidrogel sebelum (atas)
dan sesudah (bawah) uji enam siklus (cycling test).
B1 B2 B3
B1 B2 B3
Keterangan: B1 (HPMC 2%); B2 (HPMC 2% + NaHA 0,5%); B3 (NaHA 2%)
Gambar 4.17. Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidroalkoholik gel

sebelum (atas) dan sesudah (bawah) uji enam siklus (cycling test)

80
C1 C2 C3
C1 C2 C3
Keterangan: C1 (HPMC 2%); C2 (HPMC 2% + NaHA 0,5%); C3 (NaHA 2%)
Gambar 4.18. Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan emulgel sebelum (atas)
dan sesudah (bawah) uji enam siklus (cycling test)
4.3 Uji Penetrasi Secara in Vitro

Uji penetrasi dilakukan secara in vitro menggunakan sel difusi Franz.
Prinsip kerja difusi Franz adalah dengan meletakkan membran semi permeabel di
antara kompartemen donor dan reseptor, kemudian senyawa-senyawa yang
melewati lapisan epidermis kulit menuju cairan reseptor diukur kadarnya
menggunakan teknik analisis spektrofotometri UV-VIS.
Membran yang dipakai pada uji penetrasi adalah kulit tikus betina strain
Sprague-Dawley yang berumur 2-3 bulan dengan berat badan ± 200 gram. Alasan
digunakan kulit tikus sebagai membran adalah kulit tersebut lebih mudah didapat
dibandingkan kulit manusia dan memiliki permeabilitas yang mirip dengan
manusia walaupun tetap lebih besar dibandingkan manusia. Koefisien
permeabilitas kulit manusia sebesar 92,27 cm/jam x 105, sedangkan kulit tikus
yang sudah dicukur bulunya memiliki koefisien permeabilitas sebesar 103,08
cm/jam x 105 (Wester & Maibach, 1990). Selain itu, penggunaan kulit tikus dapat
mengurangi variasi antar individu karena berat tikus yang digunakan berada pada
rentang yang sama dan diberi perlakuan yang sama (Barret, 1969). Kulit yang

81
diambil adalah kulit bagian abdomen karena bagian tersebut merupakan bagian
kulit tikus terluas.
Sebelum dilakukan proses pengulitan, bulu-bulu tikus yang berada di
permukaan dicukur menggunakan silet sampai bersih, setelah itu tikus dikuliti
tanpa diambil bagian lemaknya. Sisa-sisa lemak dapat dihilangkan menggunakan
pinset secara berhati-hati agar tidak merobek bagian kulit tersebut. Kulit yang
sobek tidak dapat digunakan karena akan mempengaruhi hasil penetrasi.
Penghilangan lemak dilakukan untuk memperkecil variasi dari kulit tikus karena
tujuan dari penetrasi ini adalah zat aktif dapat mencapai lapisan subkutan. Adanya
lemak akan mempengaruhi penetrasi kofein ke dalam lapisan subkutan. Kulit
tersebut kemudian direndam dalam dapar fosfat pH 7,4 sebelum digunakan atau
dapat disimpan pada suhu 5o C agar tidak rusak dalam rentang waktu 24 jam.
Larutan yang digunakan sebagai cairan pada kompartemen reseptor adalah
dapar fosfat pH 7,4 karena larutan ini menggambarkan cairan fisiologis tubuh.
Sebelum digunakan, dapar fosfat harus selalu dicek pH-nya. Perubahan pH larutan
akan mempengaruhi hasil analisis spektrofotometri karena dapat mengakibatkan
perubahan serapan atau daya serap dan panjang gelombang maksimum zat
tersebut, seperti perubahan serapan hiperkromik dan hipokromik serta perubahan
panjang gelombang hipsokromik dan batokromik (Harmita, 2006).
Suhu yang dibutuhkan selama proses difusi berlangsung adalah suhu 37o
C. Suhu ini mirip dengan suhu tubuh normal manusia. Suhu harus dijaga konstan
karena perubahan suhu akan mempengaruhi penetrasi zat aktif dari sediaan
tersebut. Semakin tinggi suhu, maka akan semakin cepat dan semakin banyak zat
aktif yang masuk ke dalam kompartemen reseptor karena membran kulit menjadi
lebih permeabel. Penjagaan suhu dilakukan dengan cara mengalirkan air dari
termostat ke dalam pelapis air (water jacket).
Proses pengadukan pada cairan reseptor dibantu menggunakan pengaduk
magnetik (magnetic stirrer) berkecepatan 500 rpm. Tujuannya adalah untuk
mempercepat proses homogenisasi dari zat yang terpenetrasi ke dalam cairan pada
kompartemen reseptor. Perbedaan kecepatan pengadukan akan mempengaruhi
analisis hasil penetrasi. Pengadukan berkecepatan tinggi menjadikan larutan cepat

82
homogen dibandingkan kecepatan rendah. Oleh karena itu, kecepatan pengadukan

harus dijaga agar tetap konstan
Kondisi perlakuan pada masing-masing sediaan yang akan diuji
diusahakan sama karena akan mempengaruhi nilai koefisien variasinya. Misalnya,
adanya gelembung udara atau pusaran pada saat proses difusi berlangsung dapat
mempengaruhi analisis hasil penetrasi secara signifikan. Pusaran tersebut
menyebabkan timbulnya celah antara membran dengan cairan reseptor sehingga
dapat menghalangi penetrasi zat aktif menuju cairan reseptor. Proses pengambilan
sampel diusahakan pada titik yang sama serta digunakan syringe yang sama untuk
menghindari pengaruh terhadap analisis hasil penetrasi sediaan tersebut.
Ketebalan kulit tikus yang digunakan juga memenuhi kriteria tebal sekitar 0,66
mm serta luas permukaan tikus yaitu sekitar 1,76625 cm2.
Jumlah sampel yang diambil dari cairan kompartemen reseptor adalah 0,5
ml kemudiaan diencerkan dengan labu ukur 10,0 ml menggunakan dapar fosfat
pH 7,4. Volume sampel yang diambil segera digantikan oleh dapar fosfat pH 7,4
dengan volume yang sama untuk menjaga agar konsentrasi selalu rendah.
Keadaan ini disebut sink condition. Kompartemen donor sebagai sumber dan
kompartemen reseptor sebagai sink (Martin, Swarbrick, & Cammarata, 1993).
Setelah itu, kofein yang terpenetrasi diukur konsentrasinya menggunakan alat
spektrofotometer UV-VIS. Konsentrasi (ppm) kofein yang didapat dikalikan
dengan faktor koreksi (20x). Teknik analisis spektrofotometri lebih disukai karena
penggunaannya mudah dan proses analisisnya cepat walaupun terdapat banyak
kekurangan seperti sensitivitas dan selektivitasnya kurang baik karena dapat
mendeteksi gugus kromofor selain kofein, yaitu: nipagin, nipasol, dan BHT.
4.3.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kofein

Pengukuran konsentrasi zat aktif yang terpenetrasi dalam cairan reseptor
dianalisis secara spektrofotometri menggunakan alat spektrofotometer UV-VIS.
Pengukuran serapan dilakukan pada panjang gelombang maksimum berdasarkan
hasil yang didapat dari kurva serapan yang dapat dilihat pada Gambar 4.19, yaitu
pada panjang gelombang 273,5 nm.

83
273,5nm 0,5161 A
Gambar 4.19. Spektrum serapan kofein 10 ppm dalam dapar fosfat pH 7,4 pada
panjang gelombang (λ= 273,5 nm)
Sebelum dilakukan pengukuran sampel, terlebih dahulu dibuat kurva kalibrasinya.

Persamaan kurva kalibrasi yang diperoleh adalah y = -0,0343 + 0,0539 x dan nilai
r =0,9999. Data hasil pengamatan kurva kalibrasi dapat dilihat pada Tabel 4.9
yang tercantum dalam daftar tabel dan grafik kurva kalibrasi dapat dilihat pada
Gambar 4.40.
Tabel 4.9. Data kurva kalibrasi kofein dalam pelarut dapar fosfat pH 7,4 pada
λ=273,5 nm
Konsentrasi (ppm) Serapan (A) Persamaan Garis

5,105 0,2416
6,126 0,2960 r = 0,9999
7,147 0,3495 a = -0,0343
10,210 0,5161 b = 0,0539
12,252 0,6279
15,315 0,7914 y = -0,0343 + 0,0539x
16,336 0,8457

84
Kurva Kalibrasi Kafein Anhidrat pada Berbagai

Konsentrasi
1,0000
y = 0,0539x - 0,0343
Serapan (A)
0,8000
0,6000 R² = 1
0,4000
0,2000
0,0000
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
Konsentrasi (ppm)
Gambar 4.20. Kurva kalibrasi kofein dalam pelarut dapar fosfat pH 7,4
4.3.2 Perhitungan LOD dan LOQ

Harga LOD dan LOQ dapat dihitung dari data kurva kalibrasi. Data kurva
kalibrasi dapat dilihat pada Tabel 4.16 dan perhitungan LOD dan LOQ dapat
dilihat pada Lampiran 32. Nilai LOD yang diperoleh adalah 0,0609 ppm dan nilai
LOQ yang diperoleh adalah 0,2029 ppm. Perhitungan harga LOD ini bertujuan
untuk mengetahui jumlah terkecil analit dalam sampel yang masih memberikan
respon yang cukup bermakna atau dapat diukur dibandingkan dengan blanko. Di
sisi lain, perhitungan LOQ bertujuan untuk mengetahui kuantitasi terkecil analit
dalam sampel yang masih memberikan respon yang memenuhi kriteria cermat dan
seksama (Harmita, 2006).
Tabel 4.10. Data perhitungan LOD dan LOQ kofein dalam pelarut dapar fosfat pH
7,4 pada λ=273,5 nm
Konsentrasi (x) Serapan (y) Yi (y-yi) (y-yi)2

5,105 0,2416 0,2409 0,00070 0,0000004900
6,126 0,2960 0,2960 0,00002 0,0000000004
7,147 0,3495 0,3510 -0,00150 0,0000022500
10,210 0,5161 0,5162 -0,00006 0,0000000036
12,252 0,6279 0,6263 0,00164 0,0000026896
15,315 0,7914 0,7914 0,00001 0,0000000001
16,336 0,8457 0,8464 -0,00074 0,0000005476
∑= 0,0000059813
Sb = 0,0010937367
LOD = 0,0608758839 ppm
LOQ = 0,2029196130 ppm

85
4.3.3 Uji Prolehan Kembali Kofein

Sediaan-sediaan yang telah dibuat, diukur kembali persentase kadarnya
untuk mengetahui apakah sediaan tersebut memenuhi batas spesifikasi uji
perolehan kembali atau tidak. Persentase perolehan kembali dinyatakan sebagai
rasio antara hasil kadar yang diperoleh dengan hasil kadar sebenarnya. Kriteria
cermat diberikan jika hasil analisis memberikan rasio antara 80-120% (Harmita,
2006).
Berdasarkan data yang didapat dari hasil percobaan triplo pada Tabel 4.11,
perolehan rata-rata formula A1: 106,63%; formula A2: 108,10%; formula A3:
101,42%; formula B1: 99,96%; formula B2: 102,29%; formula B3: 102,13%;
formula C1: 103,17%; formula C2: 110,98%; formula C3: 100,74%. Dengan
demikian, semua sediaan memenuhi batas spesifikasi. Perhitungan uji perolehan
kembali dapat dilihat pada Lampiran 33.
Tabel 4.11. Data hasil perhitungan uji perolehan kembali (UPK) kofein pada
berbagai sediaan gel
Serapan Perolehan Perolehan Rata-

Sediaan Konsentrasi (ppm)
(A) Kembali (%) rata (%)
0,4096 8,2334 104,75
A1 0,4141 8,3167 105,81 106,63
0,4290 8,5933 109,33
0,4213 8,4511 107,52
A2 0,4238 8,4967 108,80 108,10
0,4233 8,4880 107,99
0,2949 6,1057 101,76
A3 0,2968 6,1404 102,34 101,42
0,2897 6,0090 100,15
0,3897 7,8647 100,06
B1 0,3899 7,8694 100,12 99,96
0,3882 7,8364 99,70
0,3043 6,2803 102,02
B2 0,3104 6,3935 103,86 102,29
0,3009 6,2173 101,00
0,4046 8,1413 103,58
B3 0,4011 8,0754 102,74 103,12
0,3975 8,0997 103,05
0,4068 8,1823 104,10
C1 0,4017 8,0872 102,89 103,17
0,4001 8,0573 102,51
0,3356 6,8609 109,81
C2 0,3276 6,7125 109,01 110,98
0,3493 7,1150 114,12
0,3759 7,6091 100,12
C3 0,3755 7,6008 101,01 100,74
0,3758 7,6068 101,09

86
4.3.4 Uji Penetrasi Kofein

Sediaan yang diuji penetrasinya adalah sediaan yang stabil, yaitu pada
awal pembuatan minggu pertama. Ada 18 sediaan yang diuji penetrasinya, yaitu:
sediaan hidrogel A1 dan kontrol negatif, hidrogel A2 dan kontrol negatif, hidrogel
A3 dan kontrol negatif, hidroalkoholik gel B1 dan kontrol negatif, hidroalkoholik
gel B2 dan kontrol negatif, hidroalkoholik gel B3 dan kontrol negatif, emulgel C1
dan kontrol negatif, emulgel C2 dan kontrol negatif, serta emulgel C3 dan kontrol
negatif. Sediaan-sediaan kontrol negatif hanya mengandung basis dan zat-zat
lainnya, tetapi tidak mengandung zat aktif (kofein). Proses pengujian ini
dilakukan selama 8 jam. Sampel diambil pada 11 titik, yaitu pada menit ke-10,
menit ke-30, menit ke-60, menit ke-90, menit ke-120, menit ke-180, menit ke-240,
menit ke-300, menit ke-360, menit ke-420, dan menit ke-480. Sampel yang
diambil sebanyak 0,5 ml ini kemudian diencerkan dalam labu 10,0 ml dengan
dapar fosfat pH 7,4. Setelah itu, diukur serapannya secara spektrofotometri pada
panjang gelombang 273,5 nm. Data hasil analisis spektrofotometri tercantum
dalam Lampiran 27.
Selain sediaan yang mengandung zat aktif, sediaan kontrol negatif (tanpa
zat aktif) juga perlu diuji untuk mengetahui adanya pengaruh zat-zat lain terhadap
penetrasi kofein. Berdasarkan Gambar 4.21, spektrum serapan nipagin, nipasol,
;dan BHT bertumpuk pada panjang gelombang maksimum kofein (273,5 nm)
sehingga absorbansi kofein menjadi lebih tinggi. Ketiga zat ini memiliki gugus
kromofor yang ikut terdeteksi oleh spektrofotometer UV-VIS. Oleh karena itu,
dilakukan pengoreksian menggunakan basis tanpa zat aktif.

87
Gambar 4.21. Kurva spektrum serapan kofein, nipagin, nipasol, dan BHT pada
panjang gelombang (λ= 273,5 nm)
Terdapat kemungkinan bahwa ketiga senyawa pengganggu tersebut

(nipagin, nipasol, dan BHT) dapat berpenetrasi dan jumlahnya dapat meningkat
seiring bertambahnya waktu, seperti kofein. Berdasarkan Tabel 3.1, jumlah
nipagin dan nipasol pada sediaan hidrogel dan hidroalkoholik gel adalah 0,3%,
sedangkan jumlah nipagin, nipasol, dan BHT pada sediaan emulgel adalah 0,4%.
Jumlah ini cukup signifikan dalam mempengaruhi serapan kofein. Oleh karena
itu, dilakukan faktor koreksi pada tiap menit pengambilan sampel dengan cara
mengurangi serapan kofein dengan serapan kontrol negatif pada panjang
gelombang yang sama. Pengkoreksian ini tidak dapat diwakili oleh satu sediaan
saja karena masing-masing sediaan memiliki jenis basis atau pengisi yang berbeda
sehingga kemampuan penetrasinya tiap menit dapat berbeda-beda.
Uji penetrasi perkutan secara in vitro, memiliki 2 parameter utama, yaitu
jumlah kumulatif zat aktif yang terpenetrasi, baik dalam bentuk massa/cm2
(contoh: µg/cm2) atau persentase dosis terpenetrasi dan laju penetrasi atau fluks
(laju dan waktu penetrasi) (Lehman, Rzaszutak, & Raney, 2008). Jumlah
kumulatif dihitung berdasarkan rumus pada Persamaan 3.2. Dari hasil yang
diperoleh, dapat dihitung persentase kofein yang terpenetrasi. Perhitungan jumlah
kumulatif dan persentase kofein yang terpenetrasi dapat dilihat pada Lampiran 34
dan Lampiran 35. Data hasil perhitungan jumlah kumulatif dan persentase kofein
yang terpenetrasi dapat dilihat pada Tabel 4.12 dan Tabel 4.13.

88
Tabel 4.12. Data hasil perhitungan jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi
dalam dapar fosfat pH 7,4 pada berbagai sediaan gel
Waktu Jumlah Kumulatif (µg/cm2)

(Menit) A1 A2 A3 B1 B2 B3 C1 C2 C3
183,49 195,26 181,17 186,97 181,94 205,15 164,73 152,50 175,95
10 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
3,36 0,70 3,69 6,33 0,69 10,69 3,61 3,75 5,53
224,81 384,48 236,32 239,58 210,60 302,00 188,48 221,85 176,80
30 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
2,07 8,94 19,97 6,57 8,46 29,51 4,15 19,57 14,11
345,79 528,68 292,55 338,20 296,78 506,15 201,04 249,17 273,37
60 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
18,22 4,32 19,99 1,89 45,69 12,91 4,42 26,59 7,25
433,97 677,18 393,92 412,58 384,98 537,25 221,90 306,06 354,90
90 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
15,36 4,97 8,02 27,59 10,84 537,25 4,90 2,02 22,57
540,42 710,63 474,69 528,13 507,32 569,06 274,59 353,69 400,31
120 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
17,45 2,82 20,40 3,35 3,23 10,74 6,08 10,07 18,46
591,68 810,40 594,71 702,60 659,47 616,59 289,37 696,43 630,22
180 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
9,30 9,03 10,49 11,54 3,05 5,05 6,41 21,13 9,39
642,08 862,33 768,77 1071.69 971,71 683,22 445,74 813,86 813,06
240 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
20,02 0,46 10,46 73,32 23,94 4,10 9,96 1,38 996,42
702,14 900,27 1149,85 1187.32 1498,08 676,45 566,10 954,93 1252,60
300 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
19,61 6,55 1,12 17,87 5,77 27,11 12,68 83,40 15,21
759,93 938,24 1281,89 1370,59 1592,50 681,94 701,86 1061,97 1490,27
360 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
8,08 6,32 9,39 19,07 22,72 29,23 15,76 3,36 20,88
820,49 984,17 1343,86 1575,09 1789,72 663.72 775,95 1164,89 1484,08
420 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
3,25 28,10 2,47 23,94 71,10 7,54 17,43 16,63 20,81
852,39 1077,65 1405,76 1659,02 1997,29 650,07 917,50 1263,93 1575,90
480 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
1,13 11,57 2,43 1,97 20,12 7,38 16,81 11,76 5,49
Keterangan:

89
Tabel 4.13 Data hasil perhitungan persentase (%) kofein yang terpenetrasi dalam
dapar fosfat pH 7,4 pada berbagai sediaan gel
Waktu % Terpenetrasi
2,03 2,13 2,10 2,20 2,09 2,34 1,88 1,62 2,07
10 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,04 0,01 0,04 0.07 0,01 0,12 0,04 0,04 0,07
2,48 3,80 2,74 2,82 2,42 3,45 2,15 2,35 2,08
30 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,02 0,10 0,23 0,08 0,10 0.34 0,05 0,21 0,17
3,82 5,76 3,40 3,98 3,42 5,78 2,29 2,64 3,22
60 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,20 0,05 0,23 0,02 0,53 0,15 0,05 0,28 0,09
4,79 7,38 4,57 4,86 4,43 6,13 2,53 3,25 4,18
90 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,17 0,05 0,09 0,32 0,12 0,03 0,06 0,02 0,27
5,97 7,74 5,51 6,22 5,84 6,50 3,13 3,75 4,71
120 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,19 0,03 0,24 0,04 0,04 0,12 0,07 0,11 0,22
6,53 8,83 6,90 8,28 7,59 7,04 3,30 7,39 7,42
180 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,10 0,10 0,12 0,14 0,04 0,06 0,07 0,22 0,11
7,09 9,39 8,93 12,62 11,19 7,80 5,09 8,64 9,57
240 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,22 0,01 0,12 0,86 0,28 0,05 0,11 0,01 0,30
7,75 9,81 13,35 13,99 17,24 7,72 6,46 10,13 11,73
300 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,22 0,07 0.01 0,21 0,07 0,31 0,14 0,88 0,11
8,39 10,22 14,88 16,15 18,33 7,79 8,01 11,27 14,75
360 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,09 0,07 0,11 0,22 0,26 0,33 0,18 0,04 0,18
9,06 10,71 15,60 18,55 20,60 7,58 8,86 12,36 17,55
420 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,04 0,31 0,03 0,28 0,82 0,09 0,20 0,18 0,25
9,41 11,74 16,32 19,54 22,99 7,42 10,47 13,41 18,56
480 ± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,01 0,13 0,03 0,02 0,23 0,08 0,19 0,12 0,06
Keterangan:
Fluks dapat dihitung dengan menarik garis linear dari kurva jumlah
kumulatif zat aktif yang terpenetrasi terhadap waktu sehingga didapat persamaan
y = a + bx, b atau kemiringan garis menyatakan nilai fluks yang dapat diamati

90
pada Gambar 4.22. Nilai ini secara normal menyatakan unit tunggal pada
permukaan kulit (Utley, 2001). Garis yang memiliki koefisien korelasi (r) kurang
dari 0,98 tidak dapat dihitung nilai fluksnya (Thakker & Chern, 2003). Cara lain
untuk menghitung fluks adalah menggunakan persamaan hukum Fick pertama,
yaitu jumlah kumulatif zat aktif yang terpenetrasi melalui satuan luas dalam
satuan waktu (µg.cm-2.jam-1). Contoh perhitungan fluks dapat dilihat pada
Lampiran 36. Data hasil perhitungan fluks dapat dilihat pada Tabel 4.14.
Tabel 4.14. Data hasil perhitungan fluks atau kecepatan penetrasi kofein dalam
dapar fosfat pH 7,4 pada berbagai sediaan gel
Waktu Fluks (µg.cm-2.jam-1)

10 1100,95 1171,56 1087,03 1121,84 1091,67 1230,91 988,35 915,02 1055,67
± ± ± ± ± ± ± ± ±
20,19 4,22 22,15 37,98 4,14 64,16 21,67 22,50 33,17
30 449,61 696,95 472,64 479,17 421,20 604,00 376,96 443,70 353,59
± ± ± ± ± ± ± ± ±
4,14 17,87 39,94 13,15 16,91 59,02 8,31 39,13 28,21
60 345,79 528,68 292,55 338,20 296,78 506,15 201,04 249,17 273,37
± ± ± ± ± ± ± ± ±
18,22 4,32 19,99 1,89 45,69 12,91 4,42 26,59 7,25
90 289,31 451,45 262,61 275,05 256,66 358,17 147,93 204,04 236,60
± ± ± ± ± ± ± ± ±
10,24 3,31 5,35 18,39 7,22 1,91 3,27 1,34 15,05
120 270,21 355,32 237,35 264,07 253,66 284,53 137,29 176,84 200,16
± ± ± ± ± ± ± ± ±
8,73 1,41 10,20 1,68 1,61 5,37 3,04 5,03 9,23
180 197,23 270,13 198,24 234,20 219,82 205,53 96,46 232,14 210,07
± ± ± ± ± ± ± ± ±
3,10 3,01 3,50 3,85 1,02 1,68 2,14 7,04 3,13
240 160,52 215,58 192,19 267,92 242,93 170,80 111,44 203,47 203,26
± ± ± ± ± ± ± ± ±
5,00 0,11 2,61 18,33 5,99 1,02 2,49 0,34 6,27
300 140,43 180,05 229,97 237,46 299,62 135,29 113,22 190,99 199,28
± ± ± ± ± ± ± ± ±
3,92 1,31 0,22 3,57 1,15 5,42 2,54 16,68 1,86
360 126,65 156,37 213,65 228,43 265,42 113,66 116,98 176,99 208,77
± ± ± ± ± ± ± ± ±
1,35 1,05 1,57 3,18 3,79 4,87 2,63 0,56 2,53
420 117,21 140,60 191,98 225,01 255,67 94,82 110,85 166,41 212,90
± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,46 4,01 0,39 3,42 10,16 1,08 2,49 2,38 2,98
480 106,55 134,71 175,72 207,38 249,66 81,26 114,69 157,99 196,99
± ± ± ± ± ± ± ± ±
0,14 1,45 0,30 0,25 2,51 0,92 2,10 1,47 0,69
Keterangan:

91
1000 1400
1200 y = 92,055x + 410,87
800 y = 81,537x + 271,36
r² = 0,8293
Jumlah Kumulatif (µg/cm2 )

r² = 0,9168 1000
600 800
400 600
400
200
200
0 0
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
Waktu (Jam) Waktu (Jam)
(a) (b)
1600 2000
y = 172,06x + 141,45 y = 200,39x + 147,55
1400
r² = 0,9757
1200 1500 r² = 0,9901
1000
800 1000
600
400 500
200
0 0
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
(c) (d)
2500 800
y = 248,77x + 54,086 700
2000
r² = 0,9823 600
1500 500
400 y = 45,914x + 394,46
1000 r² = 0,5978
300
500 200
100
0 0
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
(e) (f)

92
1.000 1500
y = 97,149x + 94,46 y = 151,04x + 134
800

r² = 0,9733 r² = 0,9766
1000
600
400
500
200
0 0
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
(g) (h)
2000
y = 191,14x + 76,735
1500 r² = 0,9934
1000
500
0
0 2 4 6 8
Waktu (Jam)
(i)
Keterangan:
Gambar a, b, dan f memiliki nilai fluks yang tidak linier dari menit ke-10 hingga jam ke-8 (r <
0.98) dan dianggap memiliki fluks 2 fase
Gambar 4.22. Profil jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi pada sediaan
hidrogel A1 (a), hidrogel A2 (b), hidrogel A3 (c), hidroalkoholik gel B1 (d),
hidroalkoholik gel B2 (e), hidroalkoholik gel B3 (f), emulgel C1 (g), emulgel C2
(h), emulgel C3 (i)

93
Tabel 4.15. Data perhitungan jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi,

persentase kofein yang terpenetrasi, dan fluks sediaan hidrogel, hidroalkoholik
gel, dan emulgel selama 8 jam
Jumlah Kumulatif
Persentase (%) Fluks
Sediaan Terpenetrasi
Terpenetrasi (μg.cm-2.jam-1)
(μg.cm-2)
A1 852,39 ± 1,13 9,41 ± 0,01 198,77 ± 7,05*; 53,98 ± 2,22**
A2 1077,65 ± 11,57 11,74 ± 0,13 359,34 ± 7,34*; 56,82 ± 2,16**
A3 1405,76 ± 2,43 16,32 ± 0,03 172,06 ± 2,20
B1 1659,02 ± 1,97 19,54 ± 0,02 200,39 ± 1,70
B2 1997,29 ± 20,12 22,99 ± 0,23 248,77 ± 7,23
B3 650,07 ± 7,38 7,42 ± 0,08 366,35 ± 10,24*; 57,68 ± 2,87**
C1 917,50 ± 16,81 10,47 ± 0,19 97,19 ± 1,97
C2 1263,93 ± 11,76 13,41 ± 0,12 151,04 ± 5,57
C3 1575,90 ± 5,49 18,42 ± 0,06 191,14 ± 3,79
Keterangan:
1= Kofein + HPMC 2%; 2 = Kofein + HPMC 2% + NaHA 0,5%; 3 = Kofein + NaHA 2%
*Fluks fase pertama
**Fluks fase ke dua
22,99
1997,29 19,54
18,56
1659,02 16,32
1575,90
1077,65
1263,93 13,41
1405,76 11,74
9,41 10,47
852,39 917,50
7,42
650,07
Keterangan:
Gambar 4.23. Diagram batang jumlah kumulatif (kiri) dan persentase kofein yang
terpenetrasi (kanan) pada berbagai sediaan gel

94
Berdasarkan data hasil uji penetrasi pada Tabel 4.15, jumlah kumulatif
dan persentase kofein terpenetrasi selama 8 jam dapat diamati. Jumlah kumulatif
terbesar untuk hidrogel secara berturut-turut adalah A3, A2, dan A1, pada sediaan
hidroalkoholik adalah B2, B1, dan B3, sedangkan pada sediaan emulgel adalah
C3, C2, dan C1. Gambar 4.23 menunjukkan bahwa persentase kofein terpenetasi
paling banyak adalah sediaan hidroalkoholik gel formula 2 (B2), sedangkan paling
kecil adalah sediaan hidroalkoholik gel formula 1 (B1). Nilai fluks yang diperoleh
dari sediaan hidrogel bervariasi dan tidak dapat dibandingkan antara formula satu
dan lainnya, begitu juga dengan nilai fluks sediaan hidroalkoholik gel. Hal ini
disebabkan oleh nilai fluks A1, A2, dan B3 berubah pada jam tertentu sehingga
diperoleh dua nilai fluks (fluks dua fase). Nilai fluks dua fase ini tidak dapat
mewakili fluks secara keseluruhan dari menit ke-10 hingga jam ke-8. Sementara
itu, nilai fluks sediaan emulgel dapat dibandingkan antar formula satu dan lainnya
karena dapat ditarik satu garis linier yang mewakili fluks secara keseluruhan dari
menit ke-10 hingga jam ke-8. Oleh karena itu, parameter yang dapat digunakan
untuk membandingkan antara satu sediaan dengan sediaan lainnya atau antara satu
formula dengan formula lainnya adalah persentase kofein yang terpenetrasi
selama 8 jam.
4.3.4.1 Sediaan Hidrogel (A)

Sediaan hidrogel A1 memiliki persentase kofein yang terpenetrasi sebesar
9,41 ± 0,01%, formula A2 memiliki persentase kofein yang terpenetrasi sebesar
11,74 ± 0,13%, dan formula A3 memiliki persentase kofein yang terpenetrasi
sebesar 16,32% ± 0,03%. Secara berturut-turut, formula A3 lebih baik
penetrasinya dibandingkan formula A2 dan A1. Artinya, sediaan hidrogel yang
mengandung NaHA lebih unggul dalam meningkatkan penetrasi kofein
dibandingkan sediaan hidrogel tanpa NaHA (A1).
Gambar 4.24 menunjukkan bahwa profil pelepasan formula A1 lebih
rendah dibandingkan A2 dan A3. Formula A2 melepaskan jumlah kofein lebih
banyak dibandingkan A3 hingga jam ke-4 meskipun jumlah NaHA pada A2 lebih
sedikit dibandingkan A3. Hal ini dapat terjadi akibat viskositas sediaan hidrogel
A3 lebih tinggi dibandingkan A2. Walaupun berfungsi sebagai senyawa peningkat

95
penetrasi, NaHA merupakan polimer sehingga pemakaian dalam konsentrasi yang

lebih banyak akan meningkatkan viskositasnya. Laju penetrasi berbanding terbalik
dengan viskositas, semakin tinggi viskositas maka akan semakin sulit pergerakan
molekul zat aktif tersebut untuk berpenetrasi ke dalam kulit sampai kondisi
tertentu, yakni struktur 3 dimensi gel menjadi lebih longgar dan memungkinkan
zat aktif dapat berpenetrasi ke lapisan kulit yang lebih dalam. Namun, karena A3
memiliki sifat hidrasi yang lebih tinggi, penetrasi zat aktifnya akan semakin
meningkat dibandingkan formula lainnya.
Keterangan:
A1= HPMC 2%; A2 = HPMC 2% + NaHA 0,5%; A3 = NaHA 2%
persentase kofein yang terpenetrasi (kanan) pada sediaan hidrogel selama 8 jam
Berdasarkan Gambar 4.25, nilai fluks A1 terbagi menjadi dua fase. Fase
pertama adalah menit ke-10 hingga jam ke-2, sedangkan fase ke dua adalah jam
ke-2 hingga jam ke-8. Nilai fluks fase pertama adalah 198,77 ± 7,05 µg.cm-2.jam-1
dan fase ke dua adalah 53,98 ± 2,22 µg.cm-2.jam-1. Hal ini menunjukkan
terjadinya pelepasan cepat pada fase pertama. Setelah itu, laju penetrasi menurun
pada fase ke dua yang ditandai oleh kurva berbentuk landai. Begitu juga dengan
formula A2, pada fase pertama (menit ke-10 hingga menit ke-90) memiliki nilai
fluks sebesar 359,34 ± 7,34 µg.cm-2.jam-1. Nilai fluks fase pertama lebih tinggi
dibandingkan fase ke dua (menit ke-90 hingga jam ke-8), yaitu sebesar 56,82 ±

96
2,16 µg.cm-2.jam-1. Pelepasan zat aktif secara cepat terjadi pada fase pertama,
setelah itu laju penetrasinya menurun. Perubahan nilai fluks ini dapat terjadi
karena adanya penjenuhan matriks gel pada tahap awal sehingga pelepasan zat
aktif dari pembawanya lebih cepat di awal. Ketika kondisinya tidak jenuh,
pelepasan zat aktif menjadi lebih lambat. Selain itu, diduga terjadi rekristalisasi
kofein. Kofein yang berada dalam keadaan tidak terlarut, tidak dapat menembus
membran. Selain itu, adanya bentuk kristal kofein juga dapat menutupi pori-pori
kulit atau permukaan kulit lainnya sehingga menghalangi pelepasan zat aktifnya.
Pada formula A3, nilai fluks pada menit ke-10 hingga jam ke-8 adalah 172,06 ±
2,20 µg.cm-2.jam-1.
1000 1200
y2 = 53,979 x + 431,41 y2 = 56,814 x + 610,9
800 1000
r2 = 0,977
r2 = 0,9964
800
600
600
400 y1 = 359,34x + 152,63
400 r2 = 0,9918
y1 = 198,77x + 140,17
200 r2 = 0,9956 200
0 0
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
hidrogel A1 (kiri) dan A2 (kanan)
Jika nilai fluks yang diperoleh dari persamaan hukum Fick pertama (Tabel
4.14) diplotkan terhadap waktu, maka diperoleh suatu kurva yang dapat diamati
pada Gambar 4.26. Nilai fluks pada umumnya meningkat hingga menit ke-10. Hal
ini menunjukkan terjadinya pelepasan zat aktif secara cepat pada ketiga formula.
Setelah itu, nilai fluks mengalami penurunan dan akhirnya bentuk kurva menjadi
datar ketika sudah mencapai keadaan masa tunak (steady state). Pada masa ini,
nilai fluks sudah tidak dipengaruhi oleh gradien konsentrasi sehingga dapat
dianggap sebagai nilai fluks yang konstan (Martin, Swarbrick, & Cammarata,
1993). Dari gambar tersebut dapat dilihat bahwa fluks A3 setelah mencapai

97
keadaan masa tunak lebih tinggi nilainya dibandingkan A2, dan A1 secara
berturut-turut.
Keterangan:
A1=HPMC 2%; A2 = HPMC 2% + NaHA 0,5%; A3 = NaHA 2%
Gambar 4.26. Profil kecepatan penetrasi kofein (fluks) tiap jam pada berbagai
sediaan hidrogel
4.3.4.2 Sediaan Hidroalkoholik Gel (B)

Sediaan hidroalkoholik gel B1 memiliki persentase kofein yang
terpenetrasi sebesar 19,54 ± 0,02%, formula B2 memiliki persentase kofein yang
terpenetrasi sebesar 22,99 ± 0,23%, dan formula B3 memiliki persentase kofein
yang terpenetrasi sebesar 7,42 ± 0,08%. Hal ini menunjukkan bahwa penambahan
NaHA 0,5% pada formula B2 berpotensi untuk meningkatkan persentase kofein
yang terpenetrasi. Sebaliknya, penambahan jumlah NaHA menjadi 2% pada
formula B3 menurunkan persentase kofein yang terpenetrasi.
Berdasarkan Gambar 4.27, profil pelepasan tertinggi sediaan
hidroalkoholik gel terdapat pada formula B2 dan profil pelepasan terendah
terdapat pada formula B3. Formula B1 dan B2 memiliki profil pelepasan kofein
yang berdekatan hingga jam ke-4. Setelah itu, formula B2 memiliki profil
pelepasan lebih tinggi dibandingkan B1. Hal ini terjadi karena formula B2
mengandung NaHA sebanyak 0,5%. Pada formula B3, pertambahan jumlah
NaHA tidak linier terhadap peningkatan profil penetrasi kofein perkutan. Jumlah

98
pelepasan kofein formula B3 lebih besar dibandingkan B2 dan B1 hingga jam ke-
1. Setelah satu jam, jumlah kofein yang terpenetrasi tetap meningkat, namun
peningkatannya lebih sedikit. Hal ini dapat diamati dari bentuk kurva yang
mendatar. Setelah jam ke-4, tidak teramati peningkatan jumlah kofein yang
terpenetrasi. Akibatnya, jumlah kofein yang terpenetrasi selama 8 jam pada B3
menjadi lebih sedikit dibandingkan sediaan hidroalkoholik gel lainnya.
Keterangan:
B1= HPMC 2%; B2 = HPMC 2% + NaHA 0,5%; B3 = NaHA 2%
persentase kofein yang terpenetrasi (kanan) pada sediaan hidroalkoholik gel
selama 8 jam
Berdasarkan Gambar 4.22, formula B1, B2, dan B3 tidak dapat

dibandingkan nilai fluksnya. Formula B1 memiliki nilai fluks sebesar 200,39 ±
1,70 µg.cm-2.jam-1 dari menit ke-10 hingga jam ke-8. Formula B2 memiliki nilai
fluks sebesar 248,77 ± 7,23 µg.cm-2.jam-1 dari menit ke-10 hingga jam ke-8.
Formula B3 memiliki dua nilai fluks karena laju pelepasannya tidak konstan
selama 8 jam. Pada fase pertama (menit ke-10 hingga ke-90), nilai fluksnya
adalah 366,35 ± 10,24 µg.cm-2.jam-1. Pada fase ke dua (menit ke-90 hingga jam
ke-4), nilai fluksnya menjadi lebih rendah, yaitu sebesar 57,68 ± 2,87 µg.cm-
2
.jam-1. Setelah fase ke dua (jam ke-4 hingga jam ke-8), jumlah zat aktif yang
terpenetrasi dari B3 semakin sedikit dan bentuk kurva menjadi datar serta tidak
dapat dihitung nilai fluksnya. Hal ini dapat diamati pada Gambar 4.28. Kondisi

99
seperti ini dapat terjadi akibat penguapan pelarut (alkohol) yang menyebabkan
viskositas sediaan menjadi lebih tinggi, sehingga pelepasan zat aktifnya menjadi
lebih sedikit karena sebagian tertahan di dalam matriks pembawanya.
y2 = 57,684x + 449,78
r2 = 0,9967
y1 = 366,35x + 133,83
r2 = 0,9927
hidroalkoholik gel B3
Berdasarkan persamaan hukum Fick pertama, nilai fluks tiap jam dapat
dihitung (Tabel 4.14), kemudian diplotkan terhadap waktu sehingga didapat suatu
kurva yang dapat diamati pada Gambar 4.29. Pada gambar tersebut, laju penetrasi
meningkat hingga menit ke-10 yang menunjukkan proses pelepasan obat secara
cepat. Pada awal pelepasan zat aktif, keadaan belum mencapai masa tunak karena
masih terdapat perbedaan gradien konsentrasi yang cukup besar antara
kompartemen donor dan reseptor. Gradien konsentrasi merupakan suatu gaya
dorong (driving force) bagi suatu zat aktif untuk melewati membran secara difusi
pasif. Setelah mencapai keadaan masa tunak, fluks tidak lagi dipengaruhi oleh
gradien konsentrasi atau ketebalan membran dan bentuk kurva menjadi datar
(Martin, Swarbrick, & Cammarata, 1993). Pada Gambar 4.29 dapat diamati bahwa
fluks sediaan hidroalkoholik gel formula B2 setelah mencapai keadaan masa
tunak lebih tinggi nilainya dibandingkan B1 dan B3 secara berturut-turut.

100
Keterangan:
B1= HPMC 2%; B2 = HPMC 2% + NaHA 0,5%; B3 = NaHA 2%
sediaan hidroalkoholik gel
Pada awalnya, sediaan hidroalkoholik gel dengan kandungan etanol

sebesar 40% dibuat untuk meningkatkan profil penetrasi perkutan dari kofein.
Etanol dikenal sebagai zat peningkat permeabilitas kulit pada obat-obatan topikal
dengan cara mengekstraksi lemak stratum korneum sehingga mengarahkan
kepada onset yang lebih cepat (Valencia, Calapini, & Dee, 2009). Hal ini sesuai
dengan data percobaan yang menyatakan bahwa persentase atau jumlah kofein
yang terpenetrasi dari sediaan hidroalkoholik gel formula B1 lebih tinggi
dibandingkan sediaan hidrogel formula A1. Penambahan NaHA ditujukan untuk
meningkatkan penetrasi perkutan. Hal ini sesuai dengan data percobaan yang
menyatakan bahwa jumlah kofein yang terpenetrasi pada sediaan hidroalkoholik
gel formula B2 lebih tinggi dibandingkan B1. Akan tetapi, formula B3
menghasilkan data yang sebaliknya. Hal ini dapat disebabkan oleh terdepositnya
kofein di dalam jaringan kulit sehingga tidak dapat menembus barier kulit menuju
lapisan subkutan. Selain itu, terdapat inkompatibilitas antara NaHA dengan etanol
karena kelarutan NaHA kurang baik dalam etanol. NaHA praktis tidak larut dalam
etanol sehingga penambahan etanol tidak meningkatkan kelarutan NaHA, tetapi
mengurangi jumlah air yang ada untuk melarutkan NaHA. Hal ini dapat dilihat
pada hasil pengamatan organoleptis (Lampiran 4), formula B3 berwarna keruh
karena kurang larut dalam pembawanya. Akibatnya, NaHA tidak dapat berfungsi
sebagai peningkat penetrasi dalam keadaan tidak terlarut.

101
4.3.4.3 Sediaan Emulsi Gel (C)

Pada sediaan emulsi gel (emulgel), formula C1 memiliki persentase kofein
yang terpenetrasi sebesar 10,47 ± 0,19%, formula C2 memiliki persentase kofein
yang terpenetrasi sebesar 13,41 ± 0,12%, dan formulasi C3 memiliki persentase
kofein yang terpenetrasi sebesar 18,42 ± 0,06%. Sediaan emulgel C3 lebih tinggi
penetrasinya dibandingkan C2 dan C1. Hal ini menunjukkan NaHA memberikan
pengaruh yang signifikan dalam meningkatkan penetrasi perkutan kofein pada
sediaan emulgel.
Berdasarkan Gambar 4.30, mengenai profil pelepasan kofein dari sediaan
emulgel, dapat dilihat bahwa profil pelepasan tertinggi secara berturut-turut
terdapat pada formula C3, C2, dan C1. Grafik formula C1 selalu berada di posisi
terendah dibandingkan C2 dan C3. Formula C2 dan C3 pada awalnya memiliki
profil pelepasan yang berdekatan hingga jam ke-3. Setelah itu, formula C3
semakin meningkat dibandingkan C2 karena jumlah NaHA pada C3 empat kali
lebih tinggi dibandingkan C2.
Keterangan:
C1= HPMC 2%; C2 = HPMC 2% + NaHA 0,5%; C3 = NaHA 2%
persentase kofein yang terpenetrasi (kanan) pada sediaan emulgel selama 8 jam
Berdasarkan Gambar 4.22, nilai fluks sediaan emulgel C1, C2, dan C3
dapat dibandingkan. Hal ini disebabkan jumlah kofein yang terpenetrasi linier
terhadap waktu, nilai koefisien korelasi r > 0,98. Oleh karena itu, nilai fluks ini

102
dapat dijadikan parameter untuk menentukan formula yang memiliki profil

penetrasi terbaik di antara sediaan emulgel. Berdasarkan Tabel 4.15, nilai fluks
C1, C2, dan C3 secara berturut-turut adalah 97,15 ± 1,97 µg.cm-2.jam-1; 151,05 ±
5,57 µg.cm-2.jam-1; 191,14 ± 3,79 µg.cm-2.jam-1. Nilai fluks sediaan emulgel C3
lebih tinggi dibandingkan C2, dan C1 secara berturut-turut. Begitu juga dengan
nilai fluks yang didapat dari persamaan hukum Fick pertama dan diplotkan
terhadap waktu. Setelah menit ke-10 fluks menurun dan akhirnya mendatar yang
menyatakan sudah mencapai keadaan masa tunak. Kurva C3 lebih tinggi
dibandingkan C2 dan C1. Artinya, fluks C3 lebih besar dibandingkan C2 dan C1
secara berturut-turut, Hal ini dapat diamati pada Gambar 4.31.
Keterangan: C1= HPMC 2%; C2 =HPMC 2% + NaHA 0,5%; C3 = NaHA 2%
sediaan emulgel
Emulgel merupakan bentuk penggabungan antara hidrogel dan emulsi

yang dapat menghantarkan obat yang bersifat hidrofilik maupun lipofilik (Shingel,
Roberge, Zabeida, Robert, & Klemberg-Sapieha, 2008). Pada sediaan emulgel,
terdapat fase emulsi minyak dalam air (m/a), emulgator hidrofilik dan lipofilik di
dalamnya. Jenis emulgator hidrofilik yang digunakan pada sediaan ini adalah
tween 20. Tween 20 juga dikenal sebagai surfaktan yang dapat menurunkan
tegangan permukaan antara kofein dan air (Rowe, Sheskey, & Owen, 2009).
Surfaktan ini dapat meningkatkan kelarutan kofein yang bersifat agak sukar larut

103
dalam air. Peningkatan kelarutan ini dapat membantu proses difusi obat ke dalam
membran kulit. Kulit merupakan membran semipermeabel. Lapisan barier kulit
stratum korneum terdiri atas campuran kolesterol, asam lemak bebas, dan
seramida. Zat aktif mencapai lapisan subkutan setelah melewati lapisan barier
tersebut. Parafin cair pada emulsi yang bersifat lipofilik dapat membantu zat aktif
melewati barier tersebut. Kemudian, air yang terdapat pada emulsi minyak dalam
air (m/a) akan menghidrasi kulit serta membengkakkan atau membuka struktur
lapisan stratum korneum sehingga penetrasi zat aktif menjadi lebih mudah
(Benson, 2005).
4.3.4.4 Pengaruh Natrium Hialuronat (NaHA) terhadap Penetrasi Kofein dalam

Berbagai Bentuk Sediaan Gel Antiselulit
Peran NaHA dalam meningkatkan penetrasi perkutan adalah dengan
menghidrasi kulit dan meningkatkan kelembaban kulit sehingga susunan stratum
korneum kulit menjadi terganggu dari yang tersusun rapat menjadi lebih
renggang. Dengan demikian, permeabilitas kulit terhadap molekul-molekul obat
meningkat dan zat aktif dapat berpenetrasi dengan mudah ke dalam lapisan
subkutan. NaHA yang diaplikasikan ke kulit akan diabsorpsi dengan cepat
melintasi epidermis dan menuju dermis sehingga obat yang dibawa juga akan ikut
berpenetrasi dengan cepat. NaHA sangat cocok dikombinasikan dengan sediaan
antiselulit karena selain berfungsi sebagai senyawa peningkat penetrasi juga dapat
memperbaiki jaringan kulit yang rusak, menghilangkan penampakan garis-garis
halus pada kulit serta mengencangkannya.
Berdasarkan data yang diperoleh pada penelitian ini, sediaan yang tidak
mengandung NaHA, seperti hidrogel A1, hidroalkoholik gel B1, dan emulgel C1,
cenderung memiliki penetrasi yang lebih rendah dibandingkan sediaan yang
mengandung NaHA. Hal ini menunjukkan bahwa NaHA merupakan salah satu
senyawa peningkat penetrasi (skin penetration enhancer) yang dapat membantu
kofein mencapai jaringan subkutan sehingga berpotensi dalam mengatasi masalah
selulit. Akan tetapi, NaHA hanya dapat bekerja sebagai peningkat penetrasi
perkutan dalam keadaan terlarut, seperti pada sediaan hidrogel A2 dan A3,
hidroalkoholik gel B2, dan sediaan emulgel C2 dan C3. NaHA tidak dapat bekerja

104
sebagai senyawa peningkat penetrasi perkutan dalam keadaan tidak terlarut atau
jumlah pelarut yang tersedia tidak cukup untuk melarutkan NaHA, seperti yang
terjadi pada sediaan hidroalkoholik gel B3. Dengan demikian, natrium hialuronat
(NaHA) dalam keadaan terlarut dapat meningkatkan penetrasi kofein secara
perkutan pada berbagai sediaan gel antiselulit (hidrogel, hidroalkoholik gel, dan
emulsi gel).
Bentuk sediaan yang terbaik di antara hidrogel, hidroalkoholigel, dan
emulgel ditentukan dengan melihat berbagai faktor, seperti jumlah kumulatif dan
persentase kofein yang terpenetrasi, kecepatan penetrasi kofein perkutan,
kestabilan sediaan, kenyamanan penggunaan, dan faktor ekonomisnya. Sediaan
hidroalkoholik gel B2 memiliki jumlah kumulatif kofein tertinggi (1997,29 ±
20,12 μg.cm-2) dan persentase kofein tertinggi (22,99 ± 0,23%) selama 8 jam
terhadap membran kulit tikus seluas 1,76625 cm2 serta kecepatan penetrasi atau
fluks tertinggi (248,77 ± 7,23 μg.cm-2.jam-1). Sediaan ini juga memiliki kestabilan
yang baik selama penyimpanan 8 minggu. Dengan demikian, sediaan
hidroalkoholik gel B2 merupakan sediaan yang terbaik dan dapat digunakan untuk
mengembangkan formula baru sebagai bentuk sediaan gel antiselulit topikal
dengan penetrasi kofein yang lebih baik. Ringkasan mengenai data hasil evaluasi
dan uji penetrasi berbagai sediaan gel dapat dilihat pada Lampiran 28.

1
BAB 5
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil uji penetrasi kofein secara in vitro menggunakan sel
difusi Franz, dapat diperoleh persentase kofein terpenetrasi dari berbagai sediaan
gel. Persentase kofein yang terpenetrasi dari sediaan hidrogel formula 1, 2, dan 3
selama 8 jam secara berturut-turut adalah 9,41 ± 0,01%; 11,74 ± 0,13%; 16,32 ±
0,03%. Persentase kofein yang terpenetrasi dari sediaan hidroalkoholik gel
formula 1, 2, dan 3 setelah 8 jam secara berturut-turut adalah 19,54 ± 0,02%;
22,99 ± 0,23%; 7,42 ± 0,08%. Persentase kofein yang terpenetrasi dari sediaan
emulsi gel formula 1, 2, dan 3 secara berturut-turut setelah 8 jam adalah 10,47 ±
0,19%; 13,41 ± 0,12% dan 18,42 ± 0,06%. Natrium hialuronat meningkatkan
penetrasi kofein perkutan dari berbagai sediaan gel selama 8 jam, kecuali pada
sediaan hidroalkoholik gel formula 3 (B3). Bentuk sediaan gel terbaik dalam
meningkatkan penetrasi kofein perkutan selama 8 jam adalah sediaan
hidroalkoholik gel formula 2 (B2) yang mengandung basis gel HPMC 2%,
natrium hialuronat 0,5% dan etanol 40%.
5.2 Saran
a) Perlu dilakukan penelitian mengenai natrium hialuronat pada berbagai
konsentrasi untuk menentukan konsentrasi optimal sebagai agen peningkat
penetrasi kofein perkutan secara in vitro.
b) Perlu dilakukan uji penetrasi in vitro kofein dengan menggunakan
membran kadaver manusia agar didapatkan hasil yang lebih mendekati uji
in vivo.
c) Perlu dilakukan uji iritasi sediaan terhadap kulit manusia

106
DAFTAR ACUAN
Anggraeni, C. A. (2008). Pengaruh Bentuk Sediaan Krim, Gel, dan Salep terhadap
Penetrasi Aminofilin sebagai Antiselulit secara in vitro Menggunakan Sel
Difusi Franz. Skripsi Program Sarjana Reguler Farmasi FMIPA UI,
Depok: 32-45.
Anief, M. (1997). Ilmu Meracik Obat. Yogyakarta: Gajah Mada University Press.
Ansel, H. C. (1989). Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi (Edisi Keempat). (F.
Ibrahim, Penerjemah). Jakarta: UI Press.
Atlas, J. (2008, Maret 3). The Science Behind Looking Great In the Nude.
Retrieved Mei 26, 2011, from Joe E Atlas, Inc:
http://www.getridofyourcellulite.com/index.html
Balazs, Endre A.; Pkwy, Henry Hudson; Y, Riverdale N. (1981). Hyaluronate
Based Compositions and Cosmetic Formulations Containing Same. Patent
No. 4,303,676. United States of America
Balazs, E. A. (2004). Viscoelastic Properties of Hyaluronan and Its Therapeutic
Use. In H. G. Garg, & C. A. Hales, Chemistry and Biology of hyaluronan
(p. 424;441). Netherland: Elsevier Ltd.
Barel, A. O. (2001). Anticellulite Products and Treatments. In A. O. Barel, M.
Paye, & H. I. Maibach, Handbook of Cosmetics Science and Technology
(2nd ed., p. 536). New York: Marcel Dekker, Inc.
Barret, C. (1969). Skin Penetration. J. Soc. Cosmetic Chemists , 20, 487-499.
Begoun, P. (2006). Bumpy Road Ahead. Washington: Paula’s Choice, Inc.
Benson, H. A. (2005). Transdermal Drug Delivery: Penetration Enhancement
Techniques. Current Drug Delivery , 2, 23-33.
Bernard Idson, J. L. (2008). Semipadat. In L. Lachman, H. A. Lieberman, & J. L.
Kanig, Teori dan Praktek Farmasi Industri. Terj. dari The Theory and
Practice of Industrial Pharmacy. (S. Suyatmi, Penerjemah, Edisi Ketiga,
hal. 1092, 1096). Jakarta: UI Press.

107
Bissett, D. L. (2006). Anti-aging Skin Care Formulations. In Z. D. Draelos, & L.

A. Thaman, Cosmetic Formulation of Skin Care Products (Vol. 30, p.
181). New York: Taylor & Francis Group.
Bosman, I., Lawant, A., Avegaart, S., Ensing, K., & Zeeuw, R. d. (1996). A Novel
Diffusion Cell for in vitro Transdermal Permeation, Compatible with
Automated Dynamic Sampling. J Pharm Biomed Anal , 1015-1023.
Boylan, J. (2008). Cairan. In L. Lachman, H. A. Lieberman, & J. L. Kanig, Teori
dan Praktek Farmasi Industri. Terj. dari The Theory and Practice of
Industrial Pharmacy (S. Suyatmi, Penerjemah, Vol. 2, hal. 948-961).
Jakarta: UI Press.
Brandt, F. S., & Cazzaniga, A. (2010). Nutracosmeceutical Drinks: Innovation in
Skin Functional Drinks. In N. S. Sadick, M. Lupo, D. S. Berson, & Z. D.
Draelos, Cosmeceutical Science in Clinical Practice (pp. 41, 58). London:
Informa Healthcare.
Brown, M., & Jones, S. (2005). Hyaluronic Acid: A Unique Topical Vehicle for
the Localized Delivery of Drugs to the Skin. Journal of the European
Academy of Dermatology and Venereology, 308–318.
Brown, T. J., Alcorn, D., & Fraser, J. R. (1999). Absorption of Hyaluronan
Applied to the Surface of Intact Skin. The Journal of Investigative
Dermatology, 740-746.
Brum, C. (2010). Psychological Impact of Cellulite on the Affected Patients. In
M. P. Goldman, & D. Hexsel, Cellulite Patophysiology and Treatment
(Second ed., p. 5). New York: Informa Healthcare.
Buhse, L., Kolinski, R., Westenberger, B., Wokovich, A., Spencer, J., Chen, C.
W., et al. (2005). Topical drug classification. International Journal of
Pharmaceutics, 110.
Chen, W. Y., & Abatangelo, G. (1999). Functions of Hyaluronan in Wound
Repair. Wound Repair and Regeneration. The Internetional Journal of
Tissue Repair and Regeneration , 7 (2), 79-89.
Cho, S. H., Richardson, N. K., Burger, A. R., Brinker, A. M., & Rerek, M. E.
(1997). Skin Care Composition for Treating Cellulite. Patent No.
5,667,793. United States of America.

108
Cosmoproject S.r.l. (2011, Januari 14). Active Ingredients. Retrieved Januari 14,
2011, from Beauty Spa Natural Resources:
http://www.beautyspa.it/sites/files/101795/22_Beautyspa__104098.jpg
Dermaxime. (2011, Januari 2). Hyaluronic Acid for Deeply Moisturizing the Skin
and Fighting Wrinkles and Lines. Retrieved Januari 15, 2011, from
Dermaxime Bio-Cellular Skin Care Product Web Site:
http://www.dermaxime.com/hyaluronic-
acid.htm#Use%20of%20hyaluronic%20acid%20in%20cosmetics
Djajadisastra, J. (2004). Cosmetic Stability. Seminar Setengah Hari HIKI. Jakarta:
Hotel Menara Peninsula.
El-Megrab, N. A., El-Nahas, H. M., & F. Balata, G. (2006). Formulation and
Evaluation of Meloxicam Gels for Topical Administration. Saudi
Pharmaceutical Journal , 14, 155-161.
Espace Beaute. (2009, August 15). Tratamentul Anticelulitic. Retrieved January
13, 2011, from Espace Beaute Web Site: http://www.espace-
beaute.ro/Endermologie_Cellu_M6.html
Farmakope Indonesia, Edisi IV. (1995). Jakarta: Departemen Kesehatan Republik
Indonesia.
Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. (1979). Jakarta: Departemen Kesehatan
Republik Indonesia.
Forster, M., Bolzinger, M. A., Fessi, H., & Briancon, S. (2009). Topical Delivery
of Cosmetics and Drugs Topical Delivery of Cosmetics and Drugs and
Delivery. Eur J Dermatol , 309-323.
Foxx, M. E., & Klein, R. W. (1983). Stable Benzoyl Proxide Composition. Patent
No. 4387107. United States of America.
Gemborys, M., & Wisniewski, S. J. (1992). Method for percutaneous delivery of
ibuprofen using hydroalcoholic gel. Patent No. 5093133. Pennsylvania.
Ghisalberti, C. (2005). Use of Conjugated Linoleic Acid (CLA) for the Topical
Treatment of Cellulite. Patent No. 6,953,583 B1. United States of
America.
Grams, Y., & Bouwstra, J. (2005). Penetration and Distribution in Human Skin
Focusing on the Hair Follicle. In R. L. Bronaugh, & H. I. Maibach, Drug

109
and the Pharmaceutical Sciences: Percutaneous Absorption (Fourth ed.,

Vol. 155, pp. 177 - 179). Boca Raton: Taylor & Francis Group, LLC.
Hadyanti. (2008). Pengaruh Tretionin terhadap Penetrasi Kafein dan Aminofilin
sebagai Antiselulit dalam Sediaan Krim, Gel dan Salep secara in vitro.
Skripsi Program Sarjana Reguler Farmasi FMIPA UI, Depok: 45-62.
Hanson, W. A., Schuber, S., & Moller, H. (1991). Handbook of Disolution Testing
(2nd ed.). Springfield, USA: Aster Publishing Coorporation.
Hardingham, T. (2004). Solution Properties of Hyaluronan. In H. G. Garg, & C.
A. Hales, Chemistry and Biology of Hyaluronan (pp. 11-15). Netherland:
Elsevier Ltd.
Harmita. (2006). Analisis Kuantitatif Bahan Baku dan Sediaan Farmasi. Depok:
Departemen Farmasi FMIPA UI, Depok: 31-38.
Harmita. (2006). Buku Ajar Analisis Fisikokimia. Depok: Departemen Farmasi
FMIPA Universitas Indonesia.
Harry, R. G. (2000). Harry's Cosmeticology (8th ed.). (M. M. Rieger, Ed.) New
York: Chemical Publishing Company.
Hexsel, D., Prado, D. Z., & Goldman, M. P. (2010). Topical Management of
Cellulite. In D. Hexsel, & M. P. Goldman, Cellulite Pathophysiology and
Treatment (2nd ed., pp. 63, 64, 88). New York: Informa Healthcare.
Hoekstra, D. (2011). Hyaluronan as a Versatile Biomaterial for Surface
Treatment of Medical Devices. Retrieved Mei 15, 2011, from Biocoat
Incorporated: http://www.biocoat.com/hyalvers.pdf
Iswandana, R. (2009). Penetapan Daya Penetrasi Secara Invitro dan Uji Stabilitas
Fisik Sediaan Krim, Salep, dan Gel yang Mengandung Kurkumin dari
kunyit (Curcuma longa L). Skripsi Program Sarjana Jurusan Farmasi
FMIPA Universitas Indonesia.
J. Aukunuru, C. B. (2007). Preparation, Characterization and Optimization of
Ibuprofen Ointment Intended for Topical and Systemic Delivery. Tropical
Journal of Pharmaceutical Research, 4, 855-860.
Kamonwan Bongkotphet, W. T. (2009). Comparative efficacy of Low-and High
Molecular Weight Intra-Articular Hyaluronic Acid in Patients with Knee
Osteoarthritis. International Journal of Health Research, 87-92.

110
Krause, W. E., Bellomo, E. G., & Colby, R. H. (2001). Rheology of Sodium

Hyaluronate under Physiological Conditions. Biomacromolecules, 65-69.
Lang, E., Mark, D., Miller, F. A., Miller, D., & Wik, O. (2011). Shear Flow
Characteristics of Sodium Hyaluronate. Arch opthamol, 102, 1079-1082.
Lazarus, B. I. (2008). Semi Padat. In L. Lachman, H. A. Lieberman, & J. L.
Kanig, Teori dan Praktek Farmasi Industri. Terj. dari The Theory and
Practice of Industrial Pharmacy (S. Suyatmi, Penerjemah, Edisi Ketiga,
hal. 1096). Jakarta: UI Press.
Lehman, P., Rzaszutak, M., & Raney, S. (2008). Top 10 Frequently Asked
Questions about Pre-Clinical Dermatology Research At the PRACS
Institute. Retrieved Juni 19, 2011, from PRACS Institute, Ltd:
http://www.pracs.com/preclinical/faq.html
Leibaschoff, G., & Steiner, D. (2006). Mesotherapy in the Treatment of Cellulite.
In M. P. Goldman, P. A. Bacci, G. Leibaschoff, D. Hexsel, & F. Angelini,
Cellulite Pathophysiology and Treatment (p. 279). New York: Taylor &
Francis Group, LLC.
Leon H. Kircik, M. (2009). Treatment of Scalp and Facial Seborrheic Dermatitis
with Desonide Hydrogel 0.05%. The Journal of Clinical and Aesthetic
Dermatology , Volume 2, 32.
Loden, M. (2001). Hydrating Substances. In M. Paye, A. O. Barel, & H. I.
Maibach, Handbook of Cosmetic Science and Technology (2nd ed., pp. 347,
351). New York: Marcel Dekker Inc.
Lueder, M., Morel, J., Tiedtke, J., & Marks, O. (2011). Anti-Cellulite Actives,
Dream or Reality. Switzerland: Cosmetochem International.
Martin, A., Swarbrick, J., & Cammarata, A. (1993). Farmasi Fisik. Terj. dari
Physical Pharmacy (Edisi ketiga, Vol. 2). (Yoshita, Penerjemah.) Jakarta:
UI Press.
Melbourne Dermatology. (2009, August 15). Skin Structure Diagram. Retrieved
January 13, 2011, from Melbourne Dermatology Web site:
http://www.treatment-skincare.com/Glossary/Skin-Structure-Diagram.html
Moffat, A. C., Osselton, M. D., & Widdop, B. (2005). Clarke's Analysis of Drugs
and Poisons. (L. Y. Galichet, Ed.) London: Pharmaceutical Press.

111
Mohamed, M. I. (2004, October 11). Optimization of Chlorphenesin Emulgel

Formulation. The AAPS Journal, 1.
Mortazavi, S. A., & Aboofazeli, R. (2003). An Investigation into the Effect of
Various Penetration Enhancers on Percutaneous Absorption of Piroxicam.
Iranian Journal of Pharmaceutical Research, 137.
Necas, J., Bartosikova, L., Brauner, P., & Kolar, J. (2008, 12 28). Hyaluronic
Acid (Hyaluronan): A Review. Veterinarni Medicina, 397–411.
Novitasari, R. (2008). Pengaruh AHA (Asam Laktat) Terhadap Penetrasi Kofein
Sebagai Antiselulit dalam Sediaan Krim, Gel, dan Salep secara In Vitro.
Skripsi Program Sarjana Reguler Farmasi FMIPA UI, Depok: 34-53.
Park Avenue Aesthetics. (2011, January 13). VelaShape Cellulite Treatment &
Reduction Center. Retrieved January 13, 2011, from Park Avenue
Aesthetics Web Site:
http://www.cellulitecenternyc.com/before_after_photos_vellasmooth.htm
Pittermann, W. (2007, Desember). Percutaneous absorption: Proof of evidence
and models. Retrieved Januari 13, 2011, from Skin Care Forum Web Site:
http://www.scf-online.com/english/43_e/absorption43_e.htm
Prehm, P. (1983). Synthesis of hyaluronate in differentiated teratocarcinoma cells;
mechanism of chain growth. Biochem J , 191-198.
Reynolds, J. E. (1982). Martindale The Extra Pharmacopoeia (28th ed.). London:
The Pharmaceutical Press.
Rieger, M. M. (2008). Teori dan Praktek Farmasi Industri. In L. Lachman, H. a.
Lieberman, & J. L. Kanig, Teori dan Praktek Farmasi Industr. Terj. dari
The Theory and Practice of Industrial Pharmacy (S. Suyatmi,
Penerjemah., Vol. 2, p. 1081). Jakarta: UI Press.
Rodwell, V. W. (2003). Nucleotides. In R. K. Murray, D. K. Granner, P. A.
Mayes, & V. W. Rodwell, Harper’s Illustrated Biochemistry (26th ed., p.
289). New York, USA: McGraw-Hill Companies, Inc.
Rosso, J. Q. (2006). Factor Influencing Optimal Skin Care and Product Selection.
In Z. D. Draelos, & L. A. Thaman, Cosmetic Formulation of Skin Care
Products (Vol. 30, p. 118). New York.

112
Rowe, R. C., Sheskey, P. J., & Owen, S. C. (2009). Handbook of Pharmaceutical

Excipients (6th ed.). London: The Pharmaceutical Press and American
Pharmacists Association.
Sala, S. (2007). Cosmetic or Pharmaceutical Product for Topical Use. Patent No.
0218014. Milan.
Sheehan, J., & Almond, A. (2001). Hyaluronan: Static, Hydrodynamic and
Molecular Dynamic Views. Glycoforum, 1-16.
Shingel, K. I., Roberge, C., Zabeida, O., Robert, M., & Klemberg-Sapieha, J. E.
(2008, October 24). Solid Emulsion Gel as a Novel Construct for Topical
Applications: Synthesis, Morphology and Mechanical Properties. Journal
of Materials Science: Materials in Medicine, 681-689.
Sinha, V. R., & Kaur, M. P. (2000). Permeation Enhancers for Transdermal Drug
Delivery. Drug Development and Industrial Pharmacy, 1131-1140.
Sittar, V. (2009). Uji Kestabilan Fisik dan Uji Efikasi Krim Pelembab yang
Dibuat Secara Cold Process dengan Menggunakan EMULGADE® CM
dan Menggunakan EMULGADE® CPE. Skripsi Program Sarjana
Departemen Farmasi FMIPA Universitas Indonesia.
Smith, W. P. (1996). Method of Ameliorating Cellulite by Disrupting the Barrier
Function of the Stratum Corneum. Patent No. 5,578,396. United States of
America.
Sweetman, S. C. (Ed.). (2009). Martindale The Complete Drug Reference (Thirty-
sixth ed.). London: Pharmaceutical Press.
Tammi, R., Säämänen, A., Maibach, H., & Tammi, M. (1991). Degradation of
newly synthesized high molecular mass hyaluronan in the epidermal and
dermal compartments of human skin in organ culture. J Invest Dermatol,
97, 126-130.
Thakker, K. D., & Chern, W. H. (2003). Development and Validation of In Vitro
Release Tests for Semisolid Dosage Forms - Case Study. Dissolution
Technology, 10-15.
Tracey J. Brown, D. A. (1999). Absorption of Hyaluronan Applied to the Surface
of Intact Skin. The Journal of Investigative Dermatology, 740-746.

113
Tranggono, R. I., & Latifah, F. (2007). Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan

Kosmetik. (J. Djajadisastra, Ed.) Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama.
Utley, L. J. (2001). Design, Testing, and Validation of an LC/MS Compatible Cell
for Measuring Transdermal Diffusion. Florida: University of Florida.
Valencia, D. L., Calapini, S. A., & Dee, K. U. (2009). Pharmaceutical Topical Gel
Compositions. Patent No. 20060067958. United States of America.
Williams, A. C., & Barry, B. W. (2007). Chemical Permeation Enhancement. In
E. Touitou, & B. W. Barry, Enhancement in Drug Delivery (pp. 233-248).
New York, United States of America: CRC Press.
Wester, R.C. & H.I. Maibach. (1990). Topical Drug Delivery Formulations: In
Vitro Testing of Topical Pharmaceutical Formulations (pp. 215). New
York: Marcel Dekker Inc.
Zatz, J. L., & Kushia, G. P. (1996). Gels. In H. A. Lieberman, Pharmaceutical
Dosage Form: Disperse Systems (2nd ed., Vol. 2, pp. 495-510). New York:
Marcel Dekker Inc.

112
LAMPIRAN

113
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Gambar 1-20

Lampiran Tabel 21-28
Lampiran Contoh Perhitungan 29-36
Lampiran Sertifikat Analisis 37-48

114
Lampiran 1. Foto alat
(a) (b) (c)
(d) (e) (f)
(g) (h)
Lanjutan lampiran 1

115
(i) (j)
(k) (l)
Keterangan:
(a) homogenizer
(b) viskometer Brookfield
(c) penetrometer
(d) pH meter
(e) oven
(f) lemari pendingin
(g) rangkaian alat difusi Franz
(h) water heater
(i) timbangan analitik
(j) spektrofotometer UV-VIS
(k) mikroskop optik
(l) timbangan analitik
Lampiran 2. Foto berbagai sediaan gel pada minggu ke-0

116
A1 A2 A3
B1 B2 B3
C1 C2 C3
Keterangan: A1 = Hidrogel (HPMC 2% + kofein 1,5%)

A2 = Hidrogel (HPMC 2% + NaHA 0,5% + kofein 1,5%)
A3 = Hidrogel (NaHA 2% + kofein 1,5%)
B1 = Hidroalkoholik gel (HPMC 2% + kofein 1,5%)
B2 = Hidroalkoholik gel (HPMC 2% + NaHA 0,5% + kofein 1,5%)
B3 = Hidroalkoholik gel (NaHA 2% + kofein 1,5%)
C1 = Emulgel (HPMC 2% + kofein 1,5%)
C2 = Emulgel (HPMC 2% + NaHA + kofein 1,5%)
C3 = Emulgel (NaHA 2% + kofein 1,5%)

117
Lampiran 3. Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidrogel pada suhu

kamar (28o C ± 2o C) selama 8 minggu
Hidrogel (A1)
Hidrogel (A2)
Hidrogel (A3)
Minggu ke-0 Minggu ke-2 Minggu ke-4 Minggu ke-6 Minggu ke-8

118
Lampiran 4. Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan hidroalkoholik gel pada

suhu kamar (28o C ± 2o C) selama 8 minggu
Hidroalkoholik gel (B1)

119
Lampiran 5. Foto hasil pengamatan organoleptis sediaan emulgel pada suhu

kamar (28o C ± 2o C) selama 8 minggu
Emulgel (C1)
Emulgel (C2)
Emulgel (C3)

120

rendah (5o C ± 2o C) selama 8 minggu
Hidrogel (A1)
Hidrogel (A2)
Hidrogel (A3)

121

suhu rendah (5o C ± 2o C) selama 8 minggu

122

rendah (5o C ± 2o C) selama 8 minggu
Emulgel (C1)
Emulgel (C2)
Emulgel (C3)

123

tinggi (40o C ± 2o C) selama 8 minggu
Hidrogel (A1)
Hidrogel (A2)
Hidrogel (A3)

124
suhu tinggi (40o C ± 2o C) selama 8 minggu

125
tinggi (40o C ± 2o C) selama 8 minggu
Emulgel (C1)
Emulgel (C2)
Emulgel (C3)

126
Lampiran 12. Foto ukuran diameter globul sediaan emulgel (C1) pada suhu kamar
(28o C ± 2o C)
Minggu ke-0 Minggu ke-2
Minggu ke-8

127
Lampiran 13. Foto ukuran diameter globul sediaan emulgel (C1) pada suhu
rendah (5o C ± 2o C)
Minggu ke-8

128
Lampiran 14. Foto ukuran diameter globul sediaan emulgel (C1) pada suhu tinggi
(40o C ± 2o C)
Minggu ke-8

129
(28o C ± 2o C)
Minggu ke-8

130
Minggu ke-8

131
(40o C ± 2o C)
Minggu ke-8

132
(28o C ± 2o C)
Minggu ke-8

133
Minggu ke-8

134
(40o C ± 2o C)
Minggu ke-8

135
Lampiran 21. Tabel data hasil pengamatan organoleptis dan homogenitas berbagai
sediaan gel pada suhu kamar (28o C± 2o C) selama 8 minggu
Formula Minggu Warna Bau Sineresis Homogenitas

ke-
A1 0 Transparan Tidak Berbau Tidak Terjadi Homogen
2 Transparan Tidak Berbau Tidak Terjadi Homogen
B1 0 Transparan Berbau Alkohol Tidak Terjadi Homogen
2 Transparan Berbau Alkohol Tidak Terjadi Homogen
B3 0 Agak Keruh Berbau Alkohol Tidak Terjadi Homogen
2 Agak Keruh Berbau Alkohol Tidak Terjadi Homogen
C1 0 Putih Susu Berbau Emulsi Tidak Terjadi Homogen
2 Putih Susu Berbau Emulsi Tidak Terjadi Homogen
Keterangan:

136
sediaan gel pada suhu rendah (5o C ± 2o C) selama 8 minggu

ke-
2 Putih Tidak Berbau Tidak Terjadi Ada Jarum Kristal
8 Putih Berbau Alkohol Tidak Terjadi Ada Jarum Kristal
6 Putih Susu Berbau Emulsi Tidak Terjadi Ada Jarum Kristal
Keterangan:

137
sediaan gel pada suhu tinggi (40o C ± 2o C) selama 8 minggu

ke-
8 Transparan Sedikit Berbau Tidak Terjadi Homogen
Alkohol
8 Transparan Sedikit Berbau Tidak Terjadi Homogen
Alkohol
8 Agak Keruh Sedikit Berbau Tidak Terjadi Homogen
Alkohol
2 Putih Susu Berbau Emulsi Terjadi Homogen
Keterangan:

138
Lampiran 24. Tabel data hasil pengukuran viskositas berbagai sediaan gel pada
penyimpanan suhu kamar (28o C ± 2o C) minggu ke-0
Dial Faktor Tekanan Kecepatan

Kecepatan Viskositas
Reading Koreksi Geser Geser
Formula
F/A = dr x (dv/dr =
(rpm) (dr) (f) (ƞ = dr x f)
14,347 F/Ax 1/ƞ)
1 7,5 2000 15000 107,8050 0,007187
2 14,3 1000 14300 205,5482 0,014374
2,5 17,3 800 13840 248,6702 0,0179675
5 30 400 12000 431,2200 0,035935
10 50,5 200 10100 725,8870 0,07187
A1 20 81,5 100 8150 1171,4810 0,14374
(Spindel
20 81,5 100 8150 1171,4810 0,14374
3)
10 51 200 10200 733,0740 0,07187
5 30,5 400 12200 438,4070 0,035935
2,5 17,5 800 14000 251,5450 0,0179675
2 14,5 1000 14500 208,4230 0,014374
1 7 2000 14000 100,6180 0,007187
1 13,8 8000 110400 122,1790 0,001106694
2 16 4000 64000 198,3612 0,003099394
2,5 22,3 3200 71360 229,9840 0,00322287
5 39,5 1600 63200 567,7730 0,00898375
10 57 800 45600 819,3180 0,0179675
A2 20 87 400 34800 1250,5380 0,035935
(Spindel
20 87 400 34800 1250,5380 0.035935
5)
10 57,5 800 46000 826,5050 0,0179675
5 40 1600 64000 574,9600 0,00898375
2,5 22,5 3200 72000 323,4150 0,004491875
2 16,1 4000 64400 231,4214 0,0035935
1 13,8 8000 110400 198,3612 0,00179675
1 21 8000 168000 301,8540 0,00179675
2 32,5 4000 130000 467,1550 0,0035935
2,5 37 3200 118400 531,8380 0,004491875
5 52 1600 83200 747,4480 0,00898375
10 71 800 56800 1020,5540 0,0179675
A3 20 91 400 36400 1308,0340 0,035935
(Spindel
20 91,5 400 36600 1315,2210 0,035935
5)
10 71,7 800 57360 1030,6158 0,0179675
5 52 1600 83200 747,4480 0,00898375
2,5 37 3200 118400 531,8380 0,004491875
2 32,5 4000 130000 467,1550 0,0035935
1 21 8000 168000 301,8540 0,00179675
1 6,5 2000 13000 93,4310 0,007187
2 12 1000 12000 172,4880 0,014374
B1 2,5 14,5 800 11600 208,4230 0,0179675
(Spindel 5 26 400 10400 373,7240 0,035935
3) 10 43,5 200 8700 625,2690 0,07187
20 71 100 7100 1020,5540 0,14374
20 71 100 7100 1020,5540 0,14374

139
Lanjutan lampiran 24
10 43.3 200 8660 622,3942 0,07187

5 25,5 400 10200 366,5370 0,035935
2,5 14 800 11200 201,2360 0,0179675
2 11,7 1000 11700 168,1758 0,014374
1 5,5 2000 11000 79,0570 0,007187
1 8,5 8000 68000 122,1790 0,00179675
2 14.5 4000 58000 208,4230 0,0035935
2,5 17,4 3200 55680 250,1076 0,004491875
5 28,8 1600 46080 413,9712 0,00898375
10 44,5 800 35600 639,6430 0,0179675
B2 20 65,8 400 26320 945,8092 0,035935
(Spindel
20 65,8 400 26320 945,8092 0,035935
5)
10 45 800 36000 646,8300 0,0179675
5 29 1600 46400 416,8460 0,00898375
2,5 17,8 3200 56960 255,8572 0,004491875
2 15 4000 60000 215,6100 0,0035935
1 8,7 8000 69600 125,0538 0,00179675
1 17,8 8000 142400 255,8572 0,00179675
2 31 4000 124000 445,5940 0,0035935
2,5 35,5 3200 113600 510,7700 0,004491875
5 53 1600 84800 761,8220 0,00898375
10 71 800 56800 1020,5540 0,0179675
B3 20 92 400 36800 1322,4080 0,035935
(Spindel
20 92 400 36800 1322,4080 0,035935
5)
10 71 800 56800 1020,5540 0,0179675
5 53 1600 84800 761,8220 0,00898375
2,5 35,5 3200 113600 510,2770 0,004491875
2 31 4000 124000 445,5940 0,0035935
1 17,8 8000 142400 255,8572 0,00179675
1 11,8 2000 23600 169,6132 0,007187
2 20,5 1000 20500 294,6670 0,014374
2,5 24 800 19200 344,9760 0,0179675
5 40 400 16000 574,9600 0,035935
10 64,3 200 12860 924,2482 0,07187
C1 20 100 100 10000 1437,4000 0,14374
(Spindel
20 100 100 10000 1437,4000 0,14374
3)
10 64 200 12800 919,9360 0,07187
5 39,5 400 15800 567,7730 0,035935
2,5 23,5 800 18800 337,7890 0,0179675
2 20 1000 20000 287,4800 0,014374
1 11,5 2000 23000 165,3010 0,007187
1 12 8000 96000 172,4880 0,00179675
2 19,5 4000 78000 280,2930 0,0035935
C2 2,5 22,5 3200 72000 323,4150 0,004491875
(Spindel 5 34 1600 54400 488,7160 0,00898375
5) 10 49 800 39200 704,3260 0,0179675
20 67,5 400 27000 970,2450 0,035935
20 67,5 400 27000 970,2450 0,035935

140
10 48,5 800 38800 697,1390 0,0179675

5 33,5 1600 53600 481,5290 0,00898375
2,5 22 3200 70400 316,2280 0,004491875
2 19,3 4000 77200 277,4182 0,0035935
1 12 8000 96000 172,4880 0,00179675
1 23,5 8000 188000 337,7890 0,00179675
2 36 4000 144000 517,4640 0,0035935
2,5 40 3200 128000 574,9600 0,004491875
5 56,5 1600 90400 812,1310 0,00898375
10 74 800 59200 1063,6760 0,0179675
C3 20 92,5 400 37000 1329,5950 0,035935
(Spindel
20 92,5 400 37000 1329,5950 0,035935
5)
10 75,5 800 60400 1085,2370 0,0179675
5 58 1600 92800 833,6920 0,00898375
2,5 41,5 3200 132800 596,5210 0,004491875
2 37,5 4000 150000 539,0250 0,0035935
1 25 8000 200000 359,3500 0,00179675
Keterangan:
1= HPMC 2%; 2 = HPMC 2% + NaHA 0,5%; 3 =NaHA 2%

141
Lampiran 25. Tabel data hasil pengukuran viskositas berbagai sediaan gel pada
penyimpanan suhu kamar (28o C ± 2o C) minggu ke-8
Dial Faktor Tekanan Kecepatan

Kecepatan Viskositas
Reading Koreksi Geser Geser
Formula
(ƞ = dr x F/A = dr x (dv/dr =
(rpm) (dr) (f)
f) 14,347 F/Ax 1/ƞ)
1 2,3 8000 18400 33,0602 0,00179675
2 4 4000 16000 57,4960 0,0035935
2,5 5 3200 16000 71,8700 0,004491875
5 8,5 1600 13600 122,1790 0,00898375
10 14,3 800 11440 205,5482 0,0179675
A1 20 23 400 9200 330,6020 0,035935
(Spindel
5) 20 23 400 9200 330,6020 0,035935
10 14,3 800 11440 205,5482 0,0179675
5 8,5 1600 13600 122,1790 0,00898375
2,5 5 3200 16000 71,8700 0,004491875
2 4 4000 16000 57,4960 0,0035935
1 2,3 8000 18400 33,0602 0,00179675
1 8,5 8000 68000 122,1790 0,00179675
2 14,8 4000 59200 212,7352 0,0035935
2,5 17,3 3200 55360 248,6702 0,004491875
5 40,5 1600 64800 582,1470 0,00898375
10 55 800 44000 790,5700 0,0179675
A2 20 77 400 30800 1106,7980 0,035935
(Spindel
5) 20 77 400 30800 1106,7980 0,035935
10 55,5 800 44400 797,7570 0,0179675
5 40,5 1600 64800 582,1470 0,00898375
2,5 17,5 3200 56000 251,5450 0,004491875
2 14,8 4000 59200 212,7352 0,0035935
1 8,5 8000 68000 122,1790 0,00179675
1 15 8000 120000 215,6100 0,00179675
2 23,5 4000 94000 337,7890 0,0035935
2,5 26,5 3200 84800 380,9110 0,004491875
5 38,5 1600 61600 553,3990 0,00898375
10 53,5 800 42800 769,0090 0,0179675
A3 20 72 400 28800 1034,9280 0,035935
(Spindel
5) 20 72 400 28800 1034,9280 0,035935
10 53 800 42400 761,8220 0,0179675
5 38 1600 60800 546,2120 0,00898375
2,5 26 3200 83200 373,7240 0,004491875
2 23 4000 92000 330,6020 0,0035935
1 14,5 8000 116000 208,4230 0,00179675

142
1 6,7 2000 13400 96.3058 0,007187

2 12,3 1000 12300 176,8002 0,014374
2,5 14,7 800 11760 211,2978 0,0179675
5 26 400 10400 373,7240 0,035935
10 44 200 8800 632,4560 0,07187
B1 20 71,5 100 7150 1027,7410 0,14374
(Spindel
5) 20 71,5 100 7150 1027,7410 0,14374
10 44 200 8800 632,4560 0,07187
5 26 400 10400 373,7240 0,035935
2,5 14,7 800 11760 211,2978 0,0179675
2 12,3 1000 12300 176,8002 0,014374
1 6,7 2000 13400 96,3058 0,007187
1 6,8 8000 54400 97,7432 0,00179675
2 12 4000 48000 172,4880 0,0035935
2,5 14,5 3200 46400 208,4230 0,004491875
5 24 1600 38400 344,9760 0,00898375
10 36,8 800 29440 528,9632 0,0179675
B2 20 52,5 400 21000 754,6350 0,035935
(Spindel
5) 20 52,5 400 21000 754,6350 0,035935
10 37,3 800 29840 536,1502 0,0179675
5 24,5 1600 39200 352,1630 0,00898375
2,5 15 3200 48000 215,6100 0,004491875
2 12,5 4000 50000 179,6750 0,0035935
1 7 8000 56000 100,6180 0,00179675
1 10,5 8000 84000 150,927 0,00179675
2 18 4000 72000 258,732 0,0035935
2,5 21 3200 67200 301,854 0,004491875
5 33 1600 52800 474,342 0,00898375
10 50 800 40000 718,7000 0,0179675
B3 20 72 400 28800 1034,928 0,035935
(Spindel
5) 20 72 400 28800 1034,928 0,035935
10 50 800 40000 718,7000 0,0179675
5 33 1600 52800 474,3420 0,00898375
2,5 21 3200 67200 301,8540 0,004491875
2 18 4000 72000 258,7320 0,0035935
1 10,5 8000 84000 150,9270 0,00179675
1 3 8000 24000 43,1220 0,00179675
C1 2 5,3 4000 21200 76,1822 0,0035935
(Spindel 2,5 6 3200 19200 86,2440 0,004491875
5) 5 10 1600 16000 143,7400 0,00898375
10 16,3 800 13040 234,2962 0,0179675

143
20 25,5 400 10200 366,5370 0,035935

20 25,5 400 10200 366,5370 0,035935
10 16,5 800 13200 237,1710 0,0179675
5 10 1600 16000 143,7400 0,00898375
2,5 6 3200 19200 86,2440 0,004491875
2 5,3 4000 21200 76,1822 0,0035935
1 3 8000 24000 43,1220 0,00179675
1 10 8000 80000 143,7400 0,00179675
2 16,5 4000 66000 237,1710 0,0035935
2,5 19 3200 60800 273,1060 0,004491875
5 30 1600 48000 431,2200 0,00898375
10 45 800 36000 646,8300 0,0179675
C2 20 64 400 25600 919,9360 0,035935
(Spindel
5) 20 64 400 25600 919,9360 0,035935
10 45,3 800 36240 651,1422 0,0179675
5 30,5 1600 48800 438,4070 0,00898375
2,5 19 3200 60800 273,1060 0,004491875
2 16,5 4000 66000 237,1710 0,0035935
1 10 8000 80000 143,7400 0,00179675
1 17,8 8000 142400 255,8572 0,00179675
2 28,5 4000 114000 409,6590 0,0035935
2,5 32,5 3200 104000 467,1550 0,004491875
5 48 1600 76800 689,9520 0,00898375
10 66,5 800 53200 955,8710 0,0179675
C3 20 87 400 34800 1250,5380 0,035935
(Spindel
5) 20 87 400 34800 1250,5380 0,035935
10 67,5 800 54000 970,2450 0,0179675
5 49 1600 78400 704,3260 0,00898375
2,5 33,5 3200 107200 481,5290 0,004491875
2 29 4000 116000 416,8460 0,0035935
1 18 8000 144000 258,7320 0,00179675
Keterangan:
1= HPMC 2%; 2 = Kofein + HPMC 2% + NaHA 0,5%; 3 = NaHA 2%

144
Lampiran 26. Tabel data hasil pengamatan organoleptis setelah uji siklus (cycling test) pada berbagai sediaan gel selama 6 siklus
Warna Bau Sineresis Homogenitas

Formula
Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah
A1 Bening Bening Tidak berbau Tidak Berbau Tidak sineresis Tidak Sineresis Homogen Homogen
B1 Bening Bening Berbau Alkohol Sedikit Berbau Tidak sineresis Tidak Sineresis Homogen Homogen
Alkohol
Alkohol
Alkohol
C1 Putih Susu Putih Susu Berbau Emulsi Berbau Emulsi Tidak Sineresis Sineresis Homogen Homogen
C2 Putih Susu Putih Susu Berbau Emulsi Berbau Emulsi Tidak sineresis Tidak Sineresis Homogen Homogen
C3 Putih Susu Putih Susu Berbau Emulsi Berbau Emulsi Tidak sineresis Tidak Sineresis Homogen Homogen
Keterangan:

145
Lampiran 27. Tabel data hasil analisis kofein secara spektrofotometri pada sediaan hidrogel, hidroalkoholik gel, dan emulsi gel
Hidrogel A1 (I) Hidrogel A1 (II) HIdrogel A1 (III)

Menit Kofein Kofein Kofein Kofein Kofein Kofein
Konsentrasi Konsentrasi Konsentrasi
ke- Blanko (+) (-) Blanko (+) (-) Blanko (+) (-)
(ppm) (ppm) (ppm)
Pengotor Pengotor Pengotor Pengotor Pengotor Pengotor
10 0,0060 0,0402 0,0342 25,4256 0,0060 0,0378 0,0318 24,5248 0,0060 0,0387 0,0327 24,8401
30 0,0082 0,0545 0,0463 29,8848 0,0082 0,0531 0,0449 29,3894 0,0082 0,0534 0,0452 29,4794
60 0,0144 0,0958 0,0814 42,9021 0,0144 0,0989 0,0845 44,0733 0,0144 0,1086 0,0942 47,6767
90 0,0213 0,1422 0,1209 57,5860 0,0213 0,1330 0,1117 54,1628 0,0213 0,1317 0,1104 53,6673
120 0,0261 0,1741 0,1480 67,6305 0,0261 0,1673 0,1412 65,1081 0,0261 0,1797 0,1536 69,7025
180 0,0286 0,1905 0,1619 72,7654 0,0286 0,1846 0,1560 70,6033 0,0286 0,1889 0,1603 72,1798
240 0,0310 0,2068 0,1758 77,9453 0,0310 0,2046 0,1736 77,1345 0,0310 0,1927 0,1617 72,7203
300 0,0322 0,2148 0,1826 80,4677 0,0322 0,2250 0,1928 84,2513 0,0322 0,2103 0,1781 78,8011
360 0,0345 0,2302 0,1957 85,3323 0,0345 0,2297 0,1952 85,1521 0,0345 0,2353 0,2008 87,2241
420 0,0371 0,2475 0,2104 90,7824 0,0371 0,2490 0,2119 91,3229 0,0371 0,2464 0,2093 90,3770
480 0,0374 0,2495 0,2121 91,4130 0,0374 0,2509 0,2135 91,9085 0,0374 0,2503 0,2129 91,6833
Hidrogel A2 (I) Hidrogel A2 (II) Hidrogel A2 (III)

(ppm) (ppm) (ppm)
10 0,0066 0,0440 0,0374 26,5967 0,0066 0,0436 0,0370 26,4616 0,0066 0,0424 0,0358 26,0112
30 0,0164 0,1093 0,0929 47,1812 0,0164 0,1047 0,0883 45,4696 0,0164 0,1053 0,0889 45,6948
60 0,0266 0,1772 0,1506 68,5764 0,0266 0,1796 0,1530 69,4773 0,0266 0,1706 0,1440 66,1441
90 0,0349 0,2326 0,1977 86,0530 0,0349 0,2352 0,2003 87,0439 0,0349 0,2241 0,1892 82,9000
120 0,0356 0,2372 0,2016 87,4943 0,0356 0,2386 0,2030 88,0348 0,0356 0,2284 0,1928 84,2513
180 0,0401 0,2675 0,2274 97,0884 0,0401 0,2721 0,2320 98,8000 0,0401 0,2577 0,2176 93,4399
240 0,0421 0,2807 0,2386 101,2323 0,0421 0,2807 0,2386 101,2323 0,0421 0,2704 0,2283 97,4037
300 0,0424 0,2828 0,2404 101,9080 0,0424 0,2860 0,2436 103,0791 0,0424 0,2724 0,2300 98,0343
360 0,0430 0,2868 0,2438 103,1691 0,0430 0,2897 0,2467 104,2502 0,0430 0,2763 0,2333 99,2504
420 0,0431 0,2874 0,2443 103,3493 0,0431 0,3015 0,2584 108,5743 0,0431 0,2923 0,2492 105,1510
480 0,0480 0,3201 0,2721 113,6641 0,0480 0,3251 0,2771 115,5108 0,0480 0,3083 0,2603 109,2949

146
Hidrogel A3 (I) Hidrogel A3 (II) HIdrogel A3 (III)

(ppm) (ppm) (ppm)
10 0,0059 0,0394 0,0335 25,1554 0,0059 0,0377 0,0318 24,5248 0,0059 0,0367 0,0308 24,1644
30 0,0084 0,0561 0,0477 30,4253 0,0084 0,0662 0,0578 34,1639 0,0084 0,0520 0,0436 28,8939
60 0,0112 0,0749 0,0637 36,3710 0,0112 0,0864 0,0752 40,6050 0,0112 0,0735 0,0623 35,8305
90 0,0171 0,1142 0,0971 48,7577 0,0171 0,1191 0,1020 50,5594 0,0171 0,1189 0,1018 50,4693
120 0,0205 0,1369 0,1164 55,9195 0,0205 0,1499 0,1294 60,7390 0,0205 0,1487 0,1282 60,2886
180 0,0282 0,1882 0,1600 72,0897 0,0282 0,1942 0,1660 74,2968 0,0282 0,1898 0,1616 72,6753
240 0,0380 0,2535 0,2155 92,6742 0,0380 0,2558 0,2178 93,5300 0,0380 0,2608 0,2228 95,3768
300 0,0617 0,4115 0,3498 142,4913 0,0617 0,4092 0,3475 141,6355 0,0617 0,4101 0,3484 141,9508
360 0,0678 0,4520 0,3842 155,2384 0,0678 0,4517 0,3839 155,1483 0,0678 0,4463 0,3785 153,1214
420 0,0687 0,4581 0,3894 157,1752 0,0687 0,4557 0,3870 156,2744 0,0687 0,4589 0,3902 157,4905
480 0,0699 0,4662 0,3963 159,7427 0,0699 0,4649 0,3950 159,2472 0,0699 0,4644 0,3945 159,0670
Hidroalkoholik Gel B1 (I) Hidroalkoholik Gel B1 (II) HIdroalkoholik Gel B1 (III)

(ppm) (ppm) (ppm)
10 0,0063 0,0421 0,0358 26,0112 0,0063 0,0324 0,0261 22,4078 0,0063 0,0388 0,0325 24,7950
30 0,0093 0,0618 0,0525 32,1820 0,0093 0,0637 0,0544 32,9027 0,0093 0,0585 0,0492 30,9659
60 0,0148 0,0988 0,0840 43,8931 0,0148 0,0946 0,0798 42,3166 0,0148 0,0981 0,0833 43,6228
90 0,0175 0,1166 0,0991 49,4784 0,0175 0,1481 0,1306 61,1894 0,0175 0,1312 0,1137 54,8835
120 0,0251 0,1676 0,1425 65,6036 0,0251 0,1702 0,1451 66,5495 0,0251 0,1691 0,1440 66,1441
180 0,0359 0,2394 0,2035 88,2150 0,0359 0,2330 0,1971 85,8277 0,0359 0,2331 0,1972 85,8728
240 0,0543 0,3619 0,3076 126,8165 0,0543 0,3338 0,2795 116,4117 0,0543 0,3997 0,3454 140,8698
300 0,0636 0,4240 0,3604 146,4100 0,0636 0,3878 0,3242 132,9873 0,0636 0,4132 0,3496 142,4013
360 0,0711 0,4739 0,4028 162,1299 0,0711 0,4431 0,3720 150,7341 0,0711 0,4826 0,4115 165,3730
420 0,0811 0,5407 0,4596 183,2099 0,0811 0,4678 0,3867 156,1843 0,0811 0,5516 0,4705 187,2637
480 0,0843 0,5623 0,4780 190,0563 0,0843 0,5591 0,4748 188,8402 0,0843 0,5594 0,4751 188,9753

147

(ppm) (ppm) (ppm)
10 0,0057 0,0378 0,0321 24,6149 0,0057 0,0382 0,0325 24,7950 0,0057 0,0381 0,0324 24,7500
30 0,0076 0,0508 0,0432 28,7588 0,0076 0,0446 0,0370 26,4616 0,0076 0,0482 0,0406 27,7678
60 0,0129 0,0860 0,0731 39,8393 0,0129 0,0962 0,0833 43,6228 0,0129 0,0634 0,0505 31,4613
90 0,0166 0,1106 0,094 47,5866 0,0166 0,1120 0,0954 48,1271 0,0166 0,1191 0,1025 50,7396
120 0,0240 0,1602 0,1362 63,2614 0,0240 0,1600 0,1360 63,1713 0,0240 0,1629 0,1389 64,2523
180 0,0331 0,2205 0,1874 82,2243 0,0331 0,2181 0,1850 81,3685 0,0331 0,2192 0,1861 81,7739
240 0,0532 0,3549 0,3017 124,6544 0,0532 0,3379 0,2847 118,3485 0,0532 0,3429 0,2897 120,1952
300 0,0830 0,5536 0,4706 187,3087 0,0830 0,5540 0,4710 187,4439 0,0830 0,5582 0,4752 189,0203
360 0,0846 0,5642 0,4796 190,6419 0,0846 0,5811 0,4965 196,9028 0,0846 0,5707 0,4861 193,0291
420 0,0899 0,5993 0,5094 201,6773 0,0899 0,6454 0,5555 218,7935 0,0899 0,6437 0,5538 218,1629
480 0,1034 0,6896 0,5862 230,1893 0,1034 0,6985 0,5951 233,4774 0,1034 0,7026 0,5992 235,0088

(ppm) (ppm) (ppm)
10 0,0065 0,0432 0,0367 26,3265 0,0065 0,0479 0,0414 28,0831 0,0065 0,0509 0,0444 29,2092
30 0,0151 0,1008 0,0857 44,5237 0,0151 0,0849 0,0698 38,6231 0,0151 0,0798 0,0647 36,7313
60 0,0244 0,1627 0,1383 64,0271 0,0244 0,1708 0,1464 67,0450 0,0244 0,1718 0,1474 67,4053
90 0,0260 0,1733 0,1473 67,3603 0,0260 0,1751 0,1491 68,0359 0,026 0,1753 0,1493 68,1260
120 0,0268 0,1788 0,1520 69,1169 0,0268 0,1768 0,1500 68,3512 0,0268 0,1844 0,1576 71,1889
180 0,0286 0,1907 0,1621 72,8555 0,0286 0,1913 0,1627 73,0807 0,0286 0,1940 0,1654 74,0716
240 0,0317 0,2115 0,1798 79,4317 0,0317 0,2108 0,1791 79,1614 0,0317 0,2133 0,1816 80,1073
300 0,0279 0,1860 0,1581 71,3691 0,0279 0,2026 0,1747 77,5399 0,0279 0,2035 0,1756 77,8552
360 0,0311 0,2073 0,1762 78,0804 0,0311 0,1911 0,1600 72,0897 0,0311 0,1858 0,1547 70,1079
420 0,0259 0,1726 0,1467 67,1351 0,0259 0,1752 0,1493 68,1260 0,0259 0,1779 0,1520 69,1169
480 0,0237 0,1582 0,1345 62,6308 0,0237 0,1615 0,1378 63,8470 0,0237 0,1632 0,1395 64,4775

148
Emulgel C1 (I) Emulgel C1 (II) Emulgel C1 (III)

(ppm) (ppm) (ppm)
10 0,0065 0,0335 0,0270 22,7274 0,0065 0,0300 0,0235 21,4536 0,0065 0,0316 0,0251 22,0336
30 0,0081 0,0416 0,0335 25,1325 0,0081 0,0377 0,0296 23,7178 0,0081 0,0395 0,0314 24,3612
60 0,0085 0,0440 0,0355 25,8993 0,0085 0,0401 0,0316 24,4418 0,0085 0,0419 0,0334 25,1056
90 0,0098 0,0504 0,0406 27,7816 0,0098 0,0462 0,0364 26,2139 0,0098 0,0481 0,0383 26,9273
120 0,0138 0,0711 0,0573 33,9860 0,0138 0,0659 0,0521 32,0593 0,0138 0,0683 0,0545 32,9366
180 0,0143 0,0736 0,0593 34,7180 0,0143 0,0683 0,0540 32,7497 0,0143 0,0707 0,0564 33,6463
240 0,0274 0,1413 0,1139 54,9696 0,0274 0,1328 0,1054 51,8260 0,0274 0,1367 0,1093 53,2575
300 0,0368 0,1898 0,1530 69,4699 0,0368 0,1790 0,1422 65,4853 0,0368 0,1839 0,1471 67,2998
360 0,0472 0,2435 0,1963 85,5387 0,0472 0,2302 0,1830 80,6228 0,0472 0,2363 0,1891 82,8617
420 0,0517 0,2667 0,2150 92,4751 0,0517 0,2524 0,2007 87,1568 0,0517 0,2589 0,2072 89,5790
480 0,0619 0,3190 0,2571 108,0908 0,0619 0,3022 0,2403 101,8659 0,0619 0,3098 0,2499 105,4265

(ppm) (ppm) (ppm)
10 0,0060 0,0266 0,0206 20,3596 0,0060 0,0285 0,0225 21,0802 0,0060 0,0266 0,0206 20,3596
30 0,0116 0,0514 0,0398 27,4790 0,0116 0,0614 0,0498 31,2109 0,0116 0,0567 0,0451 29,4597
60 0,0132 0,0583 0,0451 29,4597 0,0132 0,0716 0,0584 34,3973 0,0132 0,0685 0,0553 33,2203
90 0,0202 0,0895 0,0693 38,4163 0,0202 0,0931 0,0729 39,7655 0,0202 0,0895 0,0693 38,4163
120 0,0236 0,1042 0,0806 42,6362 0,0236 0,1083 0,0847 44,1577 0,0236 0,1042 0,0806 42,6362
180 0,0581 0,2570 0,1989 86,5004 0,0581 0,2667 0,2086 90,0887 0,0581 0,2466 0,1885 82,6536
240 0,0696 0,3076 0,2380 101,0261 0,0696 0,3067 0,2371 100,6816 0,0696 0,2685 0,1989 86,5004
300 0,0880 0,3892 0,3012 124,4509 0,0880 0,3444 0,2564 107,8296 0,0880 0,3260 0,2380 101,0261
360 0,0896 0,3964 0,3068 126,5178 0,0896 0,3947 0,3051 125,9150 0,0896 0,3591 0,2695 112,6811
420 0,0978 0,4326 0,3348 136,9097 0,0978 0,4241 0,3263 133,7807 0,0978 0,4328 0,3350 136,9958
480 0,1039 0,4595 0,3556 144,6319 0,1039 0,4439 0,3500 142,5595 0,1039 0,4412 0,3373 137,8570

149

(ppm) (ppm) (ppm)
10 0,0071 0,0315 0,0244 21,7663 0,0071 0,0353 0,0282 23,1729 0,0071 0,0387 0,0316 24,4360
30 0,0084 0,0371 0,0287 23,3739 0,0084 0,0534 0,0450 29,4023 0,0084 0,0387 0,0303 23,9480
60 0,0180 0,0795 0,0615 35,5456 0,0180 0,0677 0,0497 31,1534 0,0180 0,0807 0,0627 35,9762
90 0,0245 0,1082 0,0837 43,7845 0,0245 0,1156 0,0911 46,5116 0,0245 0,1173 0,0928 47,1432
120 0,0283 0,1252 0,0969 48,6647 0,0283 0,1320 0,1037 51,1909 0,0283 0,1318 0,1035 51,1047
180 0,0362 0,2194 0,1832 80,7050 0,0362 0,2132 0,1770 78,4045 0,0362 0,2113 0,1751 77,6994
240 0,0681 0,3010 0,2329 99,1314 0,0681 0,3111 0,2430 102,8942 0,0681 0,3110 0,2429 102,8633
300 0,0873 0,3860 0,2987 123,5323 0,0873 0,4090 0,3217 132,0582 0,0873 0,3779 0,2906 120,5181
360 0,1091 0,4825 0,3734 151,2345 0,1091 0,4531 0,3440 140,3258 0,1091 0,4874 0,3783 153,0430
420 0,1327 0,5868 0,4541 181,1758 0,1327 0,5534 0,4207 168,8031 0,1327 0,5728 0,4401 175,9798
480 0,1352 0,5979 0,4627 184,3622 0,1352 0,5779 0,4427 176,9559 0,1352 0,5924 0,4572 182,3240

150
Lampiran 28. Tabel data hasil evaluasi berbagai sediaan gel pada minggu ke-0 dan hasil uji penetrasi kofein secara in vitro
Diameter Jumlah
Persentase
Globul Penetrasi Viskositas Kumulatif Fluks
Sediaan Warna Bau Homogenitas pH Rheologi (%)
Rata-rata (1/10 (Cps) Terpenetrasi (μg.cm-2.jam-1)
Terpenetrasi
(µm) mm) (μg.cm-2)
Tidak 198,77 ± 7,05*
A1 Transparan Homogen 6,12 - 515 14300 Pseudoplastis 852,39 ± 1,13 9,41 ± 0,01
berbau 53,98 ± 2,22**
Tidak 359,34 ± 7,34*
A2 Transparan Homogen 5,93 - 390 64000 Pseudoplastis 1077,65 ± 11,57 11,74 ± 0,13
berbau 56,82 ± 2,16**
Tidak
A3 Transparan Homogen 5,47 - 370 130000 Pseudoplastis 1077,65 ± 11,57 16,32 ± 0,03 172,06 ± 2,20
berbau
Berbau
B1 Transparan Homogen 6,00 - 555 12000 Pseudoplastis 1659,02 ± 1,97 19,54 ± 0,02 200,39 ± 1,70
Alkohol
Berbau
B2 Transparan Homogen 5,64 - 400 58000 Pseudoplastis 1997,29 ± 20,12 22,99 ± 0,23 248,77 ± 7,23
Alkohol
Berbau 366,35 ± 10,24*
B3 Transparan Homogen 6,23 - 375 124000 Pseudoplastis 650.07 ± 7,38 7,42 ± 0,08
57,68 ± 2,87**
Alkohol
Berbau
C1 Putih Susu Homogen 5,36 0,1110 510 20500 Pseudoplastis 917,50 ± 16,81 10,47 ± 0,19 97,149 ± 1,97
Emulsi
Berbau
C2 Putih Susu Homogen 4,71 0.0876 370 78000 Pseudoplastis 1263,93 ± 11,76 13,41 ± 0,12 151,04 ± 5,57
Emulsi
Berbau
C3 Putih Susu Homogen 5,14 0.0868 350 144000 Pseudoplastis 1575,90 ± 5,49 18,56 ± 0,06 191,14 ± 3,79
Emulsi
Keterangan:
*Fluks fase pertama
**Fluks fase ke dua

151
Lampiran 29. Perhitungan HLB emulsi pada sediaan emulgel
Perhitungan HLB emulgator yang dibutuhkan pada sediaan emulgel, antara lain:
Fase minyak yang digunakan: Liquid Paraffin 5% (HLB =12)
Jumlah Emulgator yang dibutuhkan untuk mengemulsi M/A adalah 12
Kombinasi Emulgator yang mempunyai nilai HLB 11-13 akan memberikan hasil
emulsi yang baik (Anief, 1997).
Span 60 (HLB = 4,7) 4,7
12
Tween 20 (HLB= 16,7) 7,3 +

12
Jumlah Span 60 yang Dibutuhkan = 4,7 12 x 5% = 1,90% ~ 2%

Jumlah Tween 20 yang dibutuhkan = 7,3 12 x 5% = 3,04% ~ 3%
Pada Formulasi Emulgel, jumlah Gel : Emulsi (50:50)

Jadi, konsentrasi Span 60 = 50 100 x 2% = 1%
konsentrasi Tween 20 = 4,7 12 x 3%= 1,5%

152
Lampiran 30. Contoh perhitungan diameter globul rata-rata sediaan emulgel

formula C1 pada suhu kamar minggu ke-0
n = Jumlah Globul
k = Kelas = 1 + 3,322 log n
I = Interval
n = 96
k = 1 + 3,322 log (97) = 7,6
I = 0,25 – 0,05 = 0,0263
7,6
Rentang (µm) Nilai Tengah (d) n nd

0,0550 – 0,0813 0,0682 30 2,046
0,0813 – 0,1076 0,0945 -
0,1076 – 0,1339 0,1208 62 7,4896
0,1339 – 0,1602 0,1471 -
0,1602 – 0,1865 0,1734 -
0,1865 – 0,2128 0,1997 -
0,2128 – 0,2391 0,2260 1 0,2260
0,2391 – 0,2654 0,2523 4 1,0092
Ʃ= 97 10,7708
d rata-rata = Ʃnd
n
= 10,7708 = 0,1110 µm
97

153
Lampiran 31. Contoh perhitungan yield value dari pengukuran konsistensi sediaan
hidrogel formula A1
Untuk mencari nilai yield value digunakan rumus:
. .
=
Keterangan:
So = yield value (dyne/cm2)
k1 = 1/π cos2 α cos α = 0,14281
m = Massa kerucut
g = Gravitasi (cm/df2)
p = Dalamnya penetrasi (cm)
n = Konstanta, yaitu 2
α = Sudut kerucut terhadap bidang datar, yaitu 37O
Perhitungan:
Dalamnya penetrasi = 515 1 10 mm
Massa kerucut = 263,5 g
, × , ×
Yield value = = 1391,85 dyne/cm2
,

154
Lampiran 32. Perhitungan LOD dan LOQ dari serapan kofein
Konsentrasi Serapan
Yi (y-yi) (y-yi)2
(x) (y)
5,105 0,2416 0,2409 0.00070 0.0000004900
6,126 0,2960 0,2960 0.00002 0.0000000004
7,147 0,3495 0,3510 -0.00150 0.0000022500
10,210 0,5161 0,5162 -0.00006 0.0000000036
12,252 0,6279 0,6263 0.00164 0.0000026896
15,315 0,7914 0,7914 0.00001 0.0000000001
16,336 0,8457 0,8464 -0.00074 0.0000005476
Ʃ= 0.0000059813
Sb = 0.0010937367
LOD = 0.0608758839 ppm
LOQ = 0.2029196130 ppm
∑( − ) 0.0000059813
= = = 0.0010937367
−2 7−2
3 3 0.0010937367
= = = 0.0608758839 ppm
0,0539
10 10 0.0010937367
= = = 0.2029196130 ppm
0,0539

155
Lampiran 33. Contoh perhitungan uji perolehan kembali (UPK) kofein dalam
sediaan hidrogel formula A1
Persamaan regresi: y = -0,0343 + 0,0539x

dengan y = serapan kofein (A); x = kadar kofein (ppm)
Gel diencerkan dengan dapar fosfat pH 7,4 dan dicukupkan volumenya hingga
25,0 ml
Larutan tersebut dipipet 0,5 ml dan diencerkan lagi dengan dapar fosfat pH 7,4
hingga 25,0 ml.
Serapan diukur secara spektrofotometri Pada Panjang gelombang maksimum

Faktor pengenceran = 25 × 25 = 1250
0,5
Perolehan kembali kofein = Kadar Diperoleh × Faktor Pengenceran × 100%
Bobot Seharusnya
Berat gel formula 1 sebesar 0,6550 gram (mengandung 9825 µg kofein)
Data 1
Serapan = 0,4096 A
Kadar diperoleh = 8,2334 ppm
Perolehan kembali = 104,75%
Data 2
Serapan = 0,4141 A
Data 3
Serapan = 0,4290 A
Perolehan kembali rata-rata = 104,75% + 105,81% + 109,33% = 106,63%
3

156
Lampiran 34. Contoh perhitungan jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi dari
sediaan hidrogel formula A1 pada menit ke-60
Persamaan regresi: y = - 0,0343 + 0,0539 x

Faktor pengenceran = volume labu ukur : volume sampling
= 10,0 : 0,5 = 20
Konsentrasi terpenetrasi = X × 20
Jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi dihitung menggunakan persamaa
rumus di bawah ini:
[ . ∑ . ]
=
Keterangan:
Q = jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi per luas area difusi (µg/cm2)
Cn = konsentrasi kofein (µg/ml) pada sampling menit ke-n
V = volume sel difusi Franz (13,0 ml)
∑ = jumlah konsentrasi kofein (µg/ml) pada sampling pertama (menit ke-

10) hingga sebelum menit ke-n
S = volume sampling (0,5 ml)
A = luas area membran (1,76625 cm2)
Data 1
Serapan yang didapat = 0,0958
Serapan nipagin dan nipasol = 0,0144
Serapan kofein = 0,0814
Konsentrasi diperoleh = 2,1460 ppm
Konsentrasi terpenetrasi pada menit ke-60 = 2,1460 x 20 = 42,90 ppm
Konsentrasi terpenetrasi pada menit ke-10 & ke-30 = 25,43 + 29,88 = 55,31 ppm
Jumlah kumulatif (Q) = {(42,90 × 13,0) + (55,31 x 0,5)} = 331,42 μg/cm2
1,76625

157
Data 2
1,76625
Data 3
1,76625
Jumlah kumulatif (Q) rata-rata = 331,42 + 339,65 + 366,29 = 345,79 μg/cm2

3

158
Lampiran 35. Contoh perhitungan persen jumlah kofein yang terpenetrasi dari
sediaan hidrogel formula A1 pada menit ke-60
% Terpenetrasi = Jumlah kumulatif kofein yang terpenetrasi x Luas membran x 100%

Jumlah kofein yang sebenarnya
Data 1
Berat gel untuk uji penetrasi = 1,0003 gram
Berat kofein seharusnya dalam gel = 1,5 x 1,0003 gram = 15004,5 µg
100
Jumlah kumulatif terpenetrasi pada menit ke- 60 = 331,42 μg/cm2
% Terpenetrasi = 331,42 x 1,76625 x 100% = 3,90%
15004,5
% Terpenetrasi dikali faktor koreksi (UPK) = 100 x 3,90% = 3,66%
106,63
Data 2
Berat kofein seharusnya dalam gel = 1,5 x 1,0006 gram = 15009 µg
100
% Terpenetrasi = 339,65 x 1,76625 x 100% = 4,00%
15009
106,63
Data 3
Berat kofein seharusnya dalam gel = 1,5 x 1,0010 gram = 15015 µg
100

159
% Terpenetrasi = 366,29 x 1,76625 x 100% = 4,31%

15015
106,63
Rata-rata % kofein yang terpenetrasi = 3,66% + 3,75% + 4,04% = 3,81%

3

160
Lampiran 36. Contoh perhitungan fluks atau laju penetrasi kofein dari sediaan
hidrogel formula A1 pada menit ke- 60
Rumus fluks (laju penetrasi) kofein:
= =Q
.
Keterangan:
J = Fluks atau laju penetrasi (μg cm-2 jam-1)
Q = Jumlah kumulatif glukosamin yang melalui membran per luas area difusi
(μg cm-2)
t = Waktu (jam)
Data 1
Q = 331,42 μg/cm2
J = 331,42 μg/cm2 = 331,42 μg cm-2 jam-1
1 jam
Data 2
Q = 339,65 μg/cm2
J = 339,65 μg/cm2 = 339,65 μg cm-2 jam-1
1 jam
Data 3
Q = 366,29 μg/cm2
J = 366,29 μg/cm2 = 366,29 μg cm-2 jam-1
1 jam
Fluks rata-rata = 331,42 + 339,65 + 366,29 = 345,79 μg cm-2 jam-1

3

161
Lampiran 37. Sertifikat analisis kofein anhidrat

162
Lampiran 38. Sertifikat analisis sodium hialuronat

163
Lampiran 39. Sertifikat analisis HPMC

164
Lampiran 40. Sertifikat analisis propilen glikol

165
Lampiran 41. Sertifikat analisis span 60

166
Lampiran 42. Sertifikat analisis parafin cair

167
Lampiran 43. Sertifikat analisis BHT

168
Lampiran 44. Sertifikat analisis alkohol 96%

169
Lampiran 45. Sertifikat analisis nipagin

170
Lampiran 46. Sertifikat analisis nipasol

171
Lampiran 47. Sertifikat analisis NaOH

172
Lampiran 48. Sertifikat analisis tikus putih

123 PDF

Uploaded by

Document Information

Original Title

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

123 PDF

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

UNIVERSITAS INDONESIA

PENGARUH NATRIUM HIALURONAT TERHADAP

ZURAIDA SYAFARA DZUHRO

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

PENGARUH NATRIUM HIALURONAT TERHADAP

ZURAIDA SYAFARA DZUHRO

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Nama : Zuraida Syafara Dzuhro

Kata Kunci : emulsi gel, hidroalkoholik gel, hidrogel, kofein, natrium

vii Universitas Indonesia

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Name : Zuraida Syafara Dzuhro

Anticellulite topical gel preparation with caffeine as active ingredient needs a

Keywords : caffeine, Franz diffusion cell, gel emulsion, hydroalcoholic gel,

viii Universitas Indonesia

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

xiv Universitas Indonesia

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

xvi Universitas Indonesia

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

xvii Universitas Indonesia

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

1.1 Latar Belakang

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

1.2 Tujuan Penelitian

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

(1) Epidermis, (2) Dermis, (3) Lapisan subkutan

[Sumber: Melbourne Dermatology, 2009]

Gambar 2.1. Struktur kulit manusia (telah diolah kembali)

2.1.1 Epidermis (Tranggono & Latifah, 2007)

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

2.1.2 Dermis (Tranggono & Latifah, 2007)

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

2.1.3 Subkutan (Grams & Bouwstra, 2005)

2.2 Penetrasi Obat Melalui Kulit

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

(b) (a) (c)

[Sumber: Pittermann, 2007]

Rute transeluler Rute interseluler

Sel tanduk Matriks lemak

[Sumber: Pittermann, 2007]

2.2.1 Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Penetrasi Perkutan

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

b) Perbedaan usia dan jenis kulit

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

i) Hubungan antara pembawa dengan zat yang berpenetrasi

2.2.2 Peningkat Penetrasi Perkutan

Pengaruh natrium..., Zuraida Syafara Dzuhro, FMIPA UI, 2011

b) Modifikasi stratum korneum, misalnya: hidrasi, fluidisasi lipid, interaksi