Hayudiarti, et al., Potensi Rebusan Daun Mimba (Azadirachta indica) Pada Adhesi Sel Neutrofil.....

Potensi Rebusan Daun Mimba (Azadirachta indica) Pada Adhesi

Sel Neutrofil Terhadap Candida albicans
(Potention of Neem Leaves Decocta (Azadirachta indica) to
Adhesion of Neutrophil against Candida albicans)
Amalia Hayudiarti1, I Dewa Ayu Ratna Dewanti2, Tantin Ermawati3
1Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Jember
2,3Bagian Biomedik Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Jember
Jl. Kalimantan 37 Jember 68121
e-mail korespodensi : hayu_diar@yahoo.co.id

Abstract

Introduction : Neem is one of the medicinal plants containing immunomodulatory components that can
modulate the immune response to infection. C. albicans is the main cause of oral thrush infections. The
phagocytosis process that begins with adhesion is an important stage in eliminating pathogenic fungi and
occurs in neutrophil. This research aims to determine the potential and concentration of neem leaves
decocta to adhesion of neutrophil against C. albicans. Method : This research is in-vitro experimental
studies with the post test only control group design. The sample using isolated neutrophil from human
peripheral venous blood. Neutrophil suspension coated on micro plates were given a coverslip and
incubated by Neem leaves decocta concentration of 25%, 12,5%, 6,25%, and 3,125% while a control
incubated by RPMI. Furthermore, neutrophil exposed to 100 µl C. albicans. Then fixation using methanol
and Giemsa dye staining. Counting adhesion on neutrophil microscopically. Result : The highest
adhesion index is in the group 4. Conclusion : Neem leaves decocta is able to act as an
immunomodulator in increasing neutrophil adhesion to C. albicans and the most effective concentration
is 25%.

Keywords : neem, neutrophil, adhesion, Candida albicans

Abstrak

Pendahuluan : Mimba merupakan salah satu tanaman obat yang mengandung komponen
imunomodulator yang dapat memodulasi respon imun terhadap infeksi. C. albicans merupakan penyebab
utama infeksi kandidiasis mulut. Proses fagositosis yang diawali dengan adhesi merupakan tahap yang
penting dalam mengeliminasi jamur patogen dan terjadi di dalam sel neutrofil. Penelitian ini bertujuan
untuk mengetahui potensi dan konsentrasi rebusan daun mimba dalam meningkatkan adhesi sel neutrofil
terhadap C. albicans. Metode : Penelitian ini merupakan eksperimental laboratoris in-vitro dengan the
post test only control group design. Sampel penelitian menggunakan isolat neutrofil yang diambil dari
darah vena perifer manusia. Neutrofil diletakkan pada micro plate yang sudah diberikan coverslip dan
diinkubasi rebusan daun mimba dengan konsetrasi 25%, 12,5%, 6,25%, dan 3,125%,dan untuk kontrol
diinkubasi dengan RPMI. Kemudian neutrofil dipapar dengan 100 µl C. albicans. Setelah itu dilakukan
fiksasi dengan methanol dan pengecatan dengan Giemsa. Penghitungan adhesi pada sel neutrofil
dilakukan dengan menggunakan mikroskop. Hasil : Indeks adhesi tertinggi terdapat pada kelompok
perlakuan 4. Kesimpulan: Rebusan daun mimba mampu berperan sebagai imunomodulator dalam
meningkatkan adhesi sel neutrofil terhadap C. albicans dan konsentrasi paling efektif adalah 25%.

Kata kunci : mimba, neutrofil, adhesi, Candida albicans

e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun

Hayudiarti, et al., Potensi Rebusan Daun Mimba (Azadirachta indica) Pada Adhesi Sel Neutrofil.....
Pendahuluan
Efek samping obat-obatan kimia yang
sering kali menimbulkan masalah baru yang tak
kalah berat, menjadi salah satu yang
mendorong berkembangnya pengobatan
tradisional dengan menggunakan tanaman obat
[1]. Salah satu tanaman obat yang sudah
dikenal masyarakat luas adalah tanaman mimba
dengan nama lain Azadirachta indica. Mimba
telah digunakan secara luas oleh masyarakat
untuk mengobati berbagai jenis penyakit bahkan
sebelum ada catatan tertulis yang mencatat
awal sejarah [2].
Mimba (Azadirachta Indica) telah dikenal
dan dimanfaatkan masyarakat untuk mengatasi
berbagai macam penyakit, seperti: cacingan,
kudis, malaria, infeksi jamur, mengatasi tumor,
dan alergi [3]. Beberapa penelitian membuktikan
mimba memodulasi imunitas alami dan adaptif
[4][5][6]. Fenomena ini menunjukkan bahwa
mimba mengandung komponen imunomodulator
yang dapat memodulasi respon imun, terutama
terhadap infeksi.
Infeksi rongga mulut yang paling umum
dijumpai adalah kandidiasis mulut (80%) dengan
penyebab utama C. albicans [7]. C. albicans
merupakan mikroorganisme oportunistik, yang
merupakan flora normal di rongga mulut, namun
dapat menjadi patogen, sehingga dikatakan
bahwa faktor predisposisi utama yang
menyebabkan perubahan C. albicans menjadi
patogen adalah rendahnya daya tahan tubuh
sehingga menyebabkan kandidiasis [8].
Ekstrak cair daun mimba terbukti
mempunyai efek anti mikroba terhadap C
albicans secara in vitro [9]. Rebusan daun
mimba dapat menghambat pertumbuhan C
albicans secara in vitro [10]. Mimba
menyebabkan peningkatan TNF-α, sehingga
diduga dapat meningkatkan aktivitas fagositosis
[4].
Imunitas alami (fagositosis) terutama
neutrofil berperan penting dalam melawan C
albicans [11]. C. albicans juga mengeluarkan
mikotoksin, diantaranya gliotoksin yang mampu
menghambat aktivitas fagositosis dan menekan
sistem imun lokal [8]. Fagositosis merupakan
proses penghancuran benda asing oleh sel
fagosit, seperti neutrofil dan makrofag. Proses
ini diawali dengan perlekatan (adhesi) mikroba
melalui reseptor fagositik, selanjutnya
mikroorganisme masuk ke dalam sel fagosit dan
terbentuk vesikel yang mengandung mikroba
atau disebut fagosom yang akan bergabung
dengan lisosom dan membentuk fagolisosom.
e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun
Fagosit memiliki protein antibakterial yang
disimpan di dalam granula lisosom yang toksik
terhadap sel fagosit itu sendiri dan jaringan
sekitarnya. Fusi antara fagosom dan granul
lisosom menyebabkan dilepaskannya protein
antibakterial [12].
Adhesi merupakan hal yang penting untuk
terjadinya fagositosis. Adhesi adalah perlekatan
antara dua zat yang memiliki perbedaan jenis
dan struktur [13]. Adhesi melibatkan interaksi
antara ligand dan reseptor pada sel inang. Sel
neutrofil merupakan sel fagosit paling potensial
terhadap C. albicans disaat makrofag tidak
mampu memfagosit C. albicans [14][15].
Neutrofil merupakan sel yang sangat
penting khususnya untuk mengeliminasi C.
albicans dalam sistem kekebalan tubuh.
Neutrofil efektif melawan bakteri dan jamur dan
merupakan sel leukosit yang paling utama
dikaitkan dengan fagositosis dan respon
inflamasi lokal [16]. Neutrofil juga akan
memberikan sinyal bagi sel imun lainnya
mengenai keberadaan benda asing [14].
Berdasarkan latar belakang tersebut,
peneliti ingin mengetahui potensi rebusan daun
mimba pada adhesi sel neutrofil terhadap C.
albicans dengan menggunakan konsentrasi
rebusan 3,125%, 6,25%, 12,5%, dan 25%.
Metode Penelitian
Jenis penelitian ini adalah eksperimental
laboratoris in vitro dengan rancangan the post
test only control group design. Penelitian ini
dilakukan di Laboratorium Bioscience Rumah
Sakit Gigi dan Mulut Fakultas Kedokteran Gigi
Universitas Jember pada buan April tahun 2018.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini
adalah microplate 24 well, coverslip, tabung
EDTA, timbangan, tabung reaksi, centrifuge,
laminar flow, inkubator, autoclave, lampu spirtus,
kaca obyek, mikroskop inverted, densicheck,
vortex, filter, micropipet, corong, pisau/gunting,
syringe, filter syringe, tabung falcon, centrifuge
5810 R dan bahan yang digunakan adalah
suspensi C. albicans, aquades steril, daun
mimba, darah vena perifer, ficoll hypaque
gradient, penstripe, fungizone, histopaque-1119,
RPMI 1640, media complete M199, alcohol 70%,
minyak emersi, HBSS (Hank’s Balanced Salt
Solution), methanol absolut, giemsa.
Sampel dalam penelitian ini berupa isolat
neutrofil sebanyak 12 cc yang diperoleh dari
isolasi darah vena perifer subjek dengan kriteria
tertentu. Jumlah sampel yang digunakan adalah
4 untuk setiap kelompok. Kemudian setiap
Hayudiarti, et al., Potensi Rebusan Daun Mimba (Azadirachta indica) Pada Adhesi Sel Neutrofil.....

kelompok dipapar rebusan daun mimba kecuali

pada kelompok kontrol.
Rebusan daun mimba diperoleh dengan
cara merebus 2 g (kurang lebih 5 lembar) daun
mimba ke dalam aquades sebanyak 200 ml
selama 30 menit, sehingga didapatkan
konsentrasi 100%, selanjutnya dilakukan
pengenceran untuk mendapatkan konsentrasi
25%, 12,5%, 6,25%, dan 3,125%. Daun mimba
dipilih secara acak dari pohon yang sama, lalu
dibersihkan dengan air yang mengalir.
Keuntungan teknik rebusan dibandingkan
dengan teknik pembuatan ekstrak yaitu teknik
rebusan lebih murah, lebih mudah, lebih cepat,
alat, dan caranya sederhana.
C. albicans yang sebelumnya telah Gambar 1. Adhesi Sel Neutrofil terhadap C. albicans
(panah hitam) (Perbesaran 1000x) (Sumber:
diidentifikasi terlebih dahulu dengan uji germ
Koleksi Pribadi)
tube lalu dibuat suspensinya dengan
menggunakan standard 1 McFarland sebanyak Rata-rata indeks adhesi sel neutrofil
100 µl ditambahkan pada well culture sampai terhadap C. albicans dapat dilihat pada Tabel 1
homogen. Kemudian diinkubasi dalam inkubator dan Gambar 2:
dengan suhu 37 oC selama 150 menit. Setelah
itu sel difiksasi menggunakan methanol absolut Tabel 1. Nilai rata-rata indeks adhesi C. albicans pada sel
selama 3 menit dan dilakukan pengecatan. neutrofil
Pengecatan dilakukan dengan
menggunakan pewarna Giemsa yang diteteskan Kelompok N Rata-rata± SD
pada coverslip. Setelah itu dilakukan pencucian K 4 0,31 ± 0,121
dengan alkohol atau air mengalir dan P1 4 0,19 ± 0,040
dikeringkan. Coverslip siap untuk dilakukan P2 4 0,20 ± 0,021
pengamatan dibawah mikroskop dengan P3 4 0,37 ± 0,083
perbesaran 1000x. Penghitungan indeks adhesi P4 4 0,66 ± 0,115
dapat dilakukan dengan menggunakan rumus Total 20
sebagai berikut:

Indeks adhesi
Jumlah sel neutrofil yang dilekati
=Jumlah x 100% Indeks Adhesi
total neutrofil yang dihitung (=100) 0.8
0.66
Data dari hasil penelitian lala dianalisis 0.6
dengan menggunakan uji normalitas dengan
Saphiro-Wilk dan uji homogenitas dengan 0.37
0.4 0.31
Levene Test Selanjutnya apabila data hasil 0.19 0.2
penelitian terdistribusi normal dan homogen, 0.2
dilakukan uji parametric Anova untuk melihat
perbedaaan uji adhesi neutrofil semua kelompok. 0
Selanjutnya dengan uji LSD (Least Significant K P1 P2 P3 P4
Difference) untuk mengetahui perbedaan antar
kelompok.. Gambar 2. Diagram batang rata-rata indeksi adhesi neutrofil
terhadap C. albicans

Hasil Penelitian Rata-rata indeks adhesi yang terbesar

Berdasarkan hasil penelitian yang telah
dilakukan menunjukkan adanya adhesi sel
neutrofil terhadap C. albicans. Adhesi tersebut
dapat dilihat pada Gambar 1
terdapat pada kelompok 4 dengan pemberian
RDM 25%, sedangkan rata-rata indeks adhesi
yang terkecil terdapat pada kelompok 1 dengan
pemberian RDM 3,13%.
Hasil uji normalitas dan homogenitas
dengan Saphiro-Wilk dan Levene Test
menunjukkan data terdistribusi normal dan

e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun

Hayudiarti, et al., Potensi Rebusan Daun Mimba (Azadirachta indica) Pada Adhesi Sel Neutrofil.....
homogen. Dilanjutkan dengan uji statistik
parametrik One Way Anova menunjukkan
adanya perbedaan signifikan pada tiap
kelompok. Hasil uji LSD (Least Significance
Difference), diketahui tidak semua kelompok
terdapat perbedaan yang bermakna. Terdapat
perbedaan yang bermakna pada kelompok P4
terhadap kelompok yang lain, dan antara
kelompok P3 dengan P1 dan P2.
Pembahasan
Hasil penelitian menunjukkan nilai rata-
rata indeks adhesi kelompok kontrol sebesar
0,31, kemudian berturut-turut diikuti dengan
kelompok P1 sebesar 0,19, kelompok P2
sebesar 0,20, kelompok P3 sebesar 0,37, dan
kelompok P4 sebesar 0,66. Pada kelompok P4
indeks adhesi sel neutrofil terhadap C. albicans
adalah yang paling tinggi. Sedangkan indeks
adhesi sel neutrofil terhadap C. albicans yang
paling rendah adalah pada kelompok P1.
Neutrofil merupakan bagian dari leukosit
yang berbentuk polimorfonuklear, atau lazim
juga disebut neutrofil polimorfonuklear sebagai
sistem imun non spesifik dan berperan penting
dalam mekanisme pertahanan tubuh terdepan
dalam menghadapai berbagai serangan atau
invasi bakteri dan jamur oleh karena dapat
memberikan respon langsung, sehingga secara
fisiologis mempunyai daya adhesi terhadap
patogen [17][18].
Fagositosis diawali dengan bergeraknya
neutrofil menuju daerah infeksi yang disebut
dengan kemotaksis untuk mengadakan
perlekatan atau adhesi dengan C. albicans.
Adhesi atau kemampuan melekat pada sel
inang merupakan tahap penting dalam
kolonisasi dan penyerangan (invasi) ke sel
inang. Adhesi melibatkan interaksi antara ligand
dan reseptor pada sel inang dan proses
melekatnya miselium sel C. albicans ke sel
inang. Bagian pertama dari C. albicans yang
berinteraksi dengan sel inang adalah dinding
sel. Dinding sel C. albicans terdiri dari enam
lapisan dari luar ke dalam adalah fibrillar layer,-
glucan, mannoprotein,--chitin β mannoprotein
dan membran plasma. Protein pada permukaan
dinding sel C. albicans. juga berperan penting
dalam interaksi sel dengan lingkungan,
termasuk proses adhesi. Perlekatan lapisan
dinding sel dengan sel inang terjadi karena
mekanisme kombinasi spesifik (interaksi antara
ligand dan reseptor) dan nonspesifik (kutub
elektrostatik dan ikatan van der walls) yang
kemudian menyebabkan serangan C. albicans
e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun
ke berbagai jenis permukaan jaringan [19].
Interaksi sel C. albicans dengan sel inang
juga melibatkan fisikomekanik, fisikokimia dan
enzimatik materi mikroba serta interaksi mikro
yang mengarah pada kolonisasi dan infeksi
seperti perubahan medan magnet pada
permukaan sel yang berinteraksi yang
menyebabkan sel-sel saling melekat [20].
Protein pada permukaan dinding sel C. albicans.
juga berperan penting dalam interaksi sel
dengan lingkungan, termasuk proses adhesi.
Proses adhesi berhubungan dengan
hidrofobisitas suatu permukaan. Penempelan C.
albicans. pada sel epitel mukosa diperantarai
oleh interaksi antara glikoprotein pada
permukaan dinding sel C. albicans. Struktur
yang berperan dalam penempelan sel C.
albicans. yaitu adhesin, fimbria, kitin dan
molekul yang menyerupai integrin [21].
Daun mimba berfungsi sebagai
imunomodulator karena memiliki senyawa Galic
acid, epicatechin, catechin yang merupakan
kelompok polifenol dan golongan Oligomeric
Proanthcyanidins (OPC) yang dapat diisolasi
dari tanaman mimba dan berfungsi sebagai
antiinflamasi dan imunomodulasi. Fungsi
komponen ini dapat mempengaruhi proses
replikasi DNA, memberikan respons terhadap
PMN neutrofil, memodulasi oxidative burst
dalam mitokondria, meningkatkan transkripsi
mRNA pads nukleus yang dihubungkan dengan
protein pada mitokondria, meningkatkan migrasi
makrofag dan phagocytosis uptake. Komponen
ini dapat diabsorbsi dengan cepat dalam
mukosa membran usus dan dengan cepat
diedarkan dalam darah, mempunyai half life
dalam plasma 5 jam dan dengan cepat pula
diabsorbsi dalam jaringan. Peningkatan darah
kapiler dapat terjadi sekitar 6 jam, kemudian
mengalami penurunan. Komponen ini berperan
selama proses inflamasi, juga pada kerusakan
jaringan akibat inflamasi tersebut [22].
Selain itu senyawa imunomodulator
tersebut diketahui dapat memodulasi PMN,
makrofag, limfosit dalam mempengaruhi
aktivitas fagositosis, TNF-α, IFN-γ, aktivitas
makrofag dan produksi immunoglobulin.
Sehingga dapat dimengerti bahwa mimba
memodulasi imunitas alami, seluler, dan
humoral. Beberapa penelitian membuktikan
bahwa efek imunomodulatori mimba antara lain
dapat memodulasi respon imun seluler dan
humoral meliputi peningkatan level IgG dan IgM
[4][5][6]. Potensi imunomodulatori ekstrak daun
mimba terhadap CD4, CD8, Th l, TNF-α, IFN-γ
dan aktivitas sel makrofag pada tikus dan kera
Hayudiarti, et al., Potensi Rebusan Daun Mimba (Azadirachta indica) Pada Adhesi Sel Neutrofil.....
[23]. Potensi daun mimba sebagai
imunostimulator dibuktikan beberapa peneliti
meliputi respons imun humoral dan seluler,
antara lain: fagositosis, ekspresi MHC (Major
Histocompatibility Complex) klas I dan II,
produksi IFN-γ, CD4, CD8, Th 1, TNF-α, IL-1 β
[4][5][6]. Senyawa imunomodulator juga
meningkatkan respon reseptor utama pada
neutrofil yang diketahui memiliki kemampuan
dalam mendeteksi C. albicans yaitu TLRs yang
terdiri dari TLR2, TLR3, TLR4 dan C-type lectin
receptors (CLRs) yang terdiri dari Dectin-1,
Dectin-2, Mannose receptor, MINCLE, Galectin-
3, DC-SIGN sehingga meningkatkan
kemampuan reseptor dalam mengenali dan
mendeteksi C. albicans [24][25].
Simpulan dan Saran
Kesimpulan penelitian ini adalah rebusan
daun mimba mampu berperan sebagai
imunomodulator dan konsentrasi yang paling
efektif adalah sebesar 25%. Perlu dilakukan
penelitian lebih lanjut mengenai potensi rebusan
daun mimba dengan konsentrasi lain dibawah
50%, pengaplikasian rebusan daun mimba
sebagai obat untuk infeksi rongga mulut, dan
potensi rebusan daun mimba terhadap respon
neutrofil pada mikroflora lain yang bersifat
patogen di rongga mulut.
Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih ditujukan kepada
Prof. Dr. drg. I Dewa Ayu Ratna Dewanti, M.Si.,
drg. Tantin Ermawati, M.Kes., dan semua pihak
yang baik secara langsung maupun tidak
langsung telah menumbuhkan idea tau gagasan
dalam pemikiran peneliti sehingga dapat
menyelesaikan artikel ini.
Daftar Pustaka
[1] Thomas, A. N. S, 2012. Tanaman Obat
Tradisional. Edisi 1. Cetakan ke-23.
Yogyakarta: Kanisius
[2] Kumar, V. S., Navaratnam, V. 2013.
Neem (Azadirachta indica): Prehistory to
Contemporary Medicinal uses to
Humankind. Asian Pac J Trop Biomed.
3(7): 505-514
[3] Kusum H, Bala A, Gupta RK, Sharma R.
2013. Leaf Extract of Azadirachta indica
(neem): a Potential Antibiofilm Agent for
Pseudomonas aeruginosa. Pathogens
and Disease. 69(1): 62-65
e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun
[4] Tewari A, Tiwari S. 2018. Synthesis of
medicinal agents from plants. Elsevier:
Netherlands
[5] Sulistina A, Asrul dan Rosmini. 2016.
Effectiveness of Neem Leaf Extract
(Azadirachta Indica A. Juss) on The in
Vitro Growth of Alternaria porri Colony
causing Purple Blotch in Wakegi Onion
(Allium x Wakegi Araki). Agrotekbis. 4(4):
419–424
[6] Gupta R. C. 2016. Neutraceutical Efficacy,
Safety and Toxicity. Elsevier: London
[7] Tortora, G. J., Funke B. R., Case, C.L.
2010. Microbiology An Introduction (10th
ed.). San Francisco: Pearson Educatin Inc.
[8] Jawetz, Melnick, Adelberg. 2016. Medical
Microbiology. 27th ed. McGraw-Hill
Education: United States.
[9] Prashar P, Pruthi H, Akhlaq A . 2012. In
vitro antibacterial activity of Azadirachta
indica against pathogenic bacteria.
Journal of Pharmacy Research. 5(1): 363-
364
[10] Dewanti, Ratna. 2011. TNF- α Expression
on Rats after Candida albicans
Inoculation and Neem (Azadirachta indica)
Extract Feeding. Majalah Kedokteran gigi
(Dental Journal). 44(1): 49-53
[11] Urban CF, D. Ermert, M. Schmid et al.,
2009. Neutrophil Extracellular Traps
Contain Calprotectin, a Cytosolic Protein
Complex Involved in Host Defense
Against Candida albicans, PLoS
Pathogens. 5(10): 1.
[12] Abbas A. K,, Lichtman A. H,, and Pober J.
S. 2015. Celluler and Moleculer
Immunology, 8th Ed. W.B Saunders
Company. Philadelphia.
[13] Amanda L. 2010. Sistem Adhesi Kedok-
teran Gigi. www.respiratory.usu.ac.id. [15
Februari 2017]
[14] Uguccioni M, Teixeira M. M, Locati M and
Mantovani A. 2017. Regulation of
Inflamation, Its Resolution and
Therapeutic Targeting. Frontiers Media
SA.
Hayudiarti, et al., Potensi Rebusan Daun Mimba (Azadirachta indica) Pada Adhesi Sel Neutrofil.....
[15] Moyes DL and Naglik JR. 2011. Mucosal
Immunity and Candida albicans Infection.
Clinical and Developmental Immunology.
vol. 2011, article ID 346307, 9 pages
[16] Turgeon M. L. 2014. Imunology &
Serology in laboratory Medicine 5th ed. St
Louise, Missouri: Elsevier Inc.
[17] Playfair J. H. L and Chain B. M. 2009.
Immunology at a Glance 9th Edition.
Wiley-Blackwell. United Kingdom
[18] Baratawidjaja K. G. 2014. Imunologi
Dasar. Edisi 11. Jakarta: Balai Penerbit
Fakultas Kedokteran Universitas
Indonesia.
[19] Biasoli M. S., Tosello M. E., Luque A. G.,
Magaró H. M. 2010. Adherence,
colonization and dissemination of Candida
dubliniensis and other Candida species.
Medical Mycology. 48(2): 291–297
[20] Zhu W, Filler SG. 2010. Interactions of
Candida albicans with Epithelial Cells.
PMC Cell Microbiol. 12(3): 273–282
e-Jurnal Pustaka Kesehatan, vol. (no.), bulan, tahun
[21] Mutiawati V. K. 2016. Pemeriksaan
Mikrobiologi Pada Candida albicans.
Jurnal Kedokteran Syiah Kuala. 16(1): 53-
63
[22] Dewanti, Ratna. 2008. Efek Ekstrak Cair
Daun Mimba terhadap Fagositosis
Makrofag pada Tikus yang Diinokulasi
Candida albicans. Disertasi. Pascasarjana:
Universitas Airlangga, Surabaya.
[23] Shakti N, Upadhya Y, Suman Dhawan and
G. P. Talwar. 2013 Antifertility Effects of
Neem (Azadirachta indica) Oil in Male
Rats by Single Intra-Vas Administration:
An Alternate Approach to Vasectomy.
Journal of Andrology. 14(4): 275–281
[24] Dennehy K. M., Willment J. A., Williams D.
L., and Brown G. D. 2009. Reciprocal
Regulation of IL-23 and IL-12 Following
Co-activation of Dectin-1 and TLR
Signaling Pathways. European Journal of
Immunology. 39(5): 1379– 1386.
[25] Bergter E. B. 2016. Glycan Diversity in
Fungi, Bacteria and Sea Organism.
Frontiers in Cellular and Infection
Microbiology. 5(44): 4-5.