Universidad de Guadalajara

Centro universitario de ciencias exactas e ingenierías

Laboratorio de Biología Molecular y Genética

Sección D04 2018 B

Practica 2
“ELECTROFORESIS DE ADN”

Profesora: ​Mtra. Ariana Arreola Rodriguez

Equipo 6
● De Leon Rodriguez Erika Viridiana
● Jimenez Quezada Ana Isabel
● Munguia Huizar Francisco Javier
● Vargas Hernández Azucena

Fecha de realización: ​05-Noviembre-2018

Fecha de entrega:​ 12-Noviembre-2018
Objetivo
● Familiarizarse con métodos de separación de ácidos nucleicos mediante
electroforesis en geles de agarosa.
● Aislamiento y purificación de plásmidos bacterianos a partir de estirpes portadoras
mediante la utilización de un “Kit” comercial.
● Determinación de los tamaños moleculares mediante electroforesis en gel de
agarosa, haciendo una recta patrón con fragmentos de DNA de peso molecular
conocido.

Fundamento
El término electroforesis se usa para describir la migración de una partícula cargada bajo la
influencia de un campo eléctrico.
La electroforesis en gel es una técnica muy utilizada para separar moléculas o fragmentos
de moléculas de ácidos nucleicos. Los materiales más comunes para separar moléculas de
ácidos nucleicos son polímeros como la poliacrilamida o la agarosa. Estos geles se colocan
en la cubeta de electroforesis, sumergidos en un tampón de pH alrededor de 8. De esta
forma, las moléculas de DNA o RNA sometidas a electroforesis se desplazarán al polo
positivo ya que a pH superiores a 5 poseen carga negativa. Los geles se comportan como
un tamiz molecular y permiten separar moléculas cargadas en función de su tamaño y
forma. Así, moléculas de DNA de diferente tamaño, van a emigrar de forma distinta en un
gel de electroforesis. La distancia recorrida por cada fragmento de DNA va a ser
inversamente proporcional al logaritmo de su peso molecular. Es importante la utilización de
marcadores de tamaño conocido porque nos permitirán calcular los pesos moleculares de
las muestras de DNA problema.

Material

● Muestra de DNA extraído previamente

● Micropipetas
● Puntas para micropipeta
● Tubos tipo eppendorf
● Camara de electroforesis

Procedimiento
Conclusión
Se realizó la práctica de electroforesis en gel de agarosa para identificar
genéticamente una cepa bacteriana , se corrió la electroforesis a 90 V por 30
minutos y se procedió a realizar el revelado , sin embargo no se obtuvo un resultado
satisfactorio ya que no aparecieron bandas en la muestra, solo en el control,
además, al mismo tiempo se corrió la PCR a las mismas condiciones, y tampoco se
obtuvo resultado alguno para la PCR, esto puede deberse a que hizo falta más
tiempo para correr la electroforesis o que la pureza de DNA obtenida anteriormente
que fue de 1.16, fue insuficiente para obtener algún resultado en la electroforesis.
Otro factor que también pudo haber influido fue la cantidad de muestra que se tomó
para realizar la electroforesis ya que fue de sólo 1 mg . sin embargo a pesar de que
no se obtuvo un resultado favorable en la realización de la práctica, aprendimos el
fundamento y la técnica para llevar a cabo una electroforesis y una PCR lo cual es
de gran importancia para nuestra formación académica.

Anexos
Bibliografía
● Carmen Alicia Padilla Peña et. al. Electroforesis de ácidos nucleicos en geles
de agarosa. Aislamiento y caracterización electroforética de DNA plasmídico.
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Campus Universitario de
Rabanales, Edificio Severo Ochoa, 14071-Córdoba. Recuperado de :
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/17%20ELECTROFORESI
S%20ACS%20NUCLEICOS%20GELES%20AGAROSA.pd​f