Centro Territorial de Educação Profissional de Irecê - CETEP

Disciplina: Bioquímica/Amostras Biológicas Curso: Análise Clinicas

Parte 01

Preparo de soluções

1. Objetivos
• Efetuar cálculos necessários para preparar soluções.
• Preparar soluções aquosas a partir de um sólido e de um reagente líquido;

2. Introdução

Solução tem como definição: mistura homogênea de duas ou mais substâncias

(soluto e solvente) cuja proporção pode variar. As soluções são os reagentes mais
utilizados no laboratório químico, por isso a importância de se saber preparar uma solução
e fazer outras soluções a partir de uma da diluição de outra solução. As soluções podem
ser de vários tipos: líquido em líquido (l/l), sólidos em líquidos (s/l), sendo estas duas
bastante comuns, mas há ainda gás em líquido (g/l), gás em gás (g/g) e soluções de sólidos
em sólidos (s/s).
As soluções podem ser classificadas de acordo com as quantidades de soluto
dissolvido, podendo ser insaturadas, saturadas ou supersaturadas. Para defini-las, é
importante lembrar que a solubilidade de um soluto é a quantidade máxima deste que
pode dispersar-se numa determinada quantidade de solvente a uma dada temperatura.
Para preparar uma solução concentrada ou diluída é muito importante definir a
concentração da solução desejada. A concentração é a relação entre a quantidade (massa,
volume, quantidade de matéria) de soluto e da quantidade de solvente. São exemplos de
algumas unidades de concentrações mais usuais em química:

Concentração em grama por litro (g.L-1)

Concentração em mol por litro (mol.L-1)
Composição percentual (% m/m, % m/V, % V/V)

Neste experimento, essas unidades de concentrações serão aplicadas para

determinar a massa ou volume de ácido e base que serão utilizadas para preparar e diluir
soluções aquosas.

3. Materiais e equipamentos
Tabela 1: Materiais e equipamentos utilizados na Prática.
Materiais e equipamentos Volumes (mL) Quantidades
Balão volumétrico 100 2
Pipeta Graduada 25 1
Béquer 100 1
Pipeta Pasteur ou conta-gotas - 1
Bastão de vidro - 1
Balança - 1
Espátula - 1
Pipetador - 1
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4. Reagentes

Tabela 2: Reagentes utilizados na Pratica.

Reagentes Quantidades Pureza
Água * -
NaCl * P.A.
HCl * 37 % (m/m)
*preencher no relatório

5. Procedimento experimental

Parte I - Preparo de 100 mL de uma solução de NaCl 0,2 mol.L-1

Para preparar a solução de cloreto de sódio, consultar no rótulo ou na tabela

periódica qual a massa molar (em g.mol-1) do sal. De posse dessas informações:

1. Calcule a massa de NaCl necessária para preparar 100 mL de solução 0,2 mol.L-1.
2. Pese a quantidade calculada de NaCl em um béquer de 100 mL.
3. Acrescente um pequeno volume de água destilada ao béquer e transfira o sal dissolvido
para um balão volumétrico de 100 mL. Não deixe nenhum resíduo do sal no béquer.
4. Complete o volume da solução com água destilada até a marca da aferição do balão
(menisco). Tampe e agite o balão volumétrico para a completa homogeneização.
5. Transfira a solução pra um frasco etiquetando corretamente, pois esta solução pode ser
utilizada em outras praticas.

Parte III - Preparo de 100 mL de solução de HCl 1,0 mol.L-1

Para preparar uma solução de ácido clorídrico (HCl), inicialmente é importante

consultar o rótulo do frasco que contém a solução concentrada para se obter a densidade
e a percentagem (m/m) do ácido no reagente e massa molar do HCl (g.mol-1). A partir
desses dados:

1. Calcule a massa de HCl necessária para preparar 100 mL de solução 1,0 mol.L-1 e,
depois, utilizando a densidade da substância, determine o volume da solução concentrada
que contém essa massa. Consulte as informações no rótulo e tente fazer os cálculos
envolvidos para o preparo da solução. Procure o professor para mostrar os cálculos ou
para ver como são feitos, caso não tenha conseguido.
2. Com auxílio do pipetador e de uma pipeta, transfira o volume calculado de HCl para o
balão volumétrico de 100 mL, já contendo uma pequena quantidade de água destilada
(cerca de 20 mL).

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ATENÇÃO: Jamais adicione água a uma solução concentrada de ácido; sempre adicione
o ácido concentrado à água.

3. Complete o volume da solução com água destilada até a marca da aferição do balão.
Tampe e agite o balão volumétrico para a completa homogeneização da solução.
4. Transfira a solução pra um frasco etiquetando corretamente, pois esta solução pode ser
utilizada em outras praticas.

6. Avaliação da aula pratica

Entregar de relatório do grupo seguindo o modelo de confecção do relatório.

A fundamentação teórica e discussão dos resultados deve se desenvolver a partir

dos seguintes tópicos.

• definição soluto e solvente

• definição de solução saturada, insaturada e supersaturada
• Apresente todos os cálculos utilizados na prática

Parte 2

Titulação ácido-base

1. Objetivos
• Determinar a concentração de uma solução ácida através da titulação com uma
solução básica de concentração conhecida (solução padrão), e determinar a
concentração ácida de produtos comerciais.

2. Introdução

A técnica da titulometria permite a determinação da concentração de uma solução-

amostra através de sua reação com outra solução de concentração conhecida (padrão). A
solução-padrão é normalmente colocada em uma bureta e é denominada titulante; as
alíquotas da solução-amostra são colocadas em frascos erlenmeyer, juntamente com
substâncias indicadoras apropriadas para cada reação.
Os diversos métodos de análise titulométrica são classificados de acordo com a
natureza das reações químicas em que se baseiam. Dessa forma, existem as titulometrias
de neutralização, precipitação, oxirredução e de formação de complexos. No caso
específico da titulometria de neutralização, a reação envolvida resulta na formação de
água a partir do íon hidrônio ou hidroxônio (H3O+) da solução ácida e do íon hidróxido
(OH- ) da solução alcalina:

H3O+ + OH- → H2O

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A 25°C, uma solução ácida caracteriza-se por uma concentração de íons

hidroxônio maior que 1,0 x 10-7 mol.L-1, enquanto uma solução alcalina é caracterizada
por uma concentração de íons hidróxido superior a 1,0 x 10-7 mol.L-1. Numa solução
neutra a 25°C, por sua vez, as concentrações de íons hidroxônio e hidróxido se igualam a
1,0 x 10-7 mol.L-1.
Determinação do ponto de equivalência de uma titulação ácido-base. Uma
titulação deve ser interrompida quando a substância de interesse, contida na amostra, tiver
sido totalmente consumida pela reação com o padrão. De forma geral, qualquer
propriedade do sistema químico que varie bruscamente quando a reação se completa pode
servir para acusar o ponto de equivalência. Esta propriedade pode ser, por exemplo, o pH,
a condutância ou a absorbância da mistura de reação, bem como a diferença de potencial
ou a corrente elétrica gerada no decorrer da transformação química.
O método mais empregado na detecção do ponto final é baseado no uso dos
indicadores. Um indicador pode ser um dos reagentes ou dos produtos da reação, ou ainda
uma substância estranha ao sistema, adicionada propositalmente para modificar a
aparência do meio através de uma mudança de cor ou do aparecimento de uma turvação.
A titulometria de neutralização faz uso dos indicadores de pH, que são substâncias
orgânicas de caráter fracamente ácido ou básico que mudam de coloração dentro de uma
faixa relativamente estreita de pH. Na tabela 1 são listadas algumas destas substâncias,
com suas colorações e intervalos de "viragem" característicos.

➢ Cálculo da concentração da solução amostra

O objetivo imediato de uma titulação é determinar experimentalmente que volume

da solução-padrão reage completamente com uma certa massa ou um certo volume da
amostra. Depois de obtida esta informação, os cálculos da concentração do reagente de
interesse (na amostra) são uma aplicação simples da estequiometria de soluções. Na
reação que será testada nesse experimento, por exemplo, para uma reação com
estequimiometria 1:1, como no caso da reação do HCl com o NaOH.Ou seja, um mol de
titulante (NaOH) reage com um mol de titulado (HCl) e, então, diz-se que a solução foi
neutralizada. Assim, ao final da titulação:

Lembrando que concentração molar da solução (C) é igual à quantidade de matéria

(n), em mol, dividida pelo volume (V), em litros, tem-se que:

C = n/V ou n = C.V

Assim, a concentração molar (C) da solução que está sendo titulada pode ser
calculada:

Ctitulante . Vtitulante = Ctitulado . Vtitulado

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3. Materiais e equipamentos
Tabela 1: Materiais e equipamentos utilizados na Pratica.
Materiais e equipamentos Volume (mL) Quantidades
Bureta 50 1
Béquer 50 1
Erlenmeyer 100 2
Balão volumétrico 100 1
Pipeta Pasteur ou conta-gotas - 1
Pipeta volumétrica 10 1
Pipeta volumétrica 5 1
Pipetador - 1
Balança - 1

4. Reagentes
Tabela 2: Reagentes utilizados na Pratica.
Reagentes Quantidades Pureza
Água (H2O) * -
Hidróxido de sódio (NaOH) * P.A.
Ácido clorídrico (HCl) * *
Vinagre * Comercial
Solução alcoólica de fenolftaleína * 1% (m/V)
*preencher no relatório

5. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
Parte I - Dosagem de básica em uma solução ácida desconhecida

1. Com o auxílio de uma pipeta volumétrica de 5 mL, transferir o volume da solução ácida
para um frasco erlenmeyer de 250 mL.
2. Em seguida, acrescentar água destilada ao erlenmeyer até cerca de um terço da
capacidade do frasco (± 75 mL).
3. Adicionar à mistura duas ou três gotas da solução do indicador, solução alcoólica de
fenolftaleína 1% (m/V).
4. Carregar uma bureta de 50 mL com a solução padrão de base (NaOH). Gotejar
lentamente a solução básica sobre a solução ácida, até observar a "viragem" do indicador.
5. Anotar o volume de solução básica consumido na titulação, indicando a incerteza
associada ao uso da bureta. Repetir a operação pelo menos 3 vezes e calcular o volume
médio de titulante consumido na reação.
Observação: ponto de viragem da fenolftaleína é evidenciado pela primeira
coloração rósea permanente na mistura de reação

Parte II - Determinação do teor de ácido acético no vinagre

O vinagre comercial consiste essencialmente de uma solução diluída de ácido

acético é produzido pela oxidação bacteriana aeróbica. O vinagre é obtido pela
fermentação do vinho, da cidra, do malte ou do álcool diluído.O ácido acético é um ácido
fraco (Ka = 1,753 x 10-5), monoprótico, cuja concentração pode ser determinada

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facilmente por titulação com uma solução de base forte, com fenolftaleína como
indicador.

➢ Procedimento

1. Usando uma pipeta volumétrica, transferir uma amostra de 3,00 mL de vinagre para
um erlenmeyer de 250 mL.
2. Adicionar aproximadamente 75 mL de água destilada e 3 a 4 gotas de solução alcoólica
de fenolftaleína a 1% (m/V).
3. Titular a amostra com solução padrão de NaOH 0,100 mol.L-1 até atingir o ponto final
da titulação, evidenciado pela primeira coloração rósea permanente na mistura de reação.
Repetir duas vezes o mesmo procedimento, empregando outras alíquotas de vinagre, 5,00
mL e 10,00 mL.

6. Avaliação da aula pratica

Entregar de relatório do grupo seguindo o modelo de confecção do relatório.

A fundamentação teórica e discussão dos resultados deve se desenvolver a partir

dos seguintes tópicos.

Parte I

• Através do volume médio de titulante consumido na reação, calcular a concentração

em quantidade de matéria da solução-amostra em mol.L-1, expressando-a também em
gramas de soluto/L de solução.

Parte II

• Calcular a concentração de ácido acético na solução-amostra (vinagre), expressando-

a em (i) quantidade de matéria do soluto (ácido acético) por litro de solução; (ii) em
gramas de soluto por litro de solução e (iii) em percentagem (m/V).
• Comparar os resultados obtidos com o valor de referência fornecido pelo fabricante do
produto.
• Sugerir explicações para as possíveis discrepâncias.

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