UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL

DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS

PRIMER INFORME DE MICROBIOLOGIA SANITARIA I

ALUMNO: OREGON RAMÍREZ ENRIQUE 20170515F

DOCENTE: Ing. JORGE TELLO CEBREROS

Lima Perú
2018
 ÍNDICE

 RESUMEN ………………………………………………………………3

 INTRODUCCION ………………………………………………………………3

 OBJETIVOS ………………………………………………………………4

 MARCO TEORICO ………………………………………………....................4

 RESULTADOS ………………………………………………. ………14

 DISCUSION DE RESULTADOS …………………………………………..22

 CONCLUSIONES ………………………………………………….24

 RECOMENDACIONES ……………………………… 25

 CUESTIONARIO ……………………………………………… 26

 FUENTES DE INFORMACION ………………………………………….. …33

 ANEXOS ………………………………………………..33
1. RESUMEN
En este laboratorio realizaremos tres experimentos el crecimiento de
microorganismos en agar nutritivo, el crecimiento de bacterias en caldo
nutritivo y la formación de colonias de hongos en Agar saboraud de
diferentes ambientes de la facultad. Realizaremos las experiencias en los
medios de cultivo tomando muestras en tubos y placas tanto estériles como
no esteriles.
En el procedimiento A Se puede observar mayor N° de colonias en el CEIA
(36) que en el Laboratorio de Fisicoquímica (23), esto significa que hay
más contaminación en el CEIA. No logró verificar que en la placa N° 3 de
ambos grupo no se observaran bacterias, dado que la placa fue
esterilizada y no fueron expuestas al ambiente.
Se observó que predominan los microorganismos de elevación plana y
caracteres ópticos opacos.
En el procedimiento B Se puede observar que este experimento depende
de la esterilización de los materiales a usar en cada caso.
En el procedimiento C encontramos hongos y levaduras como aspergillus y
penicillium.

2. INTRODUCCIÓN

En este informe realizaremos 3 procedimientos:

Estudiaremos y analizaremos como los microorganismos en este caso:
bacterias y hongos se van desarrollando en los medios de cultivo ya
mencionados, con el objeto de estudiar sus características como
morfología y estructura también conoceremos las condiciones que permiten
su desarrollo comparando los resultados en cada lugar donde realizaremos
la exposición. Aprenderemos a trabajar con los materiales de microbiología
de forma sistemática y cuidadosa evitando en lo posible cometer errores
que nos lleven a resultados inconsistentes.
El aire contiene en suspensión diferentes tipos de microorganismos,
especialmente bacterias y hongos. La presencia de uno u otro tipo
depende del origen, de la dirección e intensidad de las corrientes de aire y
de la supervivencia del microorganismo.
Las bacterias son organismos microscópicos, unicelulares y procariotas
(carentes de núcleo), a veces provistos de órganos locomotores llamados
cilios y flagelos.
Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de
sus características tanto a las unas como a los otros. A las plantas, por ser
organismos sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y, mientras
están vivos, no cesan de crecer.
3
3. OBJETIVOS

Objetivo general

Exponer a diferentes ambientes muestras conteniendo agar nutritivo, agar

sabouraud y caldo nutritivo para saber que microorganismos están
presentes en cada ambiente.

Objetivos específicos

 En el procedimiento A conoceremos el crecimiento de bacterias en

agar nutritivo de diferentes ambientes
 En el procedimiento B conoceremos el crecimiento de bacterias en
caldo nutritivo
 En el procedimiento C observaremos colonias de hongos en agar
sabouraud de diferentes ambientes.

4. MARCO TEÓRICO

Microbiología del Aire

Historia de la microbiología del aire

Fig 1
La existencia de una
multitud de
corpúsculos en el
aire fue observada
desde
la antigüedad.
Lucretius (55 a.C.)
observó las
partículas de polvo
brillando
en un rayo de sol en
una habitación
oscura y concluyó
que su movimiento
se
debía al bombardeo de innumerables e invisibles átomos en el aire, aunque
fue necesario esperar al descubrimiento del microscopio para ver que en el
aire había microorganismos vivos. Las esporas de los hongos fueron vistas
por un botánico napolitano, Valerius Cordus, en el siglo XVI, pero fue
Micheli (1679-1737) quien primero las dibujó observando las esporas de los

4
mohos que se transmitían por el aire (Miquel y Cambert, 1901).
Leeuwenhoek (1722) observa y describe por primera vez las bacterias en
distintos ambientes y supone que «estos animálculos pueden ser
transportados por el viento mediante el polvo que flota en el aire».

Tipos de micro-organismos

El aire contiene en suspensión diferentes tipos de microorganismos,

especialmente bacterias y hongos. La presencia de uno u otro tipo depende
del origen, de la dirección e intensidad de las corrientes de aire y de la
supervivencia del microorganismo.
Algunos microorganismos se encuentran en forma de células vegetativas,
pero lo más frecuente son las formas esporuladas, ya que las esporas son
metabólicamente menos activas y sobreviven mejor en la atmósfera porque
soportan la desecación. Las producen hongos, algas, líquenes, algunos
protozoos y algunas bacterias. En el aire se aíslan frecuentemente
bacterias esporuladas de los géneros Bacillus, Clostridium y Actinomicetos

Microbiología Del Aire

La atmósfera no tiene una microbiota autóctona pero es un medio para la

dispersión de muchos tipos de microorganismos (esporas, bacterias, virus y
hongos), procedentes de otros ambientes .Algunos han creado
adaptaciones especializadas que favorecen su supervivencia y
permanencia. Los microorganismos dispersados por el aire tiene una gran
importancia biológica y económica. Porque producen enfermedades en
plantas, animales y humanos, causan alteración de alimentos y materiales
orgánicos y contribuyen al deterioro y corrosión de monumentos y metales.
La microbiología del aire comienza en el siglo XIX, con Pasteur y Miquel
que diseñaron métodos para estudia

Medios de cultivo

Los medio de cultivo son las soluciones nutritivas que se usan en el

laboratorio para el cultivo de los microorganismos. En microbiología, se usan
dos tipos generales de medios de cultivo: los químicamente definidos y los
complejos (o no definidos). Los medios definidos se preparan añadiendo
cantidades precisas de compuestos orgánicos o inorgánicos purificados a un
volumen en agua destilada. Por tanto, se sabe la composición química
exacta de un medio definido. Sin embargo, en muchos casos la composición
exacta de un medio no es importante. Los medios complejos pueden ser
entonces adecuados o incluso por varias razones, dado que los medios
complejos emplean hidrolizables de caseína, carne, levaduras u otras
sustancias muy nutritivas. Tales hidrolizados pueden ser pesados con

5
facilidad y disueltos en agua destilada para preparar un medio. No obstante
una limitación importante al usar un medio complejo es que no se puede
controlar su composición nutritiva exacta.

Medios de cultivos utilizados:

Agar nutritivo:

El agar Nutritivo garantiza el crecimiento de todos los microorganismos de

importancia clínica tanto grampositivos como gramnegativos, hongos y
levaduras, además de proporcionar una herramienta para el mantenimiento
y confirmación de aislamientos primarios El agar Nutritivo se prepara a
partir del medio de cultivo deshidratado, materia prima producida por la
casa BBL y tiene la siguiente composición en g/l
Extracto de carne...............................................................................3.0 g
Peptona........ .....................................................................................5.0 g
Agar............................................................................................... 15.0 g

Agar Nutritivo (Concentración: 20 g en 1 litro)

Se utilizó 2.76 g de agar en 120 ml de agua.

Caldo Nutritivo:
Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de
microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. Está descripto
en muchos procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y otros
materiales de importancia sanitaria. Contiene pluripeptona (una mezcla de
partes iguales de peptona de carne y de caseína) y extracto de carne que
constituyen la fuente de carbono y nitrógeno necesarias para el adecuado
desarrollo bacteriano. Puede ser utilizado además, como
preenriquecimiento en la búsqueda de Salmonella spp. a partir de
alimentos, ya que permite recuperar células dañadas, diluir metabolitos
tóxicos y sustancias inhibitorias. Composición ( gr /litro)

Pluripeptona...............................................................................................5.0
Extracto de
carne..................................................................................................... 3.0.
pH final: 6.9 ± 0.2

Caldo Nutritivo (Concentración: 8 g en 1 litro)

Se utilizó 1.08 gr de caldo en 135 ml de agua.

6
Agar Sabouraud :

Medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de hongos

patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo de levaduras.
Recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente
los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo). En el medio de cultivo,
la peptona, la tripteína y la glucosa son los nutrientes para el desarrollo de
microorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de
cloranfenicol y el pH ácido, inhiben el desarrollo bacteriano y favorecen el
crecimiento de hongos y levaduras. El agar es el agente solidificante.
Puede ser suplementado con otros agentes selectivos de crecimiento.
Glucosado Composición (en gramos por litro)
Peptona...................................................................................5.0.
Tripteína..................................................................................5.0.
Glucosa.................................................................................40.0.
Cloranfenicol......................................................... .............0.05.
Agar.................................................................................... 15.0.
pH final: 5.6 ± 0

Agar Sabouraud (Concentración: 65 g en 1 litro)

Se utilizó 4.875 g de agar en 75 ml de agua.

Identificación de Bacterias y hongos :

Una colonia es una agrupación de bacterias formada a partir de la
reproducción de una Unidad Formadora de Colonia (UFC) sobre un medio
sólido; aunque varía de tamaño generalmente es visible a simple vista. Una
UFC puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de
microorganismos de una misma especie como en el caso de bacterias que
tienen tendencia a permanecer unidas como los estafilococos o los
estreptococos. Las colonias bacterianas tienen una medida, forma, textura
y en algunos casos color característicos, que aunque puede variar de
acuerdo al medio en que se encuentren, es constante bajo condiciones
controladas y depende de la especie bacteriana que la forme.

7
MORFOLOGÍA DE COLONIAS EN LA
SUPERFICIE DE UN MEDIO SÓLIDO
FORMA:
Fig 2

MARGEN O BORDE:
Fig 3

ELEVACIÓN DE LA COLONIA:
Fig 4

8
SUPERFICIE
Lisa
Rugosa
Plegada

COLOR: Se usan términos comunes para definirlo y se especifica si el

pigmento producido difusible o no.

CARACTERÍSTICAS ÓPTICAS
LUZ TRANSMITIDA ( observar a través de la colonia)
Opaca: no permite el paso de luz
Traslúcida: Deja pasar la luz sin permitir la completa visibilidad de los
objetos observados a través de la colonia.
Transparente: Deja pasar la luz permitiendo ver claramente los objetos
observados a través de la colonia.

LUZ REFLEJADA ( observar la superficie de la colonia)

Opaca
Brillante

CULTIVO EN CALDO Al igual que en los medios sólidos, en los medios

líquidos las características de la bacteria sembrada se reflejan en las
características que presenta el caldo inoculado como son: Turbidez:
Opacidad más o menos densa, signo de crecimiento.
Película: Crecimiento casi continuo sobre el líquido
Sedimento: Depósito de células en el fondo del tubo que se re suspende al
agitar.
Fig 5

9
 BACTERIAS
Las bacterias son organismos microscópicos, unicelulares y procariotas
(carentes de núcleo), a veces provistos de órganos locomotores llamados
cilios y flagelos.

Poseen una pared celular (capa de polisacáridos) la cual le proporciona

rigidez y protección.

Se reproducen asexualmente por medio de una forma de división celular

denominada fisión binaria, que produce copias genéticamente idénticas a la
célula original. En condiciones ideales, algunas bacterias se duplican en
cuestión de minutos por lo que podrían en principio, dar origen a una
población de millones de bacterias en poco tiempo.

Son organismos cosmopolitas y con una gran diversidad de formas,

funcionan como reguladoras en los ambientes, produciendo oxígeno y fijando
nitrógeno y carbono, degradando materia orgánica en descomposición y
controlando las poblaciones de organismos ya que producen enfermedades.

Fig 6

10
 Características Generales.

 Constan de material genético, ADN circular, llamado nucleoide,

inmerso en el citoplasma.
 Plásmidos.
 Ribosomas.
 Membrana plasmática.
 Pared celular.
 Cápsula (glucocalix).
 Pili
 Apéndices locomotores (cilios y flagelos).

Nutrición y Crecimiento bacterianos.

Las bacterias necesitan de un aporte energético para desarollarse.

· Se distinguen distintos tipos nutricionales según la fuente de energía

utilizada: las bacterias que utilizan la luz son fotótrofas y las que utilizan los
procesos de oxirreducción son quimiótrofas. Las bacterias pueden utilizar un
sustrato mineral (litótrofas) u orgánico (organótrofas). Las bacterias
patógenas que viven a expensas de la materia orgánica son
quimioorganótrofas.

· La energía en un sustrato orgánico es liberada en la oxidación del mismo

mediante sucesivas deshidrogenaciones. El aceptor final del hidrógeno
puede ser el oxígeno: se trata entonces de una respiración. Cuando el
aceptor de hidrógeno es una sustancia orgánica (fermentación) o una
sustancia inorgánica, estamos frente a una anaerobiosis.

· Además de los elementos indispensables para la síntesis de sus

constituyentes y de una fuente de energía, ciertas bacterias precisan de unas
sustancias específicas: los factores de crecimiento. Son éstos unos
elementos indispensables para el crecimiento de un organismo incapaz de
llevar a cabo su síntesis. Las bacterias que precisan de factores de
crecimiento se llaman "autótrofas".

· Se puede medir el crecimiento de las bacterias siguiendo la evolución a lo

largo del tiempo del número de bacterias por unidad de volumen. Se utilizan
métodos directos como pueden ser el contaje de gérmenes mediante el
microscopio o el contaje de colonias presentes después de un cultivo de una
dilución de una muestra dada en un intervalo de tiempo determinado.

· Igualmente se utilizan métodos indirectos (densidad óptica más que técnicas

bioquímicas).

11
· Existen seis fases en las curvas de crecimiento. Las más importantes son la
fase de latencia (que depende del estado fisiológico de los gérmenes
estudiados) y la fase exponencial, en la que la tasa de crecimiento es
máxima.

HONGOS
Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de
sus características tanto a las unas como a los otros. A las plantas, por ser
organismos sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y, mientras
están vivos, no cesan de crecer.

A los animales, pues, aunque las células de los hongos poseen pared como
las de las plantas, las paredes celulares fúngicas son ricas en quitina, la
misma sustancia que hace duro el esqueleto externo de los insectos.

En realidad, los organismos que conocemos como hongos tienen diferentes

orígenes en el árbol de la vida, razón por la cual se distribuyen en tres
distintos reinos. La mayoría, los más familiares y reconocibles, conforman
el reino de los hongos verdaderos (Fungi o Eumycota). Otros se ubican en
el mismo reino de las amebas, el llamado Protozoa, como es el caso de los
hongos mucilaginosos; y otros más, entre los que se cuentan ciertos mohos
acuáticos que parasitan peces, comparten un tercer reino, el denominado
Chromista, con las diatomeas, esas particulares algas microscópicas de
curiosa simetría.

Fig 7

Reproducción de los hongos.

Los hongos se reproducen sobre todo por medio de esporas, las cuales se
dispersan en un estado latente, que se interrumpe sólo cuando se hallan

12
condiciones favorables para su germinación. Cuando estas condiciones se
dan, la espora germina, surgiendo de ella una primera hifa, por cuya
extensión y ramificación se va constituyendo un micelio. La velocidad de
crecimiento de las hifas de un hongo es verdaderamente espectacular: en un
hongo tropical llega hasta los 5 mm por minuto. Se puede decir, sin exagerar,
que algunos hongos se pueden ver crecer bajo los propios ojos.
Las esporas de los hongos se producen en esporangios, ya sea
asexualmente o como resultado de un proceso de reproducción sexual. En
este último caso la producción de esporas es precedida por la meiosis de las
células, de la cual se originan las esporas mismas. Las esporas producidas
a continuación de la meiosis se denominan meiosporas.
Como la misma especie del hongo es capaz de reproducirse tanto asexual
como sexualmente, las meiosporas tienen una capacidad de resistencia que
les permite sobrevivir en las condiciones más adversas, mientras que las
esporas producidas asexualmente cumplen sobre todo con el objetivo de
propagar el hongo con la máxima rapidez y con la mayor extensión posible.
El micelio vegetativo de los hongos, o sea el que no cumple con las funciones
reproductivas, tiene un aspecto muy simple, porque no es más que un
conjunto de hifas dispuestas sin orden. La fantasía creativa de los hongos se
manifiesta sólo en la construcción de cuerpos fructíferos, los cuales, como
indica el nombre, sirven para portar los esporangios que producen las
esporas.
TIPOS DE REPRODUCCION ASEXUAL
1) Artrosora - ejm: Geotricum
2) Blastoospora – ejm: Levadura
3) clamidiospora – ejm: Candida Albicans
4) conidiospora – ejm: Penicilum/Aspergilus
5) Esporangiospora – ejm: Rhizopus
TIPOS DE REPRODUCCION SEXUAL
1) Ascomicetes – ejm: Morchella/Neurospora
2) Basidiomicetes – ejm: Amanita
3) Cigomicetes – ejm: Mucos/Rhizopus

13
 5. RESULTADOS
Tabla 1
Grupo N°1 Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril
Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril
Cantidad de crecimiento Ninguno Moderado Abundante
Distribución de Trasparente Turbidez Película
crecimiento
olor Imperceptible Imperceptible Pútrido

Fig 8

Tabla 2

Grupo N° 1
ambiente Baño de varones 2° piso
N° de hongo 4
Tipo de hongo - penicillium (3)
- aspergillus (4)
- candida spp (1)
- levadura (2)
Algunas características - penicillium: forma circular oscura con
bordes bancos.
- aspergillus: de un color verde oscuro.
- candida spp: de un color blanco circular.
- levadura: de color rojizo y blanco.

Día de exposición 28/08/18

Tiempo de exposición / días de 15 minutos / 6 días

reproducción

Hora / temperatura 1:49 pm – 2:04 pm / 18°C

Condiciones Poca luz solar

14
Grupo 2: Agar nutritivo Tabla 3
Placa
Placa N°1 Placa N°2 Placa N°4
Grupo N°3
Estéril Estéril NO Estéril
Estéril
Ambiente: Sector C Sector D
Sector A Sector B
2 biblioteca
Pelo Huella
I. Estéril I. NO NO abrir NO abrir
primer piso estéril
N° de
23 20 13 1 3 4 42
Colonias
X1=2mm
X2=3mm X1=0.5mm X22=1mm
X1=3mm
X3=3mm X2=0.5mm X23=1mm
X2=1mm
X4=1mm X3=0.5mm X24=1mm
X3=0.5mm
X5=2mm X4=1mm X25=1mm
X4=4mm X1=3mm
X6=3mm X5=1mm X26=1mm
X5=Irregu. X2=2.5mm
X7=4mm X6=1mm X27=1mm
X6=4mm X3=Irregular
X8=4mm X7=1mm X28=1mm
X7=2mm X4=2mm
X9=2mm X8=1mm X29=1mm
X8=1mm X5=1mm
X10=3mm X1=3mm X9=1mm X30=1mm
X9=1mm X6=2mm X1=3mm
X11=5mm X2=1mm X10=1mm X31=1mm
X10=1mm X7=1mm X2=4mm
Tamaño X12=1mm X1=3mm X3=1mm X11=1mm X32=1.5mm
X11=1mm X8=4mm X3=4mm
X13=7mm X4=2mm X12=1mm X33=1.5mm
X12=1mm X9=1mm
X14=2mm X13=1mm X34=1.5mm
X13=1mm X10=1mm
X15=2mm X14=1mm X35=1.5mm
X14=1mm X11=1mm
X16=8mm X15=1mm X36=2mm
X15=1mm X12=1mm
X17=3mm X16=1mm X37=2mm
X16=1mm X13=2.5mm
X18=2mm X17=1mm X38=2mm
X17=1mm
X19=1mm X18=1mm X39=2mm
X18=1mm
X20=4mm X19=1mm X40=3mm
X19=1mm
X21=2mm X20=1mm X41=3mm
X22=3mm X21=1mm X42=4mm
X23=4mm

Lisos: x1, x3,

x11, x20, x23, Lisos: x1, x2,
Liso: x1, x8 Lisos: x1, x2, x3, x4, x9, x10, x11, x12,
x22, x21, x19 x3, x8, x9, x10,
Liso: x2, x13, x14, x15, x16, x17, x18, x19, x20, x30,
lobular:x7, x11, x12, x13,
Margen o Ondulantes: x3 Lisos: x1, x31, x32, x33, x34, x35, x36, x37, x38, x39,
x2, x5, x6, x10, x14, x15, x16, Liso:x1
borde x2, x4, x5, x6, Ondulante x2, x3, x4 x40, x41, x42.
x12, x15, x16 x17, x18, x19, x20
x7, x9, x10, s:x1 Ondulantes: x5, x6, x7, x8, x21, x22, x23,
ondulante:x8 Ondulantes:
x11, x12, x3 x24, x25, x26, x27, x28, x29.
, x13, x4, x9, x4, x6, x7
x14, x17, x18
Plano: x7, x1,
x2, x3, x4, x5, Plano: x1, x2,
Plano: x1, x2, x3, x4, x9, x10, x11, x12,
x6, x9, x10, x3, x4, x8 Plano: x1, x2,
Plano: x3 x13, x14, x15, x16, x17, x18, x19, x20, x5, x6,
x14, x15, x17, Cóncavo: x6, x4, x5, x6, x7,
Plano: Cóncavo x7, x8, x21, x22, x23, x24, x25, x30, x31,
Elevación x18, x19, x22 x7, x9, x10, x11, x8, x9, x10, Plano:x1
x1, x2, x3 : x1, x2, x32, x33, x34, x35, x36, x37, x38, x39, x40,
Cóncavo: x8, x12, x13, x14, x11, x12, x13
x4 x41, x42.
x23, x20, x8, x15, x16, x17,
Cóncavo: x26, x27, x28, x29.
x13, x12, x16, x18, x19, x20
x21
Crema: x1,
Crema: x1, x5,
x3, x4, x5, x10,
x6, x7, x11, x12,
x14, x15, x17, Crema: x1, x2, x3, x4, x9, x10, x11, x12,
x13, x14 x15. x16,
x18, x19, x20, x13, x14, x15, x16, x17, x18, x19, x20, x5, x6,
x17, x18, x19, Todas Todas
Pigmentaci x21, x22, x23. Todas son Crema: x7, x8, x21, x22, x23, x24, x25, x28, x29,
x20. son son
ón Anaranjado: cremas x1 x30, x31, x32, x33, x34, x35, x36, x37, x38,
Anaranjado: cremas crema
x6, x7, x8, x9. x39, x40, x41, x42.
x2, x3, x4.
Amarillo: x2, Amarillo: x26, x27.
Amarillo: x8,
x11, x12, x13,
x9, x10.
x16.
Todas Todas Todas
Todas son Todas son Todas son
C. Óptico son son son Todas son opacas
opacas opacas opacas
opacas opacas opacas

Nota: Los resultados se vieron 7 días después de la preparación.

15
 Tabla 4
Ambiente Biblioteca
Características La placa se colocó al fondo, con
pocas personas a su alrededor.

Día de exposición 28 de Agosto 2018

Hora 13:30-13:45 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos
Tiempo del crecimiento micro bacteriano 7 días
Tipo de Agar Agar nutritivo
Cantidad de personas 1 (el encargado de la muestra)
Temperatura 19°C (Temperatura de ambiente)

Grupo 2: Agar Sabouraud

Tabla 5

Grupo 2

Ambiente Laboratorio de Fisicoquímica

Tiempo de exposición: 15 minutos

Fecha de exposición 28/08/18
Numero de hondos observados 8 hongos
Tipos de hongos Penicillium spp (3), levaduras (5)

 Levaduras: Son de forma circular, de

color blancos y de tamaño pequeño a
Características mediano.
 Penicillium spp: Forma circular, de
contextura algodonosa, con bordes
blancos y centro gris verdoso

Tabla 6
Ambiente Laboratorio de Fisicoquímica
Características La placa se colocó al medio. El
lugar estaba ventilado y sin polvo.
Día de exposición 28 de agosto 2018
Hora 13:30-13:45 pm
Tiempo de exposición/Días expuestos 15minutos

16
 Tiempo del crecimiento micro bacteriano 7 días
Tipo de Agar Agar Sabouraud
Cantidad de personas 1 (el encargado de la muestra)
Temperatura 21°C (Temperatura de ambiente)

Procedimiento B

 Grupo N° 3

Tabla 7

N° 1 N° 2 N° 3

Grupo N°3 Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril

Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril

Cantidad de Moderado Escaso Abundante

crecimiento

Distribución de Sedimento Turbidez Película

crecimiento

Olor Pútrido Imperceptible Imperceptible

Procedimiento C

 Grupo N° 3
Tabla 8

Ambiente Aula vacía 2 piso

Número de hongos 2

Tipos de hongos Aspergillus (1), Candida (1)

17
 Características Aspergillus: Tiene forma concéntrica,
núcleo verde oscuro.

Cándida: Colonia pequeña de color

blanco sin forma definida.

Factores de crecimiento del procedimiento C:

Tabla 9

Ambiente Aula vacía 2 piso (161)

Día de exposición 28/08/18

Hora 1:50 pm – 2:05 pm

Tiempo de exposición/días de reproducción 15 minutos / 6 dias

Cantidad de personas 0 personas

Características del lugar donde se dejó la Puerta a medio abrir, había 1 ventana abierta.
muestra.

18
 Placa N1º Placa N°2 Placa Placa
N°3 N°4 No
Grupo Estéril Estéril
estéril estéril
Laboratorio de Sector A: Sector B: Sector Sector
Microbiología Pelo Huella C: D:
4
Inocu- Inocu-
lador lador
estéril no
estéril

Número 35 3 5 1 1 3 -
de
colonias
Tamaño X1=6.5 X19=6 X1=3 X1=4.5 X1=6 X1=6.5 X1=3 -
(mm) X2=9 X20=3 X2=3.5 X2=2.5 X2=3.5
X3 =6 X21=13 X3=3 X3=2 X3=2.5
X4=1 X22=1.4 X4=3
X5=8 X23=1.2 X5=2.7
X6=3 X24=1.9
X7=2 X25=4
X8=4.5 X26=1
X9=2.3 X27=2,2
X10=5 X28=25
X11=2 X29=2
X12=3 X30=4.2
X13=1.8 X31=2
X14=3 X32=7
X15=1 X33=1.1
X16=2.3 X34=3
X17=2.9 X35=1
X18=4.5
Margen Liso X1=liso X1=liso X1=liso X1=liso X1=liso -
x1,x3,x4,x6,x10, X2=liso X2=liso X2=liso
x13,x14,x15,x17,
X3=liso X3=liso X3=liso
x20,x23,x24, x25,

19
 x29, x30, x31, X4=liso
x33, x34
X5=liso
Lobular
x2, x8, x19, x21,
x27, x32
Ondular
x5, x7, x9, x11,
x12, x16, x18,
x22, x26, x28,
x35
Elevación Todas son Todas son Todas son X1=plan X1=plan Todas -
lanas planas planas o o son
planas

Pigmenta- Crema X1=Amarillo X1=Amarillo X1=am X1=ama X1=Anar -

ción arillo rillo anjado
x1, x8, x9, x16, X2=Crema X2=Amarillo
x18, x19, x22, X2=Anar
X3=Crema X3=Amarillo
x24, x26, x28, anjado
x32, x33, x35 X4=
X3=Cre
Anaranjado
Amarillo ma
X5=Crema
x2, x6, x10, x11,
x12, x14, x17,
x20, x25, x29,
x31, x34
Anaranjado
x5, x13, x21, x27,
x30
Blanco
x3, x4, x7, x15,
x23
Caracterís Todas son Todas son Todas son Es Es Son -
-ticas opacas opacas opacas opaca opaca opacas
excepto x22 y
x28

20
AGAR SABOURAUD GRUPO 4
Tabla 11

Observación: estuvo expuesto al Ambiente: Laboratorio de Microbiología

Ambiente durante: 15min

Tiempo de cultivo: 168 horas

Hora de exposición : 2:04 pm--2:19pm
Temperatura 20°C
Fecha de exposición 27/08/18
Numero de hondos observados 14
Tipos de hongos penicillium spp(5), penicillium cándida
(2) levadura(7)

Características 5 hongos de color negro

2 hongos de color blanco
6 levaduras de color crema
1 levadura de color naranja

Fig 9

21
 Grupo N°5 Pipeta estéril Pipeta estéril Pipeta no estéril
Tubo estéril Tubo no estéril Tubo estéril
Cantidad de crecimiento escaso abundante moderado
Distribución de sedimento película Turbidez fina
crecimiento uniforme
olor aromático pútrido Ligeramente pútrido
Tabla 12

Grupo N° 5
ambiente Sala de tesis
N° de hongo 1
Tipo de hongo Aspergillus-niger
Algunas caracteristicas Forma: filamentosa
Superficie: umbilicada
Levaduras: verde opaco
Colonias blancas con micelio aéreo de
color negro
Tabla 13

6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

PROCEDIMIENTO A:

a) Grupo2: (Laboratorio de Fisicoquimica)

 En la placa N° 1 la cual fue expuesta en el laboratorio de fisicoquímica se

observa la presencia de 23 colonias cuyos tamaños varían de 1 mm a 8 mm, con
un tipo de margen liso, lobular y ondulante, de elevación plana y cóncava ,
cromogénesis crema y anaranjada con caracteres ópticos opaco.
 Para la placa N°2 la cual se dividió en 4 sectores A, B, C y D se observó lo
siguiente, para el sector A (cabello), se encontró la formación de 20 colonias, en
el sector B (Huella dactilar) se encontraron 13 colonias, en el sector C
(inoculador estéril), se observó 1 colonia, y para el sector D (inoculador no
estéril), se encontraron 3 colonias.
 Para la placa N°3 (placa estéril) se observaron 4 colonias no verificándose que
no existan microorganismos por lo cual el procedimiento debe repetirse.
 Para la placa N°4 se observó la presencia 42 colonias, con las siguientes
características morfológicas predominantes: En tamaño predominan las de
1mm, de margen liso, elevación plana, cromogénesis crema y caracteres ópticos
opacos.

22
b) Grupo4:(Centro de Estudiantes)
 En la placa N° 1 expuesta en el Centro de Estudiantes se observó la formación
de 35 colonias de microorganismos cuyos tamaños varían de 1mm a 6.5mm,
con margen liso predominante, de elevación plana, de cromogénesis crema,
naranja y blanco, y de carácter óptico opaco.
 En la placa N°2, para el sector A (cabello) se observaron la formación de 3
colonias, para el sector B (huella) se observaron 5 colonias, para el sector C
(inoculador estéril), se observó la presencia de 1 colonia, en el sector D
(Inoculador no estéril), se observaron 1 colonia.
 Para la placa N°3 se observaron 3 colonias
 Para la placa N°4 no se tomaron datos

PROCEDIMIENTO B:

a) Grupo 1:

 En el tubo N°1 no se observó ningún crecimiento de bacterias verificándose

el experimento ya que se tenía una pipeta estéril y un tubo no estéril con un
olor casi imperceptible
 En el tubo N° 2 se notó una moderada cantidad de bacterias, con distribución
de crecimiento túrbida y imperceptible, esto se debió por el uso del tubo no
estéril.
 En el tubo N° 3 se notó una abundante cantidad de bacterias con distribución
de crecimiento película, con un olor pútrido esto debido al uso de la pipeta
no estéril.

b) Grupo 3:

 En el tubo N°1 se observó una moderada formación de bacterias con una

distribución de crecimiento en película y olor pútrido no se verifica el
experimento ya que se utilizó un tubo estéril y una pipeta estéril se debe
repetir la experiencia
 En el tubo N°2 se notó escasa presencia de bacterias, con distribución de
crecimiento turbio con olor imperceptible , dado a que se utilizó un tubo no
esterilizado
 En el tubo N°3 se observó una abundante presencia de bacterias con olor
imperceptible y una distribución de crecimiento en película, debido al uso de
la pipeta no estéril.

c) Grupo5

 En el tubo N°1 se observó una escasa formación de bacterias con una

distribución de película y olor aromático.

23
  En el tubo N°2 se notó una abundante presencia de bacterias, con
distribución de crecimiento en película con olor pútrido , dado a que se
utilizó un tubo no esterilizado
 En el tubo N°3 se notó un moderado crecimiento de bacterias con una
distribución de crecimiento turbia uniforme y olor ligeramente pútrido esto
debido a que se utilizó una pipeta no esterilizada.

PROCEDIMIENTO C:

a) Grupo 1: Baño
Se observaron 10 hongos : 3 penicillium, 4 aspergillus, 1 candida y 2
levaduras.
b) Grupo 2: Biblioteca
Se observaron 8 hongos: 3 penicillium spp y 5 levaduras.
c) Grupo 3: Aula Vacía
Se observaron 2 hongos: 1 aspergillus y 1 candida.
d) Grupo 4: Laboratorio de Microbiología
Se observaron 14 hongos: 5 penicillium spp, 2 candidas y 7 levaduras.
e) Grupo 5: Sala de tesis
Se observó 1 hongo el aspergillus.

7. CONCLUSIONES
Procedimiento A:
“Colonias de bacterias desarrolladas en placas en medio agar nutritivo”:

 Se puede observar mayor N° de colonias en el CEIA (36) que en el

Laboratorio de Fisicoquímica (23), esto significa que hay más
contaminación en el CEIA , y esto se debe a la cantidad de personas
dentro del Centro de Estudiantes, como también por factores como la
limpieza, la ventilación, el orden la hora y el día.
 No logró verificar que en la placa N° 3 de ambos grupo no se observaran
bacterias, dado que la placa fue esterilizada y no fueron expuestas al
ambiente, hubieron algunos fallos que se tuvieron al momento de realizar
el experimento como por ejemplo el contacto con el medio ambiente.
 Se observó que predominan los microorganismos de elevación plana y
caracteres ópticos opacos.
.
Procedimiento B:
“Crecimiento de bacterias en caldo nutritivo”:

 Observamos que este experimento depende de la esterilización de los

materiales a usar en cada caso.

24
 Procedimiento C:
“Cultivos de hongos en placas con agar sabouraud”:

Cuando se colocó el agar sabouraud en todos los ambientes se lograron

encontraron levaduras y hongos.

Los Hongos encontrados son:

o Aspergillus (Baño de hombres, aula vacía , sala de tesis )

o Penicillium (Baño, biblioteca, Laboratorio de Microbiología )
o Candida (Aula vacia)
o Levaduras(Baño, biblioteca, Laboratorio de Microbiología)

8. RECOMENDACIONES

 No agitar los tubos de ensayo al momento de observar los resultados, pues ya

no se distingue adecuadamente la distribución del crecimiento (anillo o
sedimento).
 No contaminar los materiales ya esterilizados como las pipetas, placas ,tubos
de ensayo,etc
 Procurar mantener selladas las placas Petri, para evitar el ingreso de
microorganismos.
 Hacer un control riguroso de los tiempos requeridos en los experimento para
evitar complicaciones posteriores.
 Realizar bien la medición del peso de los medios de cultivo, así como del
volumen de agua destilada, para llevar a cabo los experimentos de manera
exitosa
 Al momento de hacer el trasvase del agar nutritivo hacia los recipientes de
prueba demorar el menor tiempo posible, ya que si la temperatura de este baja
de 45° tiende a solidificarse.
 Se debe asegurar la correcta ubicación de las placas Petri en el ambiente a
tomar las muestras, a fin de obtener resultados óptimos en condiciones
identificadas previamente.
 Se debe tomar en cuenta la vida media de los microorganismos, los cuales
viven aproximadamente 48 horas luego de ser cultivados, pasado ese tiempo
su identificación y su estudio no daría resultados óptimos.

25
9. CUESTIONARIO
1. ¿Qué factores influyen en la flora microbiana del aire?
En el aire no hay suficientes nutrientes para el desarrollo bacteriano, por ello, no
es muy buen medio para los microorganismos. Además, la inadecuada
disposición de la basura y las excretas expuestas al medio aire son algunos de
los emisores más importantes de microorganismos, quistes, esporas, polen, etc,
que pueden estar adheridos al polvo.
Los factores son:
 Humedad Relativa
Una humedad relativa muy elevada favorece el crecimiento de los
microorganismos, en especial aquellos que se encuentran en la
superficie. Por ejemplo la deshidratación/secado es utilizada desde
hace tiempo como técnica de conservación de alimentos. Sin embargo
su almacenaje debe efectuarse en condiciones de baja humedad
relativa, en caso contrario, la humedad (agua) presente en la atmosfera
tarde o temprano acabara por aumentar la cantidad de agua del
alimento, aumentando asi el riesgo de proliferación microbiana.
 Temperatura
La temperatura es uno de los factores más relevantes en el crecimiento
de los microorganismos. Si los relacionamos con la seguridad
alimentaria termina siendo el más importante de todos. Con respecto a
las toxinfecciones de origen alimentario, el utilizar una temperatura
inadecuada en el procesado de alimentos se apunta como la principal
causa de toxiinfecciones.
 Tamaño de las partículas
Los microorganismos se fijan en el aire depositándose con mayor
rapidez las adheridas a las partículas mayores.
 Ventilación
Las bacterias permanecen en el aire durante lapsos variables
dependiendo de la velocidad de las corrientes es por ello que un
ambiente activo contiene más bacterias que otro seco.
 Aerosoles
Los aerosoles producto de la captación hacen que se formen bacterias
 Lluvia
Cuando hay lluvia los microorganismos disminuyen por el lavado del
aire.
 Radiación
La acción directa de los rayos solares tiene efectos perjudiciales en los
microorganismos.

26
2. Explique cuatro enfermedades transmitidas por el aire
Entre algunas enfermedades citare:
Tuberculosis
El agente etiológico de la tuberculosis es el Mycobacterium tuberculosis o
comúnmente llamado bacilo de Koch. Esta enfermedad se propaga por el
aire de una persona a otra. Si no se trata adecuadamente, la enfermedad
de la tuberculosis puede ser mortal. Puede que las personas infectadas por
bacterias de la tuberculosis, y que no estén enfermas necesiten tratamiento
para prevenir la enfermedad de tuberculosis en el futuro.
Este agente Mycobacterium tuberculosis puede sobrevivir durante varios
meses por el esputo de una persona infectada en un lugar fresco y oscuro
también en materiales como alfombras, papel y ropa; es muy sensible a la
luz solar pero resistente al frio.
Neumonía
Producido por el Streptococcus pneumoniae. Esta enfermedad inflama los
sacos aéreos de uno o ambos pulmones. Los sacos aéreos se pueden
llenar de líquido o pus ( material purulento), lo que provoca tos con flema o
pus, fiebre, escalofríos y dificultad para respirar.
Difteria
Causada por el Corynebacterium diphtheriae que se propaga a tarves de
las gotas respiratorias como las que se producen por la tos o estornudos
de una persona infectada o de alguien que porta la bacteria pero no
presenta síntomas. Entre sus síntomas observamos fiebre y escalofríos,
dolor de garganta, ronquera.
Faringitis
Causada por la bacteria Streptococcus pyogenesis que se transmite a
través del aire, generando un dolor muy doloroso en la garganta. Entre sus
síntomas están sequedad en la garganta, fiebre, dolor de cabeza,
erupciones cutáneas.

3. ¿Qué grupo de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades

respiratorias?
Hongos (algunos de ellos), virus y bacterias. Estos provocan diferentes tipos
de enfermedades que pueden llegar a hacer mortales.

27
4. Menciona las características principales de: Rhizopus nigricans ,
Alternaria, sacharomyces cerevisae
Rhizopus nigricans:
Es un tipo de moho inofensivo, se halla en crecimiento en el pan, conocido por
"moho del pan". Es un miembro del género Rhizopus. Puede causar infecciones si
no se tiene cuidado. Puede causar reacciones concretas alérgicas. Rhizopus
nigricans posee esporas que flotan alrededor en el aire.
Presentan el aspecto de una suave pelusa grisácea o verdosa que se desarrolla en
la superficie de la materia orgánica en descomposición sobre la que viven. Vistos al
microscopio presentan un micelio formado por abundante cantidad de hifas
blanquecinas y sin tabiques.
En el extremo de algunas hifas se desarrollan los esporangios de forma y número
variado según las especies. Las esporas contenidas en los esporangios son
generalmente negras o verdosas. Cuando quedan libres dan origen a la formación
de nuevos micelios.
Alternarias:
Es un hongo ascomiceto .Las diferentes especies de este género son uno de los
mayores patógenos de plantas. Son conocidas comúnmente como alérgenos en los
humanos, y, dentro de casa, pueden causar rinitis alérgica o reacciones de

28
hipersensibilidad que, en ocasiones, pueden producir ataques de asma. Sus
esporas son las causantes de la alergia, y, al igual que los pólenes, son
transportadas por el aire hasta la nariz o bronquios del alérgico, causando la rinitis
o asma. Existen esporas de alternaria todo el año y, por lo tanto, causan patología
alérgica perenne; aunque varíe la intensidad según las estaciones, suele haber más
en primavera y verano. También aparecen infrecuentemente entre las infecciones
oportunistas en personas inmunodeprimidos, como por ejemplo, en personas
afectadas por el sida. Hay cuarenta y cuatro especies conocidas, pero puede haber
cientos de ellas aún por descubrir. Son una especie omnipresente en el ambiente y
parte fundamental en la flora de hongos en cualquier sitio. Son agentes activos en
la descomposición. Sus esporas están en suspensión en el aire, sobre el suelo,
sobre los objetos y en el agua, tanto fuera, como dentro de casa. Las esporas se
pueden distribuir de una en una, o en largas cadenas, y pueden crecer en colonias
visibles, de color negro o gris.
Al menos el 20% de las pérdidas de la agricultura, están causadas por alguna
especie de la Alternaria, y muchos trastornos de salud en el hombre, pueden ser
causados por estos hongos, que crecen en la piel y en las mucosas, en especial en
el globo ocular, y en el tracto respiratorio.
Saccharomyces cerevisiae:
La levadura de cerveza es un hongo unicelular, un tipo de levadura utilizado
industrialmente en la fabricación de pan, cerveza y vino. Tiene forma elíptica u
ovoide se reproduce de forma asexual por gemación, también tiene alta capacidad
fermentativa pero no fermenta ni asimila lactosa.

29
5. ¿Cuáles son los ingredientes del agar nutritivo, caldo nutritivo y agar
saboraud?. ¿Qué clase de nutrientes proporciona cada uno de los
ingredientes?

Agar Nutritivo

A principios de 1900 la APHA (American Public Health Association) sugirió

esta formulación como un medio de cultivo estándar para el análisis de
agua. El Agar Nutritivo se encuentra descrito en los Métodos

Estándar de la APHA y de la AOAC (Association of Oficial Analytical

Chemists) para el análisis de agua, leche y sus derivados, alimentos y otros
materiales.

El Agar Nutritivo sigue siendo un medio ampliamente utilizado para el cultivo

de microorganismos no fastidiosos.

En este medio el extracto de carne y la peptona aportan la fuente de

nitrógeno, vitaminas y carbono. El agar es adicionado como agente
solidificante.

Agar Nutritivo Cantidad

Extracto de carne 3g
Peptona 5g
Agar 15g
Agua 1000ml

Caldo Nutritivo

Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de

microorganismos con escasos requerimientos nutricionales.

Su uso está descripto en muchos procedimientos para el análisis de

alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.

Caldo Nutritivo Cantidad

Extracto de carne 3g
Peptona 5g
Agua 1000ml

30
 Agar Sabouraud

Es un medio para el cultivo de hongos y levaduras. El Agar Sabouraud es

una modificación del Agar de Dextrosa. Este medio es usado para el cultivo
de hongo patógenos, particularmente de aquellos asociados con
infecciones de la piel. La alta concentración de dextrosa y la acidez del pH
hacen a éste un medio selectivo para hongos. Con la adición de
cicloheximida, estreptomicina y penicilina, se obtiene un excelente medio
para el aislamiento primario de dermatofitos.

Agar Cantidad
Sabouraud
Pluripeptona 10g/l
Cloranfenicol 0.05g/l
Glucosa 40g/l
Agar 15g/l

31
10. FUENTES DE INFORMACIÓN

1.- Michael Madigan,John Martinko,Jack Parker ,Biología de los

microorganismos ,Madrid,Editorial Pearson ,2004.

2.-Michael J.Pelczar, Elementos de Microbiología, México, Editorial Mc-

Graw Hill, 1984.

3.- Mª Concepción Casado González, Medios de cultivo en un laboratorio

de Microbiología. [Consulta : 04 abril 2015 ] Disponible en :
https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-
un-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

11. ANEXOS

Fig 10

32
INDICE DE TABLAS
Tabla 1,2 pág. 14
Tabla 3 pág. 15
Tabla 4,5,6 pág. 16
Tabla 7,8 pág. 17
Tabla 9 pág. 18
Tabla 10 pág. 19
Tabla 11 pág. 21
Tabla 12,13 pág. 22

INDICE DE FIGURAS

Fig 1 pag 4
Fig 2,3,4 pag 8
Fig 5 pag 9
Fig 6 pag 10
Fig 7 pag 12
Fig 8 pag 14
Fig 9 pag 21
Fig 10 pag 32

33