ALAT DAN BAHAN

ALAT :

1. Botol dengan volume 100 ml 6. Gelas ukur 10 ml

2. LAF ( Laminar Air Flow) 7. Pipet ukur
3. Tabung reaksi kecil 8. Lampu spiritus
4. Tabung Durham 9. Inkubator
5. Vortex 10. Rak tabung reaksi

BAHAN :

1. Sampel air minum

2. Aquades steril
3. Medium KL (Kaldu Laktose)
4. Medium BGLB (Brilliant Green Lactose Bile Broth)
5. Medium MCA (Mac Conkey Agar)
6. Alkohol 70%
7. Lisol
8. Sabun cuci
9. Korek api
10. Lap
PROSEDUR KERJA
TES PENDUGAAN
Disediakan 100 ml sampel air sumur
yang akan diperiksa. Disiapkan 3
buauh tabung reaksi berisi 9 ml
aquades steril dan 9 buah tabung
reaksi berisi tabung durham yang
telah disis 3 ml medium KL
Disiapkan 9 buah tabung reaksi
berisis medium kaldu laktose. Beri
kode A1,A2,A3 untuk dimasukan 1
ml pengenceran 10-1. Begitu
seterusnya pada B1,B2,B3 untuk
pengenceran 10-2 dan C1,C2,C3
untuk pengenceran 10-3
TES PENEGASAN
Diambil 1 ml sampel air sumur
kedalam tabung reaksi berisis 9 ml
aquades steril lalu kooklah diperoleh
sebagai pengenceran 10-1.. Dilakukan
hal yang sama pada pengenceran 10-2
dan 10-3
Di inkubasikan semuatabung reaksi
pada suhu 37˚C dan 1 × 24 jam. Jika
timbul gas pada bagian dasar maka
lakukan tes penegasan. Bila tidak
tunggu kembali selama 1 × 24 jam.
Bila tidak ada gas, tidak perlu
diperiksa lebih lanjut
 Disediakan 9 buah tabung reaksi
berisi tabung durham yang telah
disis 3 ml medium BGLB.
Perlakukan seperti tes
pendugaan
Dimasukkan tabung reaksi
kedalam inkubator pada suhu
44˚C selama 1 × 24 jam.

Jika timbul gas pada bagian

dasar maka lakukan tes
kepastian karena adanya
coliform fekal. Bila tidak tunggu
kembali selama 1 × 24 jam. Bila
tidak ada gas, tidak perlu
diperiksa lebih lanjut

TES KEPASTIAN

Di inokulasikan 0,1 ml sampel air

minum pada masing- masing
Di inkubasikan pada suhu 37˚C
tingkat pengenceran 10-1,10-2,10-3 selama 1 × 24 jam atau 2 × 24 jam
pada medium MCA (Mac Conkey
Agar)

Diamati koloni bakteri yang

tumbuhpada permukaan medium.
Bila berwarna merah, maka koloni
bakteri tersebut dapat
menfermentasikan laktose.
Hitunglah jumlah koloni bakteri
berdasarkan tingkat
pengencerannya dan hitung
reratanya