UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

AISLAMIENTO DE CRYTOCOCCUS NEOFORMANS A PARTIR DE

EXCRETAS DE COLUMBA LIVIA EN LA UNIVERSIDAD PRIVADA
ANTENOR ORREGO Y SUS ALRREDEDORES, TRUJILLO 2018

AUTORES: AGIP MONTENEGRO, Maria del Carmen

AGUILAR VILCAPOMA, José
BARRETO ABANTO,Renzo
BUSTAMANTE PADILLA, Julio Cesar
CADENILLAS GARCÍA,Nathaly Valeria
DEL CASTILLO SOBERÓN, Grace Elizabeth
ESCOBAR ABANTO, Susan Harlem
ESQUIVES BOY, Junior
FALCÓN CEFERINO, Gustavo

ASESOR: Dr. ÁVILA VEREAU, Elio Fernando

Trujillo – Perú
2018
 PRESENTACIÓN

La identificación del Cryptococcus neoformans en las heces de las palomas

de la ciudad de Trujillo, permitirá establecer un mejor control y limpieza de
todo el panorama que se evidencia cotidianamente en parques públicos,
plazas, etc., donde niños y adultos gozan de momentos de esparcimiento y
que puede ser un foco infeccioso dañino para la salud; y con mayor afección
a pacientes con inmunodeficiencias, siendo esta la población más vulnerable.
El motivo principal de la presente investigación, es identificar el hongo
Cryptococcus neoformans en las heces de las palomas y establecer si este es
un factor desencadenante de enfermedades; siendo así un peligro latente para
la salud de los pacientes inmunodeprimidos y la sociedad en general. Se
valorará cualitativamente y cuantitativamente el grado de peligro que
representa para la salud.

Los autores.
 INDICE
PRESENTACIÓN.............................................................................................................................. 2
I. GENERALIDADES: .................................................................................................................. 4
1. Título: ................................................................................................................................ 4
2. Equipo de investigación: ................................................................................................... 4
3. Tipo de investigación:........................................................................................................ 4
4. Área/ línea de investigación .............................................................................................. 5
5. Unidad académica: ............................................................................................................ 5
6. Institución y localidad donde se desarrollará el proyecto: ............................................... 5
7. Duración total del proyecto: ............................................................................................. 5
II. PLAN DE INVESTIGACIÓN: .................................................................................................... 5
2.1. Planteamiento y formulación del problema: ................................................................ 6
2.2. Antecedentes: ............................................................................................................... 6
2.3. Justificación: .................................................................................................................. 6
2.4. Objetivo general: ........................................................................................................... 7
2.5. Objetivos específicos: .................................................................................................... 7
2.6. Marco teórico: ............................................................................................................... 7
2.7. Hipótesis: ..................................................................................................................... 11
2.8. Materiales y metodología: .......................................................................................... 11
2.8.1. Materiales: .......................................................................................................... 11
2.8.2. Metodología: ....................................................................................................... 12
2.10. Cronograma: ............................................................................................................ 16
III. RESULTADOS ................................................................................................................... 17
3.1. ANÁLISIS DE RESULTADOS........................................................................................... 18
IV. CONCLUSIONES ............................................................................................................... 19
V. ANEXOS ............................................................................................................................... 20
VI. BIBLIOGRAFIA: ................................................................................................................ 22
I. GENERALIDADES:

1. Título:

AISLAMIENTO DE CRYTOCOCCUS NEOFROMANS A PARTIR DE

EXCRETAS DE COLUMBA LIVIA EN LA UNIVERSIDAD PRIVADA
ANTENOR ORREGO Y SUS ALRREDEDORES, TRUJILLO 2018
2. Equipo de investigación:

1.1.Autores:
 Agip Montenegro, María del Carmen.
magip1@upao.edu.pe

 Aguilar Vilcapoma, José

jaguilarv5@upao.edu.pe

 Barreto Abanto,Renzo
rbarretoa1@upao.edu.pe

 Bustamante Padilla, Julio Cesar

jbustamantep1@upao.edu.pe

 Cadenillas García,Nathaly Valeria

ncadenillasg1@upao.edu.pe

 Del Castillo Soberón, Grace Elizabeth

gdelcastillos1@upao.edu.pe

 Escobar Abanto, Susan Harlem

sescobara1@upao.edu.pe

 Esquives Boy, Junior

Jesquivesb1@upao.edu.pe

 Falcón Ceferino, Gustavo

gfalconc1@upao.edu.pe
1.2. Asesor:
 Ávila Vereau, Elio Fernando
eavilav1@upao.edu.pe

3. Tipo de investigación:

a. De acuerdo a la orientación o finalidad: Investigación Aplicada.

b. De acuerdo a la técnica de contrastación: Investigación Experimental.

4
4. Área/ línea de investigación

 MICROBIOLOGÍA/ ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y

TROPICALES.

5. Unidad académica:
 Universidad Privada Antenor Orrego
 Escuela profesional de Medicina Humana
 Facultad de Medicina Humana

6. Institución y localidad donde se desarrollará el proyecto:

 Universidad Privada Antenor Orrego.
 Trujillo-Perú.

7. Duración total del proyecto:

a. Fecha de inicio: 05 de setiembre del 2018.

b. Fecha de término: 10 de setiembre del 2018.

II. PLAN DE INVESTIGACIÓN:

5
2.1. Planteamiento y formulación del problema:
¿Es Cryptococcus neoformans encontrado en las deyecciones de las
Columba livia, un factor desencadenante de ciertas enfermedades leves o
crónicas en el ser humano?

2.2.Antecedentes:

Tello M. (2013) en su artículo de revisión titulado Criptococosis afirma

que, La criptococosis es una infeccion micotica de distribucion mundial,
producida principalmente por el complejo Cryptococcus
Neoformans/Cryptococcus gattii (C. Neoformans/C. gattii), ambos se
encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza. C. Neoformans
afecta principalmente a personas inmunocomprometidas y C. gattii a
pacientes inmunocompetentes expuestos a al nicho ecológico del hongo.
Por lo general la puerta de entrada es por vía respiratoria y posteriormente
se disemina a otras regiones del cuerpo, principalmente el sistema nervioso
central. (1)

Rivas V. (2012) en el trabajo de investigación titulado Determinación de

la presencia de Cryptococcus Neoformans en heces de paloma (Columba
Livia) en áreas públicas de la ciudad de antigua Guatemala, encontró
como resultado Los resultados de este estudio confirman que las heces de
palomas son una importante fuente ambiental y de diseminación de C.
Neoformans. El 33.33% de los espacios públicos estudiados con presencia
de palomas de la ciudad de Antigua Guatemala resultaron positivos a la
presencia de Cryptocococis Neoformans. Estos lugares, transitados
cotidianamente por un número importante de personas de todas las edades,
representan un riesgo potencial en salud pública especialmente a personas
inmunodeprimidas. (2)

Toro V. (2015) en el trabajo de investigación titulado Aislamiento

presuntivo y caracterización de Cryptococcus Neoformans y Cryptococcus
gattii desde árboles en la región de O’Higgins y Maule, Chile encontró
como resultado La mayoría de los estudios de C. neoformans en nuestro
país están asociados a casos clínicos, principalmente en pacientes con
algún grado de compromiso inmunológico. (3)

2.3.Justificación:
La identificación del cryptococcus neoformans en las heces de las
palomas de la ciudad de Trujillo, permitirá un mejor control y limpieza
de todo el panorama que se evidencia cotidianamente en parques
públicos, plazas, etc., donde niños y adultos gozan de momentos de
esparcimiento y que puede ser un foco infeccioso dañino para la salud.
El motivo principal de la presente investigación, es el de identificar el
hongo Cryptorcoccus Neoformans en las heces de las palomas y si este

6
 es un factor desencadenante de enfermedades siendo así un peligro
latente para la sociedad. Se valorará cualitativamente y cuantitativamente
el grado de peligro que representa para la salud.

2.4.Objetivo general:

Determinar la presencia y ampliar la visión problemática e infecciosa del

hongo Cryptococcus Neoformans en heces de paloma ( Columba Livia
)en las áreas de la universidad privada Antenor Orrego y sus alrededores
y diseñar una posible estrategia viable para el control y erradicación de
la infección activa o latente.

2.5.Objetivos específicos:

 Aislar e identificar Cryptococcus neoformans en heces de

paloma.
 Conocer la prevalencia de Cryptococcus neoformans en áreas
públicas de la ciudad de Trujillo.
 Precisar las formas de contagio de cryptocococis inducida por los
factores ambientales.

2.6.Marco teórico:

CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS:
Es un hongo saprófito de amplia distribución mundial que se puede aislar
de suelos y heces de aves, principalmente de palomas.(1) Han sido
identificadas dos variedades del hongo, C. neoformans var. neoformans,
de distribución mundial, aislada de diversas fuentes y es la principal
responsable de las infecciones en pacientes inmunocomprometidos, y C.
neoformans var gatti de una distribución más restringida, y que se ha
identificado principalmente en individuos inmunocompetentes.(2)

AGENTE CAUSAL

El microorganismo causante de la criptococosis, es un hongo

levaduriforme encapsulado, redondo u ovalado, que mide entre 2 y 15 µm
de diámetro, se reproduce por gemación, y su cápsula está compuesta por
polisacáridos.

Se distingue por tres hechos fundamentales:

7
  Su incapacidad para fermentar carbohidratos y asimilación de mio
inositol.
 La producción de las enzimas ureasa y fenoloxidasa, con
producción de melanina.
 Su estado teleomorfo es la filobasidiella neoformans..

De este hongo, se reconocen dos variedades fundamentales:

1. -Var. Neoformans, cuyo serotipos A y D crecen a 37 °C en

forma de colonias de color café en agar de semillas de Niger
2. -Var. Gattii, cuyos serotipos B y C, crecen lentamente o no
crecen a 37°C y reaccionan en agar azul de canavanina-glicina-
bromotimol(CBG)

La variedad más expandida es la Var. Neoformans, que crece en agar

Sabouraud, o agar extracto de malta antes de 72 horas a 37°C, en forma de
colonias blanco amarillentas o color crema, que oscurecen al envejecer, y
que tienen aspecto mucoide2-4.

La cápsula del hongo, puede evidenciarse en preparaciones de tinta china

o nigrosina en el 50% del Líquido Céfalo Raquídeo(LCR) de las
meningitis por criptococos, y el 90% del LCR en los pacientes de VIH con
la infección micótica.

La ureasa, produce alcalinización del medio, y la fenoloxidasa, oxida

sustratos difenólicos y los convierte en melanina.

El componente principal del antígeno capsular, es el

glucuronoxilomanano, que es soluble en agua, y puede hallarse en el LCR,
suero, orina y otros líquidos corporales del paciente. Es un polisacárido de
alto peso molecular, formado por un polímero de α-1-3 manano con
ramificaciones de xilosa y ácido glucurónico.

8
La enzima fenoloxidasa oxida las catecolaminas, convirtiéndolas en
melanina (melanogénesis).La melanina protege al criptococo de la
temperatura, la radiación, y algunas enzimas defensivas del hospedero. El
Sistema Nervioso Central, es rico en catecolaminas, en el LCR no hay
factor anticriptococósico, y sí hay sustancias estimulantes de su
crecimiento como la asparagina y la creatina, por eso, este germen tiene
un neurotropismo positivo.

El polisacárido capsular, es responsable de la inhibición de la fagocitosis,

la supresión de la inmunidad celular y humoral, y la limitación del proceso
inflamatorio, aunque contradictoriamente, es un potente activador de la vía
alternativa del complemento.

EPIDEMIOLOGÍA

El criptococo tiene distribución mundial, se aloja en el suelo, en el polvo,

sobre todo contaminado con heces de aves como las palomas, y en el caso
de la variedad gattii, con la madera y las hojas del eucalipto en algunas
regiones tropicales y subtropicales..

Es frecuente en las edades entre 20 y 50 años, y predomina en varones 4/1.

FACTORES PREDISPONENTES:

 VIH
 Tratamientos esteroideos prolongados
 Linfomas
 Sarcoidosis
 Diabetes Mellitus

PATOGENIA

La puerta de entrada generalmente es pulmonar, menos frecuente cutánea

y raramente oral.

Esta situación hace muy importante el control de la cría de aves,

fundamentalmente palomas, que en muchos lugares de Cuba se lleva a
cabo en edificios multifamiliares y áreas muy pobladas.

Por la experiencia profesional se observa que la criptococosis en

inmunocompetentes pudiera desencadenar episodios alérgicos, que pueden
ser ligeros, y aunque no se manifieste la enfermedad invasiva, sí puede
deteriorarse la calidad de vida de muchas personas al ponerse en contacto
con el hongo.

9
Generalmente hay ausencia de respuesta inflamatoria y de necrosis, y las
lesiones se producen por la compresión y el desplazamiento de grupos
quísticos de hongos o granulomas incompletos. En los pulmones, la
respuesta inflamatoria es mayor, y puede incluir a macrófagos, células
gigantes, células plasmáticas y linfocitos. No está aclarado el papel de
algunas infiltraciones eosinófilas encontradas en pulmones de algunas
personas en contacto con el criptococo.

LA PALOMA Y CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS

El papel de la paloma como portadora de hongos patógenos fue establecido

por Emmons en 1955, el cual aisló C. Neoformans de las excreciones de
palomas urbanas, siendo el primero en establecer la relación existente, y
actualmente consolidado, entre el microorganismo y las heces de estas
aves. Estudios posteriores realizados por el propio Emmons [14] y por
otros investigadores muestran que las excreciones viejas de palomas son
la fuente conocida más abundante de dicho microorganismo.
Tras el descubrimiento de Emmons, investigadores de casi todo el mundo
han demostrado que las deposiciones de paloma son un importante
reservorio de C. neoformans.
Según algunos autores, este hongo no suele aislarse en deyecciones
recientes, pero sí en las heces acumuladas y secas existentes en palomares,
aleros de edificios, balcones de casas abandonadas donde duermen las
palomas.
Este hábitat desecado, alcalino, rico en sales y nitrógeno, es
ecológicamente restrictivo, pero no es infrecuente en el medio ambiente
urbano.

10
 Otros estudios no muestran diferencias significativas en la frecuencia de
aislamiento entre los excrementos secos y los frescos [8], o incluso aíslan
el microorganismo con más facilidad de heces frescas [9]. Parece que la
alta concentración de creatinina en el estiércol de paloma favorece el
crecimiento de los criptococos, pero, además, las heces de pichón, brindan
otras características: ambiente alcalino, hiperosmolar y rico en muchos
compuestos nitrogenados, además de la creatinina.
Las concentraciones de esta levadura en el excremento de paloma a
menudo exceden 106 organismos viables por gramo, su alta concentración
en este substrato puede estar también relacionada con su habilidad para
asimilar no sólo la creatinina, sino también la xantina, la urea y el ácido
úrico, compuestos abundantes en los excrementos de las aves aun así, C.
neoformans puede desaparecer cuando los detritos de estas aves se
mezclan con el suelo. De hecho, pocas veces se aísla de suelos
orgánicamente enriquecidos. Se ha estimado que la permanencia de la
levadura en deyecciones de palomas a la sombra, húmedas o desecadas,
puede ser de hasta más de dos años. Aunque hasta hace poco se
consideraba que la exposición directa al sol destruía el hongo o inhibía su
crecimiento, actualmente parece que la capacidad de las especies
patógenas de Cryptococcus para producir pigmentos melanoides no sólo
les permite sobrevivir a la radiación solar, sino que pueden llegar a utilizar
las radiaciones como energía metabólica.

2.7. Hipótesis:
El excremento de paloma con Cryptococcus N. influye significativamente
como factor de riesgo de contraer cryptocococis en pacientes
inmunodeprimidos.

2.8. Materiales y metodología:

2.8.1. Materiales:

Recursos humanos
Asesores de la investigación.
Estudiante investigador.
Personal de apoyo del laboratorio de microbiología,
Facultad de Medicina Humana de la Universidad Privada
Antenor Orrego.

Recursos de campo
Bolsas plásticas.

11
 Depresores de madera.
Cámara fotográfica.
Vehículo y gasolina.
Boletas de registro.
Bolígrafos.
Computadora.
Impresora.

Recursos de laboratorio
Láminas portaobjetos.
Masacrillas.
Láminas cubreobjetos.
Asas bacteriológicas.
Beakers( vasos de precipitado)
Tubos de ensayo.
Placas de Petri.
Recipientes de vidrio estériles.
Bandejas.
Guantes quirúrgicos no estériles.
Removedores plásticos.
Agar Sabouraud Dextrosa con cloranfenicol.
Cloranfenicol.
Solución salina estéril al 85%.
Medio líquido de urea.
Agua destilada estéril.
Cristal violeta.
Lugol.
Alcohol acetona.
Safranina.
Tinta china.
Papel absorbente.
Mechero.
Esterilizador de asas.
Incubadora.
Microscopio.
Balanza digital.

RECURSOS BIOLÓGICOS
Muestras coprológicas de palomas (Columba livia).
Palomas

CENTROS DE REFERENCIA
Biblioteca de la Facultad de Medicina Humana
Documentos electrónicos de internet.

2.8.2. Metodología:

12
Para obtener una muestra homogénea y representativa, en cada sitio de
muestreo se definieron los siguientes puntos: suelo al abrigo del sol, suelo
con exposición al sol, paredes al abrigo del sol, paredes con exposición al
sol.

Para la toma de muestras se siguieron los siguientes pasos:

1. Con la ayuda de un depresor de madera, se recolectaron 15

muestras de heces por cada sitio de muestreo.
2. Posteriormente fueron colocadas en bolsas plásticas
previamente identificadas.

3. Para su traslado, y en un lapso no superior a tres horas, las

muestras colectadas fueron llevadas al Laboratorio de
Microbiología de la Facultad de Medicina Humana en la
Universidad Privada Antenor Orrego para su
procesamiento.

Este procedimiento se repitió la semana siguiente.

Procedimiento de laboratorio:

Para la realización del cultivo se trabajó bajo una campana bacteriológica

de flujo laminar para mantener el medio libre de contaminación. El proceso
que se realizó con cada muestra fue el siguiente:

 Homogeneización de la muestra
 Luego se pesaron 5 gramos de heces y se le añadieron 30
miligramos de solución salina estéril al 85% y se homogeneizaron
agitándolas vigorosamente por 5 minutos.
 Después se dejaron sedimentar por 10 minutos.
 A partir del sobrenadante se obtuvo una asada y se sembró sobre
agar de “alpiste negro” Guizotia abyssinica.
 La muestra se incubó en un medio aerobio a 27°C de tres a siete
días.
 Transcurrido este tiempo, se examinó durante cinco días cada
muestra para identificar aquellas colonias con la presencia de un
pigmento oscuro, indicativo de la fenoloxidasa producida.

En los medios donde se identificó la presencia de Cryptococcus se realizó

un subcultivo en agar de “alpiste negro” Guizotia abyssinica y agar
Sabouraud sin cicloheximida para aislar las cepas obtenidas.
Posteriormente, fueron identificadas con base a criterios microscópicos y
bioquímicos de la siguiente manera:

Por medio de la tinción de Gram para la observación de levaduras Gram

(+).

Tinción con tinta china:

13
 1. En el centro de un portaobjetos, se colocó una gota de agua destilada
estéril, una gota de tinta china y unas gotas de la cepa aislada luego se
mezclaron suavemente.

2. Se colocó un cubreobjetos sobre la suspensión y se presionó

suavemente para evitar que quedaran burbujas.

3. Una vez finalizada la tinción, se observó al microscopio buscando la

cápsula del hongo, la cual se observó como una estructura clara
alrededor de la célula.

Prueba de ureasa
1. Se tomó una asada del cultivo fresco. Luego se inoculó 1-1.5 ml. del
medio líquido de urea.
2. Se incubaron a 35°C por 24 horas.

3. Se consideró positivo el cambio del indicador rojo fenol del amarillo

al rosado, por otro lado las cepas ureasa negativas no produjeron
cambio alguno.

2.9. Presupuesto:
 Financiamiento: Autofinanciado

BIENES Y SERVICIOS

Laboratorio de microbiología de la Universidad Privada Antenor Orrego

Servicio de impresión, fotocopiado y empastado

PAPELERÍA EN GENERAL, ÚTILES Y MATERIALES DE OFICINA.

Unidad Precio total

Precio por
Recurso de Cantidad
unidad
medida

Papel bond A4 unidad 1000 0.026 26.00

Tinta de Impresión (b/n) frasco 100 10.00 10.00

Tinta de Impresión (c) frasco 50 08.00 08.00

Folder Manila A4 unidad 10 01.00 10.00

Perforador unidad 1 04.00 04.00

Lapiceros unidad 3 00.50 01.50

14
Lápices unidad 3 01.50 04.50

Resaltadores unidad 5 04.00 20.00

SERVICIO DE IMPRESIONES, ENCUADERNACIÓN Y EMPASTADO

Unidad Precio Precio total

Recurso de Cantidad (nuevos
medida soles)
Impresión unidad 200 00.10 20.00

Fotocopias unidad 300 00.10 30.00

Empastado unidad 1 15.00 15.00

PROCESAMIENTOS DE DATOS

Unidad Precio Precio total

Recurso de Cantidad (nuevos
medida soles)
Libros de Microbiología -2 Libros
y Datos Estadísticos del 00.00
00.00
Hospital Belén-Trujillo -Varios datos

SOPORTE TÉCNICO

Unidad Precio Precio total

Recurso de Cantidad (nuevos
medida soles)
Computadora

Impresora

Microscopio
unidad 1 00.00 00.00
Incubadora

Esterilizador

Balanza digital

RECURSOS DE LABORATORIO

Asas bacteriológicas. unidad 5 00.00 00.00

Beakers(vasos de unidad 2 00.00 00.00

precipitado)

15
Tubos de ensayo. unidad 20 00.00 00.00

Placas de Petri. unidad 30 00.00 00.00

Guantes quirúrgicos no caja 1 10.00 10.00

estériles.
Agar Sabouraud Dextrosa frasco 1 00.00 00.00
con cloranfenicol
Cloranfenicol tableta 5 01.50 07.50

Solución salina estéril al botella 1 00.00 00.00

85%
Medio líquido de urea frasco 1 00.00 00.00

Agua destilada estéril botella 1 00.00 00.00

Cristal violeta frasco 1 00.00 00.00

Lugol frasco 1 00.00 00.00

Tinta china frasco 1 08.00 08.00

Mascarillas unidad 4 05.00 20.00

TOTAL DE GASTOS DE BIENES Y SERVICIOS

TOTAL (nuevos soles) 194.50

2.10. Cronograma:

TIEMPO 2018
N° AGOSTO SET OCT NOV DIC
ACTIVIDADES 2 1 2 1 2 1 2 1 2
1 Elaboración del proyecto.
2 Presentación del proyecto.
3 Revisión bibliográfica.
4 Reajuste y validación de
instrumentos.
5 Trabajo de campo y captación
de información.
6 Procesamiento de datos.

7 Trabajo de laboratorio.

16
 8 Trabajo de laboratorio.
9 Trabajo de laboratorio.
10 Trabajo de laboratorio.
11 Trabajo de laboratorio.
12 Análisis e interpretación de
datos.
13 Elaboración del informe.
14 Presentación del informe.
15 Sustentación

III. RESULTADOS

TABLA DE RESULTADOS N°1:

N° CRECIMIENTO EN GRAM: Observación de TINTA CHINA:

PLACA: Agar Saburoud la forma Cápsula
PRIMER MUESTREO
1 - - -
2 - - -
3 - - -
4 - - -
5 - - -
6 - - -
7 - - -
8 - - -
9 - - -
10 - - -
11 - - -
12 - - -
13 - - -
14 - - -
15 - - -
16 - - -
17 - - -
18 - - -
19 - - -
20 - - -
SEGUNDO MUESTREO
1 + + -
2 + + -
3 + + -
4 + + -
5 + -

17
 6 + -
7 + -
8 + -
9 + -
10 + -

Paloma A
Paloma B

Tabla de resultados N°2: Posterior a la siembra en agar úrea y a la siembra en el caldo

glucosado.

N° TINTA CHINA: Cápsula AGAR: Urea

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

3.1. ANÁLISIS DE RESULTADOS

Los resultados que obtuvimos en el primer muestreo fueron todos negativos, las
muestras obtenidas de los parques que rodean la universidad, fueron recogidas en
bolsas estériles, es importante resaltar que eran excrementos secos, se aprecia la
diferencia de los resultados en el crecimiento de microorganismos en las placas de
Agar Saburoud, ya que en el segundo muestreo se sembraron cuatro placas de heces
de dos palomas diferentes, las muestras fueron obtenidas directamente del ciego de
estos animales, para esto se realizó la extracción del contenido del intestino, podemos
apreciar la diferencia de los resultados ya que en este intento se observó el crecimiento
de microorganismos en las placas con Agar Saburoud y posteriormente pudimos
realizar la observación microscópica de las colonias formadas, en la coloración Gram
pudimos observar las características generales de la levadura en cuestión, de forma
circular, mientras que con la coloración en tinta china tuvimos algunos
inconvenientes, debido a que no se apreciaba la cápsula de esta levadura, por tal

18
motivo se sembró 10 tubos de caldo glucosado, cinco de la paloma a y 5 de la paloma
b, para poder observar si la falta de cápsula de estos microorganismos se debía a que
no habían tenido los nutrientes necesarios o el crecimiento era demasiado lento, se
sembró también tubos de agar urea para poder observar la reacción de estor
microorganismos, ya que en la teoría nos indica que el Cryptococcus neoformans es
la única levadura que da ureasa positivo.

IV. CONCLUSIONES

 Se logró aislar e identificar de manera efectiva el Cryptococcus

neoformans en heces de paloma a través de la utilización de medio de
cultivo agar Sabouraud y prueba de ureasa positivo.
 Esta enfermedad causa de manera más frecuente daño a partir de un foco
pulmonar se disemina por vía hematógena y linfática llegando así a
infectar al sistema nervioso central; causando también afectación en las
meninges en el tejido cerebral subyacente; por consiguiente, las
manifestaciones clínicas son alteración del estado mental, fiebre, cefalea,
convulsiones y alteraciones visuales.
 La existencia de focos de contaminación por excremento de aves en los
parques aledaños a la universidad representa en un 60% la probabilidad de
infección por Cryptococcus Neoformans.
 Existe la presencia del hongo Cryptococcus neoformans en los parques
cercanos a la universidad con incidencia moderada para su aparición en
las heces de las aves Columba Livia.

19
V. ANEXOS
Anexo 1: Preparación y selección de las muestras.

Anexo 2: Siembra de muestras en agar Sabouraud

20
 Anexo 4: Obtención de muestras directamente de las palomas

Anexo 5: Resultados de las siembras del segundo muestreo

21
VI. BIBLIOGRAFIA:

1. Tello M., Gutiérrez E., Bejar V., Galarza C., Ramos W., Ortega A. Criptococosis. Lima,
Perú. 2013.

2. Rivas V. Determinación de la presencia de Cryptococcus Neoformans en heces

de paloma (Columba Livia) en áreas públicas de la ciudad de antigua Guatemala,
Sacatepéquez, Guatemala. Guatemala, Guatemala. Universidad de San Carlos de
Guatemala Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, 2012. 56 pp.

3. Toro V., Azorcar P. Aislamiento presuntivo y caracterización de Cryptococcus

Neoformans y Cryptococcus Gatti desde árboles en la región de O’Higgins y
Maule, Chile. Santiago de Chile, Chile. Departamento de Microbiología,
Universidad de Talca, 2015. 13 pp.

4. Jawetz E, Melnick JL, Adelberg EA. Microbiología Médica.14ta ed. La Habana:

Ecimed; 2006.

5. Llops V, Dapena Z. Microbiología y Parasitología médicas. La Habana: Ecimed;

2010.pag 450-452

6. Beers M, Porter R, Jones T, Berkwits M. El Manual Merck. 11na ed. La Habana:

Ecimed; 2007.

7. Llops V, Dapena Z. Microbiología y Parasitología médicas. La Habana: Ecimed;

2010.pag 450-452

8. Beers M, Porter R, Jones T, Berkwits M. El Manual Merck. 11na ed. La Habana:

Ecimed; 2007.

9. Fernández C, Martínez G, Llinait T, Purera M, Gonzáles M. Identificación de

Cryptococcus neoformans var. neoformans en aislamientos clínicos cubanos.
Rev Cub Med Trop 2008; 50(2): 167-69.

10. Zurita S, Casquero J. Manual de procedimientos de laboratorio para el

diagnóstico de micosis oportunista y profunda. Lima: Instituto Nacional de
Salud; 2014. Serie de Normas Técnicas N° 23.

22