LABORATORIO DE QUIMICA ANALITICA II

PRACTICA No. 5
CROMATOGRAFIA DE GASES:
“Identificación de los componentes de una mezcla y factor de respuesta del detector”

INTRODUCCIÓN. La cromatografía es una técnica usada en muchas áreas de la ciencia e ingeniería,

estudios ambientales, alimentos y saborizantes, análisis farmacéuticos y forense. Una de las
cromatografías más frecuentemente usadas es la cromatografía de gases. Conocer y utilizar la
cromatografía de gases es hoy en día un aspecto primordial. Uno de los primeros problemas en
cromatografía es la selección de la fase estacionaria o tipo de columna a utilizar. Existe una gran
variedad de fases líquidas disponibles para la cromatografía de reparto gas-líquido. Para resolver este
problema es necesario considerar que un soporte polar retendrá más fuertemente un soluto polar y
que, por lo tanto, las sustancias menos polares saldrán con mayor rapidez de la columna,
presentando tiempos de retención más cortos. En esta práctica se corrobora tal criterio, ya que son
separados compuestos de diferente polaridad.

OBJETIVO: Que el alumno aprenda los fundamentos y la técnica de separación de la cromatografía

de gases y observará la diferencia de separar una mezcla de componentes de una muestra, además
aplicara los fundamentos teóricos y matemáticos de los parámetros relacionados con la
cromatografía.

MATERIALES n-pentano
Cromatógrafo de Gases (profesor) Area1 Edificio S Tetrahidrofurano
(Modelo Gow-Mac 580) 2 Butanona
1 jeringa para cromatografía de gases. n-propanol
8 Tubos de Ensaye con Tapon de Baquelita
5 Vasos de Precipitado de 50 mL Alumnos:
5 Pipetas Graduadas de 1 mL
1 Propipeta Memoria USB (para guadar datos)
.
REACTIVOS
NORMAS DE SEGURIDAD
Maneje los disolventes con cuidado en un lugar ventilado utilice propipetas para el manejo de
reactivos. Asegúrese de que no haya mecheros prendidos. Cuando trabaje con el cromatógrafo,
asegúrese de que se encuentre presente el profesor de laboratorio, quien le ayudará y brindará
asesoría sobre el buen manejo del equipo
METODOLOGÍA
Primera Parte:
Las condiciones del cromatógrafo deben ser las siguientes:
Temperatura de la Columna 100 ºC, Max 350ºC
Composición del Gas Comburente 30% de H2 y 70% Aire
Flujo de Gas Acarreador 30 mL/min H2
Detector de Ionización de Flama 200 ºC
Longitud de la columna 4 plg long, 1/8 de diametro
Columna Empacada OV-101 DMCS (Malla 60-100)
Tome en cuenta que el equipo requiere al menos 1h de calentamiento previo con el fin de estabilizar la
temperatura de la columna, el flujo de gas acarreador y detector de ionización de flama para que todo esto se
refleje en una línea base estable.
Con una jeringa de 50 µL, mida 3 µL de n-heptano y adicione otros 10 µL de aire. Inyéctelos en el
septo del cromatógrafo de manera uniforme y consistente sin ladear la jeringa, ya que se puede
romper la aguja; posteriormente enjuague la jeringa con agua. Marque el punto de inyección en el
cromatograma, así como la información relacionada con la muestra inyectada. El primer pico que
debe registrarse, es el del aire, seguido del pico de n-Heptano.
Repita el paso anterior con los disolventes Tetrahidrofurano, 2 Butanona y n-propanol y por último
inyecte una mezcla de disolventes problema, que el profesor preparará.
Segunda Parte:
Inyecte por separado una disolución de 1 µL de n- pentano con 2 µL de n-heptano, posteriormente 2
µL de n- pentano con 1 µL de n-heptano y por ultimo 4 µL de n- pentano con 1 µL de n-heptano y
obtenga el cromatograma de cada inyección, recuerde incluir 10 µL de aire en cada inyección.
INFORME:
Reportar en una gráfica el comportamiento de la señale registrada
Mida y tabule para cada disolvente y para la mezcla los tiempos y volúmenes de retención de
todas las corridas, incluya en una columna de esta tabla el volumen inyectado.
Con ayuda de los tiempos de retención de las sustancias puras, identifique los componentes
de la mezcla elaborada por el profesor y ubíquelas en el cromatograma.
Calcule el número de platos teóricos (N) y la Altura equivalente del plato teórico (AEPT), para
la columna utilizada.
Calcule el porcentaje de cada componente en la mezcla total, utilizando el método de
normalización (por áreas).
Calcule la resolución de los picos encontrados.
Para la segunda parte, con base en el área y concentraciones de la disolución de n-pentano
con n-heptano inyectados, calcular el factor de respuesta y áreas del segundo grupo de
cromatogramas.
Obtenga la grafica del factor de respuesta (Área o Altura) vs (Concentración n-pentano o n-
heptano)
Para el cromatograma de la mezcla de la primera parte y los cromatogramas de la segunda
parte, calcule la resolución para cada 2 picos registrados.
Efectúe las conclusiones pertinentes referentes a la resolución de la columna, polaridad de la
columna y en base al factor de respuesta del detector, indicar si el detector de Ionización
tiene una respuesta adecuada
Describa las características de la columna usada
CUESTIONARIO
1. ¿En que se basa la cromatografía de gases?
2. ¿Qué es la resolución y cuales son los criterios para medir la eficiencia de separación de los
componentes de una mezcla?
3. ¿Cómo puede medirse la eficiencia de una columna?
4. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de las columnas capilares y de las columnas
empacadas?
5. Explicar que se entiende por factor de respuesta.
6. Explicar que es el patrón interno y el externo para la identificación de los componentes de una
muestra.
7. Con base a los siguientes datos obtenidos con el empleo de una columna de Ftalato de
Dodecilo, que usa como gas acarreador N2 a 60 mL/min, y que tiene una longitud de 2m.
Calcule el numero de platos teoricos, la AEPT para cada compuesto, el porcentaje de cada
componente, utilizando el método de normalización.
Compuesto VR (mL)
Acetona 21.5
Butanona 58.0
3-Pentanona 145.0
Acetilcetona 400.0

BIBLIOGRAFIA
Verde C. J. R., Escamilla H. M. L., Reyes D. A. Malpica S. F. (1999). Manual de Practicas de Química
Analítica II. UAM-I
Harris, D. C. (2001). Análisis Químico Cuantitativo. Ed. Mac Graw Hill Interamericana.
Kirk Otmner (2001) Encyclopedia of Chemical Technology. John Wiley & Sons. Vol. 6, Pages: 373-
440.