Universidad Nacional del

Altiplano Puno

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCULA PROFESIONAL DE MEDICINAHUMANA
INFORME DE LABORATORIO DE BIOLOGIA N° 07
ALA : Mg. Bilma Valdéz Gallegos
DEL : Dante Julmer Luicho Tipo
ASUNTO : ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
FECHA : 13-05-2019
NOTA :

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Yo, Dante Julmer Luicho Tipo cumplo con informar el ensayo de

laboratorio realizado el día 13 de mayo del año en curso en el
laboratorio de biologia, desarrollando el tema ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA, el cual detallo a continuación en fojas___, que hago
alcance para su consideración y evaluación

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Firma del Estudiante
Puno, mayo 2019
 ACTIVIDAD ENZIMÁTICA:

OBJETIVOS:
 Comprender la importancia de la acción de la amilasa (salival) en el desdoblamiento
de los alimentos.
 Estudio de diferentes variables de la acción enzimática de la catalasa.
MATERIALES:
 Un trozo de papa.
 10ml de lugol.
 1 beaker 10ml.
 20 gramos de hígado de pollo.
 Agua oxigenada al 2%.
 Agua destilada.
 Ácido sulfúrico
 10ml de NaOH 1N.
 1 mortero
 1 mechero
 Baño maria a 37°C
 15 tubos de ensayo
INTRODUCCIÓN:
Las enzimas son moléculas orgánicas
que actúan como catalizadores de
reacciones químicas4, es decir, aceleran
la velocidad de reacción. Comúnmente
son de naturaleza proteica, pero también
de ARN (ver ribozimas5). Las enzimas modifican la velocidad de reacción, sin afectar el
equilibrio de la misma, ya que una enzima hace que una reacción química transcurra a
mayor velocidad, siempre y cuando sea energéticamente posible (ver energía libre de
Gibbs) . En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas
sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi
todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas
significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones
enzimáticas.
Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad
crece solo con algunas reacciones, el conjunto (set) de enzimas presentes en una célula
determina el tipo de metabolismo que tiene esa célula. A su vez, esta presencia depende de
la regulación de la expresión génica correspondiente a la enzima.
Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación
(ΔG‡) de una reacción, de forma que la presencia de la enzima acelera sustancialmente la
tasa de reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que
intervienen, ni modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar
el proceso incluso en escalas de millones de veces. Una reacción que se produce bajo el
control de una enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más
deprisa que la correspondiente reacción no catalizada.
Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas en las
reacciones que catalizan, ni alteran su equilibrio químico. Sin embargo, las enzimas
difieren de otros catalizadores por ser más específicas. La gran diversidad de enzimas
existentes catalizan alrededor de 4000 reacciones bioquímicas distintas.8 No todos los
catalizadores bioquímicos son proteínas, pues algunas moléculas de ARN son capaces de
catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividad
peptidil transferasa).910 También cabe nombrar unas moléculas sintéticas denominadas
enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las enzimas clásicas.11
La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores
enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras
que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Asimismo, gran
cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o fármacos
son moléculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el pH, la
concentración de la propia enzima y del sustrato, y otros factores físico-químicos.
Muchas enzimas son usadas comercialmente, por ejemplo, en la síntesis de antibióticos o
de productos domésticos de limpieza. Además, son ampliamente utilizadas en diversos
procesos industriales, como son la fabricación de alimentos, destinción de vaqueros o
producción de biocombustibles.
Actividad enzimática:
Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica y estructural que catalizan reacciones
químicas, siempre que sean termodinámicamente posibles: una enzima hace que una
reacción química que es energéticamente posible (ver Energía libre de Gibbs), pero que
transcurre a una velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a una
mayor velocidad respecto a la ausencia de la enzima.
En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las
cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los
procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las
reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas.
Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad
crece solo con algunas reacciones, el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula
determina el tipo de metabolismo que tendrá cada célula. A su vez, esta síntesis depende de
la regulación de la expresión génica
Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación
(ΔG‡) de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. Las
enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen, ni modifican,
por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar el proceso incluso
millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima, o de un
catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente
reacción no catalizada.
Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas por las
reacciones que catalizan, ni alteran su equilibrio químico. Sin embargo, difieren de otros
catalizadores por ser más específicas. Las enzimas catalizan alrededor de 4.000 reacciones
bioquímicas distintas. No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas, pues algunas
moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los
ribosomas en la que reside la actividad peptidil transferasa). También cabe nombrar unas
moléculas sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones
químicas como las enzimas clásicas.
La actividad enzimática puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores
enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras
que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Asimismo, gran
cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o fármacos
son moléculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el pH, la
concentración de la propia enzima y del sustrato, y otros factores físico-químicos.
Algunas enzimas son usadas comercialmente, por
ejemplo, en la síntesis de antibióticos y otros
productos farmacéuticos, como Brix 3000 por
ejemplo, y otros productos médicos innovadores y
revolucionarios que Brix Medical Science está
desarrollando para presentar al mercado
próximamente.

La amilasa:
La amilasa, (más propiamente amilasas, dado que
existen varias) es una enzima hidrolasa que tiene la
función de catalizar la reacción de hidrólisis de los
enlaces 1-4 entre las unidades de glucosa al digerir el
glucógeno y el almidón para formar fragmentos de
glucosa (dextrinas, maltosa) y glucosa libre. En los
animales se produce principalmente en las glándulas
salivales (sobre todo en las glándulas parótidas) y en
el páncreas. Tiene actividad enzimática a un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se
inflama, como en la pancreatitis, aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su
nivel en sangre (amilasemia). El pH óptimo de la amilasa salival es de 6.9. Prácticamente
todos los seres vivos disponen de amilasas.
Fue la primera enzima en ser identificada y aislada por Anselme Payen en 1833, quien en
un principio la bautizó con el nombre de "diastasa".
Clasificación:
α-amilasa:
(Nombre alternativos: 1,4-α-D-glucano-glucanohidrolasa; glucogenasa).
Las amilasas son enzimas dependientes de calcio, completamente afuncionales en ausencia
de iones de calcio. Actúan a lo largo de cualquier punto de la cadena de los carbohidratos,
descomponiéndolos en dextrina desde la amilopectina. Dado que puede actuar en cualquier
punto de la cadena es más rápida que la β-amilasa. En los animales es una enzima digestiva
mayor y su pH óptimo está entre 6,7 y 7,2.
β-amilasa:
(Nombres alternativos: 1,4-α-D-glucano-maltohidrolasa; amilasa sacarogénica).
Otra forma de amilasa, la β-amilasa es también sintetizada por bacterias, hongos y plantas.
Actúa desde el extremo no reductor de la cadena, catalizando la hidrólisis del segundo
enlace α-1,4, rompiendo dos unidades de glucosa (maltosa) a la vez. La amilasa presente
en el grano de cereal es la responsable de la producción de malta. Muchos microorganismos
también producen amilasa para degradar el almidón extracelular. Los tejidos animales no
contienen β-amilasa, aunque puede estar presente en microorganismos saprófitos del tracto
gastrointestinal.
γ-amilasa:
(Nombres alternativos: Glucano 1,4-α-glucosidasa; aminoglucosidasa; Exo-1,4-α-
glucosidasa; glucoamilasa; α-glucosidasa lisosómica; 1,4-α-D-glucano glucohidrolasa).
Además de romper el último enlace α(1-4)glicosídico en el extremo no reductor de la
cadena de amilosa y amilopectina, liberando glucosa, la γ-amilasa puede romper los enlaces
glicosídicos α(1-6). A diferencia de las otras amilasas esta forma es más eficaz en medios
ácidos y su pH óptimo es de 3.

La catalasa:
La catalasa es una enzima perteneciente a la categoría de las oxidorreductasas que cataliza
la descomposición del peróxido de hidrógeno (H2O2) en oxígeno y agua.2 Esta enzima
utiliza como cofactor al grupo hemo y al manganeso.
2𝐻2𝑂 ↔ 2𝐻2𝑂 + 𝑂2
El peróxido de hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos
vivos y tiene, entre otras, una función protectora contra microorganismos patógenos,
principalmente anaerobios, pero dada su toxicidad debe transformarse rápidamente en
compuestos menos peligrosos. Esta función la efectúa esta enzima que cataliza su
descomposición en agua y oxígeno. Además la catalasa se usa en la industria textil para la
eliminación del peróxido de hidrógeno, así como en menor medida se emplea en la
limpieza de lentes de contacto que se han esterilizado en una solución de peróxido de
hidrógeno. La ausencia congénita de catalasa es causante de una acatalasemia (o
acatalasia), la enfermedad de Takahara que se manifiesta por la ausencia de actividad de la
catalasa en los glóbulos rojos y con severas infecciones gangrenosas de la boca, pudiendo
producir la pérdida de los dientes y graves destrucciones de los maxilares y regiones
blandas que los cubre. Enfermedad congénita del Japón (2 de 100.000 habitantes sufren de
este trastorno).
PROCEDIMEINTO:
a) Estudio de la actividad de la amilasa
Obtencion de la a-amilasa salival:
 En un beaker de 10ml limpio se deposita cantidad de saliva ( de, almenos, dos
personas).
 Antes de utilizar se debe agitarse para obtener una solución homogénea.
Determinar la presencia de almidon
 Triturar en el mortero un trozo de papa.
 Colocar en el tubo de ensayo N| 1 la papa triturada con ayuda de la bagueta.
 Agregar unas gotas de lugol al tubo
 Anotar las observasiones

Acción de la amilasa
 Colocar un tubo de ensayo N° 2 la papa triturada, con ayuda de la bagueta colocar
unas muestras de amilasa salival
 Incubar por 5 min.
 Agregar unas gotas de lugol
 control Tubo 1 Tubo 2
Agua destilada 3 ml NO NO
Papa triturada NO SI SI
Amilasa NO NO SI
Lugol SI SI SI
reacción

b) Estudio de la actividad de la catalasa

Para los siguientes procedimientos rotule unos 15 tubos con números correlativos:
 1. No hay reacción
2. Reacción apenas visible (burbujeo minimo)
3. Reacción evidente (burbujeo abundante)
4. Reacción fuete (burbujeo abundante y a velocidad)
5. Reacción muy fuerte (burbujeo a velocidad y produce una espuma que se rebalsa
del tubo)
Identificación de la catalasa:
 Colocar el tubo N° 1: 3ml de agua destilada
 Colocar el tubo N° 2: varios trozos pequeños de higado
 Colocar el tubo N° 3: varios trozos pequeños de papa
 Colocar el tubo N° 4: una pequeña cantidadde hígado triturado
 Colocar el tubo N° 5: una pequeña cantidad de hígado triturado
Tubo N°1 Tubo N°2 Tubo N°3 Tubo N°4 Tubo N°5
control Hígado en Papa en Hígado Papa
trozos trozos triturado triturada
Agua 3 ml 50g 50g 50g 50g
destilada
H2O2 3 ml 3 ml 3 ml 3 ml 3 ml
Índice de No hay Apenas Apenas Apenas Apenas
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