cMICROSCOPíA

Luis Tapia G1, Jorge Garcia C1, Michell Herazo T1,

Viviana Hurtado1, Leysi Charris1
Laboratorio de Invertebrados, Programa de Licenciatura en
Biología y Química, Facultad de Educación, Universidad del
Atlántico, Barranquilla, Colombia.
Abstract.
The microscope is one of the most important tools in the field of biology. This
allows us to observe objects or organisms so small that they could not be
visualized by the human eye with the naked eye.
In this experience we will learn about the use and operation of the microscope, in
identifying its parts and also its functions, for this a brief check was made before
beginning the practice to verify the current state of the microscope, already
entering the practice a montage was made wet with a piece of newspaper and
distilled water and was observed in each of the objectives (4x, 10x, 40x, 100x with
immersion oil) of the microscope, it was possible to assemble satisfactorily
allowing us to expand our knowledge about the handling of the microscope
Keywords.
Microscope, identification, function,
Resumen.
El microscopio es una de las herramientas más importante dentro del campo de
la biología este nos permite observar objetos y organismos tan pequeños que no
podrían ser visualizados por el ojo humano a simple vista.
En esta experiencia aprenderemos acerca del uso y manejo del microscopio, en
identificar sus partes y también sus funciones, para esto se hizo un breve
chequeo antes de comenzar la práctica para verificar el estado actual del
microscopio, ya entrando a la práctica se realizó un montaje húmedo con un
pedazo de periódico y agua destilada y se observó en cada uno de los objetivos
(4x,10x,40x,100x con aceite de inmersión ) del microscopio, se logró hacer el
montaje satisfactoriamente permitiéndonos así ampliar nuestro conocimiento
sobre el manejo del microscópico
Palabras claves.
Microscopio, identificación, función,
Introducción. Así como el telescopio abrió a la
humanidad las puertas de lo
El microscopio es un instrumento que
infinitamente grande,
permite observar objetos que son
el microscopio hizo posible conocer
demasiado pequeños para ser
los mundos de dimensiones ínfimas,
observados a simple vista. El tipo más
entre ellos la célula, base de la vida.
común y el primero que fue inventado
Se contaban así las bases de las
es el microscopio óptico. Se trata de
modernas ciencias biológicas que
un instrumento óptico que contiene
hasta bien entrada la edad
dos lentes que permiten obtener una
moderna se habían fundado en las
imagen aumentada del objeto y que
observaciones directas.2
funciona por refracción.
La ciencia que investiga los objetos En esta experiencia de laboratorio, se
pequeños utilizando este instrumento explica y recuerda minuciosamente
se llama microscopía. las partes y la función que cumple
cada una de ellas del microscopio, a
El microscopio fue inventado
su vez se recuerda el correcto uso y
por Zacharias Janssen en 1590. En
manejo de este, con el fin de reforzar
1665 aparece en la obra de William
nuestras falencias y prepararos para
Harvey sobre la circulación sanguínea
las experiencias futuras.
al mirar al microscopio los capilares
sanguíneos, y Robert Hooke publicó Aparte del microscopio óptico se
su obra Micrographia. enseñó a utilizar el estereoscopio, que
es un tipo de microscopio óptico que
En 1665 Robert Hooke observó con
permite observar la muestra
un microscopio un delgado corte
generando una imagen en tres
de corcho y notó que el material era
dimensiones.
poroso; contenía cavidades poco
profundas a modo de celditas a las Materiales
que llamó células. Se trataba de la
1. Microscopio óptico.
primera observación de células
muertas. Unos años más 2. Agua.
tarde, Marcello Malpighi, anatomista y
biólogo italiano, observó células vivas. 3. Papel periódico (escrito), para
Fue el primero en estudiar tejidos preparaciones fijas. 4. Paño para
vivos al microscopio.1 limpieza de anteojos.

En su afán de llegar siempre más 5. Papel seda o arroz.

lejos en la investigación de 6. Portaobjetos y cubreobjetos
la naturaleza de lo que los límites de
sus órganos sensoriales le 7. Artículos científicos para analizar
imponen, el hombre ha construido 8. Aguja enmangada
múltiples instrumentos que le han
permitido acceder allí donde los 9. Guía de laboratorio No 1.
sentidos no podían penetrar.
Métodos lo que se observó En cada uno de
los objetivos.
- Principalmente destapamos el
- Luego, después de haber
microscopio en la mesa de
terminado con esta observación.
trabajo, comenzamos a revisar
Se retiró de manera cuidadosa la
todas las partes y asegurarnos
muestra, bajando la platina y
de que no tuviera algún defecto
abriendo las pinzas.
o daño.
- Y por último se limpió las lentes
- luego de habernos asegurado de
con el papel de seda y se apagó el
que no tuviera nada, procedemos
microscopio, luego se llevó al
a limpiar los oculares, y los
centro de la mesa.
lentes de objetivo con el papel
de seda. Resultados
- Procedemos a preparar los
elementos con los cuales íbamos
a trabajar, comenzando limpiando
el portaobjetos y el cubreobjetos.
- Luego con la gotero, echamos
una gota de agua en el
portaobjeto.
Figura 1
- Colocamos un número que
anteriormente habíamos recortado
de un periódico, y con la aguja
de disección la acomodamos
para que no quedara una burbuja
de aire en la muestra que se iba a
observar en el microscopio.
- Luego colocamos encima el
cubreobjetos, para que no se
moviera.
- Posteriormente procedemos a
colocar la placa porta objetos
sobre la platina, y antes de mirar
y ajustar por los oculares,
dibujamos a simple vista como Figura 2
se veía el numero con el que
íbamos a trabajar sin observar a
través de los oculares y con la
mirada dirigida hacia la platina Y se
dibujó lo que se veía.
- Así mismo posteriormente se
observó la muestra desde los
aumentos, 4x, luego 10x, luego
40x, y 100x, y se procedió a dibujar
Figura 3

Figura 5

Figura 4 Figura 6
 Figura 7

Figura 9

Figura 7.
Enfoque en 4x

Figura 10

Figura 8

Figuras 9 y 10.
Enfoque en 40x

Figura 8.
Enfoque en 10x

Figura 11
Figura 11.
Enfoque en 100x
En las anteriores imágenes esta
evidenciado lo observado en el
microscopio donde claramente
observamos cosas que a simple vista
no se denotan como texturas y
colores.
En este caso se utilizó un numero 5 en
donde vemos que a medida que se
aumenta se logran ver texturas y más
texturas, como a su vez alrededor
unos colores que no se observan sin
el microscopio.
Preguntas
1.11.1. ¿Cuál es la importancia del
uso del microscopio en el laboratorio
de biología experimental?
1.11.2. ¿Por qué crees que es
importante cuidar adecuadamente el
microscopio en todo el laboratorio?
1.11.3. ¿Qué otros cuidados crees
que podemos adoptar en los
laboratorios para mejorar el uso de
los laboratorios? 4. ¿Cuáles crees
que sean los errores más comunes
que los alumnos cometen en clases
al manipular el microscopio?
1.11.4. ¿Qué tan difícil te resultó el
enfoque del microscopio?
1.11.5. Definir los conceptos de:
aumento, aumento total, apertura
numérica, índice de refracción, poder
de resolución.
1.11.6 indicar ¿para que se emplea
el aceite de inmersión al enfocar con
el objetivo de 100x? ¿Porque
únicamente se emplea con este
objetivo?
2. Análisis del artículo relacionado
con la ética en el uso de animales
en laboratorio y campo.
2.1. Guía de reflexión: realiza una
breve descripción de la normatividad
legal vigente en Colombia sobre el
tema (tres cuartillas máximo).
Respuestas
1.11.1 Es importante el uso del
microscopio, porque es sin duda
alguna un elemento que se requiere
en cualquier laboratorio ya que Nos
permite observar podría colocarse
entre algunos espécimen invisibles
por ejemplo, ver células,
microorganismos y bacterias, lo cual
es imposible de observar a simple
vista. 3
1.11.2 Es de suma importancia
cuidar todos los materiales e
instrumentos que se encuentran en
los laboratorios; en este caso el
microscopio, herramienta fundamental
en la realización de prácticas que
permite observar de manera
detallada alguna imagen que al ojo
humano es muy difícil de ver.
Por otro lado este elemento tiene
un costo muy significativo que con
esfuerzo es donado a la universidad
para la formación de muchos
estudiantes, es por eso deber de
todos cuidar y valorar esta
herramienta de trabajo.
1.11.3 Se debería de tratar de
utilizarlo más para un aprendizaje
óptimo del estudiante ya que los
instrumentos de trabajo es nuestra
herramienta en el entrenamiento de
la practica pero respetando y
tomando en cuenta las normas de
bioseguridad en el laboratorio.
1.11.4. Bueno en el objetivo 4x no
se me dificultó mucho enfocar el
objetivo ya que fácilmente logré
enfocarlo, luego en los objetivos 10x
y 40x si se me dificultaba un poco
lograr enfocarlo pero luego de unos
segundos lograba conseguirlo.
1.11.5 Aumento: El término aumento
es aquel que se relaciona con el
incremento, crecimiento o subida de
cualquier elemento en relación con
etapas anteriores. Este concepto
puede ser y es utilizado para
infinitos usos que pueden no estar
para nada vinculados sí. El aumento
en ciertas características de un
objeto o elemento puede ser de
muy diverso tipo.
Aumento total: El aumento total del
microscopio se multiplicando
aumento del ocular por el del
objetivo que se está utilizando. En
general los oculares poseen diez
aumentos (10x) y los objetivos
pueden variar 10x (aumento total,
100x), 40x (total, 400x), y 100x
(objetivos de inmersión en aceite;
total 1000x) R2
Apertura numérica: En un objetivo
de microscopio, la apertura
numérica se define como la medida
de su capacidad para colectar la luz
y poder examinar los detalles del
espécimen. Los rayos de luz pasan
a través de la muestra para formar
la imagen, y entran en el objetivo
en un cono invertido como se ilustra
en la figura A.
Índice de refracción: Se denomina
índice de refracción al cociente de
la velocidad de la luz en el vacío y
la velocidad de la luz en el medio
cuyo índice se calcula. Se simboliza
con la letra y se trata de un valor
a dimensional.
Poder de resolución: Llamamos poder
de resolución a la capacidad de un
sistema óptico para diferenciar entre
dos puntos o líneas muy próximos. El
poder de resolución de un objetivo
(expresado en líneas por milímetro)
se mide con ayuda de una carta de
prueba, que no es sino una serie
de dibujos y líneas de diferentes
grosores. A la emulsión corresponde
también un poder de resolución que,
si es inferior al del objetivo, será
causa del deterioro de la nitidez4.
1.11.6 Los objetivos de mayor
aumento, tienen una distancia focal
muy pequeña y además la primera
el
lente del objetivo es de pequeño
diámetro. Los rayos que desde la
muestra se dirigen al objetivo
atraviesan el vidrio del cubreobjetos
y al pasar al aire se separan de la
normal. Algunos rayos incluso
sufren reflexión total en la interface
vidrio-aire Solo llega al microscopio
una pequeña parte de la luz que
parte de la muestra, con el problema
que conlleva para la visión.
Al intercalar, entre el objetivo y el
cubreobjetos una gota de aceite de
inmersión, de índice de refracción
casi igual al vidrio, los rayos
emergentes ya no se apartan de la
normal, sino que continúan su
camino sin desviación, consiguiendo
así que una mayor cantidad de luz
llegue al objetivo, mejorando
notablemente la visión Se utiliza con
el objetivo de 100X porque es el
objetivo de mayor aumento.5
2.1. El uso de modelos animales
para la experimentación se ha
incrementado considerablemente en
Colombia en áreas de investigación
biológica y biomédica, en el
desarrollo de medicamentos y
alimentos, y en pruebas de
comportamiento animal, entre otras.
Mientras en otros países
desarrollados estos animales se
producen en ambientes controlados
bajo normas estrictas que garantizan
la validez de los resultados de
investigación, en Colombia la
normatividad al respecto es precaria
e imprecisa lo que ha llevado a que
pocas instituciones mantengan los
animales con los estándares
requeridos para obtener resultados
de investigación con el rigor que la
comunidad científica internacional
exige.
En Colombia, la normatividad es
precaria. Hay dos normas generales
en donde apenas se menciona el
tema. La Ley 84 de 1989, además
de no estar todavía reglamentada,
contiene el capítulo VI titulado: "Del
uso de animales vivos en
experimentos e investigación"
(República de Colombia, Ley 84 de
1989). En este aparte se hacen unas
breves e inespecíficas
recomendaciones sobre el manejo
de los animales, se combinan
disposiciones y prohibiciones para
animales de granja, de compañía y
de laboratorio. Esta Ley dispone que
todos los experimentos que se
lleven a cabo con animales vivos,
deben realizarse únicamente con
autorización previa del Ministerio de
Salud y Protección Social, y "sólo
cuando tales actos sean
imprescindibles para el estudio y
avance de la ciencia", sin aclarar las
pautas para determinar qué es lo
imprescindible para el estudio.
Tampoco aclara el conducto regular
para que todos los protocolos de
docencia, investigación y producción
de animales sean aprobados
directamente por este Ministerio, lo
que además resultaría casi
impracticable. Esta Ley también
obliga a la creación de Comités de
Bioética Institucionales, y específica la
conformación de dichos comités y
sus funciones. Sin embargo, no
especifica pautas para verificar las
condiciones de alojamiento,
mantenimiento, cuidado y uso de los
animales. Además, la conformación
de dicho comité es un poco difícil
para las instituciones, ya que uno
de los miembros debe pertenecer a
la autoridad administradora de los
recursos naturales, otro debe ser
miembro de la Junta Coordinadora
Nacional de las Sociedades
Protectoras de Animales, dificultando
la incorporación de estos miembros
a los Comités de Bioética y
constituyendo una de las causas
para que muchas instituciones no
puedan cumplir con esta norma. La
Resolución 008430 de 1993, en el
Título V, menciona la investigación
biomédica en animales, pero no va
más allá de la Ley 84 de 1989.
Aunque se tratan con mayor detalle
las circunstancias en las cuales
pueden o no usarse los animales,
las disposiciones sobre el manejo,
alojamiento, infraestructura son
igualmente pobres. Desde 2011 se
está estudiando en el Congreso el
proyecto de Ley 165, que en
realidad tampoco avanza en el tema
de la reglamentación y normatividad
en la experimentación con animales.
En el Título II, Artículo 16 sobre la
utilización de animales vivos para la
investigación y experimentación
científica, indica que ésta quedará
sujeta a lo previsto en los artículos
23, 24 y 25 de la Ley 84 de 1989.
En conclusión, no existe en
Colombia ni está en trámite una
norma que reglamente la producción,
manejo y uso de animales de
laboratorio, y que asegure criterios
uniformes para el cuidado, el
manejo y la utilización de animales
con fines de investigación los
comités de Bioética de las
instituciones, esto hará que haya
más claridad en las funciones de
cada uno En Colombia existen ya
algunas propuestas de
Universidades como La Sabana,
Konrad Lorenz y Universidad
Nacional para la conformación de
estos comités. 4. En los capítulos
sobre medio ambiente, alojamiento
veterinaria, y atención se deben
dictar normas científica, desarrollo
tecnológico e innovación, que se
traduzcan en la obtención de
resultados científicos confiables. Se
presentan a continuación una serie
de consideraciones mínimas que
debería incluir la normativa para
Colombia.
1. Debe redactarse una norma
especial y específica para animales
de experimentación, no como la que
existe actualmente, en donde está
agrupada con la de animales para
docencia, animales de granja y
mascotas, lo que da como resultado
una norma con poca claridad.
2. Puede utilizarse como base la
norma norteamericana.
3. En la sección sobre políticas y
responsabilidades institucionales,
hay tres aspectos que deben
incluirse. Sobre atención veterinaria,
debe exigirse a las instituciones la
contratación de un Profesional
médico veterinario con experiencia en
animales de laboratorio. Actualmente
en Colombia no existen programas
de formación pos gradual ni
certificación en el tema. Cuando los
programas estén marchando, en
algunos años, debe exigirse que el
profesional tenga formación pos
gradual o que esté certificado. los tipos de espacio, las
Cuando se hable del entrenamiento instalaciones deben tener mínimo un
y capacitación del personal auxiliar área de hospedaje, cuidado y
debe exigirse a las instituciones la sanidad animal, una de recepción,
contratación de personal calificado. cuarentena y separación de
En la actualidad Colombia no cuenta animales, una de separación por
con programas para técnicos en especies o cuando sea necesario
animales de laboratorio, lo que aislamiento de proyectos
repercute directamente en el manejo individuales y un área para
y bienestar de los mismos. Mientras almacenamiento. Dependiendo de la
estos se desarrollan, la entidad institución, pueden tenerse además
deberá comprometerse con la por separado laboratorios
formación y entrenamiento del especializados, áreas para recepción
personal contratado. y almacenamiento de alimento,
material de cama, medicamentos,
4. Por último, se debe exigir a las
biológicos e insumos, espacio para
instituciones la conformación de
lavado y esterilización de equipos y
Comités Institucionales para el
materiales. Los establecimientos
Cuidado y Uso de Animales de
deberán ser certificados por una
Laboratorio (Cicual), comités
autoridad competente para su
diferentes a específicas sobre
funcionamiento. ¿Qué propósito
espacio por especie, temperatura y
tendría hacer una norma en
humedad, ventilación, iluminación,
Colombia con este nivel de
ruido, ambiente social, actividades,
exigencia? Se aseguraría el
alimentación y sanidad, entre otros
bienestar de los animales, su calidad
aspectos. Su cumplimiento llevará a
sanitaria y se facilitarían muchos
un mejoramiento en el cuidado y
aspectos de manejo y sanidad, que
manejo de los animales que lleve al
además pueden influir en los costos
máximo el bienestar y minimice el
y en los resultados finales de los
sufrimiento de los mismos. En esta
estudios. De esta manera los
forma, los investigadores y los
científicos podrían disponer de
(Cicual) Comités Institucionales para
modelos animales de alta calidad,
el Cuidado y Uso de Animales de
que avalarían de manera óptima sus
Laboratorio, sabrán con claridad lo
resultados de evaluación.6
que debe o no hacerse, lo que no
sucede hoy con las Discusión
recomendaciones generales incluidas
En la práctica n°1 de microscopia,
en las normas colombianas actuales.
vimos las capacidades del
5. En el capítulo sobre planta física, microscopio, su uso y su
debe haber especificaciones funcionamiento, además aprendimos
precisas sobre tipos de espacios, a realizar montajes húmedos, en
tamaños mínimos, requerimiento de donde realizamos varios casos.
techos, paredes, puertas, etc. Para
Para el primer caso es la Referencias
observación del número “5” obtenida
1. Diccionario de la lengua española
previamente de un papel periódico,
(vigésima segunda edición), Real
en donde le realizamos un montaje
Academia Española. (2001).
húmedo, lo que se esperaba ver a
Fundacion Wikipedia. Obtenido
través del objetivo 4x del
de:https://es.wikipedia.org/wiki/Mic
microscopio era la imagen de esta
roscopio
letra de forma invertida y aumentada
2. L. Botero1, R. M. (2 de diciembre
según lo leído acerca de la
de Aprobado: 2013). USO DE
formación de la imagen en un
ANIMALES DE LABORATORIO
microscopio, y al lograr observar
EN COLOMBIA-Artículo recibido: 1
esto se cumplió por lo tanto se
de febrero de 2013 .
obtuvo el resultado esperado, en el
REFLEXIONES SOBRE
objetivo 10x observar la letra casi
ASPECTOS NORMATIVOS Y
completa por la resolución del
ÉTICO.
objetivo, y con el objetivo 40x
3. L.Landolfi, M. (2008). República
logramos observar solo una parte de
Bolivariana de Venezuela-
la letra ya que este objetivo está
Ministerio de Educacion Cuktura y
más cerca y tiene mejor resolución,
Deporte. Obtenido de Monografias:
debido a esto se logran observar las
https://www.monografias.com/trab
fibras componentes del papel
ajos16/microscopio/microscopio.s
periódico, las partes que abarca la
html
tinta y las partes en las que las
4. medic-capitulo 3-4. (s.f.). LA
fibras del papel periódico no están
MICROSCOPÍA. Obtenido de
teñidas.
http://www.medic.ula.ve/histologia/
Conclusión anexos/microscopweb/MONOWE
B/capitulo3_4.htm
Con la realización de la anterior
5. mejores, L. (14 de 09 de 2011).
experiencia, se han obtenido
Tema Fantástico, S.A.. Imágenes
conocimientos que son esenciales a la
del tema: molotovcoketail. Con la
hora del manejo y cuidado del
tecnología de Blogger. Obtenido
microscopio, tanto el óptico como el
de
estereoscopio. Para obtener buenos
http://brofrien.blogspot.com/2011/
resultados al analizar una muestra es
10/importancia-del-microscopio-
importante conocer y aplicar las reglas
para-la.html
o precauciones que se llevan a cabo
6. Riley, M. B. (2008). Department of
con cada parte de dichos
Plant Pathology and Physiology,
microscopios. Se adquirieron los
Clemson University. Obtenido de
conocimientos fundamentales de
https://www.apsnet.org/edcenter/in
como girar y enfocar con cada uno de
tropp/LabExercises/Pages/Microsc
los objetivos dependiendo de su
opio.aspx
aumento, para con esto, tener mejores
resultados.